Chronic Lymphocytic Leukemia (CLL): evaluation of AKT protein kinase and microRNA gene expression related to disease pathogenesis

Abstract The present study evaluated 56 patients diagnosed with Chronic Lymphocytic Leukemia (CLL) and a control group of 44 clinically healthy subjects with no previous history of leukemia. Genetic expressions of AKT and microRNAs were evaluated by quantitative PCR (qPCR). A significant increase in AKT gene expression in patients when compared to controls was observed (p = 0.017). When the patients were stratified according to Binet subgroups, a significant difference was observed between the subgroups, with this protein kinase appearing more expressed in the B+C subgroup (p = 0.013). Regarding miRNA expression, miR-let-7b and miR-26a were reduced in CLL patients, when compared to controls. However, no significant differences were observed in these microRNA expressions between the Binet subgroups (A versus B+C). By contrast, miR-21 to miR-27a oncogenes showed no expression difference between CLL patients and controls. AKT protein kinase is involved in the signaling cascade that occurs with BCR receptor activation, leading to increased lymphocyte survival and protection against the induction of cell death in CLL. Thus, increased AKT protein kinase expression and the reduction of miR-let-7b and miR-26a, both tumor suppressors, may explain increased lymphocyte survival in CLL patients and may be promising markers for the prognostic evaluation of this disease.

Estudo das bases mecanísticas da diferenciação neuronal mediada pela atividade de `Ca POT. 2+' através dos receptores purinérgicos e colinérgicos / Study of mechanistic bases of neuronal differentiation mediated by 'Ca POT. 2+' activity through purinergic and cholinergic receptors

Muitos subtipos de receptores são ativados pelo mesmo ligante, mas estão acoplados a diferentes mensageiros secundários podendo produzir sinalização divergente em uma célula, enquanto receptores ativados por diferentes ligantes, mas que compartilham o mesmo mensageiro secundário, podem produzir sinalização convergente. Para examinar as bases mecanísticas que influenciam a proliferação e a diferenciação celular determinamos as funções de liberação intracelular de 'Ca POT. 2+' e a excitabilidade celular mediada pelos receptores purinérgicos e colinérgicos utilizando imageamento de cálcio por microscopia confocal. Para tanto, caracterizamos a participação dos subtipos P2'X IND. 1-7' e P2'Y IND. 1,2,4,6' de receptores purinérgicos aos níveis dos transcritos de mRNA e de expressão protéica, assim como pela atividade de induzir os transientes de '['Ca POT. 2+'] IND. i', aumento na concentração livre de cálcio intracelular, durante a diferenciação neuronal de células P19 de carcinoma embrionário, que foram utilizadas como modelo in vitro para o desenvolvimento neuronal precoce. Em células embriônicas os receptores P2'Y IND. 1,2', P2'X IND. 4' ou os heteromultímeros de P2X com farmacologia semelhante ao do receptor P2'X IND. 4' foram os responsáveis pelos transientes de '['Ca POT. 2+'] IND. i' induzidos pelo ATP e seus análogos. Ao término da diferenciação neuronal, os receptores P2'Y IND. 2,6' e P2'X IND. 2' foram os principais mediadores das respostas de '['Ca POT. 2+'] IND. i'. Obtivemos evidências do envolvimento destes receptores na indução da proliferação tanto de células embriônicas como de progenitores neuronais, por ensaios de incorporação de BrdU, e da indução da diferenciação neuronal das células progenitoras, na presença de vários agonistas e antagonistas de receptores purinérgicos...