Acoplamiento molecular sobre la proteína dUTPasa de Trypanosoma cruzi para el descubrimiento de inhibidores en el tratamiento de la enfermedad de Chagas

Introducción: la enfermedad de Chagas es endémica de las zonas tropicales de América Latina y presenta una importante prevalencia, sin embargo, existen pocos tratamientos disponibles en el mercado por lo que la búsqueda de moléculas con potencial farmacológico que actúen en el parásito Trypanosoma cruzi, causante de la enfermedad, es necesaria considerando las graves complicaciones. Objetivo: evaluar las potenciales proteínas blanco, disponibles en la base de datos de PDB considerando como parámetro inicial, la similitud con proteínas humanas e identificar potenciales inhibidores del blanco elegido por medio de acoplamiento molecular. Metodología: se realizó una evaluación de las proteínas del parásito por medio de alineamiento de secuencias y posteriormente un cribado virtual por acoplamiento molecular con bases de datos y recursos informáticos disponibles en el Centro de Cómputo Avanzado de la Universidad de Texas (TACC), y se evaluaron los mejores resultados en función de afinidad, farmacocinética y toxicidad. Resultados: el blanco molecular elegido fue la dUTPasa. Posterior al cribado virtual se seleccionaron 12 moléculas que presentan potencial inhibidor de estas, la 4-{3-[3-(trifluorometil)fenil]isoxazol-5-il}pirimidin-2-amina es una de las moléculas con mejor perfil para convertirse en candidato en el tratamiento de la enfermedad de Chagas.

SUMMARY Introduction: Chagas disease is endemic to the tropical areas of Latin America and has an important prevalence, however, there are few treatments available in the market, so the search for molecules with pharmacological potential that can act in the same way as the disease, it is necessary considering the serious complications. Aim: to evaluate the possible target proteins available in the PDB database, considering the similarity with human proteins as an initial parameter and identify potential inhibitors of the chosen target using molecular docking. Methodology: an evaluation of the parasite proteins was carried out by means of sequence alignment and subsequently a virtual molecular coupling screening was performed with databases and computer resources available at Centro de Cómputo Avanzado de Universidad de Texas (TACC), and the best results were evaluated based on affinity, pharmacokinetics, and toxicity. Results: the molecular target chosen was the dUTPase. After virtual screening, 12 moles showing inhibitory potential were selected of these, 4- {3-[3- (trifluoromethyl) phenyl] isoxazole-5-yl} pyrimidine-2-amine is one of the molecules with the best profile to become a candidate in the treatment of Chagas disease.

Introdução: a doença de Chagas é endêmica das áreas tropicais da América Latina e possui importante prevalência, porém, poucos são os tratamentos disponíveis no mercado, por isso a busca por moléculas com potencial farmacológico que possam atuar da mesma forma que a doença, é necessário considerando as complicações graves. Objetivo: avaliar as possíveis proteínas-alvo disponíveis na base de dados do PDB, considerando a similaridade com proteínas humanas como parâmetro inicial e identificação de potenciais inibidores do alvo escolhido por meio de acoplamento molecular. Metodologia: uma avaliação das proteínas do parasita foi realizada por meio de alinhamento de sequências e posteriormente foi realizada uma triagem de acoplamento molecular virtual com bancos de dados e recursos computacionais disponíveis no Centro de Cómputo Avanzado de Universidad de Texas (TACC), e os melhores resultados foram avaliados com base na afinidade, farmacocinética e toxicidade. Resultados: o alvo molecular escolhido foi a dUTPase. Após a triagem virtual, 12 moles mostrando potencial inibitório foram selecionados destes, 4- {3- [3- (trifluorometil) fenil] isoxazol-5-il} pirimidina-2-amina é uma das moléculas com o melhor perfil para se tornar um candidato no tratamento da doença de Chagas.

Determinación y caracterización de antígenos de cisticercus de T. solium, reconocidos por líquidos cefalorraquídeos de pacientes con neurocisticercosis / Determination and characterization of T. solium cysticercus antigens, recognized by cerebrospinal fluid from neurocysticercosis patients

La cisticercosis humana es una parasitosis causada por T. solium la cual posee una alta prevalencia en aíses en desarrollo constituyéndose en un problema de salud pública, y en donde la neurocisticosis (NCC) es su forma más grave ya que compromete el sistema nervioso central (SNC). Debido a que las técnicas desarrolladas para el inmunodiagnóstico de NCC presentan problemas de sensibilidad y especificidad, en éste estudio se desarrollo un método analítico sensible para la identificación de antígenos específicos de cisticerco de T. solium reconocidos por líquidos cefalorraquídeos (LCRs) de pacientes con (NCC). La identificación de un número definido de antígenos de T. solium potenciales para el inmunodiagnóstico permitiría posteriormente la purificación de proteínas para el desarrollo de técnicas inmunodiagnósticas. Los antígenos presentes en LIV de cisticerco, fueron modificados químicamente empleando Biotina-NHS (Biotin-Amido-Caproato-N-hidroxisuccinimida éster) seguido por una inmunoprecipitación utiliando LCR. Los complejos antígeno-anticuerpo fueron capturados empleando agarosa anti IgG humana y posteriormente, las proteínas resueltas por electroforesis, seguida de transferencia a papel de nitrocelulosa. Los antígenos biotinilados, fueron reconocidos utilizando estreptavidina conjugada a fosfatasa alcalina y la reacción se visualizó empleando el sustrato NBT (nitro blue tetrazolium) y BCIP (4-cloro-5-bromo-4cloro-3-indolyl phospahate) (Sigma). Se identificaron 5 polipeptidos principales de 100 kDa, 70 kDa, 50 kDa, 35 kDa y 24 kDa por el ensayo de inmunoprecipitación. Los polipéptidos de 100 kDa, 50 kDa y 24 kDa dueron reconocidos por LCRs de pacientes clínica y serológicamente positivos por ELISA para NCC (94 por ciento, 94 por ciento y 78 por ciento respectivamente), además éstos antígenos fueron reconocidos por LCRs de pacientes con otras neuropatologías de SNC (94 por ciento, 76 por ciento y 47 por ciento respectivamente) e igualmente por LCRs de pacientes sospechosos clínicamente pero serológicamente negativos por ELISA para NCC (21 por ciento, 24 por ciento, y 13 por ciento respectivamente). Los antígenos de 70 kDa fueron reconocidos por el 86 por ciento y 90 por ciento respectivamente, de los LCRs de pacientes clínica y serológicamente positivos por ELISA para NCC. Estos antígenos no fueron reconocidos por LCRs de pacientes con otras neuropatologías del SNC. Sin embargo,...