Optimización de un método para la detección de carbamatos y organofosforados en vegetales / Optimization of a method for the detection of organophosphates and carbamates in vegetables

Debido al alto grado de contaminación por plaguicidas de productos agrícolas y al alto costo que implica su detección se consideró importante optimizar el método de escrutinio de inhibición de colinesterasas humanas en presencia de extractos vegetales. Se demostró que las suspensiones de glóbulos rojos y plasma son estables al menos por tres meses si se mantienen entre 4 y 8 °C. El reactivo de color es estable por al menos dos años y medio en refrigeración y los sustratos de ambas colinesterasas son estables congelados al menos por dos años. La mezcla del extracto vegetal y los glóbulos rojos o plasma debe incubarse 90 minutos a 37 °C para determinar los porcentajes de inhibición enzimática. Se determinó que los porcentajes de inhibición superiores a 16% en la plasmática y a 21% en la eritrocítica indican presencia de plaguicida en los vegetales. Este método de screening optimizado para detectar la presencia de carbamatos y organofosforados tiene ventaja sobre otros por su bajo costo, facilidad y rapidez de análisis sin requerir de equipo costoso y poco versátil. Esta metodología no cuantifica ni identifica el plaguicida presente pero permite diferenciar entre organofosforados y carbamatos si el periodo de incubación del vegetal con eritrocitos o plasma se prolonga por 24 horas a 20-25 °C.

Optimization of the screening method of inhibition of human cholinesterases is considered important because of the high contamination rate of agricultural products with pesticides and its high detection cost. It has been demonstrated that erythrocytes and plasma are stable at least for three months at 4-8 °C. The colour reaction reagent is stable for at least two and a half years at 4-8 °C and the substrate for both cholinesterases is stable when frozen, at least for two years. The solution of vegetable extract and erythrocytes or plasma must be incubated 90 minutes at 37 °C in order to determine the percentages of enzymatic inhibition. It was established that inhibition percentages higher than 16% for the plasmatic solution, and 21% for the erythrocytic solution mean that pesticide is present in vegetables. The advantages of this optimized screening method for the detection of carbamates and organophosphates in vegetables are its low cost and its easy and quick analysis without the need of expensive equipment. This method does not quantify or identify the pesticide, but rather it differentiates organophosphates from carbamates if the incubation time of the vegetable extract with erythrocytes or plasma is maintained at 20- 25 °C for 24 hours.

Comparación de la determinación enzimática de fosfolípidos que contienen colina con otras pruebas para evaluar madurez pulmonar fetal / Comparation of the enzimatic determination of phospholipids that contain choline with other test as a means of evaluating fetal lung maturity

Se investiga el uso de un método reciente descrito para la determinación enzimática de los fosfolípidos que contienen colina (FLC) como un medio de evaluar madurez pulmonar fetal. Se compararon resultados del FLC con los resultados obtenidos por cromatografía de la capa fina, fluorescencia polarizada (TDx-FLM),recuento de cuerpos lamelares y absorbancia a 650 nm. El estudio usó 101 líquidos amnióticos. El análisis de los resultados sugirió que una concentración de FLC (7,0 mg/dL es indicativa de madurez pulmonar. Se encontró una alta concordancia del FLC con las otras pruebas para evaluar madurez pulmonar fetal. Se sugiere el empleo de FLC como método alternativo para la evaluación del riesgo de síndrome de insuficiencia respiratoria. (Rev Cost Cienc Méd 1999; 20(1-2): 51-65) PALABRAS CLAVE: fosfolípidos, líquido amniótico, madurez pulmonar fetal, síndrome de insuficiencia respiratoria, cuerpos lamelares, fosfatidilglicerol, relación surfactante/albúmina

Determinación enzimática de fosfolípidos que contienen colina en líquido amniótico / Enzimatic determination of phospholipids that choline contains in amniotic fluid

Se describe un método para determinar en líquido amniótico los fosfolípidos que contienen colina, que se basa en la acción de la fosfolipasa D sobre los fosfolípidos, originando colina, que es oxidada por la colinaoxidasa a betaína con la producción simultánea de peróxido de hidrógeno, este último en presencia de peroxidasa oxida al fenol que se acopla a la 4-aminofenazona produciendo un cromógeno rojo. La intensidad del color a 500 nm es directamente proporcional a la concentración de fosfolípidos que contienen colina. El método es sencillo, rápido, relativamente econónico, preciso, exacto y requiere poco volumen de muestra. El análisis comparativo con la determinación de lecitina mediante un método enzimático mostró un coeficiente de correlación (r) de 0,945 y una ecuación de regresión lineal y=2,595+0,929x. El método presenta coeficientes de variación día a día de 2,6 y 4,5 por ciento para concentraciones de fosfolípidos de 12,4 y 4,3 mg/dL, respectivamente. El intervalo analítico es de 25,0 mg/dL. La sangre, la bilirrubina y el ácido ascórbico producen cierto grado de interferencia

Optimización de un método colorimétrico para la cuantificación de cobre en suero / Colorimetric method for determination of copper in serum

Se optimizó y adaptó un método colorimétrico para la determinación de cobre sérico con dibenzilditiocarbamato de zinc. El método presenta linealidad por lo menos hasta 400 ug/dl de cobre. La recuperación promedio obtenida fue de 102 por ciento , con un intervalo de 98 a 108 por ciento . El hierro II y III, zinc, magnesio, mercurio, ácido ascórbico, calcio y plomo no producen interferencia. Por el contrario, la bilirrubina sí interfiere en la reacción, obteniéndose resultados más elevados que con el método de absorción atómica. Por esta razón, es indispensable montar un blanco de muestra con el método colorimétrico siempre que el suero esté ictérico. Las precisiones para muestras con valores de cobre bajos, normales y altos mostraron coeficientes de variación de 5.78 por ciento , 3,09 y 0,89 por ciento en un mismo día, y 9,02, 5,71 y 2,45 por ciento día a día respectivamente. Con una población de 200 adultos aparentemente sanos de uno u otro sexo y utilizando el percentil 95, se obtuvieron los intervalos de referencia de cobre sérico siendo éstos en 100 hombres de 50 a 142 ug/dl y en 100 mujeres de 73 a 142 ug/dl El método propuesto correlaciona adecuadamente con el de absorción atómica

Creatina intraeritrocítica como valoración de la edad celular / Erythrocyte creatine as appraisal of cellular age

El índice de reticulocitos es el parámetro más utilizado para medir la producción eritrocitaria medular. Sin embargo, como éste ha sido asociado con cierto grado de error estadístico, se ha buscado un método objetivo y de fácil realización, la determinación de creatina intraeritrocítica, para obtener una mayor información acerca de la edad eritrocitaria en determinados procesos hemolíticos. La misma se determinó por el método del diacetil alfa-naftol, observándose una linealidad hasta 400 mg/l. Los valores de creatina obtenidos en el grupo control (n=100)fueron de 24 a 69 mg/l, y se utilizó el logaritmo de estos valores para normalizar la distribución de los datos. Se analizó un grupo de muestras de 216 pacientes con diferentes diagnósticos, obteniéndose valores aumentados del conteo de reticulocitos en un 75 por ciento de los casos de creatina intraeritrocítica en un 63 por ciento. Sin embargo, en un 13 por ciento de las muestras se obtuvieron valores aumentados de creatina intraeritrocítica con un conteo de reticulocitos normal o disminuido. Sin restarle su debida importancia a la determinación de reticulocitos, se recomienda realizar el análisis de creatina como dato complementario en el estudio de aquellos síndromes hemolíticos idioáticos que cursen con conteos normales o subnormales de reticulocitos

Enfermedad de Wilson fulminante en Costa Rica: Estudio clinico patologico de 7 casos / Fulminant Wilson's disease in Costa Rica: pathological clinical study of 7 cases

En los últimos 18 añno (entre 1972-1989), alrededor de 150 casos de enfermedad de Wilson se han diagnosticado en Costa Rica (6/100.000 habitantes). En el Hospital San Juan de Dios se han estudiado alrededor de 120 casos durante este período, de los cuales 7 han muerto con un cuadro de insuficiencia hepática aguda, anemia hemolítica, encefalopatía, sangrado digestivo e insuficiencia renal. En cuatro de estos casos se realizaron estudios histopatológicos postmorten, con microscopía de alta resolución, revelando extensa necrosis submasiva del hígado, con severa colestasis y necrosis lítica y acidófila con regeneración irregulary nodular y especialmente esteatosis microvacuolar, diferente a la observada en otras formas de hepatitis fulminante. Con los hallazgos clínicos, de laboratorio e histopatológicos, concluimos que la enfermedad de Wilson fulminante es una entidad clínica-patológica bien definida, de fatal evolución sin respuesta al tratamiento, incluído la iniciación sin respuesta al tratamiento, incluíndo la iniciación temprana de penicilamina e esteroides

Hallazgos de laboratorio en 61 casos de Enfermedad de Wilson en Costa Rica / Laboratory findings in 61 cases of Wilson's Disease in Costa Rica

Se analizan 61 casos de Enfermedad de Wilson con edades comprendidas entre 5 meses y 39 años, 35 varones y 26 mujeres, atendidos en diferentes hospitales del pais. 22 de los casos se detectaron por estudios familiares, siendo la mayoria de ellos asintomaticos. 12 pacientes fallecieron en edades de 10 a 39 años. Todos los pacientes mostraron niveles bajos de ceruloplasmina. La mayoria presento niveles elevados de cobre urinario, a excepcion de 4 con valores normales. La concentracion de cobre serico fue baja a excepcion de un paciente con nivel normal y 6 con niveles elevados, fallecinedo estos ultimos. Las biopsias y autopsias de higado efectuadas a los pacientes con Enfermedad de Wilson mostraron valores elevados de cobre. Se observo un ingremento de bilirrubina total en el 33 % de los pacientes, de los cuales fallecio el 57%, con valores entre 2 y 55 mg/dl. El tiempo de protrombina mostro actividades inferiores al 80 por ciento en el 71 por ciento de los pacientes. La fosfatasa alcalina y la transaminasas presentaron elevaciones en el 46 y 60 por ceinto respectivamente.

Aplicación del método gráfico de Levey-Jenning a los datos de un control de calidad externo en química clínica / Use of Levey-Jenning charts to clinical chemistry external quality control

El seguimiento de los resultados del control de calidad externo a través del tiempo permite detectar errores sistemáticos que son dificilmente percibidos por otros métodos. Para facilitar la apreciación de los datos se buscó un método, para adaptarlos al gráfico de Levey Jennings, debido a la gran difusión y aceptación de este sistema. El método consistió en anotar en el gráfico el índice de desviación estándar en las ordenadas contra tiempo en las abscisas, considerando ñ 2 derivaciones estándar como los límites permisibles. El sistema se puso a prueba en el análisis de 15 sustancias diferentes por un período de dos años, observandose tendencias y desplazamientos dificílmente percebidos sin la graficación de los datos

Evaluación del análisis de calcio sérico con o-cresolftaleína complexona / Evaluation of the serum calcium analysis with o-cresolphtalein complexone

Se modificó y evaluó un método para la determinación de calcio sérico con o-cresolftaleína complexona. Las lecturas de absorbancia del complejo calcio-o-cresolftaleína disminuyen al aumentar la temperatura, el calentamiento del espectrofotómetro produce variaciones que se corrigen analizando un patrón entre cada seis muestras. El uso de un blanco interno obvia el problema de contaminación por calcio en la cristalería y el de blanco de muestra corrige errores por turbiedad y pigmentos. El método presenta linealidad hasta 20 mg/dl de calcio. La recuperación promedio obtenida fue de 100,4 por ciento con un intervalo de 99,2 a 103,0 por ciento. El hierro, el magnesio, el fosfato, la bilirrubina y la hemoglobina no producen interferencia. Las precisiones para muestras con valores de calcio bajos, normales y altos mostraron coeficientes de variación de 1,7;1,0 y 1,5 por ciento en un mismo día y de 1,6; 2,7 y 2,2 por ciento día a día respectivamente. Con una población de 101 adultos sin patología aparente se obtuvo un intervalo de referencia de 8,2-9,7 mg/dl. El método propuesto correlaciona adecuadamente con el de absorción atómica

Estudio comparativo de exactitud en la determinación de glucosa sérica por cuatro métodos / Comparative study of accuracy between 4 methods of serum glucose determination

Se analizó comparativamente la exactitud, en la determinación de glucosa sérica mediante pruebas de recuperación e interferencia para el método de la o toluidina, un método automatizado que utiliza ferrianuro y dos métodos enzimáticos, el de la glucosa oxidasa y el de la hexoquinasa. La ley de Beer y Lambert para los métodos de la o-toluidina, ferricianuro, glucosa oxidasa y hexoquinasa se cumplicó hasta 600, 300, 600 y 500 mg/dl respectivamente. Se obtuvo una recuperación adecuada para esos métodos, en el mismos orden, hasta 300, 300, 500 (no se evaluó en este caso 600 mg/dl que es el límite máximo de linealidad) y 500 mg/dl. En el método de la o-toluidina hubo interferencia marcada por galactosa, manosa y ácido úrico y moderada por fructosa, salicilatos y bilirrubina. En el método del ferricianuro la interferencia fue marcada con fructuosa, galactosa, y ácido ascórbico y moderada con creatinina, manosa y salicilatos. En cuanto al de glucosa oxidasa hubo interferencia marcada únicamente por ácido ascórbico y moderada por bilirrubina. Con hexoquinasa hubo interferencia moderada únicamente por fructosa. Por su exactitud, ambos métodos enzimáticos son satisfactorios como substitutos de los métodos tradicionales; sin embargo, el método de la glucosa oxidasa se considera más adecuado por cuanto puede efectuarse con cualquier fotómetro o espectrofotómetro y el reactivo es más estable y de menor precio

Estudios de función plaquetaria en diabéticos adultos en tratamiento / Platelet function in adult diabetic patients under treatment

Se hace un estudio de 52 pacientes diabéticos adultos en tratamiento, donde se analizan la adhesividad y la agregación plaquetaria. Se observó un aumento en la adhesividad con un promedio de 38,4 por ciento sobre 19 por ciento de los normales (p<0,001). No se evidenciaron diferencias en los grupos etarios ni entre los pacientes con tratamiento insulínico o con hipogliceminantes orales (p>0,1). Para ambos sexos, se encontró promedios significativamente altos con respecto al normal (p<0,001), pero con diferencia significativa entre hombres y mujeres (p<0,05), con un promedio mayor en el hombre (41 por ciento y 35,3 por ciento en la mujer). Usando diversas concentraciones de ADP se demostró una sensibilidad aumentada de las plaquetas al mismo, pues 35 pacientes dieron segunda onda de agregación con una concentración de ADP de 1,3 x 10**-6M o menor. Analizando los pacientes en cuanto a tipo de tratamiento, edad y sexo, no se encontró diferencia significativa. De los 10 pacientes con más de 10 años de evolución de su diabetes, 9 mostraron una sensibilidad mayor al ADP. De los 36 pacientes con microangiopatía, 25 mostraron una sensibilidad aumentada al ADP, al igual que 10 de los 16 pacientes sin microangiopatía