The combination of mammaglobin A and TWIST-1 increases detection of circulating tumor cells in breast cancer / A combinação de mamaglobina A e TWIST-1 aumenta a detecção de células tumorais circulantes no câncer de mama

ABSTRACT Objectives: Breast cancer cells that are released into the bloodstream are called circulating tumor cells (CTCs). CTCs can express different genes, like TWIST-1 and mammaglobin A (MGA). The aims of this study were to analyze the expression of TWIST-1 and MGA in the blood of breast cancer patients to detect CTCs and to assess the association between the presence of CTCs and prognostic parameters of breast cancer. Methods: Prospective study. Total ribonucleic acid (RNA) from blood mononucleated cells was obtained from breast cancer patients (n = 36; age: 51.5 ± 12.5 years) and healthy donors (n = 14; age: 49.4 ± 9.4 years). Real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) was performed to analyze the expression of TWIST-1 and MGA. Results: Patient carcinomas - ductal (86.7%), other types (13.3%). MGA gene expression was not detected in the donors' samples, while it was detected in 14% of the patient samples. Overexpression of TWIST-1 gene was observed in 17% of the patient samples. The combined analysis of both markers allowed the detection of CTCs in 27.8% of the samples, resulting in a significant (p < 0.05) sensitivity increase of detection. No significant associations (p > 0.05) were found between expression of the analyzed genes and the breast cancer prognostic factors. Conclusion: Combined analysis of TWIST-1 and MGA increased the sensitivity of CTCs detection compared to the single analysis of each gene. The detection of CTCs was not associated with known prognostic factors, suggesting that it is able to provide clinical information in addition to routine breast cancer clinicopathological parameters.

RESUMEN Objetivos: Las células de cáncer de mama liberadas al torrente sanguíneo se llaman células tumorales circulantes (CTCs). Las CTCs pueden expresar diferentes genes, como TWIST-1 y mamaglobina A (MGA). Los objetivos de este estudio fueron analizar la expresión de TWIST-1 y MGA en la sangre de pacientes con cáncer de mama (CM) para detectar CTCs y evaluar la asociación entre la presencia de CTCs y los parámetros pronósticos del CM. Métodos: Estudio prospectivo. Se obtuvo el ácido ribonucleico (ARN) de las células mononucleadas en la sangre de pacientes con CM (n = 36, edad: 51,5 ± 12,5 años) y donantes sanas (n = 14; edad: 49,4 ± 9,4 años). Se realizó reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR) para analizar la expresión de TWIST-1 y MGA. Resultados: Carcinoma ductal (86,7%), otros tipos (13,3%). No se detectó la expresión del gen MGA en las muestras de las donantes, pero en el 14% de las muestras de las pacientes. Se observó elevada expresión de TWIST-1 en el 17% de las muestras de pacientes con CM. El análisis combinado de ambos marcadores permitió detección de CTCs en el 27,8% de las muestras, resultando en un aumento significativo (p < 0,05) en la sensibilidad de detección. No se encontraron asociaciones significativas (p > 0,05) entre la expresión de los genes y los factores pronósticos. Conclusión: El análisis combinado de TWIST-1 y MGA aumentó la sensibilidad de detección de CTCs en comparación con el análisis de cada gen. La detección de CTCs no se asoció a factores pronósticos conocidos, sugiriendo que podría ofrecer informaciones clínicas adicionales a los parámetros clínico-patológicos de rutina del CM.

RESUMO Objetivos: As células cancerígenas da mama liberadas na corrente sanguínea são chamadas de células tumorais circulantes (CTCs). As CTCs podem expressar diferentes genes, como TWIST-1 e mamaglobina A (MGA). Os objetivos deste estudo foram analisar a expressão de TWIST-1 e MGA no sangue de pacientes com câncer da mama (CM) para detectar CTCs e avaliar a associação entre a presença de CTCs e os parâmetros prognósticos do CM. Métodos: Estudo prospectivo. O ácido ribonucleico (RNA) das células mononucleadas no sangue foi obtido de pacientes com CM (n = 36, idade: 51,5 ± 12,5 anos) e doadoras saudáveis (n = 14; idade: 49,4 ± 9,4 anos). Reação da cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) foi realizada para analisar a expressão de TWIST-1 e MGA. Resultados: Carcinoma ductal (86,7%), outros tipos (13,3%). A expressão do gene MGA não foi detectada nas amostras das doadoras, mas foi observada em 14% das amostras das pacientes. Superexpressão de TWIST-1 foi observada em 17% das amostras dos indivíduos com CM. A análise combinada de ambos os marcadores permitiu a detecção de CTCs em 27,8% das amostras, resultando em um aumento significativo (p < 0,05) na sensibilidade da detecção. Associações significativas (p > 0,05) entre a expressão dos genes e os fatores prognósticos não foram encontradas. Conclusão: A análise combinada de TWIST-1 e MGA aumentou a sensibilidade da detecção de CTCs em comparação com a análise de cada gene. A detecção de CTCs não foi associada a fatores prognósticos conhecidos, sugerindo que ela pode fornecer informações clínicas adicionais aos parâmetros clinicopatológicos de rotina do CM.

La osteoporosis desde la visión del ginecólogo

En el adulto tiene lugar un activo proceso de recambio óseo que se localiza en unidades de remodelación para reemplazar y mejorar las funciones del hueso. Existe una estrecha regulación de este recambio mediante la interacción del osteoblasto-osteoclasto: el primero produce una proteína de membrana, el RANK-L, que al unirse al receptor RANK del preosteoclasto lo madura, lo activa y finalmente lo lleva a la apoptosis. El RANK-L es neutralizado por otra glucoproteína del osteoblasto no anclada a la membrana, la osteoprotegerina, que se fija al ligando impidiendo su unión con el RANK. Del equilibrio entre ambas proteínas depende el ritmo de absorción ósea. Entre distintos factores locales y sistémicos que regulan este equilibrio, los estrógenos aumentan la producción de osteoprotegerina y reducen el RANK-L. Durante la menopausia, la caída del E2 y el aumento de la FHS (también implicada en la remodelación ósea) llevan a una pérdida acelerada de masa mineral ósea, con aumento de la incidencia de osteoporosis y de las fracturas por fragilidad del hueso. En este sentido, referimos la observación de 405 fracturas de cadera/100 000 mujeres posmenopáusicas en Rosario durante el período 2001-2002. También describimos los factores de riesgo para predecir fracturas; encontramos que un índice de masa corporal <25 kg/m2, más de 10 años de menopausia sin tratamiento, baja ingestión de calcio y cifosis con fracturas vertebrales previas son los factores de riesgo más importantes en nuestra población. Se analizan los métodos disponibles para el diagnóstico de la osteoporosis haciendo referencia a las medidas preventivas farmacológicas y no farmacológicas para evitar la aparición de las principales fracturas incapacitantes en la vejez.

In postmenopausal osteoporosis the bone increasing effect of monofluorophosphate is not dependent on serum fluoride

According to previous pharmacokinetic studies the biovailability of fluorine (F) from sodium monofluorophosphate (MFP) doubles that of sodium fluoride (NaF). This paper reports a study designed to verify whether the vertebral bone mass increasing effect of NaF (30 mg F/day) was comparable to that of MFP (15 mg F/day), given for 18 months to osteoporotic postmenopausal women. The BMD of lumbar vertebrae of both groups showed significant increases (MFP: 60 + 15 mg/cm2, NaF: and 71 + 12 mg/cm2) over basal levels (P < 0.001). The difference between treatments was not significant (P = 0.532). The serum levels of ionic F (the mitogenic species on osteoblasts) were not related to the above mentioned effects. In NaF-treated patients, the fasting levels of total serum F increased significantly (6.7 + 0.9 muM vs. Basal: 2.0 + 0.8 muM; P < 0.001). This phenomenon was accounted for by ionic fluoride that increased over 20-fold (6.5 + 1.9 muM vs. Basal: 0.3 + 0.04 muM). In MFP-treated patients the fasting serum levels of total (7.0 + 0.7 muM vs. Basal: 2.2 + 0.9 M) and diffusible F (0.5 + 0.02 muM vs. Basal 0.2 + 0.02 muM) increased significantly (P < 0.001). The increase in the non diffussible F fraction is accounted for by proteinboud F, probably by the complexes formed between MFP and alpha2-macroglobulin and C3. Serum diffusible F was formed by two fractions: ionic F and F bound to low molecular weight macromolecule/s (2 200 + 600 Da), in approximately equal amounts. The general information afforded by the present observations support the hypothesis that ionic F is released progressively during the metabolism of MFP bound to alpha2-macroglobulin and C3. These phenomena explain why comparable effects to those obtained with 30 mg F/d of NaF could by obtained with one half the dose of MFP.