A novel reiterated family of transcribed oligo(A)-terminated, interspersed DNA elements in the genome of Trypanosoma cruzi

We report the molecular characterization of a novel reiterated family of transcribed oligo(A)-terminated, interspersed DNA elements in the genome of Trypanosoma cruzi. Steady-state level of transcripts of this sequence family appeared to be developmentally regulated, since only in the replicative forms the parasite showed expression of related sequences with a major band around 3 kb. The presence of frame shifts or premature stop codons predicts that transcripts are not translated. The sequence family also contains truncated forms of retrotransposons elements that may become potential hot spots for retroelement insertion. Sequences homologous to this family are interspersed at many chromosomes including the subtelomeric regions

Isolamento e caracterizaçäo de genes II da superfamília gp85/sialidases expressos nas formas amastigotas de Trypanosoma cruzi / Isolation and characterization of group II genes from 85/sialidase superfamily expresses at amastigote stage of Trypanosoma cruzi

O Trypanosoma cruzi é o protozoário flagelado causador da Doença de Chagas ou tripanosomíase americana, que atinge milhoes de pessoas na América Latina. Esse microorganismo apresenta um ciclo de vida complexo e o estágio evolutivo amastigota é a forma de replicaçao do parasita encontrada no hospedeiro mamífero. Os amastigotas se caracterizam pela presença cie um flagelo curto e forma oval, e sao fundamentais para a persistência da infecçao pelo T. cruzi no hospedeiro vertebrado. Pouco se sabe sobre a constituiçao bioquímica das formas amastigotas, tendo sido poucos os genes isolados e caracterizados até o presente. No entanto sabe-se que a superfamília gênica das gp85/sialidases, que codificam para antígenos de superfície com papel importante na adesao e invasao do parasita, possui membros que sao expressos também nas formas amastigotas do T. cruzi. No presente trabalho é feita a caracterizaçao de cDNAs de formas amastigotas intracelulares da cepa Sylvio (clone X10/4) do Trypanosoma cruzi. Esses cDNAs foram denominados TcSx e foram isolados com sonda de um gene que codifica uma glicoproteína de superfície de 85 kilodáltons das formas tripomastigotas do parasita, descrito anteriormente na literatura. Os dados mostram que o gene TcSx23 e seus similares (TcSx2, TcSx7, TcSxl8, TcSx19 e TcSx32) constituem novos genes que podem ser inseridos na família 11 das gp85/sialidases. A análise das seqüências de nucleotídeos e de aminoácidos revela diferenças significativas entre TcSx23 e as proteínas SA85 -1, ASP-1 e ASP-2 que sao expressas nas formas amastigotas. O gene TcSx23 é transcrito e traduzido nas formas tripomastigotas e amastigotas gerando peptídeos de -80 e 50 kDa e anticorpos anti-TcSx23 mostram que a localizaçao celular dos epítopos reconhecidos por esses anticorpos difere nas duas formas do parasita, sendo de superfície em tripomastigotas e intracelular nos amastigotas. Alguns motivos peptídicos presentes em membros da família 11 das gp85/sialidases e que desempenham papel de adesinas, por exemplo Tc85 e gp82, estao ausentes em TcSx23. É possível que o polipeptídeo TcSx23 e...(au)