DNA damage as a potential marker in the clinical follow-up of female patients with treated cancer / Daño del ADN como marcador potencial en el seguimiento clínico de pacientes femeninas con cáncer tratado

Abstract Objective: To identify individual differences in the basal damage (DB) of peripheral leukocyte DNA from women with cancer in remission. Methods: Cross-sectional analytical study in which 24 women with cancer in remission from different locations and 24 supposedly healthy women participated. The alkaline comet assay and the neutral variant were used to determine single-stranded breaks (DB-A), and double-stranded DNA breaks (DB-N), respectively. Results: Although there were no differences between the mean values of DNA damage in patients and controls (DB-N: p = 0.43 and DB-A: p = 0.13), 41.6% of the patients presented an increase of one type or another of DNA breaks, with respect to the corresponding cut-off points of the control women. DB-N was correlated with increasing age (r2 = 0.1833; r = 0.4281; p = 0.036) in the patients. DB-A was elevated in those who had received anticancer combination therapy (p = 0.024) and in those who were undergoing treatment with tamoxifen (p = 0.033); while it was decreased in those that consumed antioxidants (p = 0.006) and in those that combined tamoxifen and antioxidants (p = 0.020). Conclusions: Individual differences were identified in both types of DNA strand breaks that are of medical interest in the studied patients. Baseline DNA damage determined by comet assay is a potential tool in the clinical follow-up of cancer patients in remission.

Resumen Objetivo: Identificar diferencias individuales en el daño basal (DB) del ADN de leucocitos periféricos de mujeres con cáncer en remisión. Métodos: Estudio analítico de corte transversal en el que participaron 24 mujeres con cáncer en remisión de diferentes localizaciones y 24 mujeres supuestamente sanas. Se utilizó el ensayo cometa alcalino y la variante neutral para determinar roturas de simple hebra (DB-A), y roturas de doble hebra del ADN (DB-N), respectivamente. Resultados: Aunque no hubo diferencias entre los valores medios del daño del ADN de pacientes y controles (DB-N: p=0,43 y DB-A: p=0,13), el 41,6% de las pacientes presentó aumento de un tipo u otro de roturas del ADN, respecto a los correspondientes puntos de corte de las mujeres controles. El DB-N estuvo correlacionado con el incremento de la edad (r2 = 0,1833; r = 0,4281; p = 0,036) en las pacientes. El DB-A estuvo elevado en aquellas que habían recibido politerapia anticáncer (p = 0,024) y en las que estaban realizando tratamiento con tamoxifeno (p=0,033); mientras estuvo disminuido en las que consumieron antioxidantes (p=0,006) y en las que combinaron tamoxifeno y antioxidantes (p=0,020). Conclusiones: Se identificaron diferencias individuales en ambos tipos de roturas de hebra del ADN que resultan de interés médico en las pacientes estudiadas. El daño basal del ADN determinado por ensayo cometa es una herramienta potencial en el seguimiento clínico de pacientes con cáncer en remisión.

Water pH and hardness alter ATPases and oxidative stress in the gills and kidney of pacu ( Piaractus mesopotamicus )

This study aimed to assess the effects of low and high water hardness in interaction with different water pH in pacu (Piaractus mesopotamicus). Pacu juveniles were subjected to low (50 mg CaCO3 L-1 - LWH) or high water hardness (120 mg CaCO3 L-1 - HWH) at water pH of 5.5 (acidic), 7.5 (circumneutral) or 9.0 (alkaline) for 15 days. Gills and kidneys were collected (days 1, 5 and 15). Gill Na+/K+-ATPase (NKA) and vacuolar-type H+-ATPase (V-ATPase) activities were higher in alkaline pH with HWH on day 1. Gill and kidney NKA and V-ATPase activities were higher in acidic pH with LWH on day 15. Gill NKA activity of pacus under alkaline pH with LWH was higher than those exposed to HWH. Reduced antioxidant capacity in the gills and kidney and enhanced thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) levels were demonstrated in fish exposed to acidic or alkaline pH, mainly with LWH. HWH increased glutathione-S-transferase (GST) activity and reduced TBARS levels in the gills and kidney. On day 15, GST activity was increased at acidic pH with LWH. In conclusion, circumneutral pH presents less oxidative stress and fewer variations in ATPases and HWH reduced deleterious effects in fish exposed to acidic or alkaline pH.(AU)

Este estudo objetivou analisar o efeito de baixa e alta dureza da água em interação com diferentes pH da água em pacu (Piaractus mesopotamicus). Juvenis de pacu foram submetidos a baixa (50 mg CaCO3 L-1 - BDA) ou alta dureza da água (120 mg CaCO3 L-1 - ADA) em pH da água de 5.5 ácido), 7.5 (circum-neutro) ou 9.0 (alcalino) por 15 dias. Foram coletados brânquias e rim (dias 1, 5 e 15). Atividade de Na+/K+-ATPase (NKA) e H+-ATPase do tipo vacuolar (V-ATPase) branquial foram maiores em pH alcalino com ADA no dia 1. Atividade de NKA e V-ATPase branquial e renal foram maiores em pH ácido com BDA no dia 15. Atividade de NKA branquial de pacus submetidos a pH alcalino com BDA foi maior que aqueles expostos para ADA. Em peixes expostos a pH ácido ou alcalino com BDA houve redução da capacidade antioxidante nas brânquias e rim e aumento dos níveis de "substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico" (TBARS). Em ADA aumentou a atividade da "glutationa-S-transferase" (GST) e reduziu níveis de TBARS nas brânquias e rim. No dia 15, a atividade da GST foi maior em pH ácido com BDA. Em conclusão, pH circum-neutro apresentou menor estresse oxidativo e poucas variações na atividade de ATPases e ADA reduziu efeitos deletérios em peixes expostos a pH ácido ou alcalino.(AU)

Avaliação do potencial alcalinizante das águas minerais comercialmente disponíveis em território brasileiro / Alkalizing potential evaluation of commercially available mineral waters in Brazil

OBJECTIVE:To characterize the profile of commercially available mineral waters in Brazil (from national and international sources) by calculating the potential renal acid load (PRAL). METHODS: We evaluated 308 commercially available mineral waters in the five Brazilian macro regions. The content of sulfate, chloride, sodium, potassium, magnesium and calcium from mineral waters were obtained to calculate the PRAL, using Remers & Manz formula, adapted for mineral waters. RESULTS: From the 308 mineral waters collected, 256 were included in this analysis. We found a great variability in the composition of mineral waters according to the source and country of origin. All the components analyzed were present in greater quantities in the mineral waters from international sources and differed significantly from the values found in the mineral waters from Brazilian sources, with the exception of potassium and sodium (Mg: 1,9 vs 6,8, p=0,0008; Ca: 5,78 vs 32,9, p=0,001; SO4: 0,9 vs 13, p<0,0001; Cl: 1,49 vs 12, p=0,0019, mineral waters from Brazilian sources versus international sources, respectively). The PRAL value of mineral waters from Brazilian sources was also statistically different (-0,39 vs -1,39; p=0,0025). The potential basifying / acidifying effects of the mineral water evaluated by PRAL did not correlate with the pH value. The magnesium and bicarbonate content were the major predictors of a negative PRAL - the higher the content thereof, lower the PRAL. CONCLUSION: The mineral waters from Brazilian sources have a low grade of mineralization and the vast majority (n=201) have a PRAL value considered neutral

OBJETIVO: Caracterizar o perfil de águas minerais comercialmente disponíveis em território brasileiro (provenientes de fontes nacionais e internacionais) através do cálculo do potencial de carga ácida renal (PRAL). MÉTODOS: Foram avaliadas 308 águas minerais comercialmente disponíveis nas cinco macrorregiões brasileiras. O conteúdo de sulfato, cloreto, sódio, potássio, magnésio e cálcio das águas minerais foram obtidos para cálculo do PRAL, que foi realizado através da fórmula de Remer e Manz, adaptada para águas minerais. RESULTADOS: Das 308 águas minerais coletadas, foram incluídas 256 nesta análise. Foi encontrada uma grande variabilidade na composição das águas minerais de acordo com a fonte de extração e país de origem. Todos os componentes analisados apresentaram-se em maior quantidade nas águas minerais de fontes internacionais e diferiram significantemente dos valores encontrados nas águas minerais de fontes brasileiras, com exceção do potássio e sódio (Mg: 1,9 vs 6,8, p=0,0008; Ca: 5,78 vs 32,9, p=0,001; SO4: 0,9 vs 13, p<0,0001; Cl: 1,49 vs 12, p=0,0019, fontes brasileiras versus fontes internacionais, respectivamente). O valor de PRAL das águas minerais de fontes brasileiras também foi diferente (-0,39 vs -1,39; p=0,0025). O potencial alcalinizante/ acidificante das águas minerais avaliado pelo PRAL não esteve correlacionado com o valor de pH. O magnésio e bicarbonato apresentaram-se como os principais preditores negativos do PRAL ­ quanto maior o teor destes, menor o PRAL. CONCLUSÃO: As águas minerais de fontes brasileiras possuem baixo grau de mineralização e a maioria (n=201) com valor de PRAL considerado neutro

Chemical composition and dry matter digestibility of sugar cane oxide treated with calcium / Composição química e digestibilidade da matéria seca da cana-de-açúcar tratada com óxido de cálcio

The aim of this study was to identify the most adequate level of calcium oxide (CaO) in the treatment of sugar cane by evaluating the chemical composition and in vitro digestibility of dry matter. The sugar cane was homogenized with CaO levels 0, 0.75, 1.5, 2.25, 3.0, 3.75 and 4.5 percent, in natura matter, for 24 hours. The dry matter and mineral matter increased, while the organic matter of the sugar cane decreased (P <0.05) linearly as a result of the CaO levels. The CaO had no effect on the levels of crude protein and ether extract. The phosphorus concentration remained unchanged, but there was a significant increase (P<0.05) in the calcium content. The contents of neutral detergent fiber, acid detergent fiber and cellulose decreased linearly with the levels of CaO. The average levels of indigestible dry matter and indigestible neutral detergent fiber significantly decreased with increasing levels of CaO. The results showed that the in vitro dry matter digestibility (IVDMD) was different between fresh sugar cane and sugar cane with added levels of CaO from 1.5 percent. The IVDMD and nutritional value of the sugar cane was improved by adding 1.5 percent CaO based on fresh content...

O objetivo foi identificar o nível mais adequado de óxido de cálcio (CaO) no tratamento da cana-de-açúcar por meio da avaliação da composição química e a digestibilidade in vitro da matéria seca. A cana-de-açúcar foi homogeneizada adicionando os níveis de CaO 0; 0,75; 1,5; 2,25; 3,0; 3,75 e 4,5 por cento em porcentagem de matéria natural, por 24 horas. Os teores de matéria seca e matéria mineral aumentaram, ao passo que o teor de matéria orgânica da cana-de-açúcar diminuiu (P<0,05) de forma linear em função dos níveis de CaO. Não houve efeito dos níveis do CaO sobre o teor de proteína bruta e extrato etéreo. Os teores médios de fósforo mantiveram-se inalterados, porém ocorreu um aumento (P<0,05) no teor de cálcio. Os teores de fibra em detergente neutro, fibra em detergente ácido e celulose diminuíram linearmente em função dos níveis de CaO. Os teores médios da matéria seca indigestível e da fibra em detergente neutro indigestível tiveram redução significativa com o aumento dos níveis de CaO. Os resultados da digestibilidade in vitro da matéria seca (DIVDM) mostraram-se diferentes entre cana-de-açúcar in natura e a com níveis de CaO. Níveis de CaO a partir de 1,5 por cento melhoram o valor nutritivo e a DIVDM da cana-de-açúcar...

Avaliação do emprego de microfiltração para remoção de fibras do efluente de branqueamento de polpa celulósica / Evaluation of the use of microfiltration for removal of fiber from bleaching pulp mill effluent

O processo de branqueamento é o estágio em que ocorre a maior perda de fibras durante a fabricação de polpa celulósica. Além de ser uma perda de produto, estas fibras aumentam a concentração de matéria orgânica do efluente dificultando seu tratamento. O objetivo deste trabalho foi avaliar o emprego de microfiltração (MF) na remoção de fibras de efluente de branqueamento alcalino de polpa celulósica. Foi empregada membrana de poli(éter imida) com tamanho médio de poros de 0,5 µm e área de filtração de 0,05 m². O efeito das condições operacionais no fluxo permeado foi avaliado através do monitoramento do perfil de fluxo durante a operação em diferentes condições de velocidade de escoamento (Reynolds de 1.226, 1.653 e 2.043), pH da alimentação (7, 10 e 10,6), temperatura (28, 43 e 48°C) e pressão de operação através da avaliação da pressão crítica. Os resultados mostraram que a MF é um processo eficiente para remoção de fibras, apresentado 99% eficiência de remoção de sólidos suspensos. O melhor desempenho da operação de MF foi obtido empregando pH 7, pressão de 1 bar e Re de 1.653. Os resultados mostram que a redução do fluxo se deve principalmente à formação de torta.

The bleaching process is the stage where there is the greatest loss of fibers during the pulp production. Besides being a waste of product, these fibers increase the concentration of organic matter in the effluent and make the treatment of effluent more difficult. The aim of this study was to evaluate the use of microfiltration (MF) in the removal of fiber of effluent of alkaline bleaching pulp mill. The membrane employed was hollow fiber poly (ether imide), with average pore size of 0.5 µm and filtration area of 0.05 m². The effect of operating conditions on the permeate flux was evaluated by monitoring the flux profile during operation in different conditions of flow velocity (Reynolds 1,226, 1,653 and 2,043), pH of feeding (7, 10 and 10.6), temperature (28, 43, and 48°C) and pressure operation by evaluating the critical pressure. The results showed that MF is an efficient process for removal of fiber, with 99% removal efficiency of suspended solids. The best performance of the operation of MF was obtained using pH 7, 1 bar and Reynolds number of 1,653. The results show that the flow reduction is mainly due to cake formation.

Lodos de esgoto alcalinizados em solos do estado do Paraná: taxa de aplicação máxima anual e comparação entre métodos para recomendação agrícola / Alkaline sewage sludge on soils of Paraná state: maximum annual application rate and comparison between methods for agricultural recommendation

Para o uso agrícola do lodo de esgoto higienizado por processo de estabilização alcalina prolongada (lodo EAP), além de estabelecer limites de aplicação máxima conforme a legislação, é necessário estudar atributos dos lodos e dos solos que favoreçam as metodologias de sua recomendação. Objetivou-se determinar a taxa de aplicação máxima anual (TAMA) de lodo EAP pelo critério de elevação do pH para 20 lodos e solos do estado do Paraná; determinar a influência dos atributos desses solos nos valores da TAMA de lodo EAP; avaliar o uso dos métodos de saturação por bases (V%) e pH referência (SMP), utilizando como padrão o método da incubação. Empregou-se o ensaio de incubação para lodo EAP aplicado ao solo, conforme metodologia oficial. Os resultados indicam que as TAMA de lodo EAP variaram de 10 a >80 Mg.ha-1 para as 20 regionais estudadas; Os atributos químicos (capacidade de troca de cátions, H+Al e carbono) e físico (argila) são os que melhor definem a determinação da TAMA, apresentando relação diretamente proporcional. Os métodos do V% e do pH referência (SMP) para pH H2O 5,5 mostraram-se seguros quanto à recomendação agrícola.

For agricultural use of alkalinized sludge (AS), beyond to establish the maximum application limits to comply with the legislation, it is necessary to study the attributes of sludges and soils that favor the methodologies of its recommendation. The objectives of this study were to determine the maximum annual application rate (MAAR) of alkalinized sludge (AS) according to the pH elevation criterion for 20 sludge origins and soils of the Paraná state; to determine the influence of soil attributes over the MAAR of AS; to evaluate two methods rate calculation for AS, the base saturation (V%) and pH reference (SMP) by comparing with the standard incubation methodology for AS sludge application. It was used incubation test for AS applied to soil, following official methodology. The results indicated that the MAAR were ranged 10 to >80 Mg.ha-1, for the 20 regions; the chemical properties (cation exchange capacity, H+Al and carbon) and physical properties (clay) were the best parameters to the determination of the MAAR, showing direct relationship; the V% and SMP (pH H2O 5,5) methods were safe to the agricultural recommendation.

Aplicación de dos biomarcadores para el análisis de lesiones en el DNA de bivalvos marinos

El presente trabajo describe la estandarización de las técnicas del Test de Micronúcleo (MN) y Ensayo Cometa para la evaluación del daño en el DNA de bivalvos marinos. La importancia de estas técnicas radica en que permiten evaluar la respuesta temprana al estrés ocasionado por agentes contaminantes y cambios ambientales. Tejidos branquiales de Semimytilus algosus y Aulacomya ater fueron utilizados para tratamientos in vivo e in vitro. Los tejidos fueron expuestos a los agentes mutagénicos Mitomicina C en concentraciones de 0,02; 0,04 y 0,06 x 10-6 M y H2O2 en una concentración de 100 mM con tiempos de evaluación de 1, 3, 6, 24 y 48 h. Diferentes soluciones para la colecta del tejido y aislamiento celular fueron evaluados obteniendo una mayor viabilidad celular en la solución salina CMFS, pH 7,3; en frío. El Test de Micronúcleo se modificó en la forma de obtener el disgregado celular, realizando la hipotonización en Citrato de sodio 0,9%, fijación en metanol por segundos posterior al frotis y la tinción con Giemsa 2%. La estandarización del Ensayo Cometa Alcalino, descrita por Wilson et al. (1998), se realizó modificando la suspensión celular en agarosa LMP (1% en solución Kenny, pH 7,5), la exposición a solución de lisis (pH 10 con DMSO y Tritón) con variaciones en el tiempo de 1 a 16 h, y la electroforesis en solución alcalina pH 13,7 y tinción con Bromuro de etidio y Nitrato de plata para geles de agarosa. Los cambios realizados en ambas técnicas permitieron obtener un alto número celular con morfología definida, observándose macrolesiones como la formación de MN y aberraciones nucleares, y la determinación cualitativa de microlesiones observadas por fragmentación y migración del DNA.

This work describes the standardization of Micronucleus Assay (MN) and Comet Assay techniques used for the evaluation of the DNA damage on marine bivalves. These techniques are important because they can evaluate the early stress response caused by pollutant agents and environmental changes. Branchial tissues of Semimytilus algosus and Aulacomya ater were used for in vivo and in vitro treatments. Tissues were exposed to the mutagenetic agents Mitomicine C in concentrations of 0,02; 0,04 and 0,06 x 10-6 M and H2O2 in concentration of 100 mM evaluated at 1, 3, 6, 24 and 48 h. Different solutions for the tissue collection and cell isolation were evaluated, obtaining more cell viability with cold CMFS pH 7,3 saline solution. Micronucleus Assay were modified in the obtaining of suspension cell, we used 0,9% Sodium citrate hipotonic solution, fixation in methanol for seconds after the spread and dyed with 2% Giemsa. The Alkaline Comet Assay protocol described by Wilson et al. (1998) was standardized modifying the single-cell suspension embedded in LMP Agarose (1% in Kenny solution, pH 7,5), the exposure at lysing solution (pH 10 with DMSO and Triton) with changes from 1 to 16 h, electrophoresis in alkaline solution pH 13,7 and dyed with Ethidium bromide and Silver nitrate for agarose gels. Changes made at both techniques allowed us to obtain a high cell number with a defined morphology, recognizing macrolessions like the MN formation and nuclear aberrations, and the qualitative determination of microlessions observed by the fragmentation and migration of the DNA.

Estudo comparativo entre as metodologias enzimática e picrato alcalino cinético na determinação da creatinina / Comparative study between the enzymatic and kinetic alkaline picrate methodologies for creatinine assay

A determinação da creatinina é um dos ensaios mais solicitados no laboratório clínico como prova de função renal. Neste trabalho, nós comparamos a nova metodologia enzimática para determinação da creatinina no soro e urina (creatinina-PAP, Merck/Boeringer Mannheim) com o procedimento do picrato alcalino cinético (A-Gent, Abbott), ambos utomatizados no sistema Cobas Mira. Nossos dados mostraram excelente correlação (r>0,99) entre os dois métodos para soro e urina. A regressão linear foi y (mg/dL) = 0,963 x Picrato Alcalino – 0,076 para o soro e y (mg/dL) = 0,985 x Picrato Alcalino -3,618 para urina. Os resultados obtidos com os dois métodos mostraram que são diferentes quando o teste “t” foi utilizado (p<0,001) tanto para o soro como para urina, com o procedimento enzimático mostrando resultados baixos. A imprecisão (reprodutibilidade) inter-ensaio para níveis de creatinina baixos (~0,41 mg/dL), normais (~0,9 mg/dL) e elevados (~6,6 mg/dL) em termos de CV foi: 7,80; 7,82; 2,31 e 4,06; 5,50; 1,81 para as metodologias enzimática e picrato alcalino cinética, respectivamente. A linearidade observada foi cerca de 19 mg/dL para o método enzimático e de cerca de 22 mg/dL para o procedimento com picrato alcalino. Nós concluímos que a metodologia enzimática é tão adequada quanto o procedimento com picrato alcalino cinético para a rotina laboratorial, com o adicional de fornecer maior especificidade ao ensaio, como sugerido por outros autores.