Suplementação de probióticos: ferramenta no controle de infecções respiratórias virais ­ uma revisão sistemática / Probiotics supplementation: a tool in the control of viral respiratory infection ­ a systematic review

Infecções respiratórias virais estão entre as principais causas globais de adoecimento de acordo com o estado de saúde e o microbioma do indivíduo. O objetivo dessa revisão foi identificar possíveis efeitos associados à suplementação de probióticos em infecções respiratórias virais. Para tanto, realizou-se uma busca sistematizada nas bases de dados Google Acadêmico, Scopus e PubMed partindo da hipótese de que a intervenção clínica baseada na suplementação de probióticos reduz a gravidade dos sinais/ sintomas de infecções virais. Foram identificados 585 artigos dos quais foram selecionados 16 para compor a síntese descritiva deste artigo. O uso de probióticos como terapêutica na infecção respiratória tem capacidade de melhorar o quadro clínico do paciente por meio de: (i) modulação da resposta imune, (ii) melhora da resposta específica, (iii) produção de bacteriocinas, (iv) melhora na integridade de mucosas, (v) redução do número de cópias virais.

Viral respiratory infections are among the main global causes of illness according to the individual's health status and microbiome. The objective of this review was to identify possible effects associated with probiotic supplementation in viral respiratory infections. Therefore, a systematic search was carried out in the Google Academic, Scopus and PubMed databases, based on the hypothesis that clinical intervention based on supplementation of probiotics reduces the severity of signs/symptoms of viral infections. 585 articles were identified, of which 16 were selected to compose the descriptive synthesis of this article. The use of probiotics as therapeutics in respiratory infection is able to improve the patient's clinical condition through: (i) modulation of the immune response, (ii) improvement of the specific response, (iii) production of bacteriocins, (iv) improvement in mucosal integrity, (v) reduction in the number of viral copies.

Qualidade higiênico-sanitária de suco de laranja in natura e estabelecimentos comerciais / Hygiene and sanitary quality of in natura orange juice and commercial establishments

O objetivo deste estudo foi analisar a qualidade microbiológica de suco de laranja in natura em Presidente Prudente (SP) e estabelecimentos comerciais. Foi avaliada a qualidade higiêncio-sanitária do ambiente de trabalho mediante um check-list e a qualidade do suco de laranja por contagem em placa. Os resultados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) para dados não paramétricos (Kruskal-Wallis) com p <0,05. A maioria dos estabelecimentos apresentou boas práticas de higiene adequadas. Não foi confirmada a presença de coliformes termotolerantes. Para os demais parâmetros microbiológicos foram observadas altas contaminações em algumas amostras de suco. As bactérias ácido-láticas (BAL's) apresentaram contagem entre 3,15 (dp=0,21) a 5,68 (dp=0,01) log UFC/mL, e sua avaliação inibitória foram satisfatórias, uma vez que conseguiram inibir Escherichia coli (15 a 27 mm) e Listeria monocytogenes (23 a 27 mm). A adoção de medidas de boas práticas de higiene, além da educação continuada dos manipuladores de alimentos, promove a redução da contaminação.

Current paper analyzes the microbiological quality of in natura orange juice in Presidente Prudente, Brazil, and in commercial establishments. Hygiene and sanitary conditions of work environment was investigated through a check-list and the quality of orange juice was analyzed by plate counts for ANOVA results for non-parameter data (Kruskal-Wallis) at p<0.05. Most commercial establishments had good hygiene practice and thermo-tolerant coliforms were not extant. There were, however, high contaminations in several juice samples. Acid-lactic bacteria had counts between 3.15(dp=0.21) and 5.68(dp=0.01) log CFU/mL. Inhibitory evaluation was satisfactory since their impaired Escherichia coli (15 - 27 mm) and Listeria monocytogenes (23 - 27mm). Good practice in hygiene and continued education by food handlers cause a reduction of contamination.

Papel da interação entre bactérias láticas isoladas de alimentos na produção de bacteriocinas / Role of interactions among lactic acid bacteria isolated from foods on production of bacteriocins

Bacteriocinas produzidas por bactérias láticas (BAL) apresentam um importante potencial de aplicação na bioconservação de alimentos, por sua ação antimicrobiana contra algumas espécies de microrganismos patogênicos de relevância, como Listeria monocytogenes. Este estudo analisou o efeito da interação entre cepas selecionadas de BAL produtoras de bacteriocinas com outras BAL viáveis ou não viáveis (bacteriocinogênicas ou não) na indução da produção de bacteriocinas. O efeito dos metabólitos produzidos por estas cepas na indução da bacteriocinogênese também foi avaliado. As cepas produtoras de bacteriocinas selecionadas para o estudo foram Lactobacillus sakei MBSa1, produtora de sakacina A e Pediococcus acidilactici ET34, produtora de pediocina, isoladas de salame e salmão defumado, respectivamente. A produção de pediocina por P. acidilactici ET34 foi avaliada também em leite em pó desnatado reconstituído, além de meio de cultura (caldo MRS). Os resultados indicaram que, quando em co-cultura com Enterococcus faecalis ATCC12755, Lactobacillus sakei ATCC15521 ou Listeria monocytogenes (cepas 104, 711 e 637), ou na presença do sobrenadante livre de células (SLC) dessas culturas, nenhuma das duas cepas testadas produziu maior quantidade de bacteriocina do que a produzida quando em monocultura ou na ausência do SLC. A bacteriocina produzida por P. acidilactici ET34 apresentou um efeito bacteriostático contra L. monocytogenes 104 no leite em pó desnatado reconstituído nas 12 h analisadas, com extensão da fase lag, de forma dose-dependente. Os resultados indicaram, também, que P. acidilactici ET34 não foi capaz de produzir pediocina no leite em pó desnatado reconstituído quando em monocultura ou em co-cultura, ao contrário do observado para o caldo MRS. Mais investigação é necessária para esclarecer os efeitos de possíveis interações entre as BAL presentes em um alimento, bem como o efeito dos componentes dos alimentos na produção das bacteriocinas pelas BAL bacteriocinogênicas

Bacteriocins produced by lactic acid bacteria (LAB) present an important application potential in food biopreservation, by their antimicrobial activity against some species of pathogenic microorganisms of relevance, such as Listeria monocytogenes. This study analyzed the effect of the interaction between selected strains of bacteriocin-producing LAB with other viable or non-viable LAB (bacteriocinogenic or not) in the induction of bacteriocin production. The effect of the metabolites produced by these strains on the induction of bacteriocinogenesis was also evaluated. The bacteriocin-producing strains selected for the study were Lactobacillus sakei MBSa1, producer of sakacin A and Pediococcus acidilactici ET34, producer of pediocin, isolated from salami and smoked salmon, respectively. The production of pediocin by P. acidilactici ET34 was also evaluated in reconstituted skimmed milk powder as well as culture medium (MRS broth). The results indicated that when co-cultivated with Enterococcus faecalis ATCC12755, Lactobacillus sakei ATCC15521 or Listeria monocytogenes (strains 104, 711 and 637), or in the presence of the cell free supernatant (SLC) of these cultures, neither of the two strains tested produced greater amount of bacteriocin than that produced in monoculture or in the absence of SLC. The bacteriocin produced by P. acidilactici ET34 presented a bacteriostatic effect against L. monocytogenes 104 in skimmed milk powder reconstituted in 12h, with extension of lag phase, in a dose-dependent manner. The results also indicated that P. acidilactici ET34 was not able to produce pediocin in the reconstituted skimmed milk powder when in monoculture or in co-culture, unlike that observed for the MRS broth. More research is needed to clarify the effects of possible interactions between BAL present in a food and the effect of food components on bacteriocin production by bacteriocinogenic BAL

Bacteriocin-like inhibitory substance in aquaculture: a classic method of protein precipitation for a new aplicability / Substância inibidora tipo bacteriocina na aquicultura: método clássico de precipitação de proteínas para novas aplicações

Techniques to decrease losses from bacterial diseases are always important to improve the fish production. The use of antagonistic substances (bacteriocins) has been proven to be a viable option. The aim of this study was to evaluate different methods of purification for bacteriocin like inhibitory substances (BLIS). For the purification process, we isolated and used two Gram-positive bacilli that produce antagonistic substances for pathogens in aquaculture. Tests for detection of interfering factors were also performed. After the confirmation that the antagonistic action was due the BLIS activity, we carried out the purification methods. The methods tested were: cell free supernatant, acid extraction and ammonium sulfate precipitation at two concentrations (20 and 50%). Salmonella Tiphy CFP/IAL1472 and Aeromonas hydrophila (isolated in a tilapia production environment) were used as indicators of the efficiency of extracts in controlling pathogenic potentials. Ammonium sulfate precipitation at 50% was the most appropriate for purifying the antagonistic substance for both indicators. The extracts of the two isolates remained active for 22 days at 25ºC. These are promising results regarding the water and fish health without the use of antibiotics, in this manner being a safer environmental practice.

Técnicas para diminuir as perdas causadas por doenças bacterianas são importantes para melhorar continuamente a produção de pescado. O uso de substâncias antagônicas (bacteriocinas) tem-se mostrado uma opção viável. O objetivo do trabalho foi avaliar diferentes métodos de purificação de bacteriocinas como substâncias inibidoras (BLIS). Dois bacilos Gram-positivos, produtores de substâncias antagonistas para agentes patogênicos da aquicultura, foram utilizados em processos de purificação. Depois de confirmada a ação antagônica pela atividade de BLIS, os métodos de purificação foram realizados. Os métodos testados foram: células livres de sobrenadante, extração ácida e precipitação por sulfato de amônia em duas concentrações (20 e 50%). Salmonella Typhi PCP/IAL1472 e Aeromonas hydrophila (isolada de um ambiente de tilapicultura) foram utilizadas como indicadores de eficiência dos extratos. O precipitado por sulfato de amônio a 50% foi o mais adequado para purificar a substância antagonista para ambos os isolados indicadores. Os extratos dos dois isolados permaneceram ativos por 22 dias em 25ºC. Estes resultados são promissores do ponto de vista da manutenção da sanidade da água e dos peixes, sem uso de antibióticos, constituindo uma prática ambientalmente mais segura.

determinación de bacteriocinas en muestras de consorcios microbianos nativos de ecosistemas de manglar en el departamento del atlántico, como fuente potencial de nuevos tratamientos biomédicos / The mangroves are ecosystems of high primary productivity; they are rich in organic matter and have high microbial diversity. The pressure of the physical conditions of the mangrove ecosystems has been linked to the production of special metabolites and unique molecular structures for microorganisms. Because of the developing of microbial resistance to antimicrobials in the world, it is necessary

Los manglares son ecosistemas con gran diversidad microbiana; la presión de las condiciones físicas de este, se ha relacionado con la producción de metabolitos con estructuras moleculares únicas para los microorganismos. Dado el desarrollo de resistencia bacteriana a antimicrobianos a nivel mundial, se hace necesaria la búsqueda de nuevas soluciones que nos permitan contrarrestar los efectos de dichos patógenos. En este estudio, se buscó aislar, identificar y evaluar la actividad antimicrobiana de bacteriocinas producidas por microorganismos nativos del ecosistema de Manglar de la Ciénaga de Mallorquín, frente a microorganismos patógenos de interés clínico. Se comprobó actividad antimicrobiana leve del extracto CN11, CN 8, P4C3, frente a S. Aureus ATCC 25923, actividad antimicrobiana leve del extracto de P4C3 frente a E. coli BLEE, actividad antimicrobiana leve frente a Klebsiella Pneumoniae ATCC 700603 de los extractos P4C3 y CN9; y actividad antimicrobiana moderada para el caso del extracto proteico de la cepa CN9 frente a E.coli ATCC 25922

The mangroves are ecosystems of high primary productivity; they are rich in organic matter and have high microbial diversity. The pressure of the physical conditions of the mangrove ecosystems has been linked to the production of special metabolites and unique molecular structures for microorganisms. Because of the developing of microbial resistance to antimicrobials in the world, it is necessary the research of new solutions that allow to counteract the effect of those pathogens. On this study, I was looking isolate, identify and evaluate the antimicrobial bacteriocins activity produced by native microbial consortia of mangrove swamp at the Mallorquín swamp, against pathogens microorganisms of clinical interest. Mild antimicrobial activity of the extract CN11, CN 8, P4C3, was found against S. aureus ATCC 25923, mild antimicrobial activity of P4C3 extract was found against E. coli BLEE, mild antimicrobial activity of the extracts P4C3 y CN9 against Klebsiella Pneumoniae ATCC 700603; moderate antimicrobial activity for protein extract of CN9 against E. coli ATCC 25922.

Adición de Carnobacterium maltaromaticum CB1 en chorizo y morcilla empacados al vacío, para inhibir el crecimiento de Listeria monocytogenes / Addition of Carnobacterium maltaromaticum CB1 in vacuum packaged chorizo and morcilla, to inhibit the growth of Listeria monocytogenes

Antecedentes: En años recientes la demanda de productos alimenticios percibidos como “naturales” se ha incrementado de manera importante, los cuales no contienen dentro de sus ingredientes conservantes o aditivos de origen químico o artificial. Al retirar de la fórmula estos conservantes/aditivos artificiales se puede generar en el producto un medio ideal de crecimiento de bacterias alterantes o patógenas. Esto es particularmente cierto en productos cárnicos procesados empacados al vacío, donde su alta actividad acuosa, bajo pH y un largo periodo de almacenamiento a condiciones de refrigeración generan un ambiente ideal para el crecimiento de microorganismos patógenos como Listeria monocytogenes. Por tanto, esto genera la necesidad de nuevas y efectivas tecnologías que permitan su control y eliminación. Los Bio-Conservantes (adición de bacterias vivas a los productos cárnicos) ofrecen una solución ideal a este tipo de problemas directamente relacionados con la seguridad alimentaria, y a la vez satisfacen la demanda por parte de los consumidores de productos saludables. Objetivos: Determinar si el cultivo C. maltaromaticum CB1 puede controlar el crecimiento de una cepa nativa de L. monocytogenes en morcilla y chorizo empacados al vacío (película de baja permeabilidad al oxigeno). Métodos: Tres lotes diferentes de chorizo y morcilla producidos a nivel industrial fueron posteriormente inoculados con una cepa nativa de L. monocytogenes a un nivel de 102 UFC/g junto con el bio-conservante C. maltaromaticum CB1 a un nivel de 103 UFC/g. A los tratamientos denominados como control no se les aplicó el bio-conservante. Después de ser empacados al vacío, los productos fueron almacenados a dos temperaturas diferentes de 4°C (refrigeración) y 8°C (abuso de temperatura) durante 35 días. En intervalos de 7 días se hizo recuentos del crecimiento de la L. monocytogenes utilizando agar Oxford...

Genes de virulencia y bacteriocinas en cepas de Enterococcus faecalis aisladas desde diferentes muestras clínicas en la Región del Maule, Chile / Virulence genes and bacteriocins in Enterococcus faecalis strains isolated from different clinical samples in Maule Region, Chile

The presence of virulence genes (VG) and bacteriocins from different clinical samples was studied in Enterococcus faecalis isolated from urinary tract infections (UTI), bacteremia and endodontitis and was correlated with haemolysin and gelatinase activity. We evaluated the presence of VG by PCR in 150 strains of E. faecalis including cylA, aggA, efaA, eep, gelE, esp, as-48, bac31, entL50A/B, entA, entP, entB, enlA andentl071. Haemolysin and gelatinase activity was studied. gelE and cylA genes expressed hemolysin and gelatinase, respectively. This activity was observed in some strains of bacteremia, UTI and endodontitis. The highest number of VG was detected in bacteremic strains, being aggA and entA genes the most frequent. efaA, esp, entA, entL50A/B were associated with their clinical origin (p < 0.05). The most common genetic profile was aggA-eep-enlA-entL50A/B. E. faecalis from UTI, bacteremia and endodontitis presented different gene combinations. Some of the genes studied were related to their clinical origin. The results obtained in this study are similar to those reported in other countries.

Desde diferentes muestras clínicas se determinó la presencia de genes codificantes de factores de virulencia (FV) y bacteriocinas en Enterococcus faecalis aislados desde infecciones del tracto urinario (ITU), bacteriemias y endodontitis, correlacionándose con la actividad hemolisina y gelatinasa. En 150 cepas de E. faecalis fue evaluada mediante RPC la presencia de cylA, aggA, efaA, eep, gelE, esp, as-48, bac31, entL50A/B, entA, entP, entB, enlA, y ent1071 determinándose actividad hemolisina y gelatinasa. Los genes cylA y gelE expresaron hemolisina y gelatinasa, respectivamente. Esta actividad fue observada en algunas de las cepas causantes de bacteriemia, ITU y endodontitis. El mayor número de genes estudiados se detectó en cepas bacteriémicas. Los genes aggA y entA, fueron los más frecuentes. Los genes efaA, esp, entL50/AB y entA se asociaron a su origen clínico (p < 0,05). El perfil genético más recurrente fue aggA-eep-enlA-entL50A/B. Enterococcusfaecalis de ITU, bacteriemias y endodontitis presentaron distintas combinaciones génicas. AAlgunos de los genes estudiados se relacionaron con su origen clínico. Los resultados obtenidos son similares a los reportados en otros países.

Interações entre bactérias láticas produtoras de bacteriocinas e a microbiota autóctone de charque / Interactions between bacteriocin-producing lactic acid bacteria and the autochthonous microbiota from charqui

O charque é um produto cárneo tipicamente brasileiro, salgado e seco ao sol, ainda produzido de maneira artesanal. Durante sua produção há uma etapa de fermentação, realizada pela microbiota naturalmente presente na matéria-prima, o que dificulta a padronização do produto, e pode influenciar negativamente em suas características sensoriais e qualidade microbiológica. O controle da etapa de fermentação do charque seria uma alternativa para minimizar este problema e, neste contexto, as bactérias láticas produtoras de bacteriocinas se enquadram de forma interessante. A microbiota autóctone de charque inclui principalmente bactérias láticas e micro-organismos halofílicos e halotolerantes, sendo assim, este produto apresenta potencial como fonte para o isolamento de novas bactérias láticas produtoras de bacteriocinas. Assim, este trabalho teve por objetivo isolar e identificar culturas de bactérias láticas produtoras de bacteriocinas naturalmente presentes no charque, caracterizar parcialmente as bacteriocinas produzidas por essas culturas, avaliar seu potencial de aplicação neste produto para a melhoria de sua qualidade microbiológica e avaliar seu efeito na ecologia microbiana do charque, nas diferentes etapas de sua fabricação. Através da técnica de tripla camada em ágar foi isolada uma cepa de Lactococcus lactis subsp. lactis apresentando o gene codificador para nisina Z e com capacidade de inibir, in vitro, micro-organismos medianamente e altamente halotolerantes isolados de charque, além de outros micro-organismos deteriorantes e patogênicos importantes em alimentos, como Lactobacillus spp., Listeria monocytogenes e Staphylococcus aureus. A bacteriocina produzida pela cepa isolada neste estudo também possui características interessantes para sua aplicação na bioconservação de alimentos, como resistencia ao calor, presença de agente químicos e altos teores de NaCl, além de não ser afetada pelo pH. A aplicação dessa cepa em charque modelo resultou na redução de até 2 ciclos log na população de micro-organismos halotolerantes, indicando apresentar um potencial de aplicação como agente de bioconservação do produto. Os ensaios de avaliação da ecologia microbiana, empregando DGGE, indicaram que a fermentação natural do charque ocorreu com a participação de bactérias láticas dos gêneros Lactobacillus, Streptococcus, Lactococcus e de micro-organismos halotolerantes do gênero Staphylococcus. Além disso, os estudos referentes à dinâmica populacional demonstraram que a adição da cepa bacteriocinogênica ao charque não influenciou, de forma qualitativa, as populações presentes no produto

Charqui is a Brazilian traditional meat product, salted and sun-dried, still manufactured without control of the fermentation step, which is performed by the indigenous microbiota. This fact interferes on the standardization of the product and can negatively affect the sensorial properties and microbiological quality. The application of a known microbiota would be an alternative to minimize this problem and the bacteriocin-producing lactic acid bacteria can can fit in this purpose. The charqui indigenous microbiota mainly includes lactic acid bactéria and halophilic and halotolerant microorganisms, therefore, this product presents a potencial as a source for the isolation of new bacteriocin-producing lactic acid bacteria. The aim of the present work was to isolate and identify bacteriocin-producing lactic acid bacteria from charqui, characterize the bacteriocins produced by the isolated culture, evaluate its potential as biopreservative in charqui and its influence on the microbial populations during the manufacture of the product. A bacteriocinogenic Lactococcus lactis subsp. lactis strain was isolated from charqui through the triple-layer agar technique. This strain produces a nisin-like bacteriocin capable to inhibit in vitro medium and highly halotolerant bacteria isolated from charqui and other food-borne pathogenic and spoilage microorganisms. The application of this strain for charqui manufacturing caused a reduction of up to 2 log in the halotolerant bacteria population, evidencing its potential application for charqui biopreservation. Studies in the populational dynamics using DGGE indicated that the presence of the bacteriocinogenic strain did not affect the microbial populations in the product

Actividad antagonista de bacterias lácticas aisladas del medio marino contra cepas de Listeria / Antagonistic activity of lactic bacteria isolated from marine environment against Listeria strains / Atividade antagonista de bactérias lácticas isoladas do meio marinho contra cepas de Listeria

En el presente trabajo se estudiaron 74 bacterias lácticas para determinar su capacidad de inhibir el desarrollo de Listeria monocytogenes ATCC 7644 o L. innocua ATCC 33090. Dentro de las 7 que exhibieron actividad, 2 se seleccionaron para estudios complementarios y se identificaron por métodos fenotípicos y genotípicos como Enterococcus mundtii Tw 56 y Lactococcus lactis subsp. lactis Tw 34. Después de la neutralización con NaOH y tratamiento térmico (100 ºC y 121 ºC durante 5 min) la actividad antagonista del sobrenadante libre de células se mantuvo activa. El tratamiento con lisozima, lipasa y catalasa no afectó la actividad antimicrobiana. Sin embargo, la actividad enzimática de la tripsina suprimió la acción inhibitoria del sobrenadante, confirmando la naturaleza proteica del compuesto activo. En ambos casos, el título de la actividad antilisteria no se vio afectado luego de la inducción mediada por nisina o galactosa. La combinación de los sobrenadantes libres de células no exhibió antagonismo o sinergia. Las características bioquímicas y fisicoquímicas de los agentes antilisteria producidos por las cepas seleccionadas sugieren que pueden ser clasificadas como bacteriocinas tipo I o II. Se deben realizar estudios complementarios para determinar el uso potencial de las cepas seleccionadas como cultivos bioprotectores en el control de la seguridad alimentaria.

In the present work, 74 strains of lactic bacteria isolated from the marine environment were studied in order to determinate their ability to inhibit the growth of Listeria monocytogenes ATCC 7644 or L. innocua ATCC 33090. Among the 7 strains that exhibited some activity, 2 were selected for further studies and identified by phenotypic and genotypic methods as Enterococcus mundtii Tw 56 y Lactococcus lactis subsp. lactis Tw 34. After neutralization with NaOH and heat treatment (100 ºC and 121 ºC for 5 min) the antagonistic activity of cell-free supernatants of the two strains studied remained active. Treatment with lysozime, lipase and catalase did not affect the antimicrobial activity; however enzymatic activity of trypsin abolished the inhibitory action of the supernatant, confirming the proteinacious nature of the active compound. In both cases, the titre of antilisterial activity was not affected after nisin or galactose-mediated induction. The combination of cell-free supernatants of both strains did not display antagonism or synergy. The biochemical and physicochemical characteristics of antilisterial agents produced by the selected strains suggest that they can be classified as type I or II bacteriocins. Further studies will be adressed to determine the potential use of the selected strains as bioprotective cultures in food safety control.

No presente trabalho foram estudadas 74 bactérias lácticas para determinar sua capacidade de inibir o desenvolvimento de Listeria monocytogenes ATCC 7644 ou L. innocua ATCC 33090. Dentro das 7 que exibiram atividade, 2 foram selecionadas para estudos complementares e se identificaram por métodos fenotípicos e genotípicos como Enterococcus mundtii Tw 56 e Lactococcus lactis subsp. lactis Tw 34. Depois da neutralização com NaOH e tratamento térmico (100 ºC e 121 ºC durante 5 min) a atividade antagonista do sobrenadante livre de células se manteve ativa. O tratamento com lisozima, lipase e catalase não afetou a atividade antimicrobiana. Entretanto, a atividade enzimática da tripsina suprimiu a ação inibidora do sobrenadante, confirmando a natureza proteica do composto ativo. Em ambos os casos, o título da atividade antilisteria não se viu afetado depois da indução mediada por nisina ou galactose. A combinação dos sobrenadantes livres de células não exibiu antagonismo ou sinergia. As características bioquímicas e fisioquimicas dos agentes antilisteria produzidos pelas cepas selecionadas sugerem que podem ser classificadas como bacteriocinas tipo I ou II. Devem ser realizados estudos complementares para determinar o uso potencial das cepas selecionadas como culturas bioprotetoras no controle da segurança alimentar.

Ação de bacteriocinas de bactérias láticas no controle de Listeria monocytogenes e no aumento da vida de prateleira de mortadela fatiada / Use of bacteriocins from lactic acid bacteria in the control of Listeria monocytogenes and in the shelf life extension of sliced mortadella

As bacteriocinas são peptídeos antimicrobianos produzidos por algumas bactérias, que atuam como bio-conservantes e têm grande potencial de aplicação em produtos cárneos. Estudos mostram que as bacteriocinas de bactérias lácticas (BAL) a serem utilizadas em um determinado alimento são mais eficientes quando produzidas por bactérias lácticas isoladas do mesmo tipo de alimento. Este estudo objetivou obter novas BAL produtoras de bacteriocinas a partir de mortadela fatiada, caracterizar as bacteriocinas produzidas, obter a bacteriocina semi-purificada e verificar seu potencial de aplicação in vitro e in situ no controle de Listeria monocytogenes e na vida de prateleira (VDP) de mortadela fatiada. Foram obtidos 19 isolados de BAL comprovadamente produtoras de bacteriocinas, que foram avaliadas quanto ao espectro de ação frente a uma grande variedade de bactérias Gram positivas e Gram negativas, e estabilidade em diferentes pH. As que apresentaram melhor estabilidade e inibiram maior número de bactérias foram avaliadas quanto a estabilidade térmica e resistência a diferentes agentes químicos e concentrações de NaCl. As que apresentaram maior resistência foram submetidas a testes de otimização da produção da bacteriocina em diferentes combinações de tempo/temperatura. Com base nestes resultados, selecionou-se um isolado que identificado como Lactobacillus curvatus pelo sequenciamento do gene 16S e confirmado por reações de PCR com primers específicos. A bacteriocina produzida por este isolado foi submetida a uma purificação por extração ácida e aplicada em fatias de mortadela experimentalmente contaminadas com um pool de cepas de Listeria monocytogenes, observando-se as contagens deste patógeno durante o armazenamento em refrigeração (7°C) por 40 dias em embalagem à vácuo. Paralelamente, foi realizada contagem de bactérias láticas para avaliar o efeito da bacteriocina nesta população, responsável pela VDP deste produto. A bacteriocina parcialmente purificada foi ...

Bacteriocins are peptides with antimicrobial properties produced by some bacteria, that act as bio-preservatives with great potential of application in meat products. Several studies show that bacteriocins from lactic acid bacteria (LAB) to be used in a specific food product have a better performance when produced by LAB isolated from the same kind of product. This study aimed to obtain new bacteriocinogenic LAB from sliced Bologna, to characterize the bacteriocins produced, to obtain a semi-purified bacteriocin, and to verify its potential of application in vitro and in situ in the control of Listeria monocytogenes and in the shelf-life of sliced bologna. 19 bacteriocin producer LAB, were evaluated as to spectrum of action against a great variety of Gram positives and Gram negatives bacteria and pH stability. The ones with better stability and that inhibited a larger number of bacteria were evaluated according to its thermal stability and resistance against different chemical agents and NaCl concentrations. The ones that showed better resistance were submitted to tests to optimize the bacteriocin production in different combinations of time and temperature. Based on these results, one was selected, identified as Lactobacillus curvatus by gene 16S sequencing and confirmed by PCR reactions with specific primers. The bacteriocin produced by this strain was submitted to partial purification by acid extraction and was applied in mortadella slices experimentally contaminated with a pool of L. monocytogenes strains, observing the counts of this pathogen along refrigerated (7ºC) storage fo r 40 days in vacuum package. Parallel, it was done LAB counts to evaluate the effect of the bacteriocin on this population, responsible for limiting the shelf life of this product. The semi-purified bacteriocin was able to reduce 1 log cicle of the initial population of L. monocytogenes in the sliced mortadella, which was maintained during the 40 days of analysis. Along the whole...

Comparative antimicrobial activity of two new mutacins / Actividad microbiana comparativa de dos nuevas mutacinas

OBJECTIVES: To compare the in vitro activity of mutacins D-123.1 and F-59.1 against different bacteria including antibiotic-resistant strains, in order to evaluate their application potential. DESIGN AND METHODS: The antibacterial activity spectrum of purified F-59.1 and the MIC and MBC of F-59.1 and D-123.1 against target bacteria were determined. RESULTS: Most bacteria were inhibited by the purified mutacins. Mutacin F-59.1 shows a relatively wide activity spectrum. Mutacin D-123.1 has low Minimum Inhibitory Concentrations [MICs] (0.25-4 µ/ml) against human pathogens while F-59.1 has higher MICs (3.2-12.8 fig/ml) mainly against food-borne pathogens. CONCLUSION: The effectiveness of mutacins D-123.1 and F-59.1 against human and food-borne pathogens is demonstrated. Mutacin D-123.1 shows potential as a new antibiotic while F-59.1 shows promising application in food products. ABBREVIATIONS: MALDI-TOF MS, matrix assisted laser desorption ionisation-time of flight mass spectrometry; MB(I)C, minimum bactericidal (inhibitory) concentrations; OD, optical density; RP-HPLC, reverse-phase high-pressure liquid chromatography; TSBYE, trypticase soy broth yeast extract.

OBJETIVOS: Comparar la actividad in vitro de las mutacinas D-123.1 y F-59.1 frente a diferentes bacterias incluyendo las cepas resistentes a los antibióticos, a fin de evaluar el potencial de su aplicación. DISEÑO Y MÉTODOS: Se determinó el espectro de actividad antibacteriana de F-59.1 purificada y la CIM y la CBM de F-59.1 y D-123.1 frente a determinadas bacterias. RESULTADOS: La mayor parte de las bacterias eran inhibidas por las mutacinas purificadas. La mutacina F-59.1 muestra un espectro de actividad relativamente amplio. La mutacina D-123.1 posee bajas concentraciones de inhibición mínimas [CIM] (0.25-4 fig/ml) contra los patógenos humanos, mientras que el F-59.1 posee concentraciones CIM más altas (3.2-12.8 fig/ml) principalmente frente a los patógenos alimentarios. CONCLUSIÓN: Queda demostrada la efectividad de las mutacinas D-123.1 y F-59.1 frente a los patógenos humanos y alimentarios. La mutacina D-123.1 muestra poseer un potencial como nuevo antibiótico, en tanto que F-59.1 se presenta como una aplicación promisoria en relación con los productos alimentarios. ABREVIATURAS: MALDI-TOF MS, espectrometría de masas con desorción/ionización mediante láser asistida por matriz asociada a un analizador de tiempo de vuelo (del inglés: matrix assisted laser desorption ionisation-time de flight mass spectrometry). CIM: concentración inhibitoria mínima (inglés MIC). CBM: concentración bactericida mínima (inglés MBC). DO: densidad óptica (inglés OD); RP-HPLC: cromatografía líquida de alta resolución en fase revertida; TSBYE:caldo tripticasa soya- extracto de levadura.

Evaluación higiénico-sanitaria y acción antagónica de cepas de lactobacilos comerciales frente a microorganismos patógenos (escherichia coli) presentes en el queso de capa del municipio de mompox / Higienic-sanitary evaluation and antagonistic action of strains of commercial lactobacillus in front to the pathogen microorganism (escherichia coli ) present in the cheese of layer of the municipality of mompox

El objetivo de este trabajo fue evaluar la calidad higiénica del queso de capa del municipio de Mompóx en el departamento de Bolívar, Colombia y la capacidad bactericida de Lactobacillus spp aislados de un producto comercial (yogurt). Se tomaron 16 muestras de 200 g en cuatro sitios de fabricación del queso de capa, entre abril y noviembre del 2006; fueron empacadas en bolsas estériles y trasladadas en nevera de icopor con hielo hasta el laboratorio de Microbiología de Alimentos de la Universidad de Cartagena, allí se evaluó la carga microbiana de mesófilos aerobios, coliformes totales, coliformes fecales, E. coli y Salmonella. Este estudio arrojó un promedio de mesófilos aerobios 1,5×10(8), de coliformes totales 2,5×10³; se confirmó la presencia de E. coli y la ausencia de Salmonella, así como de cepas ácido lácticas en las muestras estudiadas. En general, los recuentos microbiológicos sobrepasan los valores establecidos por la legislación colombiana. Por otro lado, la evaluación de actividad antagónica de Lactobacillus comerciales fue demostrada frente a las cepas de E. coli aisladas.

The aim of this study was to assess the hygienic quality of the cheese layer in the Mompox Municipality in the Department of Bolivar, Colombia, and the bactericidal capacity of the Lactobacillus spp isolated from a commercial product (yogurt). Sixteen cheese layer samples of 200g each were taken from four manufacturing sites between April and November of 2006, the samples were packed in sterile bags and transported with ice in polystyrene to the laboratory of food Microbiology at the University of Cartagena, the university assessed the microbial of aerobic mesophiles total coliforms, fecal coliforms, E. coli and salmonella. This study threw an average of aerobic mesophiles 1.5×10(8), of total coliforms 2.5×10³; confirmed the presence of E. coli and the absence of Salmonella, as well as strains of lactic acid in the samples studied. In general, microbial counts exceed the levels established by Colombian legislation. Furthermore, assessment of antagonistic activity of commercial Lactobacillus was demonstrated against isolated strains of E. coli.

Pesquisa de substâncias antagonistas tipo bacteriocinas produzidas por amostras de Staphylococcus aureus meticilina resistentes isoladas de pacientes inter-nados no Hospital Regional do Município de Barbacena, Minas Gerais / Research of antagonist substances bacteriocins produced by samples of methicillin-resistant staphylococcus aureus isolated from patients admitted to Regional Hospital of Barbacena-City, Minas Gerais

Objetivos: detectar a produção de bacteriocinas, determinar a suscetibilidade das amostras coletadas a essas substãncias e estabelecer possível correlação entre bacteriocinas e sua ação antimicrobiana. Métodos: foram coletadas 14 amostras isoladas de processos infecciosos causados por cepas de Staphylococcus aureus/Meticilina resistentes (MRSA),de pacientes do município de Barbacena-MG. Essas amostras foram previamente identificadas, caracterizadas com o MRSA , preservadas à temperatura de -80ºC em freezer, em meio apropriado de manutenção com crioprotetores, skim-milke, e submetidas a testes no laboratório. Resultados: foram realizados 196 testes, sendo que 100 por cento das amostras testadas mostraram -se produtoras de bacteriocinas. As cepas MRSAs eram, em 71,4 por cento dos casos, sensíveis à ação de bacteriocinas produzidas pelas bactérias testadas, tendo o seu crescimento inibido. O fenômeno de autoantagonismo foi também observado em 57,1 por cento das bactérias estudadas. Conclusão: os resultados demonstraram o alto potencial antimicrobiano das MRSAs isoladas. O autoantagonismo exerce marcante papel na manutenção do equilíbrio entre as com unidades microbianas que constituem a flora humana normal. Diante do aumento e da rápida disseminação de bactérias patógenas multirresistentes, encontradas em ambientes hospitalares e na comunidade, as bacteriocinas estudadas poderiam oferecer solução alternativa na terapêutica de infecções envolvendo esses patógenos.

Evaluación de bacteriocinas como medio protector para la biopreservación de la carne bajo refrigeración / Evaluation of bacteriocines as protective means for the biopreservation of refrigerated meat

The objective was to evaluate shelf-life extension of fresh beef meat applying crude extract of bacteriocines produced by a native strain of Lactobacillus plantarum LPBM10. Fillets of rib (longissimus dorsi) were stocked during 12 days at 3° C and analyzed by means of microbiology analysis, pH, texture, weight loss and sensorial. Significant differences were found among treatments for psychrotrophics and fecal coliforms, being better the treatment with crude bacteriocin extract that had germicide effect. Fecal coliforms were inhibited by the crude bacteriocin extract during most of the period. The mesophilic count didn’t present difference among treatments. The pH changes and the weight loss present statistical variations among treatments and between days. Cutting force diminished during storage time in all treatments improving meat tenderness without presenting significant difference. The appearance, color and aroma diminished the acceptance value as the storage time advanced.

El objetivo del presente trabajo fue evaluar la extensión de la vida útil de carne refrigerada mediante la aplicación de extracto crudo de bacteriocinas producido por Lactobacillus plantarum LPBM10. Se utilizaron filetes de solomo redondo (longissimus dorsi) almacenados durante 12 días a 3º C y analizados por medio de análisis microbiológicos, pH, textura, pérdidas de peso y sensoriales. Se encontraron diferencias significativas entre los tratamientos para psicrotrófilos y coliformes totales, resultando mejor el tratamiento con extracto crudo de bacteriocinas que tuvo efecto bactericida. Los coliformes fecales también fueron inhibidos por el extracto crudo de bacteriocinas. Los cambios de pH y pérdida de peso presentan variaciones estadísticas entre tratamientos y entre días. La fuerza de corte disminuyó durante el tiempo de almacenamiento en todos los tratamientos mejorando la terneza de la carne sin presentar diferencia significativa. La apariencia, color y aroma disminuyeron el valor de aceptación a medida que avanzo el tiempo.

Atividade antimicrobiana de bactérias lácticas isoladas de queijo de baixa umidade frente a Staphylococcus aureus ATCC6538 e Listeria monocytogenes ATCC7644 / Antimicrobial activity of lactic acid bacteria isolated from cheese, low moisture against Staphylococcus aureus ATCC6538 and Listeria monocytogenes ATCC7644

Há uma crescente preocupação na indústria de alimentos com o desenvolvimento de métodos para o controle de microrganismos indesejáveis na tentativa de satisfazer os consumidores que estão mais exigentes e atentos aos conservadores contidos nos alimentos. As bactérias láticas (BAL) despertam interesse devido ao seu potencial de utilização no biocontrole em alimentos, pois podem exercer atividade inibitória frente a outras bactérias. No presente trabalho o isolamento de BAL foi realizado em 60 amostras de queijo de baixa umidade. Das 66 linhagens isoladas, 10 foram identificadas baseando-se na coloração de Gran, reação com KOH, teste de catalase e fermentação de 49 carboidratos (API 50 CH). (...)

Utilización de sustancias antimicrobianas producidas por bacterias acido lácticas en la conservación de la carne / Use of antimicrobian substances produced by acid lactic bacterias on meat conservation

The use of lactic acid bacteria (LAB) for food bio-preservation has taken great importance nowadays due to its capacity for controlling pathogenic and spoilage microorganisms. Application of bi-o preservative strains as well as extracts and metabolites produced by them have demonstrated to control diverse undesirable microorganisms improving the enlargement of foods shelf-life and safety against bacteria that can affect the consumerís health. This review involves aspects of food bio-preservation and specifically of meat and meat products susceptible of alterations and attacks of diverse microorganisms. Bio-preservation methodologies of common use in foods are detailed as well as more outstanding aspects of metabolites produced by LAB, making special emphasis on bacteriocins, antimicrobial substances that have demonstrated its effectiveness to control diverse microorganisms and have had successful application on foods. The use of bio-preservation is revised, considered as a technology barrier that combined with other conservation methods like refrigeration and joint to good manufacturing practices can be an interesting option to diminish the addition of chemical preservatives, providing safe foods naturally preserved.

El uso de bacterias ácido lácticas (BAL) en la biopreservación de alimentos ha tomado gran importancia en los últimos años debido a la capacidad para controlar microorganismos patógenos y alterantes. La aplicación de cepas biopreservantes así como de los extractos y metabolitos producidos por ellas, han demostrado tener control sobre diversos microorganismos no deseados consiguiendo alargar la vida útil de los alimentos y dar seguridad contra bacterias que puedan afectar la salud del consumidor. En esta revisión se abarca aspectos de la biopreservación en alimentos y específicamente en carne y productos cárnicos, susceptibles de alteración y ataques de diversos microorganismos. Se detallan las metodologías de biopreservación más comunes utilizadas en alimentos, así como aspectos mas relevantes de los metabolitos producidos por las bacterias ácido lácticas, haciendo especial énfasis en las bacteriocinas que son sustancias antimicrobianas que han demostrado ser eficaces en el control de diversos microorganismos y han tenido exitosa aplicación a los alimentos. Se revisa el uso de la biopreservación considerado como una tecnología de barrera que combinado con otros métodos de conservación como la refrigeración y ligado a Buenas Prácticas de Manufactura pueden ser una opción interesante para disminuir la adición de preservantes químicos, proporcionando alimentos seguros preservados naturalmente.

Caracterizaciónppreliminar de compuestos antiliteriales producidos por bacteriias ácido lácticas nativas / Partialcharacterrization of antilisterial compounds prouced by native lactic acid bacteria

Objetivo. Caracterizar los metabolitos producidos por bacterias ácido lácticas nativas con capacidad antilisterial. Materiales y métodos. Se analizaron 42 muestras tomadas de alimentos y equipos procesadores de alimentos, de donde se aislaron bacterias ácido lácticas, las cuales se identificaron por medio de pruebas bioquímicas. Se evaluó la actividad antagónica de las cepas aisladas frente a 17 cepas de L. monocytogenes pertenecientes a los serotipos 4b, 4e, y 3b utilizando la técnica de la gota y doble capa. Se obtuvieron extractos crudos para la caracterización de los metabolitos inhibitorios del crecimiento de las cepas de L. monocytogenes, los cuales fueron tratados con catalasa, ácido clorhídrico, proteinasa K y temperaturas de 95°C y 121°C. El peso molecular de las proteínas se aproximó utilizando la técnica de electroforesis SDS-PAGE y bioensayos. Resultados. De un total de 250 aislamientos se lograron identificar 75 cepas de bacterias ácido lácticas. La evaluación de la actividad antagónica indicó que los metabolitos inhibitorios producidos por las bacterias ácido lácticas no actuaban de igual manera frente a las diferentes cepas de L. monocytogenes. Sin embargo, se encontró que tres de los aislamientos nativos identificados como Lactobacillus spp., Leuconostoc spp. y Enterococcus spp. presentaban una mejor actividad antilisterial debido a que sintetizan proteínas o metabolitos de peso molecular menor a 7600 Da. Conclusiones. En los alimentos distribuidos en Colombia existen cepas de bacterias ácido lácticas con potencial bioprotector.

Objective. Characterization of antilisterial compounds produced by native lactic acid bacteria. Materials and methods. Lactic acid bacteria (LAB) were isolated from 42 samples collected from foods and food processing equipment. Identification of LAB species was assessed by biochemical reactions. The antilisterial activities of the isolates were tested against 17 L. monocytogenes strains belonging to 4b, 4e and 3b serotypes, by the agar differed spot on the lawn technique. Crude extracts were subjected to catalase, proteinase K, hydrochloric acid and high temperature (95°C and 121°C) treatments in order to characterize the antilisterial compounds. The molecular weights were estimated by SDS-PAGE and bioassays were performed. Results. Seventy five strains were identified out of 250 lactic acid bacteria isolates. The inhibitory compounds produced by LAB displayed dissimilar activities against the different L. monocytogenes strains. Furthermore, three native isolates identified as Lactobacillus spp., Leuconostoc spp. and Enterococcus spp. showed improved antilisterial effect due to the production of compounds with molecular weight below 7600 Da. Conclusions. We demonstrated the presence of native lactic acid bacteria with potential as biocontrolers in foods distributed in Colombia.

Calidad físico-química y atributos sensoriales de filetes sajados biopreservados los de cachama empacados al vacío bajo refrigeración / Qualidade físico-química e atributos sensoriais de filetes bio-preservados na Cachama vácuo-embalados sob refrigeração / Physical-chemical quality and sensory attributes of cut bio-preserved cachama fillets vacuum packaging under refrigeration

Las alteraciones fisicoquímicas y sensoriales fueron evaluadas en filetes sajados de híbrido de cachama (Piaractus brachypomus x Colossoma macropomum), biopreservados con un extracto crudo de bacteriocinas producidas por Lactobacillus plantarum LPBM10, empacados al vacío y almacenados a 3 ºC/30 días. La evaluación serealizó bajo tres tratamientos, extracto crudo de bacteriocinas, ácido láctico y control.Los valores de pH disminuyeron a lo largo del periodo de almacenamiento alcanzand1 o valores de 6.20 para el final del periodo. El valor inicial del acido tiobarbitúrico (TBA) para los filetes fue de 0.93 mg de malonaldehido/kg, hacia el día 10 de almacenamiento se obtuvieron los valores más altos de TBA. Para este periodo el mayor valor fue alcanzado para el tratamiento con ácido láctico y el menor para el tratamiento control.El análisis de bases volátiles totales de nitrógeno (BVT-N) mostró los mejores resultados para el tratamiento con extracto crudo de bacteriocinas y finalizó con 19.3 mg BVT8N/100g. Los resultados del análisis sensorial para filetes sajados en estado fresco y cocinado, presentaron las mejores puntuaciones de aceptabilidad para el tratamiento con extracto crudo de bacteriocinas.

Biopreservatives for a native strain bacteriocin producer were evaluated on fillets of hybrid Cachama. A raw extract of Lactobacillus plantarum LPBM10-bacteriocin was added to fillets of cachama hybrids (Piaractus brachypomus x Colossoma macropomum)°vaccum-packed and stored at 30 °C/30 days. The evaluation was performed with three treatments, crude bacteriocin extract, lactic acid and control. The pH values decrease throughout storage period levels 6.20 at the end of the period. The initial value of thiobarbituric acid (TBA) for the fillets was 0.93 mg of malonaldehyde/kg, the highest values in physicochemical and sensory changes were evaluated to cachama hybrid fillets Piaractus brachypomus x Colossoma macropomum biopreserved with a crude bacteriocin extract produced by Lactobacillus plantarum LPBM10, vacuum-packed and stored at 30 ºC/30 days. The evaluation of TBA was obtained up the day 10 of storage. For this period the lactic acid treatment reached the highest value and the lower were observed for the control treatment. The analysis of TVB-N showed the best results for bacteriocin treatment and concluded with 19.3 mg TVB-N/100g. The results of sensory analysis for fresh and cooked cut fillets showed the best acceptability scores for the crude bacteriocin extract treatment.

As perturbações físicas e sensoriais foram avaliadas em filetes Sajid de híbridos de cachama (Piaractus brachypomus x Colossoma macropomum), biopreservados com um extrato bruto de bacteriocinas produzidas por Lactobacillus plantarum LPBM10, vácuo-embaladas e armazenadas em 3 ºC/30 dias. A avaliação foi conduzida sob três tratamentos, extrato bruto de bacteriocinas, ácido láctico e de controlo. O pH diminuiu ao longo do período de armazenagem atingindo valores de 6.20 no final do período. O valor inicial no ácido thiobarbiturico (TBA) foi para os filetes de estresse oxidativo 0.93 mg/kg a 10 dias de armazenamento foram os maiores valores de TBA. Para este período, o valor mais elevado foi atingido por tratamento com ácido láctico e os mais baixos para o tratamento controle. A análise de aminas voláteis de nitrogênio (N-BVT) apresentou os melhores resultados para o tratamento com extrato bruto de bacteriocinas e terminou com 19.3 mg BVT-N/100g. Os resultados da análise sensorial para filetes Sajid como frescos e cozidos, teve a melhor pontuação para a aceitação do tratamento com extrato bruto de bacteriocinas.

Enterococos em amostras de alimentos e águas: avaliação da virulência e do desempenho como indicadores de higiene / Enterococci in samples of food and water: evaluation of their virulence markers and their suitability as hygiene indicators

Enterococcus spp. pertencem ao grupo das bactérias láticas e estão presentes em solos, águas, plantas, microbiota autóctone de vários alimentos e como membros da microbiota intestinal de humanos e animais. Esses microrganismos foram considerados por muito tempo como comensais, mas o aumento da severidade das infecções nosocomiais causadas por enterococos mutirresistentes a antimicrobianos e, a falta de conhecimento sobre seus fatores de virulência geram insegurança na utilização de cepas deste gênero na produção de alimentos como culturas fermentadoras e/ou probióticas. A diferença entre uma cepa de enterococos com potencial patogênico e outra aparentemente segura para uso em processamento de alimentos não é clara, e a probabilidade de que esta última adquira fatores de virulência merece investigação. O objetivo do presente projeto foi determinar características fenotípicas e genotípicas de Enterococcus spp. isolados de amostras de alimentos e águas correlacionando sua presença com indicadores clássicos de higiene e contaminação fecal. De 812 colônias indicativas do gênero enterococos obtidas a partir de 120 amostras de alimentos, 299 isolados (37%) foram presuntivamente caracterizados como Enterococcus spp. Após identificação por PCR, 139 (46,5%) E. faecium, 80 (26,8%) E. faecalis, 36 (12%) E. casseliflavus e 8 (2,7%) E. gallinarum. Produção de gelatinase foi detectada apenas em isolados de E. faecalis (60%). Um isolado de E. faecium (0,7%) e 31 isolados de E. faecalis (38,7%) apresentaram perfil ß-hemolítico. Produção de bacteriocina contra Lactobacillus sakei e/ou Listeria monocytogenes foi observada para 10% dos isolados de E. faecalis e 23% dos isolados de E. faecium. Hidrólise de sais biliares foi observada para 100% dos isolados de E. gallinarum, 86% E. casseliflavus, 65% E. faecalis e 62,6% de E. faecium. Alguns isolados de E. faecium apresentaram resistência à vancomicina, eritromicina e tetraciclina. Entre os isolados de E. faecalis não houve resistência à vancomicina, mas foi observada resistência à tetraciclina, eritromicina e alta concentração de gentamicina. Houve uma maior prevalência dos genes de virulência (esp, gel, ace, as, efaA e cylA) entre os isolados de E. faecalis quando comparado a E. faecium. Além disso, os isolados de E. faecalis, resistentes a antibióticos, mostraram forte adesão a células Caco-2 e capacidade de formação de biofilme em superfície abiótica. RAPD-PCR individualizou 14 cepas de E. faecium e 17 cepas de E. faecalis dentre os 52 isolados Enterococcus spp. resistentes a antibióticos. A variabilidade dos resultados impediu o estabelecimento de uma correlação entre a presença ou contagem de coliformes, E. coli e enterococos nas amostras analisadas. Os dados deste trabalho sobre marcadores fenotípicos e genotípicos de virulência, e a presença de cepas resistentes a antibióticos evidenciam a necessidade da avaliação cuidadosa de linhagens de enterococos para aplicações em alimentos

Enterococcus spp. belong to the group of lactic acid bacteria widely distributed in soil, plants, foods, animals and humans. In the past, these microorganisms were considered commensals but the increase of antibiotic-resistant enterococci and the lack of knowledge about their virulence markers, had raised concerns regarding the safety of using strains of this genus in the food production as fermentative or probiotic cultures. Besides this, literature data suggests the use of enterococci as sanitary indicator for foods. Differences between enterococci strains with pathogenic potential and an apparently safe ones is unclear and there is a concern about virulence markers transfer. The aim of this work was to determine phenotypic and genotypic characteristics of Enterococcus spp. isolated from foods and water and also to correlate their presence with classical indicators of sanitary quality. Out of 812 presumptive enterococci colonies obtained from 120 food samples, 299 isolates (37%) were presuntively characterized as Enterococcus spp. Isolates were identified by PCR: 139 (46.5%) E. faecium, 80 (26.8%) E. faecalis, 36 (12.0%) E. casseliflavus and 8 (2.7%) E. gallinarum. Only E. faecalis isolates (60%) produced gelatinase. One E. faecium (0.7%) and 31 E. faecalis (38.7%) were ß-haemolytic. Bacteriocin activity against Lactobacillus sakei and/or Listeria monocytogenes was observed for 10% of the E. faecalis and for 23% of the E. faecium isolates. All E. gallinarum isolates, 86% of the E. casseliflavus, 65% of the E. faecalis and 62.6% of the E. faecium isolates showed bile salt hydrolysis activity. Some E. faecium isolates were resistant to vancomycin, erythromycin and tetracycline. Vancomycin resistance was absent among the E. faecalis but, resistance to tetracycline, erythromycin and highlevel gentamicin was observed. There was a higher prevalence of virulence genes (esp, gel, ace, as, efaA e cylA) among the E. faecalis isolates when compared to the E. faecium. Antibiotic resistant E. faecalis isolates strongly adhered to Caco-2 cells and formed biofilm on abiotic surface. Using RAPDPCR 14 E. faecium and 17 E. faecalis strains could be individualized from the 52 antibiotic resistant enterococci. It was not possible to correlate the presence of total coliforms, E. coli and Enterococcus spp. in the samples of food and water analysed due to results variability. Data obtained regarding phenotypic and genotypic virulence markers and the presence of antibiotic resistant enterococci raise the needs of a carefully evaluation of the Enterococcus spp. strains before future applications in foods

Bacteria of fecal origin in mangrove oysters (Crassostrea rhizophorae) in the Cocó River estuary, Ceará State, Brazil

This study was aimed at evaluating the microbiological quality of mangrove oysters (Crassostrea rhizophorae), collected at a natural oyster bed in the estuary of Cocó river (Fortaleza, Ceará, Brazil). MPN values were used for estimating the total (TC) and fecal (FC) coliforms and Enterococcus spp. TC and FC MPN values in the whole muscle and intervalve liquid ranged from 1.8 to >1,600/g and from 1.8 to 920/g, respectively. The MPN estimates for Enterococcus spp. were between 3.0 and >1,100/g. No correlation was found between the physico-chemical parameters (temperature, salinity and pH) of the surrounding water and the bacteriological contamination levels found in the tested oysters. The only correlation found was between TC and FC values. Enterococcus spp. strains were isolated and subjected to biochemical tests for species identification. The capacity of those strains for production of a bacteriocin-like inhibitory substance was tested using the Escherichia coli strain ATCC 25922 as a testing organism. Only one, E. faecalis, out of 121 Enterococcus strains tested, presented the inhibitory activity.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade microbiológica da ostra de mangue (Crassostrea rhizophorae) originária de um criadouro natural no estuário do Rio Cocó, Fortaleza, Ceará, Brasil. Para isso, foram realizadas as estimativas do Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais (CT) e de Fecais (CF) e de Enterococcus spp. Os valores encontrados para CT e CF no músculo (com líquido intervalvar) variaram de 1,8 a >1.600 e 1,8 a 920 por grama, respectivamente. O valor do NMP de Enterococcus spp. variou de 3,0 a >1.100/g. Não houve correlação entre os parâmetros físico-químicos (temperatura, salinidade e pH) da água na área do criadouro e os níveis de contaminação encontrados nas ostras. Somente houve correlação entre os valores de CT e CF. Cepas de Enterococcus spp. foram isoladas e submetidas a testes bioquímicos para identificação das espécies e, posteriormente, foram testadas para verificar a produção de substância inibitória semelhante à bacteriocina utilizando a cepa-teste Escherichia coli ATCC 25922. De um total de 121 cepas de Enterococcus spp. testadas apenas uma, E. faecalis, apresentou atividade inibitória.