Ceftaroline resistance in Staphylococcus pseudintermedius gene mecA carriers / Resistência à ceftarolina em Staphylococcus pseudintermedius portadores do gene mecA

Infections caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) being a constant concern, ceftaroline fosamil has been recently approved as a new cephalosporin, active against MRSA, for use in humans; only rare cases of resistance have been reported till date. There is no report of resistance to ceftaroline in Staphylococcus pseudintermedius, which is the main bacterium causing dermatitis and otitis in dogs. To evaluate staphylococcal resistance to ceftaroline, 35 isolates of methicillin-resistant S. pseudintermedius (MRSP), carrying the mecA gene, from 26 dogs with folliculitis and nine dogs with external otitis, underwent disk diffusion test with cefoxitin, oxacillin, and ceftaroline. Tests with cefoxitin and oxacillin showed > 90% sensitivity in methicillin resistance detection. In the disk diffusion test, 97.14% (34/35) were resistant to cefoxitin, 94.29% (33/35) to oxacillin, and 31.43% (11/35) to ceftaroline. Of the ceftaroline-resistant strains, 27.27% (3/11) were obtained from the ears of dogs while the rest (8/11) were from the skin. The current report is the first description of MRSP resistance to ceftaroline.(AU)

Infecções causadas por Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) são uma preocupação médica constante. A ceftarolina fosamila é uma nova cefalosporina ativa contra Staphylococcus aureus resistente à meticilina recentemente aprovada para uso em humanos e raros casos de resistência relatados até agora. Não há relatos de resistência à ceftarolina em Staphylococcus pseudintermedius, principal bactéria causadora de dermatite e otite em cães. Com o objetivo de avaliar a resistência estafilocócica à ceftarolina, 35 amostras de S. pseudintermedius resistentes à meticilina (MRSP), portadoras do gene mecA, provenientes de 26 cães com foliculite e 9 com otite externa foram submetidos ao teste de disco-difusão com cefoxitina, oxacilina e ceftarolina. Os testes realizados com cefoxitina e oxacilina mostraram mais de 90% de sensibilidade na detecção da resistência à meticilina em ambas. No teste da disco-difusão, 97,14% (1/35) foram resistentes à cefoxitina, 94,29% (3/35) à oxacilina e 31,43% (11/35) à ceftarolina. Das cepas resistentes às ceftarolina, 27,27 (3/11) foram provenientes de ouvido de cães e as demais (8/11), provenientes da pele, sendo essa primeira descrição de resistência de MRSP à ceftarolina na literatura atual.(AU)

Staphylococcus aureus y estafilococo coagulasa negativa resistentes a la meticilina / Staphylococcus aureus and negative coagulase staphylococcus resistant to methicillin

Se realizó un estudio prospectivo de 47 cepas de estafilococo procedentes de muestras biológicas del Laboratorio de Microbiología del Hospital Provincial Docente Clinicoquirúrgico Saturnino Lora Torres de Santiago de Cuba, desde febrero hasta abril de 2017, con vistas a determinar la frecuencia de estafilococos resistentes a la meticilina. En la serie, el mayor número de los aislamientos correspondió a las muestras de secreciones y catéter; asimismo, los servicios con mayores aislamientos notificados fueron Ortopedia y Cirugía. Se observó una frecuencia elevada de cepas de Staphylococcus aureus y estafilococo coagulasa negativa, resistentes a meticilina

A prospective study of 47 staphylococcus stumps coming from biological samples of the Microbiology Laboratory in Saturnino Lora Torres Teaching Clinical Surgical Provincial Hospital was carried out in Santiago de Cuba, from February to April, 2017, aimed at determining the frequency of staphylococcus resistant to methicillin. In the series, the highest number of isolations corresponded to the samples of secretions and catheter; also, the services with more notified isolations were Orthopedics and Surgery. A high frequency of Staphylococcus aureus stumps and negative coagulase staphylococcus resistant to methicillin was observed

Study of variables involved in hospital-acquired urinary tract infections at a university hospital / Estudo de variáveis envolvidas em infecção do trato urinário nosocomiais em um hospital universitário

OBJECTIVE: Analyze bacteria involved in urinary tract nosocomial infections (UTIs), their sensitivity profile, and other correlated clinical variables. METHODS: This was a retrospective study, based on the analysis of positive urine culture reports (from100,000CFU/ml) for nosocomial infection covering the years 2009, 2010 and 2011, and on medical records. Statistical analysis was performed through SPSS 19.0 software, using chi-square tests with Yates correction and Pearson's correlation coefficient. p<0.05 was considered statistically significant. RESULTS: The sample consisted of 74 positive urine cultures, 64.9% of which from females, and 58.1% of which from patients above 50 years of age. Medical conditions accounted for 87.8% of cases, and nervous and gastrointestinal problems were the most prevalent. Hospital stay ranged from 56.7±35.7 days; 51.4% of the patients used indwelling urinary catheter, 54% of whom over a 30 day period. Klebsielle pneumoniae and Escherichia coli together accounted for 60.8% of cases. Amikacin, Gentamicin, Cefoxitin, Piperacillin-tazobactam, Imipem, Meropenem and Ertapenem showed ≥50% sensitivity. There were correlations between symptoms associated to UTI and antibiotic use after urine culture (p=0.02), and catheter use and duration of hospital stay (p=0.04). CONCLUSIONS: Female patients over 50 years of age with underlying clinical conditions originated in the nervous system or the gastrointestinal apparatus making use of indwelling urinary catheters for over 30 days and a hospital stay period of 56.7±35.7 days are more likely to develop nosocomial UTIs. Amikacin, Gentamycin and Cefoxitin are feasible options for empirical antibiotic therapy against the two most prevalent bacteria.

OBJETIVO: Analisar as bactérias envolvidas nas infecções do trato urinário (ITUs) nosocomiais, perfil de sensibilidade, e outras variáveis clínicas correlacionadas. MÉTODOS: Estudo retrospectivo, com base na análise dos laudos de urocultura positiva (a partir de 100 mil UFC/ml) para infecção nosocomial abrangendo os anos 2009, 2010 e 2011, em prontuários médicos. A análise estatística foi realizada no SPSS 19.0, utilizando os testes do qui-quadrado com correção de Yates e coeficiente de correlação de Pearson. Considerou-se estatisticamente significativo p<0,05. RESULTADOS: A amostra constitui-se de 74 uroculturas positivas, sendo 64,9% do sexo feminino, com 58,1% acima de 50 anos. As patologias clínicas corresponderam a 87,8% dos casos, sendo sistema nervoso e gastrointestinal os de maiores prevalências. Tempo de permanência hospitalar foi de 56,7±35,7 dias, 51,4% fizeram uso de SVD, sendo 54% destes com uso acima de 30 dias. As bactérias Klebsielle pneumoniae e Escherichia coli representaram juntas 60,8% dos casos. Os antibióticos Amicacina, Gentamicina, Cefoxitina, Piperaciclina-tazobactam, Imipem, Meropenem e Ertapenem apresentaram sensibilidade ≥50%. Houve correlação entre sintomas associados à ITU e uso de antibiótico após urocultura (p=0,02); tempo de uso de sonda e tempo de permanência hospitalar (p=0,04). CONCLUSÕES: Pacientes femininos com mais de 50 anos e doença de base clínica, de origem no sistema nervoso ou gastrointestinal, em uso de SVD por mais de 30 dias e tempo de permanência hospitalar de 56,7±35,7 dias, estão entre as mais propensas a desenvolverem ITU nosocomial. A Amicacina, Gentamicina e Cefoxitina apresentaram opções factíveis para a antibioticoterapia empírica as duas bactérias mais prevalentes.

Staphylococcus lugdunensis: um olhar diferenciado no laboratório clínico / Staphylococcus lugdunensis: a different view in the clinical laboratory

Os estafilococos coagulase negativos (ECNs) são cocos Gram-positivos usualmente considerados contaminantes em laboratórios de microbiologia clínica. Apesar de pertencer a este grupo, Staphylococcus lugdunensis pode causar infecções complicadas, como endocardites, infecções de pele e tecidos moles, osteomielites, entre outras. Além da formação de biofilmes, apresenta patogenicidade similar ao Staphylococcus aureus. É um dos principais agentes causadores de endocardites, com taxa de mortalidade de até 70 por cento. Pode ser confundido com S. aureus quando se utilizam testes rápidos para sua identificação, como a pesquisa de clumping factor, no caso de teste de coagulase em lâmina, ou em testes de aglutinação direta em látex. Pode ser facilmente identificado por meio de provas bioquímicas acessíveis, como a presença de atividade da ornitina descarboxilase e pirrolidonil arilamidase (PYR). Apresenta sensibilidade à maioria dos agentes antimicrobianos, devendo ser pesquisada rotineiramente a presença de betalactamases e do gene mecA por meio de testes com cefalosporina cromogênica e suscetibilidade à cefoxitina, respectivamente. Convém salientar que os critérios interpretativos utilizados para avaliar a sensibilidade à cefoxitina são os mesmos preconizados para S. aureus e diferentes dos utilizados para os outros ECNs. Apesar de incomum, o S. lugdunensis é um patógeno com acentuada virulência que deve ser corretamente identificado, pois raramente poderá ser considerado contaminante quando isolado de sítios estéreis.

Coagulase-negatives staphylococci (CNS) are Gram-positives cocci commonly regarded as contaminants in clinical microbiology laboratories. Despite belonging to this group, Staphylococcus lugdunensis may cause complicated infections such as endocarditis, skin infections and soft tissue, osteomyelitis, among others. Apart from the formation of biofilms, it has pathogenic features similar to Staphylococcus aureus. It may be mistakenly identified as S. aureus when using rapid identification tests, such as clumping factor in slide coagulase or in agglutination latex tests. It is easily identified through available biochemical tests, such as the presence of ornithine decarboxylase and pyrrolidonyl arylamidase (PYR). It presents sensitivity to most antimicrobial agents. Furthermore, the presence of beta-lactamase and mecA gene should be routinely investigated by testing with chromogenic cephalosporin and cefoxitin susceptibility, respectively. It is convenient to highlight that the interpretative criteria used to evaluate cefoxitin sensitivity are the same recommended for S. aureus and different from those used for other CNS. Despite the fact it is atypical, S. lugdunensis is a virulent pathogen, which must be accurately identified insofar as it will rarely be deemed as a contaminant when isolated from sterile sites.

Desenvolvimento e Caracterização de Nanopartículas de D, L-PLA contendo Cefoxitina / Development and Characterization of Cefoxitin Loaded D, L-PLA Nanoparticles

As nanopartículas de D, L-PLA (PLA) contendo cefoxitina (CEF) foram preparadas pelo método de emulsão múltipla / evaporação do solvente. As partículas foram avaliadas em relação à morfologia, à eficiência de encapsulação, às interações polímero-fármaco, bem como à cinética de liberação do fármaco in vitro . As nanopartículas são esféricas e isoladas, com um diâmetro médio de cerca de 600 nm. O comportamento térmico (DSC) das nanopartículas contendo CEF sugeriu que o fármaco está disperso em um nível molecular dentro do sistema. A eficiência de encapsulação do fármaco no sistema quando a concentração de CEF é 30 mg / mL foi de 5,5%, determinada após a extração de fármaco, através de um método de HPLC validado. Esta baixa eficiência de encapsulação é compreensível, uma vez que a CEF é altamente hidrofílica. Os ensaios in vitro mostraram um perfil de liberação do fármaco a partir das nanopartículas fortemente sustentado e com uma cinética de difusão Fickiana pura.

Nanoparticles containing cefoxitin (CEF) made of D,L-PLA (PLA) were designed by a multiple emulsion/solvent evaporation method. The particles were extensively evaluated in relation to morphology, encapsulation efficiency, drug-polymer interactions as well as in vitro drug release kinetics. Nanoparticles were spherical in shape and isolated, with a mean diameter of about 600 nm. The thermal behaviour (DSC) of CEF-containing nanoparticles suggested that the drug was dispersed at a molecular level within the system. The drug encapsulation efficiency in the system for a CEF concentration of 30 mg/mL was 5.5%, as assessed after the drug extraction, by a validated HPLC method. This low encapsulation efficiency is understandable, since CEF is highly hydrophilic. The in vitro assays showed a strong sustained drug release profile from the nanoparticles with kinetics following pure Fickian diffusion.

Bacteremias por Staphylococcus coagulase negativos oxacilina resistentes em um hospital escola na cidade de Santa Maria, Estado do Rio Grande do Sul / Oxacillin-resistant coagulase-negative Staphylococci bacteremia at a teaching hospital in Santa Maria, State of Rio Grande do Sul, Brazil

INTRODUÇÃO: Neste estudo, objetivou-se caracterizar a prevalência e o perfil de suscetibilidade de cepas de Staphylococcus coagulase negatives resistentes à oxacilina isoladas de culturas de sangue, em um hospital escola, localizado na Cidade de Santa Maria. Além disso, buscou-se comparar ao teste genotípico de referência, diferentes metodologias fenotípicas para a caracterização da resistência mediada pelo gene mecA. MÉTODOS: Após identificação (MicroScan® - Siemens), os isolados foram submetidos a testes de sensibilidade antimicrobiana a partir da difusão do disco e automação (MicroScan® - Siemens). A presença do gene mecA foi evidenciada através da técnica molecular de reação em cadeia da polimerase. RESULTADOS: A espécie prevalente foi Staphylococcus epidermidis (67 por cento). O gene mecA foi detectado em 90 por cento das cepas e conforme análise dos perfis de sensibilidade, observou-se um índice elevado de resistência a várias classes de antimicrobianos. Contudo, todos os isolados mostraram-se uniformemente sensíveis à vancomicina e tigeciclina. O disco de cefoxitina foi a metodologia fenotípica que melhor correlacionou-se com o padrão ouro. CONCLUSÕES: A análise da significância clínica de SCN isolados de hemoculturas e a detecção precisa da resistência à oxacilina representam fatores decisivos para a instituição correta da antibioticoterapia. Apesar da vancomicina constituir o tratamento usual na maioria dos hospitais brasileiros, tem a redução de seu emprego recomendada.

INTRODUCTION: This study aimed to characterize the prevalence and susceptibility profile to oxacillin-resistant Coagulase-negative Staphylococci strains isolated from blood cultures in a teaching hospital, located in Santa Maria, RS. In addition, different methodologies for phenotypic characterization of mecA-mediated oxacillin resistance were compared with genotypic reference testing. METHODS: After identification (MicroScan® - Siemens), the isolates were tested for antimicrobial sensitivity using disk diffusion and automation (MicroScan® - Siemens). The presence of mecA gene was identified by the polymerase chain reaction molecular technique. RESULTS: The most common species was Staphylococcus epidermidis (n=40, 67 percent). The mecA gene was detected in 54 (90 percent) strains, while analysis of the sensitivity profiles revealed a high rate of resistance to multiple classes of antimicrobial drugs. However, all isolates were uniformly sensitive to vancomycin and tigecycline. The cefoxitin disk was the phenotypic method that best correlated with the gold standard. CONCLUSIONS: Analysis of the clinical significance of CoNS isolated from hemocultures and the precise detection of oxacillin resistance represent decisive factors for the correct choice of antibiotic therapy. Although vancomycin constitutes the normal treatment in most Brazilian hospitals, reduction in its use is recommended.

Avaliação de métodos comumente usados em laboratórios para a determinação da suscetibilidade à oxacilina entre amostras de Staphylococcus sp, isoladas de um hospital de Vitória, Estado do Espírito Santo / Evaluation of methods commonly used in laboratories to determine the susceptibility to oxacillin among Staphylococcus sp samples isolated from a hospital in Vitória, State of Espírito Santo

INTRODUÇÃO: O gênero Staphylococcus é de grande importância devido a sua alta prevalência em infecções hospitalares e por apresentar taxas elevadas de resistência a oxacilina e a outros antimicrobianos. Assim, a avaliação da acurácia dos métodos fenotípicos usados para determinação do perfil de suscetibilidade a antimicrobianos é essencial para garantir a escolha da terapia mais adequada. MÉTODOS: Foram usadas 114 amostras de Staphylococcus sp (53 S. aureus e 61 SCN) na avaliação da acurácia dos métodos de difusão de disco, microdiluição em agar, ágar triagem oxacilina e sistema automatizado em comparação com a PCR para verificação da resistência a oxacilina. RESULTADOS: O gene mecA foi detectado em 48 (42,1 por cento) amostras e 27 (23,7 por cento) amostras apresentaram discrepância de resultados em pelo menos um dos métodos (74,1 por cento SCN, 25,9 por cento S. aureus). Para S. aureus, com exceção do Microscan Walkaway, todos os métodos apresentaram 100 por cento de especificidade e sensibilidade. Já para os SCN, o sistema automatizado e o disco de cefoxitina apresentaram menor acurácia. CONCLUSÕES: O uso de dois métodos deve ser a melhor opção para a melhora da acurácia, principalmente quando o laboratório de diagnóstico utiliza somente sistema automatizado ou teste de difusão do disco de oxacilina. A associação destes métodos com outros apresentaram praticamente 100 por cento de sensibilidade e especificidade em nosso estudo.

INTRODUCTION: The genus Staphylococcus is of great importance because of its high prevalence in hospital infections and because it presents high rates of resistance to oxacillin and other antimicrobials. Thus, evaluation of the accuracy of the phenotypic methods that are used to determine the profile of antimicrobial resistance is essential to ensure that the most appropriate therapy is chosen. METHODS: One hundred and fourteen strains of Staphylococcus sp (53 S. aureus and 61 CNS) were used to evaluate the accuracy of the methods of disk diffusion, agar microdilution, oxacillin screening agar and automated systems, in comparison with PCR for investigating resistance to oxacillin. RESULTS: The mecA gene was detected in 48 strains (42.1 percent), and 27 strains (23.7 percent) showed discrepant results in at least one of the methods (74.1 percent of CNS, 25.9 percent of S. aureus). For S. aureus, with the exception of the Microscan Walkaway, all the methods showed 100 percent specificity and sensitivity. In relation to CNS, the automated system and cefoxitin disk had lower accuracy. CONCLUSIONS: Use of two methods should be the best option for improved accuracy, especially when the diagnostic laboratory only uses an automated system or oxacillin disk diffusion test. Combination of these methods with others presented almost 100 percent sensitivity and specificity in our study.

Detección de Staphylococcus aureus resistente a meticilina mediante disco de cefoxitina / Detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus by cefoxitin sodium disc

OBJETIVO. Detectar la presencia del Staphylococcus aureus resistente a meticilina en el Hospital Militar Central «Dr. Luis Díaz Soto¼. MÉTODOS. Se utilizó el método de difusión con discos de cefoxitina-30 µg. El período analizado fue entre julio de 2006 y febrero de 2007 y fueron estudiadas 125 cepas Staphylococcus aureus. RESULTADOS. El 73,6 % de cepas identificadas fueron sensibles a la meticilina, y a la mayoría de los antibióticos betalactámicos; 26,4 % de estos eran cepas Staphylococcus aureus resistente a meticilina. En los estafilococos asociados al hospital, el porcentaje de Staphylococcus aureus resistente a meticilina se elevó hasta casi el 45 %. La mayor parte de los aislamientos ocurrieron en la Sala de Quemados y la Unidad de Cuidados Intensivos de Adultos (68 % entre ambos). De las muestras tomadas en el medio hospitalario (25) hubo predominio de la quemadura, la secreción bronquial y las lesiones cutáneas (17); en pacientes ambulatorios (8) fueron obtenidas a partir de lesiones en piel y partes blandas (8). La mayoría de las cepas identificadas como Staphylococcus aureus resistente a meticilina (66,6 %) fueron completamente resistentes a cefoxitina. Ninguno de los estafilococos estudiados presentó resistencia a vancomicina. No se observaron diferencias entre los Staphylococcus aureus resistente a meticilina hospitalarios y los comunitarios en cuanto a sus patrones de resistencia; se comprobaron valores de resistencia elevados para casi todos los antibióticos probados, con la excepción de vancomicina. CONCLUSIONES. El disco de cefoxitina mostró utilidad para detectar Staphylococcus aureus resistente a meticilina y predecir su comportamiento frente a otros antibióticos. Se constató que los Staphylococcus aureus resistente a meticilina identificados fueron extremadamente resistentes.

OBJECTIVE. To detect the presence of Methicillin-resistant Staphylococcus aureus in patients from the «Dr. Luís Díaz Soto¼ Central Military Hospital. METHODS. The 30 µg-cefoxitin diffusion disk method was used. Analysis period was between July, 2006 to February, 2007 and 125 Staphylococcus aureus strains were studied. RESULTS. There was a 73.6 % of methicillin-sensitive of strains and to most of beta-lactamase antibiotics; the 26.4 % were methicillin-resistant Staphylococcus aureus strains. In hospital associated staphylococcus, percentage of above mentioned staphylococcus increased to almost the 45 %. Most of isolations were in Burn Ward and in Adult Intensive Care Unit (68 % for both). From the samples took in hospital environment (25) there was predominance of burns, bronchial secretion and the skin lesions (17); in ambulatory patients (8) samples took were from the skin lesions and soft tissues (8). Most of the Methicillin-resistant S. aureus strains (66.6 %) were Cefoxitin- resistant. No study staphylococcus was Vancomycin-resistant. There were not differences among the hospital Methicillin-resistant S. aureus and the community ones as regards its resistance patterns; we demonstrated high resistance values for almost all the study antibiotics, except the Vancomycin. CONCLUSIONS. Cefoxitin disk was useful to detect the Methicillin-resistant S. aureus and to predict its behavior versus other antibiotics. We verify that above mentioned Staphylococcus were very resistant.