RESUMO
Extratos de folhas de araçá (Psidium cattleianum) são biocompatíveis e quando associados ao hidróxido de cálcio [Ca(OH)2] inibe o Enterococcus faecalis em 24 horas. O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta tecidual dos extratos da folha de araçá associado com Ca(OH)2, por meio da análise edemogênica e histológica. Foram utilizados 80 ratos machos (Wistar) pesando entre 200g e 280g. Para a análise edemogênica foram utilizados 30 animais divididos em 3 grupos [Extrato aquoso + Ca(OH)2 (A), Extrato etanólico + Ca(OH)2 (B), Propilenoglicol + Ca(OH)2 (C)], com 10 animais sendo 5 para cada período de 3 e 6 horas. Sob anestesia geral foram injetados 0,2ml/100g de massa corporal de Azul de Evans a 1% na veia peniana, após 30 minutos foi injetado no subcutâneo da região dorsal cada associação a ser avaliada. A análise edemogênica foi realizada por meio de espectrofotometria (λ=630ηm) após 3 e 6 horas. Para análise da reação inflamatória foram utilizados 50 ratos, que receberam quatro tubos de polietileno contendo os grupos experimentais citados anteriormente e um grupo controle (tubo vazio). Os períodos de avaliação foram de 7, 15, 30, 60 e 90 dias. As lâminas obtidas foram analisadas na coloração de Hematoxilina e Eosina atribuindo-se escores para intensidade da resposta tecidual. Observou-se que para a análise edemogênica a associação do extrato etanólico ao Ca(OH)2 mostrou no período de 3 horas maior edema em comparação aos outros grupos (p<0,05). No período de 6 horas os grupos não apresentaram diferença significante. Para a análise histológica foi observada evolução do reparo ao longo do tempo (p<0,05), os extratos aquoso e etanólico apresentaram resposta semelhante aos grupos controle e Ca(OH)2 + propilenoglicol. Pode-se concluir que a utilização de extratos de araçá como veículo do Ca(OH)2 apresentam resposta tecidual favorável assim como o propilenoglicol associado ao Ca(OH)2...
Leaf extracts from araçá (Psidium cattleianum) are biocompatible and when combined with calcium hydroxide [Ca (OH) 2] inhibits Enterococcus faecalis in 24 hours. This study aimed to evaluate the tissue respons of the araça leaf extracts associated to Ca(OH)2 by edemogenic and histological analysis. Eighty male wistar rats weighing between 200 and 280g were used in this study. For edemogenic analysis, 30 animals were divided in 3 groups (n=10) - (a) aqueous araça extract + Ca(OH)2; (b) ethanolic extract + Ca(OH)2; (c) propylene glycol + Ca(OH)2. Half of the specimens were evaluated after 3 hours and half after 6 hours. Under general anesthesia, 0,2ml/100g body weight of 1% Evans blue were injected in the penile vein. After 30 minutes, each studied substance was injected in the subcutaneous. Edemogenic analysis was performed though spectrophotometry (λ=630ηm) after 3 and 6 hours. For the inflammatory reaction evaluation, 50 rats were used. Each rat received 4 polyethylene tubes containing the studied substances and one empty tube (control). Evaluation periods were 7, 15, 30, 60 and 90 days. The tissues were stained with Hematoxylin and Eosin and scores were attributed for intensity of tissue response. The association of ethanolic extract to Ca(OH)2 presented larger edema after 3 hours than the other groups (p<0.05). After 6 hours there was no significant difference. On the histological analysis, an evolution on tissue repair was observed over time. The extract groups presented similar response to the Ca(OH)2 + propylene glycol and control. In conclusion that the use of guava extract as vehicle of Ca (OH)2 exhibit favorable tissue response as well as propylene associated with Ca (OH)2...
Assuntos
Animais , Ratos , Hidróxido de Cálcio , Endodontia , Enterococcus faecalis , Teste de Materiais , Extratos Vegetais , Ratos WistarRESUMO
O objetivo deste estudo foi analisar as respostas biológicas `a materiais utilizados em Endodontia que apresentam na formulação Mineral Trióxido Agregado (MTA) ou cimento Portland (PC) utilizando sistemas de cultura de células. O estudo foi dividido em três capítulos: No capitulo 1 foram avaliados bioatividade e biocompatibilidade de dois novos cimentos endodônticos comercialmente disponíveis; MTA Fillapex (MTA-F, cimento endodôntico à base de MTA, Ângelus) e Ephiphany SE (EP-SE, cimento endodôntico a base de resina metacrilato, SybronEndo). A linhagem de osteoblastos humanos (Saos-2) foi utilizada como modelo de estudo. Os resultados de MTT mostraram uma taxa significante de morte celular nas primeiras horas de exposição para todos os materiais avaliados. Entretanto, o grupo MTA-F apresentou aumento de células viáveis após 7 dias de presa. As imagens de microscopia eletrônica de varredura e o resultado de EDS (energia de dispersão atômica) mostraram diferenças na morfologia dos nódulos minerais formados pelos osteoblastos expostos ao MTA-F. No capítulo 2, células de folículo dental humanos (hDFCs) de dois terceiros molares inclusos indicados para exodontia por razões ortodônticas foram isoladas para avaliação da bioatividade e da biocompatibilidade do PC associado a diferentes agentes radiopacificadores em cultura primária de células. Os materiais estudados foram o cimento Portland branco (PC) e as associações de PC com: óxido de bismuto (CPBi), óxido de zircônio (CPZir) e tungstato de cálcio (CPCa). Além dos resultados de viabilidade celular e atividade de fosfatase alcalina, a biocompatibilidade do PC e das associações com agentes radiopacificadores foi analisada por imagens de microscopia eletrônica de varredura, que mostraram as hDFCs aderidas aos materiais. O capítulo 3 apresenta um estudo original de pesquisa básica, no qual foi avaliada a hipótese de ativação do fator de transcrição gênica NFATc1 em células de linhagem de osteoblastos humanos após exposição ao PC. O NFATc1 é um fator de transcrição essencial para a diferenciação celular de osteoclastos, o qual é ativado por calcineurina. Curiosamente, estudos recentes demonstraram que os fatores NFAT também desempenham um papel importante na diferenciação e atividade dos osteoblastos. Os resultados obtidos no capítulo 3 com ensaios de western blotting, microscopia confocal, expressão gênica de marcadores moleculares de osteogênese e a co-localização de Osterix com NFATc1 no núcleo de Saos-2 expostas ao eluído de PC forneceram evidências que comprovaram a hipótese proposta. O PC estimulou a ativação de NFATc1 em Saos-2, devido ao influxo de Ca+2 para o ambiente intracelular
The aim of this study was to analyze the biological responses to new endodontic materials based on Portland cement (PC) and the PC itself in cell culture systems. The study was divided into three chapters as follows: The first chapter describes a research in which the bioactivity and biocompatibility of two new commercially available sealers; MTA Fillapex (MTA-F, PC-based sealer, Angelus) and Ephiphany SE (EP-SE, resin-based sealer, SybronEndo); were evaluated in human osteoblast-like cells (Saos-2). The MTT results showed a significant cell death rate during the first hours of exposure to all test materials. After 7 days of exposure, MTA-F group showed a suitable increasing rate of cell viability. Interestingly, the images of scanning electron microscopy and the result of EDS (energy-dispersive X-ray spectroscopy) showed morphological differences in the mineralized nodules formed by osteoblasts exposed to MTA-F. In Chapter 2, human dental follicle cells (hDFCs) were isolated from two included third molars, which were extracted for orthodontic reasons. The hDFCs were suitable to assess the bioactivity and biocompatibility of PC associated with different radiopacifying agents in primary cell culture system. The materials tested were the white Portland cement (PC) and PC associations with radiopacifying agents: bismuth oxide (PCBi), zirconium oxide (PCZir) and calcium tungstate (PCCa). Besides the results of cell viability and alkaline phosphatase activity, the biocompatibility of the PC was corroborated by the images of scanning electron microscopy, which allowed us to visualize the hDFCs adhered to the material surfaces. Chapter 3 presents an original study of basic research, aimed to evaluate the hypothesis of the transcription factor NFATc1 activation in human osteoblast-like cells as a result of exposure to PC. The NFATc1 is a transcription factor essential for osteoclasts differentiation, which is activated by Calcineurin. Curiously, recent studies have shown that NFAT transcription factors play an important role in differentiation and activity of osteoblasts as well. The results obtained with western blotting assay, confocal microscopy, expression of molecular markers of osteoblasts differentiation and the co-location of NFATc1 with Osterix in the nuclei of Saos-2 exposed to PC elute provided evidences that supported the hypothesis proposed. PC stimulated the activation of NFATc1 in Saos-2 due to the influx of Ca+2 to the intracellular environment