Development of a mouse computational model for MCNPx based on Digimouse (r) images and dosimetric assays

ABSTRACT The aim of this study was to create and test a new mice 3D-voxel phantom named DM_BRA for mice and human first-estimation radiopharmaceutical dosimetry. Previously, the article reviews the state-of-art in animal model development. Images from Digimouse CT database were used in the segmentation and on the generation of the voxelized phantom. Simulations for validation of the DM_BRA model was performed at 0.015, 0.1, 0.5, 1 and 4 MeV photons with heart-source. Specific Absorbed Fractions (SAF) data were compared with literature data. The organ masses of DM_BRA correlated well with existing models based on the same dataset; however, few small organ masses hold significant variations. The SAF data in most simulated cases were statistically equal to a significant level of 0.01 to the reference data.

Anxiolytic-like effect of Citrus limon (L. ) Burm f. essential oil inhalation on mice / Efeito ansiolítico da inalação do óleo essencial de Citrus limon (L. ) Burm f. em camundongos.

ABSTRACT Experimental in vivo study aimed to characterize the anxiolytic-like effect of the Citrus limon fruit peel’s essential oil (CLEO) in animal models of anxiety, besides evaluating the viability J774.A1 cells in vitro through the MTT reduction method at the concentrations of 10 and 100 µg/mL. The anxiolytic behavior was evaluated in Swiss mice (n = 8) using the methodology of Elevated Plus-Maze (EPM) and Open-Field (OF). CLEO was tested by inhalation at the doses of 100, 200, and 400 µL, and as control, animals were subjected to inhalation of the vehicle (saline solution 0.9% + Tween80®) and intraperitoneal administration of diazepam (1.5 mg/kg). In the cell viability assay, it was observed that none of the concentrations showed cytotoxicity. OF test showed significant anxiolytic activity at all tested doses of OECL, compared to the control group, without changing the motor performance of the animals. Corroborating OF data, the EPM test confirmed anxiolytic activity in at least two doses of the tested oil (200 and 400 µL), justified by the number of entries and increase in the percentage of time in the open arms. The data analysis of this study evidenced that inhalation of OECL was able to induce an anxiolytic behavior in mice; however, further studies are required to ensure its safe use by the population.

RESUMO O estudo experimental in vivo objetivou caracterizar o efeito ansiolítico do óleo essencial das cascas do fruto de Citrus limon (OECL) em modelos animais de ansiedade, além de avaliar in vitro a viabilidade de células J774.A1 através do método de redução do MTT nas concentrações de 10 e 100 µg/mL. O comportamento ansiolítico foi avaliado em camundongos Swiss (n = 8), utilizando a metodologia do Labirinto em Cruz Elevado (LCE) e do Campo Aberto (CA). O OECL foi testado por inalação nas doses de 100, 200 e 400 µL, e como controle, os grupos foram submetidos à inalação do veículo (Solução fisiológica 0,9% + Tween80®) e administração intraperitoneal de diazepam (1,5 mg/kg). No ensaio de viabilidade celular, observou-se que nenhuma das concentrações apresentou citotoxicidade. O teste de CA demonstrou atividade ansiolítica significativa em todas as doses testadas do OECL, comparada ao grupo controle, sem alterar a performance motora dos animais. Corroborando os dados do CA, o teste do LCE confirmou a atividade ansiolítica em pelo menos duas das doses do óleo testadas (200 e 400 µL), justificada pelo número de entradas e aumento na percentagem de tempo nos braços abertos. A análise dos dados deste estudo evidenciou que a inalação do OECL foi capaz de induzir um comportamento ansiolítico em camundongos; entretanto, outros estudos são necessários para garantir o seu uso seguro pela população.

Antinociceptive and anti-inflammatory effects of Lantana camara L. extract in mice / Efeitos antinociceptivos do extrato de Lantana camara L. em camundongos

ABSTRACT: he Lantana camara L. belongs to the family Verbenaceae, which contains several active compounds in leaves and roots and which are reported to have medicinal and insecticidal properties. Studies of plants within the same family show the existence of anti-inflammatory activity in paw edema induced by carrageenan, serotonin and histamine and analgesic activity in the acetic acid writhing and tail-flick tests. The present study investigated whether the L. camara extract (ACE) also exerts these effects. The ACE toxicity was studied in male mice, and the percentage of mortality recorded 7 days after treatment was assessed. The ACE was evaluated as an antinociceptive agent in the hot plate, tail-flick and acetic acid writhing tests at a nontoxic dose of 1.0 g/Kg. The results showed that 1.5 g/Kg of ACE was not able to cause death, and doses of 3.0 and 4.0 g/Kg caused 50% and 60% death, respectively, in male mice. In all of the antinociceptive tests, 1 g/Kg of ACE markedly reduced responses to pain. Our findings suggest that ACE may have active anti-inflammatory and antinociceptive properties in much smaller doses than toxic.

RESUMO: Lantana camara L. pertence à família Verbenaceae, a qual contem muitos princípios ativos em suas folhas e raízes com propriedade medicinais e inseticidas. Estudos com plantas da mesma família mostram a existência de propriedades antinflamatórias no modelo de edema de pata induzido pela carragenina, serotonina e histamina, além da atividade analgésica nos testes de contorção induzida pelo ácido acético e da retirada da cauda por estímulo térmico. O presente trabalho investigou os efeitos tóxicos e antinociceptivos do extrato de L. camara (ACE) em camundongos. Para tanto, investigou-se a porcentagem de mortes em 7 dias após a administração de diferentes doses do extrato. Avaliou-se também os efeitos antinociceptivos do ACE pelos testes da placa quente, estimulação térmica da cauda e contorções abdominais induzidas pelo ácido acético com a dose não-tóxica [1,0 g/Kg]. Os resultados mostraram que 1,5 g/Kg do ACE não causou mortalidade, enquanto que 3,0 e 4,0 g/Kg promoveram 50 e 60% de mortalidade, respectivamente. Em todos os testes antinociceptivos, a dose de 1,0 g/Kg do ACE reduziu a resposta à dor. Os presentes resultados indicam que o ACE apresenta propriedades antinflamatórias e analgésicas em doses muito menores que a tóxica.

Influência da própolis sobre os perfis leucocitário e proteico de camundongos e tempo de fechamento de feridas excisionais limpas e infectadas por Staphylococcus aureus / Influence of Propolis on leukocyte and protein profiles of mice and closing time of excisional wounds clean and infected by Staphylococcus aureus

RESUMO Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da própolis sobre os perfis leucocitário e protéico de camundongos e sobre o tempo de fechamento de lesões de pele confeccionadas experimentalmente, limpas e infectadas com Staphylococcus aureus. No primeiro, foram utilizados 48 animais divididos em quatro grupos, sendo um tratado com solução hidroalcóolica pura e três tratados com própolis a 10%, nas dosagens de 20 mg, 40 mg e 80 mg por animal de 25 gramas de peso, em única aplicação intraperitoneal. Foram coletadas amostras de sangue no segundo, 10º, 18º e 26º dias após o tratamento para realização de leucograma, proteinograma e fracionamento eletroforético das proteínas. Na avaliação da atividade cicatrizante, também foram utilizados 48 camundongos divididos em seis grupos, nos quais realizou-se a confecção cirúrgica de feridas na dimensão de 1cm2, após anestesia dissociativa. Dois grupos serviram como controle para feridas limpas e infectadas. Dois grupos de feridas infectadas por S. aureuse dois grupos de feridas limpas foram tratados com própolis a 5% e 10%, sendo a escolha destas concentrações baseada em um estudo piloto realizado. Os resultados mostraram que o tratamento com própolis influencia o leucograma e o proteinograma, de forma dose-dependente, sendo que a maior dose utilizada desencadeou leucocitose com linfocitose e aumento de proteínas da fração gamaglobulínica, no 10º dia após o início do tratamento. Também mostraram que a concentração da solução influenciou o tempo de cicatrização das feridas infectadas, ocorrendo em menor tempo no grupo tratado com a solução a 5%.

ABSTRACT This study aimed to evaluate the propolis effects on both the leukocyte and protein profiles of mice and on the closing time of skin lesions made experimentally, clean and infected with Staphylococcus aureus. The first 48 animals were divided into four groups, one treated with pure alcohol solution and three treated with propolis 10% at dosages of 20 mg, 40 mg and 80 mg per 25 g of animal weight in an intraperitoneal single application . Blood samples in the second, and then 10º, 18º and 26º days after treatment were collected in order to perform WBC, proteins and electrophoretic fractionation of proteins. Regarding the healing activity, also 48 mice divided into six groups were used, in whom surgical wounds in the size of 1cm2 were purposely inflicted , after the dissociative anesthesia were applied . Two groups served as control ones, for clean and infected wounds. Two groups of S. aureus with infected wounds and two groups with clean sores were treated with 5% and 10 % propolis, being this concentration choice based on a pilot study previously performed. The results showed that treatment with propolis influences leukocyte and protein concentrations in a dose- dependent manner, with the highest dose triggering leukocytosis with lymphocytosis and increasing the protein fraction of gamaglobulínica, on the 10th day after the start of treatment. It also indicated that the concentration of the solution influence the time of healing of infected wounds, since the process on the group treated with 5% solution happened faster.

Efeito da fração não-oleosa doRicinus communisna biodistribuição comTecnécio-99m em camundongos / Effect of non-oily fraction ofRicinus communis on the bio distribution with Technetium-99m in mice

RESUMO Ricinus communisé uma planta pertence à família Euforbiaceae. A partir de seus frutos é extraído o óleo de rícino e outra fração altamente tóxica (fração não-oleosa). Neste estudo, foi avaliado o efeito da fração não oleosa de R. communis(FNORC) na biodistribuição do Tc-99m em camundongos sadios e em animais transplantados com Sarcoma-180 (S180). Para avaliação da biodistribuição do Tc-99m, o percentual de atividade radioativa total injetada (ATI%) foi mensurada utilizando um contador gama. Os resultados mostraram que, em animais sadios, houve aumento da captação do Tc-99m após o tratamento com FNORC pelos rins, cérebro e estômago. Apenas houve diminuição da absorção deste radioisótopo nos músculos. Em animais com tumor, houve redução significativa da captação do Tc-99m no coração, pulmões e tumor, e foi observado o aumento da captação apenas nos rins. Foi observada também a diminuição da concentração das proteínas plasmáticas totais em animais com tumor após tratamento com FNORC e atividade antitumoral significativa. Diante desses dados, conclui-se que fração não oleosa de R. communis possui atividade antitumoral significativa, porém altera a biodistribuição do Tc-99m, fato este que pode resultar em falhas nos processos de diagnóstico por imagem que utilizem este radioisótopo como marcador.

ABSTRACT Ricinus communis is a plant belonging to the Euforbiaceae family. From its fruits, it is extracted the castor oil and another highly toxic fraction (non-oily fraction). In this study, we evaluated the effect of the non-oily fraction of R. communis (NOFRC) on the bio distribution of Tc-99m in healthy mice and in animals transplanted with Sarcoma-180 (S180). To evaluate the bio distribution of theTc-99m, the percentage of the total injected radioactivity (% TIR) was measured through a gamma counter. There was an increase in the capitation of Tc-99m after the treatment with NOFRC in the kidneys, brain, and stomach of healthy animals. A decrease in the reception of this radionuclide was only found in the muscles. In animals with tumour, there was a significant reduction in the uptake of Tc-99m in the heart, lungs and tumour. An increase in the capitation was only observed in the kidneys. It was also observed a reduction in the total plasma protein concentration in animals with tumours after the treatment with NOFRC, besides significant antitumor activity. We concluded that there is antitumor activity in the NOFRC, but that it alters the biodistribution of Tc-99m, a fact which may result in failures in the diagnostic imaging process using this radioisotope as a marker.

Gene expression profile of oxidative stress in the lung of inbred mice after intestinal ischemia/reperfusion injury

To determine the gene expression profile associated with oxidative stress and antioxidant defense in the lung tissue of mice subjected to intestinal ischemia and reperfusion. METHODS: Twelve male, inbred mice (C57BL/6) were randomly assigned to one of two groups. The control group (CG) underwent anesthesia and laparotomy and was observed for 120 minutes; the ischemia/reperfusion group (IRG) was subjected to anesthesia, laparotomy, and ischemia of the small intestine for 60 minutes and to 60 minutes of reperfusion. A pool of six mice from each group was subjected to a reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) to analyze the oxidative stress and antioxidant defense genes. All genes that were up-regulated or down-regulated greater than three-fold, based on the algorithm 2.

The testis of the mice C57/BL6 offspring in adulthood have alterations due to maternal caffeine consumption

To investigate the effects of the maternal caffeine consumption during pregnancy to adult male testis mice offspring. METHODS: Twenty pregnant mice were divided into control group (c) and caffeine group (cf). dams received daily saline or 20 mg/kg of caffeine subcutaneously. Male offspring were monitored daily until 13th week. The testis were used to evaluate both the proliferation (pcna) and apoptosis (bax); leptin receptor (ob-r); aromatase; follicle stimulating hormone (fshr), luteinizing hormone (lhr) and androgen receptors (ar); steroidogenic acute regulatory protein (star); vascular endothelial growth factor (vegf) and estrogen receptors (erα and erβ) by western blotting. Serum concentrations of testosterone, estradiol and leptin were measured. RESULTS: There was a significant reduction in food intake and the body mass gain (p<0.05) in the cf ; pcna (p=0.01), fshr (p=0.02), star (p=0.0007), vegf (p=0.009), ar (p=0.03) in the cf. while an increase were note in bax (p=0.01), ob-r (p=0.02), lhr (p=0.04) and in the aromatase (p=0.03) in the cf. only erα and erβ were not changed by maternal caffeine. The serum testosterone levels in the cf offspring were 90% lower than in the c offspring (p=0.04). CONCLUSION: Maternal caffeine consumption has a role and alters the testis of the offspring in adulthood.

Caracterização da imunogenicidade das proteínas recombinantes Virb9, Virb10 e fator termo instável de Elongação de Peptídeos de Anaplasma marginale em camundongos / Characterization of the immunogenicity of recombinant proteins VirB9, VirB10 and Elongation Factor Tu of Anaplasma marginale in mice

Considerando as limitações dos atuais métodos de controle contra a anaplasmose bovina, o desenvolvimento de uma vacina efetiva se faz necessário. A partir do advento da análise genômica e proteômica, novas proteínas de membrana de Anaplasma marginale foram identificadas como possíveis candidatas a componentes de uma vacina, tais como, VirB9, VirB10 e Fator Termo Instavél de Elongação de Peptídeos (EF-Tu). Embora estas proteínas ainda não estejam bem caracterizadas na membrana de A. marginale, a produção destas na forma recombinante (rVirB 9, rVirB10 e rEF-Tu) tem sido realizada, mas as mesmas ainda não foram exploradas em formulações vacinais. Neste trabalho, avaliou-se o uso de rVirB9, rVirB10 e rEF-Tu emulsionadas em adjuvante Montanide em camundongos. Nas condições testadas, verificou-se a indução de forte resposta imune humoral com a produção de IgG1 e IgG2a, sendo que as proporções dos níveis de produção destas subclasses indicam predomínio de IgG1. Entretanto, esplenócitos de animais, que foram injetados com rVirB9 ou rVirB10, produziram interferon-gama acima do limite de detecção do ensaio após estimulação in vitro, sinalizando assim resposta celular específica. Assim, novas avaliações serão realizadas com a finalidade de modular o perfil de resposta imune obtido em bovinos e avaliar a proteção contra A. marginale.

Considering the limitations of current methods of anaplasmosis control, the development of a more effective vaccine is required. Previous studies, using proteomic and genomic approaches, have identified new membrane proteins in Anaplasma marginale that may be vaccine candidates. These include VirB9, VirB10 and elongation factor-Tu (EFTu). Although the role of these proteins in the membrane of A. marginale has not been properly characterized, production of the recombinant proteins rVirB9, rVirB10, and rEF-Tu has been achieved. However, these recombinant proteins have not yet been exploited in vaccine formulations. The present study describes the use of rVirB9, rVirB10 and rEF-Tu, emulsificated in adjuvant Montanide, in mice. A strong humoral immune response was induced under these conditions, with both IgG1 and IgG2a production. The IgG2a/IgG1 ratios revealed a predominance of IgG1. However, splenocytes of the animals that received rVirB9 or rVirB10 produced high levels of gamma interferon after in vitro stimulation, indicating a specific cellular immune response to these proteins. Therefore, further studies are required to adjust the profile of the immune response in order to perform tests of protection against A. marginale in cattle.

Behavioral effects of acute glyphosate exposure in male and female Balb/c mice / Efeitos comportamentais da exposição aguda ao gliposato em camundongos Balb/c machos e fêmeas

We investigated the behavioral effects induced by an acute exposure to a commercial formulation of glyphosate (GF) in a dose that was about double the concentration of the no observed adverse effect level (NOAEL) in male and female BALB/c mice. The acute neurotoxicity induced by GF exposure was determined through analysis of general activity, the sensory system, the psychomotor system, the central nervous system and the autonomous nervous system in both male and female mice. The behavioral effects on exploration, anxiety and depression induced by GF exposure were determined with the open field, elevated plus maze and tail suspension tests, respectively. GF induced few signs of acute neurotoxicity. Locomotion in the open field was decreased in only female mice. No signs of anxiety were detected in the plus maze test in both sex, however, a reduced exploration was observed in male mice in this apparatus. In the tail suspension test, both male and female mice showed an increased immobility time. No interaction between sex and treatment was detected. In conclusion, GF exposure at about a dose twice that of the NOAEL induced few signs of neurotoxicity and no sexual dimorphism in all behavioral models employed.

Neste trabalho investigou-se em camundongos BALB/c, machos e fêmeas, os efeitos comportamentais da exposição aguda a uma formulação comercial do glifosato (GF) em uma dose duas vezes maior que a dose sem efeito observado (NOAEL). A neurotoxicidade aguda ao GF foi determinada por meio da análise da atividade geral, de parâmetros sensoriais, psicomotores, do sistema nervoso central e autônomo em machos e fêmeas. Os efeitos exploratório, de ansiedade e depressão induzidos pelo GF foram observados no campo aberto, labirinto em cruz elevado e no teste da suspensão da cauda, respectivamente. O GF promoveu poucos sinais de neurotoxicidade. A capacidade exploratória de fêmeas foi reduzida no campo aberto. Nenhum sinal de ansiedade foi detectado tanto em machos como em fêmeas no labirinto em cruz elevado porém, notou-se redução da exploratória neste aparelho. No teste de suspensão da cauda tanto as fêmeas como machos mostraram aumento no tempo de imobilidade. Não foi observado neste caso interação entre sexo e tratamento. Concluiu-se que a exposição ao dobro da dose da NOAEL do GF induziu poucos sinais de neurotoxicidade e poucos efeitos sexualmente dimórficos em camundongos machos e fêmeas.

Efeitos de jejum de curta duração na evolução de peritonite fecal em camundongos / Effects of short term fasting on the evolution of fecal peritonitis in mice

PURPOSE: To investigate the effect of 72 hours food suppression on the evolution of fecal peritonitis in mice evaluating the mortality and measuring the number and size of abscesses formed into the peritoneal cavity. METHODS: Mice receiving commercial diet and water ad libitum (control group, N=35) and mice fasted during 72 h (N=35), receiving only water ad libitum, were inoculated by i.p. route, with 4uL/g body weight of a fecal suspension diluted 1:6 or 1:9 in 0.15M NaCl solution (1:6 dilution, 22 controls and 18 fasted; 1:9 dilution, 13 controls and 17 fasted). Animals were followed up until two weeks after fecal inoculation, when the survivors were euthanized for evaluation of the number and size of intra-peritoneal abscesses. Mortality was evaluated by Kaplan Meyer curves. RESULTS: Mortality was significantly higher in fasted groups than in controls. However the number and size of abscesses were significantly less in fasted groups than in controls. CONCLUSION: Seventy two hours food suppression increased the susceptibility to endotoxic shock (high mortality after peritonitis induction) and the resistance to infection with fecal microorganisms (less number and size of intra-peritoneal abscesses).

OBJETIVO: Investigar o efeito de jejum de 72 horas na evolução de peritonite fecal em camundongos, avaliando a mortalidade e o número e tamanho dos abscessos formados na cavidade peritoneal. MÉTODOS: Camundongos recebendo dieta ad libitum (grupo controle, N=35) e camundongos submetidos a jejum durante 72h (N=35) foram inoculados, por via intraperitoenal, com 4uL/g de peso corporal de uma suspensão de fezes diluída a 1:6 ou 1:9 em NaCl 15M (diluição 1:6, 22 controles e 18 jejum; diluição 1:9, 13 controles e 17 jejum). Os animais foram acompanhados até duas semanas após a inoculação das fezes quando eram eutanaziados para avaliação do número e tamanho dos abscessos intraperitoneais. A mortalidade foi avaliada através das curvas de Kaplan Meyer. RESULTADOS: A mortalidade foi significativamente maior nos animais submetidos ao jejum. No entanto o número e tamanho dos abscessos foram significativamente menores neste grupo. CONCLUSÃO: O jejum de 72 horas aumentou a susceptibilidade ao choque endotóxico (maior mortalidade nas primeiras 48 horas) e aumento da resistência aos microorganismos fecais (menor número e tamanho dos abscessos intraperitoneais).

Estudo da ação antineoplásica da Tabebuia avellanedae (Ipê-Roxo) na carcinogênese induzida pelo azoximetano em camundongos / Study of the antineoplastic action of Tabebuia avellanedae in carcinogenesis induced by azoxymethane in mice

PURPOSE: To study the antitumor action of Tabebuia avellanedae in experimentally induced colon carcinogenesis by azoxymethane in mice. METHODS: Fifty (n=50) mice were divided into five groups: in group I azoxymethane (AOM) was administered, in Group II - β-lapachone, in group III - vehicle (diluent) and in group IV - vehicle + AOM and finally in group V - β-lapachone + AOM. RESULTS: It was observed the presence of aberrant crypt foci in all animals of groups I and IV, 50 percent in group II and 90 percent in group V. CONCLUSION: The β-lapachone extracted from the Tabebuia avellanedae showed no protective effect of lesions induced by azoxymethane in colon of mice.

OBJETIVO: Estudar a ação antitumoral da Tabebuia avellanedae (Ipê-Roxo) na carcinogênese colônica induzida experimentalmente pelo azoximetano em camundongos. MÉTODOS: Foram utilizados 50 camundongos divididos em 5 grupos: grupo I administrado Azoximetano (AOM); grupo II - β-lapachona; grupo III - veículo (diluente); grupo IV - veículo + AOM; e grupo V - β-lapachona + AOM. RESULTADOS: Observou-se presença de focos de criptas aberrantes em todos os animais dos grupos I e IV, 50 por cento no grupo II e 90 por cento no grupo V. CONCLUSÃO: A β-lapachona extraída da Tabebuia avellanedae não apresentou efeito protetor das lesões induzidas pelo azoximetano em cólon de camundongos.

Desenvolvimento de embriões de camundongas após manutenção em diferentes soluções de manipulação / Development of mice embryos after maintenance in different manipulation solutions

Avaliou-se a eficácia de duas soluções de manipulação (SM) de embriões de camundongas nos estádios de blastocisto inicial (Bin), mórula compacta grau I (McI) e II (McII), distribuídos aleatoriamente em três tratamentos (T), de acordo com a solução de manutenção. No T1 usou-se PBS modificado (controle); no T2, SME e no T3, SME enriquecida. Os embriões foram mantidos durante quatro horas na solução de manutenção e posteriormente classificados quanto ao estádio de desenvolvimento e à qualidade embrionária. Logo após, foram cultivados em meio TCM 199 e classificados novamente quanto ao estádio de desenvolvimento e à qualidade embrionária. A taxa de desenvolvimento dos embriões após manutenção por quatro horas em solução de manipulação foi menor (P<0,05) nos embriões do controle, comparada à de embriões do SME e SME enriquecida, diferença esta não observada (P>0,05) após o cultivo in vitro. Os embriões McII do T3 tiveram maior desenvolvimento (P<0,05) em relação aos embriões do T1 e T2, indicando o efeito benéfico do enriquecimento da solução SME. Conclui-se que as soluções de manipulação SME e SME enriquecida influenciaram beneficamente o desenvolvimento de embriões.

The effect of embryo manipulation solution followed by in vitro culture in mice embryos was studied. The embryos at early blastocyst (Bin), and compact morula grades I (McI) and II (McII) were randomly assigned into three treatments. T1 used modified PBS (control), T2 used EMS, and T3 used EMS supplemented. In each treatment, the embryos were kept in manipulation solution for four hours. Finishing the manipulation period, the embryos were classified according the development stage and quality. Following, the embryos were cultured in TCM 199. After the culture period, the embryos were evaluated according to quality and development stage. The development rate for Bin, McI, and McII after maintenance for four hours in manipulation solution was lower for control embryo (P>0.05) as compared to EMS and EMS supplemented embryos. After in vitro culture, no differences (P>0.05) on embryo development rate among control, EMS, and EMS supplemented were observed. Moreover, McII from EMS supplemented had a higher development (P<0.05) (93 percent) as compared to control (82.5 percent) and EMS (83.9 percent), suggesting a beneficial effect of EMS supplemented. EMS and EMS supplemented embryos had a positive effect on embryo development, showing higher embryo development than those in PBS solution.

Estudo morfológico da sínfise púbica de ratos e camundongos durante a gravidez / Morphological study of rats and mice pubic symphysis during pregnancy

O objetivo desse estudo foi avaliar as diferenças existentes na sínfise púbica de camundongos e ratos fêmeas, grávidas e não grávidas, descrevendo as alterações morfológicas ocorridas na articulação com a finalidade de entender os movimentos apresentados pela articulação ao longo da gestação. Para tal, as sínfises foram coletadas de camundongos fêmeas grávidas no 6º, 12º e 18º dias de gestação, e nas ratas com 18 dias de gestação. Foram fixadas em paraformoldeído e a seguir descalcificadas em solução de Morse. Na sequência, as peças foram incluídas em parafina. Cortes de 7 micrômetros foram realizados e corados em Picrosirius e Resorcina-Fucsina. A coloração com Picrosirius evidenciou em camundongos fêmeas virgens a presença de fibras grossas de colágeno diferente dos outros grupos de camundongos, os quais apresentaram fibras finas. A análise de fibras elásticas mostrou que, com o decorrer da gestação, estas aumentam em espessura e número. Em ratas com 18 dias de gestação foi observado o aparecimento de tecido conjuntivo fibroso no disco de cartilagem hialina, aumentando assim, o espaço inter-púbico e modificando a estrutura de sincondrose encontrada nos animais virgens. Observou-se também aumento no diâmetro e quantidade de fibras elásticas em relação às ratas virgens. Podemos concluir que a articulação de camundongos fêmeas grávidas passam por transformações estruturais qualitativas e quantitativas ao longo da gravidez. Em ratas prenhas, além do aumento de fibras elásticas e da distância entre os ossos do quadril, a articulação diferenciou-se pelo aparecimento de tecido conjuntivo fibroso para facilitar o parto.

The objective of this study was to assess the existing differences in the pubic symphysis of female rats and mice, pregnant and non pregnant, describing the morphological alterations occurred in the joint and understanding the movements shown during pregnancy. The pubic symphysis were collected from female pregnant mice on the 6th, 12th and 18th days of pregnancy, and from rats with 18 days of pregnancy. They were fixed in paraformoldehyde and following decalcificated with Morse’s solution. The samples were then, included in paraffin. Seven micrometers slices were made and stained with Picrosirius and Resorcin-Fuchsin. The Picrosirius staining had shown, in virgin female mice, the presence of thick collagen fibers different from the other groups of mice, which presented thin fibers. The analysis of elastic fibers showed that, with the progress of pregnancy there is an increase in their thickness and number. In rats with 18 days of pregnancy, an appearance of fibrous conjunctive tissue on the hyaline cartilage disc was observed, enlarging the inter-pubic space and modifying the synchondrosis structure found in the virgin animals. It was also observed an increase in diameter and amount of elastic fibers comparing to virgin rats. We conclude that the pregnant female mice’s joint undergoes transformations in structure, quality and amount during the pregnancy. In pregnant rats, besides the increase of elastic fibers and the distance between the hip’s bone, the joint had differred by the appearance of fibrous conjunctive tissue, thus making the birth easier.

Klotho: un nuevo eslabón en la fisiopatología de la insuficiencia renal crónica / Klotho: a new link in the pathophysiology of chronic kidney disease insufficiency

Klotho, a recently described gene, is mainly expressed in the kidney, and encodes a protein necessary for the activity of fibroblast growth factor receptors (FGFR), especially FGFR1. The Klotho protein has two variants, a transmembrane and a secreted form, and the latter may represent a new hormone synthesized by the kidney. Recent studies have shown that chronic kidney disease (CDK) is associated with significant alterations in the expression of klotho, and this alteration seems to be responsible for many of the phenotypic characteristics that accompany the uremic syndrome. CKD is associated with marked lymphocyte dysfunction, a clinically relevant problem, but the pathophysiological mechanisms behind this dysfunction are mostly unknown. Our research group has recently demonstrated the expression of klotho andFGFR1 in human lymphocytes and is currently implementing a series of experiments designed to determine the role of this pathway in the pathogenesis of lymphocyte dysfunction associated with uremia.

Histopatologia e imuno-histoquímica de camundongos C57BL/6 infectados por Toxoplasma gondii cepa ME-49 e alimentados com micotoxinas / Histopatology and immunohistochemistry of C57BL/6 mice infected with Toxoplasma gondii ME-49 strain and fed with mycotoxins

A avaliação do curso da infecção por Toxoplasma gondii em camundongos alimentados com micotoxinas, utilizando a histopatologia e imuno-histoquímica, demonstrou a ocorrência de lesões mais acentuadas nos animais infectados e expostos às toxinas. Diferentes quadros de inflamação e necrose encefálica e hepática mostraram que a associação entre parasitismo e a ingestão das micotoxinas causou agravamento nas lesões. A fumonisina B1(FB1, isolada ou associada a outras micotoxinas) foi responsável por alterações celulares como gigantismo nuclear, hipertrofia celular e células atípicas em tecido hepático. A FB1 foi também relacionada com quadros de desmielinização em tecido cerebral. A presença de cistos ou formas livres da cepa ME-49 de T. gondii foi constatada tanto em animais controle quanto nos alimentados com micotoxinas, mostrando que a cepa do parasita, nesta linhagem C57BL/6 de camundongos, apresenta formas características de fase aguda e crônica da infecção.

The course of toxoplasmosis in mice fed with mycotoxins was evaluated by histopatology and immunohistochemistry. The most severe lesions was seen in animals infected by T. gondii and fed on mycotoxins, when they were compered with control animals. Encephalitis, hepatitis, necrosis foci in the brain and liver showed that the association parasite infection and micotoxicosis aggravated the lesions. The fumonisin B1(isolated or in adiccion to others mycotoxins) was responsable for cellular alteration like nuclear enlargement, cellular hypertrophy, and atypical cells in hepatic tissue. This mycotoxin was also related to brain desmyelinization. The presence of cysts or free parasites was observed in control and intoxicated animals. This result showed that ME49 strain of T. gondii, in C57BL/6 mice, can display typical forms of acute and chronic infection.

Alterações bioquímicas e anátomo-histopatológicas causadas pelo veneno do escorpião Tityus fasciolatus em camundongos / Biochemical and anatomo-histopathogical alterations caused by Tityus fasciolatus scorpion venom in mice

O objetivo desta pesquisa foi estudar as alterações causadas pelo veneno de Tityus fasciolatus, uma espécie de escorpião encontrada no Brasil Central, sobre os tecidos, utilizando-se camundongos Swiss CF1, machos, com peso entre 18 e 20g como modelo experimental. Numa primeira parte do experimento, foi determinada a DL50 do veneno de T. fasciolatus, administrado por via subcutânea e foram avaliadas as alterações anátomo-histopatológicas dos animais que vieram a óbito. Numa segunda parte, foram estudados os efeitos de 24µg de veneno de T. fasciolatus sobre a bioquímica sanguínea, 1h, 8h e 24h após a inoculação por via subcutânea do veneno. A DL50 do veneno de T. fasciolatus para o camundongo foi de 59,65µg. Os achados macroscópicos encontrados foram áreas de hemorragia pulmonar (petéquias e equimoses) difusamente distribuídas pela superfície dos pulmões. Os corações apresentavam uma área de coloração mais clara, em formato de cunha no ápice, sugerindo área de infarto. Na microscopia observou-se hemorragia intersticial e presença de leucócitos nas paredes dos alvéolos; leve a moderada congestão dos vasos sanguíneos do epicárdio, miocárdio e endocárido e discreto infiltrado inflamatório linfo-histiocitário no endocárdio e miocárdio. Os animais da segunda parte, inoculados com 24µg de veneno de T. fasciolatus, não apresentaram alterações significativas nos valores de creatina quinase (CK), isoenzima CK-MB, aspartato aminotransferase (AST), lactato desidrogenase (LDH), amilase e glicose. Concluiu-se que o veneno de T. fasciolatus possui uma menor toxicidade quando comparada com o veneno de T. serrulatus e na dose de 24µg não alterou o perfil bioquímico sanguíneo em camundongos.

The aim of this study was to investigate the action of the venom the species Tityus fasciolatus scorpion, found in the Central of Brazil on the tissue using CF1 Swiss mice, male, (18-20kg) as experimental model. In the first part of the experiment, the LD50 of T. fasciolatus was determined by sub-cutaneous and evaluated the anatomo-pathological changes of the animals who died . In a second part, we studied the effects of 24ìg of venom of T. fasciolatus in the blood biochemistry, 1h, 8h and 24h after inoculation of the venom. The LD50 of the venom of T. fasciolatus for mice was 59.65 µg. The macroscopic findings were found with areas of pulmonary haemorrhage (petechiae and ecchymosis), diffusely distributed on the surface of the lungs. The hearts had a clearer field of colour in the wedge at the apex, suggesting infarcted area. Microscopy was observed in interstitial haemorrhage and presence of leukocytes in the alveolar walls, light to moderate congestion of the blood vessels of the epicardium, myocardium and endocardium and discrete hystiocitary lymphohistiocytic inflammatory infiltrate in the myocardium and endocardium. The second part of the animals inoculated with 24ìg of venom of T. fasciolatus showed no significant changes in the levels of creatine kinase (CK), CK-MB isoenzyme, aspartate aminotransferase (AST), lactate dehydrogenase (LDH), amylase and glucose. It was concluded that the venom of T. fasciolatus has a lower toxicity when compared with the venom of T. serrulatus and the dose of 24ìg did not alter the blood biochemical profile in mice.

Ecología poblacional del ratón Peromyscus mexicanus (Rodentia: Muridae) en el Parque Nacional Volcán Poás, Costa Rica

Population ecology of the mouse Peromyscus mexicanus (Rodentia: Muridae) in Poas Volcano National Park, Costa Rica. The Mexican Deer Mouse has been reported as an abundant wild mouse in Costa Rica; nevertheless, it has not been studied as well as other Peromyscus species. Thirty Sherman traps were placed on three habitats during six consecutive days of each month, from March 2002 through April 2003 in three sites of Poás volcano National Park, Costa Rica. A total of 2 393 mice were captured. Other species such as Reithrodontomys creper, R. rodriguezi, Scotinomys teguina and Oryzomys devius (Muridae) were also captured in Tierra Fría and R. creper, R. sumichrasti, S. teguina and O. devius in Potrero Grande. in Canto de las Aves we captured P. mexicanus, R. creper, R. rodriguezi and O. devius. Of the total mice collected, 34.77 % were P. mexicanus. For this species, the mean monthly capture per hectare was 34±2.15 in Tierra Fría and 11±1.85 in Potrero Grande. in the third site, Canto de las Aves, only four mice were captured throughout the study. The estimated population size did not change among months in Tierra Fría, but it did in Potrero Grande. No sex ratio variation was found in any habitat. In Potrero Grande, weight averages were 43.54±3.42 g for males and 42.08±3.4 5 g for females. variation in population structure among habitats was not significant. The presence of oak trees (Quercus sp.) and the high understory density could explain the stability of the population in this area. Rev. Biol. Trop. 55 (3-4): 1037-1050. Epub 2007 December, 28.

Se estudió el tamaño poblacional, la proporción de sexos, el peso y el número de adultos e inmaduros de Peromyscus mexicanus en tres sitios, durante 14 meses, en el Parque Nacional volcán Poás, Costa Rica. Se colocaron 30 trampas Sherman en cada sitio, para un estudio de captura-recaptura durante seis días consecutivos de cada mes, desde marzo de 2002 hasta abril de 2003. Se hicieron 2 393 capturas, hallándose en Tierra Fría, además de P. mexicanus, Reithrodontomys creper, R. rodriguezi, Scotinomys teguina y Oryzomys devius (Muridae). En Potrero Grande se capturaron P. mexicanus, R. creper, R. sumichrasti, S. teguina y O. devius. En Canto de las Aves se capturaron P. mexicanus, R. creper, R. rodriguezi y O. devius. El 34.77 % del total de ratones capturados fueron P. mexicanus. Se capturaron en promedio 34 individuos por mes por hectárea en Tierra Fría y 11 en Potrero Grande; en Canto de las Aves sólo se capturaron 4 individuos en todo el muestreo. El tamaño estimado de la población de P. mexicanus no varió mensualmente en Tierra Fría, pero si en Potrero Grande. No se observó variación en la proporción de sexos en ninguno de los dos sitios. El valor promedio de peso en Tierra Fría fue de 43.83+1.93 g machos 39.29+2.07 g hembras. En Potrero Grande fue 43.54+3.42 g machos y 42.08+3.45 g hembras. En ninguno de los dos sitios se encontraron diferencias en la cantidad de individuos inmaduros a través del tiempo.

Estructúra histológica del estroma conjuntivo del epidídimo en el ratón negro isogénico (Mus musculus) / Histological organization of the connective tissue stroma of the epididymis in the black isogenic mouse (Mus musculus)

La organización histológica del estroma conjuntivo del epidídimo en el ratón negro isogénico (Mus musculus) fue estudiada en preparaciones para microscopia óptica con técnicas de Hematoxilina y esoína, PAS y Hematoxilina, tricómicas de Masson, Mallory y Masson-Goldner, aldehido fucsina y argentamina de Gomory. La estructúra del tejido conjuntivo del conducto del epidídimo es comparada con la de otros mamíferos