In Vitro Enamel Remineralization by Low-Fluoride Toothpaste with Calcium Citrate and Sodium Trimetaphosphate

The objective of this study was to evaluate in vitro the effect of a low fluoride toothpaste (450 µgF/g, NaF) combined with calcium citrate (Cacit) and sodium trimetaphosphate (TMP) on enamel remineralization. Bovine enamel blocks had the enamel surface polished sequentially to determine the surface hardness. After production of artificial carious lesions, the blocks selected by their surface hardness were submitted to remineralization pH cycling and daily treatment with dentifrice suspensions (diluted in deionized water or artificial saliva): placebo, 275, 450, 550 and 1,100 µgF/g and commercial dentifrice (positive control, 1,100 µgF/g). Finally, the surface and cross-section hardness was determined for calculating the change of surface hardness (%SH) and mineral content (%∆Z). Fluoride in enamel was also determined. The data from %SH, %∆Z and fluoride were subjected to two-way analysis of variance followed by Student-Newman-Keuls's test (p<0.05). The mineral gain (%SH and %∆Z) was higher for toothpastes diluted in saliva (p<0.05), except for the 450 µgF/g dentifrice with Cacit/TMP (p>0.05). The 450 Cacit/TMP toothpaste and the positive control showed similar results (p>0.05) when diluted in water. A dose-response was observed between fluoride concentration in toothpastes and fluoride present in enamel, regardless of dilution. It was concluded that it is possible to enhance the remineralization capacity of low F concentration toothpaste by of organic (Cacit) and inorganic (TMP) compounds with affinity to hydroxyapatite.

O objetivo do presente trabalho foi avaliar in vitro o efeito de um dentifrício com reduzida concentração de fluoreto (450 µgF/g, NaF) associado ao citrato de cálcio (Cacit) e trimetafosfato de sódio (TMP) na remineralização do esmalte. Blocos de esmalte bovino tiveram sua superfície de esmalte polida seqüencialmente para determinação da dureza de superfície. Após o desenvolvimento de lesões artificiais de cárie, os blocos selecionados através da dureza de superfície foram submetidos a ciclagem de remineralização e tratamento diário com suspensões de dentifrícios (diluição em água deionizada ou saliva artificial): placebo, 275, 450, 550 e 1.100 µgF/g e com dentifrício comercial (controle positivo, 1.100 µgF/g). Ao término, determinou-se a dureza de superfície e em secção longitudinal, para cálculo da variação da dureza de superfície (%SH) e do conteúdo mineral (%∆Z). O fluoreto presente no esmalte também foi determinado. Os dados de %SH, %∆Z e fluoreto foram submetidos a análise de variância a dois critérios seguido pelo teste de Student-Newman-Keuls (p<0,05). O ganho mineral (%SH e %∆Z) foi maior para os dentifrícios diluídos em saliva (p<0,05), exceto para os dentifrícios 450 µg F/g com Cacit/TMP (p>0,05). Os dentifrícios 450 Cacit/TMP e controle positivo apresentaram resultados semelhantes (p>0,05) quando diluídos em água. Uma relação dose-resposta foi observada entre a concentração de fluoreto nos dentifrícios e o fluoreto presente no esmalte, independente da diluição. Concluiu-se que é possível melhorar a capacidade de remineralização de dentifrícios com reduzida concentração de fluoreto pela adição de compostos orgânico (Cacit) e inorgânico (TMP) com afinidade a hidroxiapatita.

Calcium citrate improves the epithelial-to-mesenchymal transition induced by acidosis in proximal tubular cells / Citrato de cálcio melhora a transição epitélio-mesenquimal induzida por acidose em células do túbulo proximal

INTRODUCTION: Epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) is a key event in renal fibrosis. The aims of the study were to evaluate acidosis induced EMT, transforming-growth-factor (TGF) β1 role and citrate effect on it. METHODS: HK2 cells (ATCC 2290) were cultured in DMEM/HAM F12 medium, pH 7.4. At 80% confluence, after 24 hr under serum free conditions, cells were distributed in three groups (24 hours): A) Control: pH 7.4, B) Acidosis: pH 7.0 and C) Calcium citrate (0.2 mmol/L) + pH 7.0. Change (Δ) of intracellular calcium concentration, basal and after Angiotensin II (10-6M) exposition, were measured to evaluate cellular performance. EMT was evaluated by the expression of α-smooth muscle actin (α-SMA) and E-cadherin by immunocytochemistry and/or Western blot. TGF-β1 secretion was determined by ELISA in cell supernatant. RESULTS: At pH 7.0 HK2 cells significantly reduced E-cadherin and increased α-SMA expression (EMT). Supernatant TGF-β1 levels were higher than in control group. Calcium citrate decreased acidosis induced EMT and improved cells performance, without reduction of TGF-β production. CONCLUSIONS: Acidosis induces EMT and secretion of TGF-β1 in tubular proximal cells in culture and citrate improves cellular performance and ameliorates acidosis induced EMT.

INTRODUÇÃO: A transição epitélio-mesenquimal (TEM) é um evento chave na fibrose renal. Os objetivos do estudo foram avaliar se o citrato seria capaz de reverter a TEM induzida por acidose, e qual seria o papel do fator de crescimento transformador (TGF) β1 neste evento. MÉTODOS: Células de túbulo proximal (HK2) foram cultivadas em meio DMEM-F12, pH 7,4. Após confluência, as células foram distribuídas em três grupos A) controle: pH 7,4, B) Acidose: pH 7,0 e C) Acidose: pH 7,0 + citrato de cálcio (0,2 mmol/L). A variação na concentração de cálcio intracelular, antes e após a adição de angiotensina II (10-6M) foi medida para avaliar o desempenho celular. TEM foi avaliada pela expressão de α-actina de músculo liso (α-SMA) e E-caderina por imunocitoquímica e/ou de Western blot. A secreção de TGF-β1 foi determinada por ELISA no sobrenadante. RESULTADOS: Em pH 7,0, houve redução significante na expressão de E-caderina e aumento de α-SMA indicando a presença de TEM e a concentração de TGF-β1 foi maior do que no grupo controle. O citrato de cálcio melhorou TEM induzida pela acidose e a resposta das células à angiotensina II, sem redução do TGF-β. CONCLUSÕES: Acidose induz TEM e secreção de TGF-β1 em células tubulares proximais em cultura e o citrato melhora o desempenho celular e a TEM induzida por acidose.

Anticaries effect of dentifrices with calcium citrate and sodium trimetaphosphate

Because of the growing concerns regarding fluoride ingestion by young children and dental fluorosis, it is necessary to develop new dentifrices. OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate the effect of dentifrices with calcium citrate (Cacit) and sodium trimetaphosphate (TMP) on enamel demineralization. MATERIAL AND METHODS: Enamel blocks (n=70), previously selected through surface hardness analysis, were submitted to daily treatment with dentifrices diluted in artificial saliva and to a pH-cycling model. The fluoride concentration in dentifrices was 0, 250, 450, 550, 1,000 and 1,100 µg F/g. CrestTM was used as a positive control (1,100 mg F/g). Cacit (0.25 percent) and TMP (0.25 percent) were added to dentifrices with 450 and 1,000 µg F/g. Surface hardness was measured again and integrated loss of subsurface hardness and fluoride concentration in enamel were calculated. Parametric and correlation tests were used to determine difference (p<0.05) and dose-response relationship between treatments. RESULTS: The addition of Cacit and TMP did not provide a higher fluoride concentration in enamel, however it reduced (p<0.05) mineral loss when compared to other dentifrices; the dentifrice with Cacit and TMP and a low fluoride concentration presented similar results when compared to a dentifrice with 1,100 mg F/g (p>0.05). CONCLUSIONS: Dentifrices with 450 and 1,000 µg F/g, Cacit and TMP were as effective as a gold standard one.

Influência de diferentes citratos na prevençäo da cárie dentária em ratos (Rattus norvegicus, var-albinus) / Influence of different citrates on the prevention of dental caries in rats (Rattus novergicus, var-albinus)

Este trabalho teve como objetivo verificar o efeito de diferentes citratos na incidência de cárie em ratos (Rattus norvegicus, var-albinus). Para tal, foram utilizados 96 ratos (48 machos e 48 fêmeas) com 21 dias de idade e distribuídos aleatoriamente em 6 grupos com 16 animais cada: G.I - dieta cariogênica (controle); G.II - dieta cariogênica + citrato de cálcio 1 por cento; G.III - dieta cariogênica + citrato de magnésio 0,9 por cento; G.IV - dieta cariogênica + citrato de potássio 0,65 por cento; G.V - dieta cariogênica + citrato de amônio bibásico, 0,45 por cento; G.VI - dieta cariogênica + ácido cítrico 0,38 por cento. A dieta cariogênica utilizada foi a 2000 a, proposta por REGOLATI; MUHLHEMANN 45. Os animais de todos os grupos, foram pesados inicialmente aos 21 dias de idade e depois semanalmente até atingirem 64 dias de idade após o que, foram sacrificados. Os segmentos ósseos maxilares e mandibulares foram removidos hemisseccionados e preparados para o exame das lesöes de cárie de sulco de molares segundo o método de KEYES 21. Os dados obtidos foram anotados em fichas apropriadas para posteriormente serem analisados estatisticamente, através de um teste näo paramétrico a um modelo de análise de variância a um critério de Kruskal-Wallis, permitindo desta maneira concluir que: - O íon citrato apresenta efeito anticariogênico. - O ácido cítrico, demonstrou um maior efeito na reduçäo da cárie dentária quando comparado aos sais de citrato, com diferenças estatisticamente significantes. - Os sais de citrato reduziram a incidência de cárie, a nível de significância estatística, porém, quando comparados entre si, näo demonstraram diferenças estatisticamente significantes. - Os diferentes tratamentos recebidos pelos ratos durante todo o período experimental näo alteraram o ganho de peso desses animais