Percepciones y creencias sobre criopreservación embrionaria en mujeres y hombres que se realizan técnicas de reproducción asistida en Santiago, Chile / Perceptions and beliefs about embryo cryopreservation in women and men who have assisted reproductive techniques in Santiago, Chile

RESUMEN Introducción y objetivos: Aunque la criopreservación embrionaria es frecuentemente utilizada como parte de las técnicas de reproducción asistida, no existe información cuantitativa de cómo las parejas infértiles viven la experiencia de tener embriones criopreservados en Chile. El objetivo del estudio fue examinar las percepciones y creencias que tienen mujeres y hombres respecto de sus embriones criopreservados, sus perspectivas respecto de la donación reproductiva y destino de los embriones remanentes. Metodología: 153 mujeres y hombres con embriones criopreservados provenientes de un hospital público, Instituto de Investigaciones Materno Infantil y un centro privado, Clínica Las Condes, en Santiago, Chile, respondieron durante mayo 2015 a mayo 2016 un cuestionario en línea, anónimo, respecto de sus percepciones y creencias sobre criopreservación embrionaria. Resultados: Los encuestados reconocen a sus embriones criopreservados como un hijo (53.2%) o un proyecto de hijo (40.7%). Sólo 8% los considera un grupo organizado de células; sobre el 60% rechaza la opción de descartarlos o usarlos para investigación. Los participantes del hospital público tenían mayor disposición a donar sus embriones remanentes a otras parejas que aquellos del privado (61% vs 40%; P=0.016). Un 34% de las personas encuestadas estuvo de acuerdo con donar embriones a parejas de un mismo sexo. Conclusión: Este estudio muestra que las personas chilenas tienen un vínculo emocional con sus embriones criopreservados y no consideran descartarlos. Los resultados de este estudio pueden servir para dar adecuada consejería a las personas que se realizan técnicas de reproducción asistida, de tal modo de tomar decisiones informadas respecto de la criopreservación.

ABSTRACT Background and objetive: Although embryo cryopreservation is frequently used as part of assisted reproductive technology, quantitave information addressing how infertile couples live the experience of having cryopreserved embryos is lacking in Chile. The aim of this study is to examine men and women's perception and beliefs regarding their cryopreserved embryos, as well as their perspective on embryo donation and disposition. Methods: 153 women and men with frozen embryos from a public hospital, Instituto de Investigactiones Materno Infantil, and a private clinic, Clínica Las Condes, in Santiago, Chile, responded between May 2015 and May 2016 to an anonymous online survey addressing their perceptions and beliefs concerning their cryopreserved embryos. Results: Respondents considered their frozen embryos to be equivalent to a child (53.2%) or a potential child (40.7%). Only 8% regard them as an organized group of cells. Over 60% of respondents disagree with destroying surplus embryos or using them for research. Participants from the public hospital are more willing to donate their embryos to another couple than those from the private center (61% vs 40%; P=0.016); 34% of respondents agreed to donate surplus embryos to same sex couples. Conclusion: This study reveals that Chilean couples are emotionally bound to their frozen embryos, and that discarding them is not an option. The results from this survey will help strengthen counseling for couples to enable them to make informed decisions regarding their surplus embryos.

Utilização de diferentes volumes de sêmen na realização do teste hiposmótico em touros adultos da raça nelore / Use of different semen volumes in hypoosmotic test of adult nelore bulls / El uso de diferentes volúmenes de semen en el test hiposmótico en toros adultos de la raza nelore

O objetivo deste estudo foi avaliar diferentes proporções de sêmen: solução hiposmótica na realização do teste hiposmótico e suas relações com a congelabilidade do sêmen de touros zebuínos. Utilizaram-se 15 ejaculados de três touros adultos da raça Nelore. No sêmen in natura realizou-se a avaliação física e morfológica, a coloração supravital e o teste hiposmótico. No teste hiposmótico foi utilizada uma solução com osmolaridade de 100 mOsm/Kg com 15 minutos de período de incubação a 37 ºC, tanto no sêmen in natura quanto no congelado/descongelado. Foram utilizados quatro volumes de sêmen em 1mL de solução hiposmótica: 10, 20, 50 e 100 µL. As amostras criopreservadas foram descongeladas e foram realizados os testes hiposmótico, coloração supravital, teste de termo-resistência lento e a coloração fluorescente. Os valores médios e desvios padrão do percentual de espermatozoides reativos ao teste hiposmótico em sêmen in natura e congelado/descongelado foram 69,3 ± 11,8 e 20,5 ± 6,8; respectivamente. Não houve correlação do teste hiposmótico com os aspectos físicos e morfológicos e os testes complementares realizados em sêmen in natura e congelado/descongelado. Nenhum teste de integridade de membrana plasmática dos espermatozoides foi capaz de classificar os touros quanto a sua congelabilidade do sêmen. Conclui-se que o teste hiposmótico pode ser realizado com 20 a 100 µL de sêmen in natura, e 10 a 100 µL de sêmen congelado/descongelado em 1 mL de solução hiposmótica, sem interferir em seus resultados, mas deve-se optar por 100 µL tanto para sêmen in natura e congelado/descongelado, porque melhora consideravelmente a leitura das lâminas.(AU)

The objective of this study was to evaluate different proportions of semen: hypoosmotic solution in the hypoosmotic swelling test and their relationship with semen freezability in Zebu bulls. A total of 15 ejaculates from three adult Nelore bulls were used. Physical and morphological features were analyzed in fresh semen, as well as supravital staining and hypoosmotic swelling test. In the hypoosmotic test, a hypoosmotic solution with 100 mOsm/kg osmolality using 15 minutes incubation at 37 °C was used both in fresh and frozen/thawed semen. Four semen volumes in 1-ml hyposmotic solution were used: 10, 20, 50 and 100 µL. Cryopreserved samples were thawed and submitted to hypoosmotic tests, supravital staining, slow thermo-resistance test and fluorescent staining. Mean values and standard deviations of the percentage of reactive sperm cells in the hypoosmotic test in fresh and frozen/thawed semen were 69.3 ± 11.8 and 20.5 ± 6.8, respectively. There was no correlation between the hypoosmotic test and physical and morphological features and the complementary tests performed on fresh and frozen/thawed semen. None of the plasma membrane integrity tests was able to predict bull semen freezability. It can be concluded that the hypoosmotic test can be performed with 20 to 100 µL fresh semen, and 10 to 100 µL of frozen/thawed semen in 1 mL of hypoosmotic solution without interfering with their results, but 100 µL should be used in both, because it considerably improves the view of the slides.(AU)

El objetivo de este estudio ha sido evaluar diferentes proporciones de semen: solución hiposmótica en la realización del test hiposmótico y sus relaciones con la congelabilidad del semen de toros cebú. Se utilizaron 15 eyaculados de tres toros adultos de la raza Nelore. En el semen fresco se realizó evaluación física y morfológica, la tinción supravital y test hiposmótico. En el test hiposmótico se ha utilizado una solución con osmolaridad de 100 mOsm/kg con un período de incubación de 15 minutos a 37 ºC, tanto en el semen fresco cuanto en el congelado/descongelado. Fueron utilizados cuatro volúmenes de 1 mL de solución hiposmótica: 10, 20, 50, y 100 µL. Las muestras criopreservadas fueron descongeladas y realizados los tests hiposmótico, tinción supravital, test de resistencia al fuego lento y la tinción fluorescente. Los valores medios y desvío estándar del porcentaje de espermatozoides reactivos al test hiposmótico en l semen fresco y congelado/descongelado fueron 69,3 ± 11,8 y 20,5 ± 6,8; respectivamente. No hubo correlación del test hiposmótico con las características físicas y morfológicas y pruebas adicionales en el semen fresco y congelado/descongelado. Ningún test de integridad de la membrana plasmática de los espermatozoides han sido capaz de clasificar a los toros cuanto su congelabilidad del semen. Se puede concluir que el test hiposmótico puede ser realizado con 20 a 100 µL de semen fresco, y de 10 a 100 µL de semen congelado/descongelado en 1 mL de solución hiposmótica, sin interferir en sus resultados, pero se debe optar por 100 µL para el semen fresco y congelado/descongelado, porque mejora significativamente la lectura de las láminas.(AU)

Sperm banking for male cancer patients: social and semen profiles

PURPOSE: Report the characteristics of cryopreserved semen from a cohort of male cancer patients, attitudes towards cryopreservation and outcomes of semen samples based on a 12-year cryopreservation program. MATERIAL AND METHODS: Data from 98 male cancer patients whose sperm samples were banked were evaluated. Demographic parameters, semen characteristics, destination of sperm banked samples and questionnaires answered by the patients regarding cryopreservation time were evaluated. RESULTS: The cancer diagnoses were testicle (56.1 percent), prostate (15.3 percent), Hodgkin’s lymphomas (9.2 percent), non-Hodgkin’s lymphomas (7.1 percent), leukemia (3.1 percent) and other malignancies (9.2 percent). The patients with testicular cancer presented lower sperm concentration (p < 0.001); however, there were no differences with the percentage of normozoospermic patients among cancer type groups (p = 0.185). A shorter time between cancer diagnosis and sperm banking was observed for testicular and prostate cancer patients (p < 0.001). Most of the patients (89.5 percent) favored sperm banking as a fertility preservation method. CONCLUSIONS: Although less than 20 percent of banked sperm samples were disposed of, the majority of patients related sperm banking with safe for fertility preservation. Our results show that all male cancer patients of reproductive age facing cancer treatment could be offered sperm banking.

Criopreservacion de pronucleos: rol en el programa de fertilizacion asistida

Objetivo: Determinar el rol de la criopreservación (CP) de pronúcleos (PN), como una herramienta para disminuir la incidencia de embarazos múltiples y dar otra oportunidad de transferencia embrionaria, sin requerir estimulación ovárica nuevamente, en parejas con infertilidad que requieren como tratamiento algún tipo de procedimiento de Fertilización Asistida (FA). Material y Método: Se analizaron los resultados de 545 procedimientos de FA entre marzo del 2000 y junio del 2003. Resultados: La incorporación de la CP se logra en diciembre del 2001, criopreservando hasta la fecha el 51,3% de las parejas que tiene más de 6 folículos a aspirar. Se han criopreservado 623 PN dando un promedio 6,4 PN por pareja. Se han descongelado 166 PN, sobreviviendo 134 PN, lo que implica un 80,7%. Ciento catorce PN clivaron a embrión de 4 células, equivalente a un 85,1%. Se han transferido 114 PN en 39 ciclos con un promedio de 2,9 embriones por pareja, dando origen a 12 embarazos clínicos (30,7%) con una tasa implantacional del 11,4%. Se observa una reducción del número de embarazos múltiples en dobles del 23% al 15,5%, en triples del 7,6% al 2,2% y la no ocurrencia de cuádruples o más, al comparar el período 2000-diciembre 2001 (sin CP de PN), con diciembre de 2001-junio del 2003.

Criopreservación embrionaria: su influencia en la tasa de embarazo por ciclo de captación ovocitaria en un programa de fertilización asistida / Embryo criopreservation: its influence in pregnancy rate by ovocytic captation cycle in a program of in vitro fertilization

El objetivo es evaluar el aumento del potencial reproductivo de un único ciclo de captación ovocitaria para fertilización asistida a través de la criopreservación embrionaria. Para ello se evaluaron retrospectivamente, durante el período 1/1/98 al 31/12/98, 223 ciclos de captación ovocitaria para fertilización asistida en los que se criopreservaron embriones. De ellos 60 fueron diferidos por riesgo de síndrome de hiperestimulación ovárica congelando el total de los embriones, quedando un grupo de 163 pacientes en los cuales se transfirieron embriones frescos y que además tuvieron suficientes embriones que fueron criopreservados. De las pacientes que no se embarazaron con la primera transferencia de embriones frescos o abortaron o tuvieron un ectópico (n= 124), se realizaron 94 transferencias de embriones criopreservados. Las tasas de embarazo clínico y evolutivo en la transferencia en fresco fueron 29.4 por ciento y 23.9 por ciento respectivamente. Las tasas de embarazo clínico y evolutivo con transferencia de embriones criopreservados fueron del 22.3 por ciento y 18.08 por ciento respectivamente. Por lo tanto, la tasa acumulativa de embarazo clínico y evolutivo en estas 133 pacientes que realizaron 2 transferencias en caso de fracaso inicial es 51.87 por ciento y 42.1 por ciento respectivamente. Por lo tanto concluimos que la criopreservación embrionaria aumenta significativamente las posibilidades de embarazo por ciclo de captación ovocitaria en caso de fracasar la transferencia en fresco

Agua de coco como soluçäo crioprotetora de espermatozóides humanos / Coconut water as a criopreservant solution for human sperm

A criopreservaçäo de sêmen humano é utilizada há cerca de 50 anos. O crioprotetor universal é o glicerol. A associaçäo de substâncias ricas em açúcares e proteínas melhora a sobrevida dos espermatozóides após o congelamento-descongelamento. Neste trabalho compara-se essa sobrevivência criopreservando-se sêmen, utilizando-se o "Test Yolk Buffer - TYB" (meio que utiliza gema de ovo e citrato), comercialmente utilizado, e glicerol com água de coco. Os resultados de sobrevivência espermática pós-descongelamento näo apresentaram diferenças estatisticamente significantes entre os dois meios. Em conclusäo, a água de coco é um eficiente co-crioprotetor do espermatozóide humano