Evaluation of cysticercus-specific IgG (total and subclasses) and IgE antibody responses in cerebrospinal fluid samples from patients with neurocysticercosis showing intrathecal production of specific IgG antibodies / Avaliação das respostas de anticorpos anti-cisticercos IgG (total e subclasses) e IgE em amostras de líquido cefalorraquidiano de pacientes com neurocisticercose apresentando produção intratecal de anticorpos específicos IgG

In the present study, an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) standardized with vesicular fluid of Taenia solium cysticerci was used to screen for IgG (total and subclasses) and IgE antibodies in cerebrospinal fluid (CSF) samples from patients with neurocysticercosis showing intrathecal production of specific IgG antibodies and patients with other neurological disorders. The following results were obtained: IgG-ELISA: 100% sensitivity (median of the ELISA absorbances (MEA)=1.17) and 100% specificity; IgG1-ELISA: 72.7% sensitivity (MEA=0.49) and 100% specificity; IgG2-ELISA: 81.8% sensitivity (MEA=0.46) and 100% specificity; IgG3-ELISA: 63.6% sensitivity (MEA=0.12) and 100% specificity; IgG4-ELISA: 90.9% sensitivity (MEA=0.85) and 100% specificity; IgE-ELISA 93.8% sensitivity (MEA=0.60) and 100% specificity. There were no significant differences between the sensitivities and specificities in the detection of IgG-ELISA and IgE-ELISA, although in CSF samples from patients with neurocysticercosis the MEA of the IgG-ELISA was significantly higher than that of the IgE-ELISA. The sensitivity and MEA values of the IgG4-ELISA were higher than the corresponding values for the other IgG subclasses. Future studies should address the contribution of IgG4 and IgE antibodies to the physiopathology of neurocysticercosis.

No presente estudo, uma reação imunoenzimática (ELISA) padronizada com o fluido vesicular de cisticercos de Taenia solium foi utilizada para avaliar as respostas de anticorpos anti-cisticercos IgG (total e subclasses) e IgE em amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com neurocisticercose apresentando produção intratecal de anticorpos específicos IgG e pacientes com outras desordens neurológicas. Os seguintes resultados foram obtidos: ELISA-IgG: 100% de sensibilidade (mediana das absorbâncias das reações ELISA (MAE)=1,17) e especificidade 100%; ELISA-IgG1: sensibilidade 72,7% (MAE=0,49) e especificidade 100%; ELISA-IgG2: sensibilidade 81,8% (MAE=0,46) e especificidade 100%; ELISA-IgG3: sensibilidade 63,6% (MAE=0,12) e especificidade 100%; ELISA-IgG4: sensibilidade 90,9% (MAE=0,85) e especificidade 100%; ELISA-IgE: sensibilidade 93,8% (MAE=0,60) e especificidade 100%. Não foram encontradas diferenças significativas entre as sensibilidades e especificidades das reações ELISA-IgG e ELISA-IgE, embora a MAE da reação ELISA-IgG em amostras de LCR de pacientes com neurocisticercose tenha sido significativamente maior que a obtida com ELISA-IgE. Os valores de sensibilidade e MAE da reação ELISA-IgG4 foram maiores que os valores correspondentes para as outras subclasses da IgG. Estudos futuros deverão abordar a contribuição dos anticorpos IgG4 e IgE na fisiopatologia da neurocisticercose.

Cysticercosis in experimentally and naturally infected pigs: parasitological and immunological diagnosis / Cisticercose em suínos infectados experimentalmente e naturalmente: diagnósticos parasitológico e imunológico

Our objective was to evaluate the diagnosis of swine cysticercosis by examining "ante mortem" (inspection of the tongue), "post mortem" (inspection and detailed necropsy) and ELISA for research in serum of antibodies (Ab-ELISA) and antigens (Ag-ELISA). Seven (7) pigs were experimentally infected orally with eggs of Taenia solium and another 10 were naturally infected. In the pigs experimentally infected, inspection of the tongue was negative in all animals, in the routine inspection detailed necropsy and cysticercis were identified in all of them. In pigs with heavy natural infection, inspection of the tongue identified cysticerci in two (20%), while at inspection with necropsy the parasites were identified in large quantities in all animals. In ELISA for antibody search (Ab-ELISA) TS-14 recombinant protein was used, and in search for antigen (Ag-ELISA) a monoclonal antibody against this protein. In animals experimentally infected, blood was collected weekly for 140 days. The Ab-ELISA identified an increase in titers of antibody to cysticerci 21 days after infection, and at the end of the experimental period six animals (86%) were positive to the test. The search for circulating antigens (Ag-ELISA) was positive in two pigs 28 to 91 days after infection. All naturally infected pigs were positive for Ag-ELISA and Ab-ELISA. The search for antibodies and antigens by ELISA in serum from 30 pigs of a local farm and without history of cysticercosis was negative. Thus, the use of TS-14 antigen in ELISA test (Ab-ELISA) can be useful for the diagnosis of cysticercosis in pigs with low infection.

Nosso objetivo foi avaliar o diagnóstico de cisticercose suína através do exame "ante mortem" (inspeção da língua), "post mortem" (inspeção e necropsia detalhada) e teste de ELISA para a pesquisa no soro de anticorpos (Ab-ELISA) e antígenos (Ag -ELISA). Sete (7) suínos foram infectados experimentalmente por via oral com ovos de Taenia solium e outros 10 eram portadores de infecção natural generalizada. Nos suínos experimentalmente infectados, a inspeção da língua foi negativa em todos os animais, na inspeção 4 (57%) estavam infectados, a necropsia detalhada identificou cisticercos em todos os animais. Nos animais com infecção natural generalizada, a inspeção da língua identificou cisticercos em 2 (20%), enquanto que a inspeção e a necropsia os parasitas foram identificados em grande quantidade em todos os animais. No teste de ELISA para a pesquisa de anticorpos (Ab-ELISA) foi utilizada a proteína recombinante TS-14 e para a pesquisa de antígenos (Ag-ELISA) um anticorpo monoclonal produzido contra esta proteína. Nos animais experimentalmente infectados o sangue foi coletado semanalmente por um período de 140 dias. O Ab-ELISA identificou um aumento nos títulos de anticorpos para cisticercos 21 dias após a infecção, sendo que no final do período experimental 6 animais (86%) foram positivos ao teste. A pesquisa de antígenos circulantes (Ag-ELISA), foi positiva em 2 animais, entre os dias 21 e 91 após a infecção . Todos os suínos com infecção natural generalizada foram positivos para Ag-ELISA e Ab-ELISA.A pesquisa de anticorpos e antígenos pelo ELISA realizada no soro de 30 suínos procedentes de uma criação local sem historia de cisticercose foi negativa. Assim o uso do antígeno TS-14 (Ac-ELISA), pode ser útil para o diagnóstico da cisticercose em suínos com baixa infecção.

Evaluation of two Taenia solium cysticercal antigenic preparations (vesicular fluid and a glycoprotein fraction with affinity for lentil lectin) for the immunodiagnosis of neurocysticercosis by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) / Avaliação de duas preparações antigênicas de cisticercos de Taenia solium (líquido vesicular e uma fração glicoprotéica com afinidade para lentil lectina) para o imunodiagnóstico da neurocisticercose usando uma técnica imunoenzimática (ELISA)

OBJECTIVE: To evaluate the performance of two antigenic preparations (vesicular fluid - VF and a glycoprotein fraction, LLa-Gp fraction, purified from a whole parasite extract by lentil lectin affinity chromatography) from Taenia solium cysticerci for the immunodiagnosis of neurocysticercosis. METHOD: Fifty-six cerebrospinal fluid (CSF) samples (22 from patients with neurocysticercosis and 34 from patients with other neurological disorders) and 57 serum samples (22 from patients with neurocysticercosis, 18 from patients with other infections and 17 from presumably healthy persons) were assayed for anticysticercal IgG antibodies with an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). RESULTS: The VF ELISA showed 100 percent sensitivity and specificity in CSF and serum samples, whereas the sensitivity and specificity of the LLa-Gp ELISA were, respectively, 90.9 percent and 97.1 percent, with the CSF samples and 95.5 percent and 100 percent with serum samples. There was no significant difference in the sensitivity and specificity of the two antigenic preparations used to screen CSF and serum samples. CONCLUSION: Considering the complexity and high cost of obtaining the LLa-Gp fraction, VF could be more suitable for screening specific antibodies by ELISA in CSF and serum samples from patients with neurocysticercosis.

OBJETIVO: Avaliar o desempenho de duas preparações antigênicas (líquido vesicular - LV e uma fração glicoprotéica, fração LL a-Gp, purificada do extrato total dos parasitas por cromatografia de afinidade com lentil lectina) de cisticercos de Taenia solium para o imunodiagnóstico da neurocisticercose. MÉTODO: Cinquenta e seis amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) (22 de pacientes com neurocisticercose e 34 de pacientes com outras doenças neurológicas) e 57 amostras de soro (22 de pacientes com neurocisticercose, 18 de pacientes com outras infecções e 17 de pessoas presumivelmente sadias) foram analisadas quanto à presença de anticorpos IgG anti-cisticercos com uma reação imunoenzimática (ELISA). RESULTADOS: A reação ELISA LV apresentou 100 por cento de sensibilidade e especificidade em amostras de LCR e soro, enquanto a sensibilidade e a especificidade da reação ELISA LLa-Gp em amostras de LCR e soro foram de 90,9 por cento e 97,1 por cento e 95,5 por cento e 100 por cento, respectivamente. Não foram encontradas diferenças significativas na sensibilidade e especificidade das duas preparações antigênicas utilizadas, tanto para amostras de LCR como para amostras de soro. CONCLUSÃO: Considerando a complexidade e o alto custo de obtenção da fração LLa-Gp, o LV pode ser mais adequado para a pesquisa de anticorpos específicos por ELISA em amostras de LCR e soro de pacientes com neurocisticercose.

Seroprevalence of Tissue Invading Parasitic Infections Diagnosed by ELISA in Korea

Seroprevalence of the IgG antibodies for Clonorchis sinensis, Paragonimus westermani, Taenia solium metacestode (cysticercus), and Spirometra erinacei plerocercoid (sparganum) was measured using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in sera of patients in Korea from 1993 to 2006. A total of 74,448 specimens referred nationwide from 121 hospitals revealed an IgG positive rate of 7.6% for the 4 parasites. The IgG positive rate (18.7%) for the 4 parasites in 1993 decreased gradually to 6.6% in 2006. Individual positive rate decreased from 5.2% (1993) to 1.6% (2006) for C. sinensis, from 2.8% (1993) to 1.1% (2006) for P. westermani, from 8.3% (1993) to 2.2% (2006) for cysticercus, and from 2.6% (1993) to 1.6% (2006) for sparganum. The positive rate was highest (21.2%) in the group of patients who ranged in age from 50-59 yr old, and in the group that was referred from the Seoul area (55.9%). In conclusion, our results suggest that tissue invading parasitic infections should always be included in differential diagnosis for patients with eosinophilia associated lesions of the central nervous system, liver, and lungs in Korea.

Prevalence of human cysticercosis and taeniasis in rural Goa, India.

A cross sectional study among 450 individuals selected by strafified random sampling was carried out in rural Goa to find out the prevalence of cysticercosis and taeniasis, as well as to study the role of various factors associated with this diseases. The study participants were administered a pre-tested structured questionnaire and subsequently blood and stool samples were examined. SPSS software was used to analyze the data statistically. The sero-prevalence of cysterosis was 22.4%, which increased with age. Prevalence of taeniasis was 9.7% by stool examination. Individuals with taeniasis were thrice more likely to have cysticercosis; however no association between sero-positivity for cysterosis and pork consumption as well as religion could be established. The study confirmed a high sero-prevalence of cysticercosis in Goa underscoring the need to general awareness about good cooking habits and sanitation.

Immunodiagnosis of human neurocysticercosis by using semi-purified scolex antigens from Taenia solium cysticerci

Crude antigen and semi-purified proteins from scolices of Taenia solium cysticerci were evaluated for the immunodiagnosis of human neurocysticercosis neurocysticercosis. Semi-purified proteins obtained by electrophoresis on polyacrylamide gel and by electroelution were tested by means of the immunoenzymatic reaction against sera from normal individuals and from patients with neurocysticercosis or other parasitic diseases. The 100kDa protein provided 100 percent sensitivity and specificity in the immunodiagnosis. When 95 or 26kDa proteins were used, 95 and 100 percent sensitivity and specificity were obtained, respectively. The assays involving crude antigen and sera from normal individuals or from patients with neurocysticercosis, diluted to 1:256, gave excellent agreement with those in which 100, 95 or 26kDa proteins were tested against the same serum samples diluted to 1:64. (Kappa: 0.95 to 1.00). Crude scolex antigen may be useful for serological screening, while 100, 95 or 26kDa protein can be used in confirmatory tests on neurocysticercosis-positive cases.

Antígeno bruto e proteínas semipurificadas de escóleces de cisticercos de Taenia solium foram avaliados para o imunodiagnóstico da neurocisticercose humana neurocisticercose. As proteínas semipurificadas, obtidas por eletroforese em gel de poliacrilamida e eletroeluição, foram testadas na reação imunoenzimática contra soros de indivíduos normais e de pacientes com neurocisticercose ou outras parasitoses. A proteína de 100kDa proporcionou 100 por cento de sensibilidade e especificidade no imunodiagnóstico. Quando a proteína de 95 ou 26kDa foi empregada, foram obtidos 95 e 100 por cento de sensibilidade e especificidade, respectivamente. Os ensaios envolvendo antígeno bruto e soros de indivíduos normais ou de pacientes com neurocisticercose, diluídos a 1:256, tiveram ótima concordância com aqueles onde a proteína de 100, 95 ou 25kDa foi testada contra os mesmas amostras de soro diluídas a 1:64 (Kappa: 0,95 a 1,00). O antígeno bruto de escolex poderá ser empregado na triagem sorológica enquanto a proteína de 100, 95 ou 26kDa nos testes confirmatórios dos casos positivos de NC.

Influence of the cerebrospinal fluid laboratory parameters in the ELISA test for neurocysticercosis using a total cysticerci antigen

Avaliar se os parâmetros do líquido cefalorraquidiano (LCR) podem influenciar na reatividade da resposta imune específica do LCR na neurocisticercose (NC). Amostras de LCR de 109 pacientes foram analisadas e classificadas em três grupos, de acordo com as manifestações neurológicas e reatividade do teste de Ab-ELISA para NC no LCR. Grupo A, 18 pacientes com enfermidades neurológicas compatíveis com NC e reatividade do teste Ab-ELISA para NC no LCR; grupo B, 50 pacientes com enfermidades neurológicas não compatíveis com NC e reatividade do teste Ab-ELISA para NC no LCR; grupo C, 41 pacientes com enfermidades neurológicas não compatíveis com NC e na ausência de reatividade do teste de Ab-ELISA para NC no LCR. A análise do LCR do grupo A foi compatível com NC. O grupo B apresentou maior freqüência e intensidade da pleocitose, da presença de hemácias no LCR, hiperproteinorraquia, reatividade imune para outros agentes etiológicos em comparação aos grupos A e C (p<0.05). Os dados indicam que o processo inflamatório e os elevados níveis de concentração da proteína no LCR podem influenciar na ocorrência de reações falso positivas de Ab-ELISA para NC. Destacamos a importância da correlação clínico-laboratorial para o diagnóstico de neurocisticercose e o uso de testes laboratoriais confirmatórios.

Prevalence of anti-cysticercus antibodies in slum, rural and urban populations in and around Union territory, Chandigarh.

A comparative analysis for the prevalence of anti-cysticercus antibodies was carried out in urban, rural and slum population in & around Union territory of Chandigarh. Prevalence of anti-cysticercus antibodies in different population groups was found to be 17.3% with highest prevalence (24%) reported from slum areas followed by that of rural areas (20%) and least in the urban organized sectors (8%). Only 8% of the seropositive individuals had history suggestive of neurocysticercosis. Overall, females showed the highest anti-cysticercus response of 20.4%.

Cysticercus antibodies and antigens in serum from blood donors from Pondicherry, India

O objetivo do presente estudo foi examinar o soro de doadores de sangue que são aparentemente saudáveis e residentes em Pondicherry ou seus distritos vizinhos do estado de Tamil Nadu, para a detecção específica dos antígenos e anticorpos de Cysticercus. Um total de 216 amostras de sangue foram coletadas de doadores de sangue do "Central Blood Bank, JIPMER Hospital", Pondicherry, Índia, durante janeiro e fevereiro de 2004. ELISA foi usado para demonstrar anticorpos anti-Cysticercus e co-aglutinação (CoA) foi utilizada para detectar antígenos no soro. 14 (6.48%) homens foram positivos para antígenos e anticorpos anti-Cysticercus. Destes, oito soros foram positivos para anticorpos anti-Cysticercus e seis positivos para antígenos. Os resultados do presente estudo mostram que a detecção de antígenos de Cysticercus no soro pode ser um adjunto útil para o teste de anticorpos para estudos de soroprevalência de cisticercose na comunidade. O presente estudo é o primeiro do tipo, realizado para determinar tanto anticorpos de Cysticercus como antígenos nas amostras de soro coletadas de doadores de sangue aparentemente saudáveis.

Effect of Cysticercus cellulosae fractions on the respiratory burst of pig neutrophils

Neutrófilos, eosinófilos e macrófagos são células que interagem com os parasitas no corpo do hospedeiro desenvolvendo atividade antiparasitária. A reação inicial destes leucócitos é a geração de espécies reativas de oxigênio (ERO) a fim de expulsar os parasitas. No presente trabalho estudou-se o efeito da fração total, de escolex e de membrana de Cysticercus cellulosae sobre a explosão respiratória de neutrófilos de suínos. A produção de peróxido de hidrogênio (H2O2) pelos neutrófilos incubados com as frações de C. cellulosae apresentou acréscimo de 190% (extrato total), 120% (escolex) e 44% (membrana). Alta atividade de catalase (33%, 28% e 28% para extrato total, escolex e membrana respectivamente) foi observada nos neutrófilos incubados com as frações de metacestodeo, podendo representar a própria proteção celular do neutrófilo. Frações de escolex e de membrana aumentaram a capacidade fagocitária dos neutrófilos (44% e 28%, respectivamente). Por outro lado, a fração total do cisticerco não alterou a capacidade fagocitária dos neutrófilos, o que pode estar relacionada com modificações na função da membrana celular causadas pela alta produção de ERO na presença da fração total. O extrato total de C. cellulosae é tóxico para os neutrófilos, indicada pela diminuição da capacidade fagocitária, provavelmente pela indução de alto nível de ERO. A diferença de toxicidade do extrato total, de escolex e de membrana para os neutrófilos pode ocorrer pelo efeito antigênico presente no fluido vesicular no extrato total de C. cellulosae.

Department of Paediatrics, Nalanda Medical College, Patna.

Cysticercosis is the most common parasitic disease of the central nervous system. The disease has worlwide distribution. The cysticerci might lodge in the brain parenchyma, spinal cord, eyes, ventricular system, subarachnoid space and muscle. These are most often seen in basal meninges. The presence of human lymphocyte antigen-related antigens on the surface of cysticerci has a direct relationship with microscopic signs of damage to cysticerci. The clinical manifestations depend upon number and topography of lesions, the individual immune response to the parasite and the sequelae of previous infestations. The diagnostic criteria of neurocysticercosis can be based on absolute criteria, major criteria, minor criteria and epidemiological criteria. Computerised tomography (CT) head is still most useful diagnostic tool for the diagnosis of neurocysticercosis but magnetic resonance imaging has some advantages over computerised tomography. The mainstay of therapy lies on medical and surgical intervention. Medical therapy consists of cysticidal drugs. Surgical therapy is indicated in intraventricular and subarachnoid neurocysticercosis. Steriods are used for anti-oedema measures. Anti-epileptics can also be tried. The measures for prevention of cysticercosis are proper disposal of human waste, treatment of water contaminated with human faeces before its use in irrigation of vegetable cultivation, proper cooking of pork and repeated treatment in taenia carriers.

Evaluation of cysticercus fasciolaris antigen for the immunodiagnosis of neurocysticercosis.

Cysticercus cellulosae antigen has been frequently used to detect antibodies for immunodiagnosis of neurocysticercosis. We have, for the first time, used membrane extract of cysticercus fasciolaris, the larval stage of Taenia taeniaeformis, in ELISA, with successful results. IgM and IgG antibodies against cysticercus were measured in serum from cases of neurocysticercosis (217), normal and diseased controls (89). 203 sera from cases of neurocysticercosis were positive for either or both IgG and IgM antibodies while 157/217 cases showed IgM and 158/217 showed IgG antibodies. Ten controls showed false postivity in IgG ELISA. Eight of these cases also had IgM antibodies. The test had an overall sensitivity of 93.54% and a specificity of 84.2% with a positive predictive value of 93.54% and a negative predictive value of 84.2%. Cysticercus fasciolaris can be conveniently produced in the experimental laboratory host, Rattus rattus, and would be of practical value in the immunodiagnosis of cysticercosis in humans.

Detection of antibodies to Taenia solium in sera of patient with epilepsy using ELISA.

Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was used for detection of antibodies to cysticerci of Taenia solium in patients suffering from suspected neurocysticercosis. Serum antibodies to cysticercosis were detected in 10.4% of the patients. Antibodies were absent in healthy controls. No cross-reactivity was observed in sera from patients with other parasitic diseases viz. toxoplasmosis, filariasis and kala-azar. However sera from patients with hydatid disease showed cross reactions in 20%. Age group distribution showed gradual non-significant increase in seropositivity rates with advancing age. No significant gender difference, was observed. Analysis of dietary habits of patients showed statistically significant difference in seropositivity rates in non-vegetarians (15.4%) as compared to vegetarians (6.9%) (P value < .001).

Interleukin-5 and interleukin-10 are major cytokines in cerebrospinal fluid from patients with active neurocysticercosis

Neurocysticercosis (NCC) is a common neurological disorder especially in developing countries, caused by infection of the brain with encysted larvae of the tapeworm Taenia solium. Seizures are a common finding associated with this disease. The objective of the present study was to evaluate the correlation between the levels of various cytokines present in the cerebrospinal fluid (CSF) of patients with NCC and the severity of the disease. The levels of the cytokines IL-1î, TNF-alpha, IL-5, IL-10 and IFN-gamma were determined in the CSF of 22 patients with active NCC, 13 patients with inactive NCC and 15 control subjects. CSF from patients with active NCC presented significantly higher IL-5 levels compared to control subjects. IL-5 and IL-10 levels in CSF from NCC patients with inflammatory CSF were significantly higher than those detected in non-inflammatory CSF. These results show a predominant Th2 lymphocyte activation in human NCC and also indicate the possible use of cytokines in the CSF as a marker for the differential diagnosis between inactive disease and the active form of NCC

Cisticercose: fatores relacionados à interaçäo parasito-hospedeiro, diagnóstico e soroprevalência / Aspects of the host/parasite interacion, diagnosis and seroprevalence of cysticercosis

A cistecercose humana é uma doença caracterizada pela presença de larva metacestóidea de Taenia solium nos tecidos e decorrente da ingestäo acidental de ovos viáveis, provenientes da matéria decal de indivíduos portadores do verme adulto. Dentre as possíveis localizaçöes do cisticerco, destaca-se o Sistema Nervoso Central (SNC) pelo poliformismo, pela gravidade dos sintomas e pelas dificuldades diagnósticas. O curso da doença é particularmente dependente de uma variedade de reaçöes imunes e inflamatórias desencadeadas pela interaçäo parasito-hospedeiro, que se desenvolve em diferentes graus de complexidade, desde a ativaçäo e migraçäo das oncosferas, a partir da luz do intestino delgado, até a implantaçäo e sobrevida da larva em tecidos do organismo hospedeiro. O estágio de evoluçäo, a quantidade e a localizaçäo dos cisticercos exercem açäo sobre a sintomatologia e podem influenciar nos diagnósticos imunológico e por imagem. O duagnóstico definitivo somente pode ser firmado através da demonstraçäo do parasito por pesquisa direta; entretanto, questöes de ordem técnica e de caráter invasivo limitam seu emprego. Devido ao alto custo, a tomografia computadorizada e a ressonância nuclear magnética näo säo acessíveis à maioria da populaçäo...

ELISA test for the diagnosis of cysticercosis in pigs using antigens of Taenia solium and Taenia crassiceps cysticerci

In the present study ELISA was standardized for the diagnosis of swine cysticercosis based on necropsy parameters and confirmed positive and negative control sera. Serum samples from pigs with other infections were also assayed to determine possible cross-reactions. Four antigens were assayed: from Taenia crassiceps vesicular fluid (VF-Tcra) and crude larvae extract (T-Tcra), and from Taenia solium extracts of scolex (S-Ts) and of larvae (T-Ts). A checkerboard evaluation of antigen, serum and conjugate dilutions, as well as the use of Tween-20 and skim cow milk in wash and blocking solution had a marked effect on improving ELISA performance. All the antigens showed a good performance, but VF-Tcra was the best, with 96.0 per cent and 80.0 per cent sensitivities for cut-offs respectively at 2sd and 3sd, and corresponding specificities of 97.5 per cent and 100.0 per cent. Cross-reactivity was observed only with hydatidosis and ascaridiosis. In view of the high performance observed, the ELISA test should be recommended for the diagnosis of cysticercosis in suspected swine in slaughterhouses and for the screening of cysticercosis in swine production. These results will support integrated measures of cysticercosis control throughout the chain of swine production, effectively contributing to public health.

Imunologia da neurocisticercose / Immunology of neurocysticercosis

A neurocisticercose é a parasitose mais importante do Sistema Nervoso Central. A resposta imune celular do hospedeiro frente ao parasita da cisticercose tem sido exaustivamente estudada através de infecçäo experimental em animais com interesse na compreensäo da relaçäo parasita-hospedeiro. Os resultados revelam uma alteraçäo no balanço das células T auxiliares CD4+ através da up-regulaçäo de Th2 e down-regulaçäo de Th1 localizada nas proximidades do parasita, exibindo uma resposta imune Th2-like, benéfica para a sobrevida do parasita. A imunidade humoral tem sido investigada para a detecçäo de anticorpos específicos anti-Cysticercus cellulosae no líquido cefalorraquidiano, considerada um dos elementos de importância no diagnóstico da infecçäo. Os autores revisam os principais eventos da resposta imunológica celular e humoral que estäo presentes na neurocisticercose e os métodos imunológicos utilizados para o seu diagnóstico laboratorial

Determinación y caracterización de antígenos de cisticercus de T. solium, reconocidos por líquidos cefalorraquídeos de pacientes con neurocisticercosis / Determination and characterization of T. solium cysticercus antigens, recognized by cerebrospinal fluid from neurocysticercosis patients

La cisticercosis humana es una parasitosis causada por T. solium la cual posee una alta prevalencia en aíses en desarrollo constituyéndose en un problema de salud pública, y en donde la neurocisticosis (NCC) es su forma más grave ya que compromete el sistema nervioso central (SNC). Debido a que las técnicas desarrolladas para el inmunodiagnóstico de NCC presentan problemas de sensibilidad y especificidad, en éste estudio se desarrollo un método analítico sensible para la identificación de antígenos específicos de cisticerco de T. solium reconocidos por líquidos cefalorraquídeos (LCRs) de pacientes con (NCC). La identificación de un número definido de antígenos de T. solium potenciales para el inmunodiagnóstico permitiría posteriormente la purificación de proteínas para el desarrollo de técnicas inmunodiagnósticas. Los antígenos presentes en LIV de cisticerco, fueron modificados químicamente empleando Biotina-NHS (Biotin-Amido-Caproato-N-hidroxisuccinimida éster) seguido por una inmunoprecipitación utiliando LCR. Los complejos antígeno-anticuerpo fueron capturados empleando agarosa anti IgG humana y posteriormente, las proteínas resueltas por electroforesis, seguida de transferencia a papel de nitrocelulosa. Los antígenos biotinilados, fueron reconocidos utilizando estreptavidina conjugada a fosfatasa alcalina y la reacción se visualizó empleando el sustrato NBT (nitro blue tetrazolium) y BCIP (4-cloro-5-bromo-4cloro-3-indolyl phospahate) (Sigma). Se identificaron 5 polipeptidos principales de 100 kDa, 70 kDa, 50 kDa, 35 kDa y 24 kDa por el ensayo de inmunoprecipitación. Los polipéptidos de 100 kDa, 50 kDa y 24 kDa dueron reconocidos por LCRs de pacientes clínica y serológicamente positivos por ELISA para NCC (94 por ciento, 94 por ciento y 78 por ciento respectivamente), además éstos antígenos fueron reconocidos por LCRs de pacientes con otras neuropatologías de SNC (94 por ciento, 76 por ciento y 47 por ciento respectivamente) e igualmente por LCRs de pacientes sospechosos clínicamente pero serológicamente negativos por ELISA para NCC (21 por ciento, 24 por ciento, y 13 por ciento respectivamente). Los antígenos de 70 kDa fueron reconocidos por el 86 por ciento y 90 por ciento respectivamente, de los LCRs de pacientes clínica y serológicamente positivos por ELISA para NCC. Estos antígenos no fueron reconocidos por LCRs de pacientes con otras neuropatologías del SNC. Sin embargo,...

DOT-Elisa for the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in cerebrospinal fluid using a new solid phase (resin-treated polyester fabric) and Cysticercus longicollis antigens

Foi desenvolvido o teste dot-Elisa para deteccao de anticorpos em liquido cefalorraquiano (LCR) no diagnostico imunologico da neurocisticercose humana, utilizando antigenos de membrana e escolex de Cysticercus cellulose (M+E-Cc) e, alternativamente, membrana (M) e liquido vesicular (LV) de Cysticercus longicollis (Cl) covalentemente ligados a um novo suporte constituido de tecido de poliester-resina de N-metilolacrilamida (dot-TR). O teste foi realizado a temperatura ambiente, com tempos de incubacao reduzidos e sem necessidade de cuidados na manipulacao do suporte...