Aspectos da biologia reprodutiva de Boa constrictor constrictor: um estudo histológico dos testículos nos períodos reprodutivos de quiescência e máxima atividade / Boa constrictor constrictor reproductive biology aspects: the testes histological study in the reproductive periods of quiescence and maximal activity

As serpentes pertencem ao segundo maior grupo dentro dos répteis, podendo apresentar sazonalidade quanto à espermatogênese, com produção descontínua ou contínua. O presente trabalho tem como objetivo caracterizar aspectos da biologia reprodutiva de Boa constrictor constrictor com base nos achados histológicos dos testículos nos períodos de máxima atividade (período de gametogênese) e quiescência. Os testículos de dois espécimes de Boa c. constrictor (7767 e 11752) foram cortados a uma espessura de 3µm em micrótomo, corados com azul de toluidina 1%, fotodocumentados e descritos. A presença de espermatozoides na luz do túbulo seminífero no indivíduo 7767 indica um período de máxima gametogênese, enquanto o lúmen dos túbulos seminíferos pouco evidentes, sem a presença de espermatozoides e de células gaméticas em divisão, caracteriza o indivíduo 11752 em período quiescente. Mediante os achados histológicos descritos no presente estudo, concluiu-se que Boa c. constrictor apresenta sazonalidade em relação à gametogênese, sendo esse padrão de sazonalidade associado ao período de cópulas relatado em literatura característico de serpentes com padrão pré-nupcial.(AU)

These snakes belong to the second largest group within the reptiles, being able to present seasonality regarding spermatogenesis, with discontinuous or continuous production. The present study aims to characterize Boa constrictor constrictor reproductive biology aspects from histological findings in testicles during periods of maximum activity (period of gametogenesis) and quiescence. The testicles of two specimens of Boa c. constrictor (7767 and 11752) were cut to a thickness of 3µm in microtome, stained with 1% toluidine blue, photodocumented and described. The spermatozoa presence in the seminiferous tubule lumen in individual 7767 indicates a period of maximum gametogenesis, whereas the seminiferous tubules lumen is not very evident without spermatozoa and the absence of dividing gametic cells characterizes individual 11752 in the quiescent period. Through the histological findings we concluded that Boa c. constrictor presents seasonality in relation to gametogenesis, and the pattern of reproductive seasonality observed along with the period of copulas reported in the literature resembles the pre-nuptial pattern.(AU)

Reproductive periods of Lucina pectinata (BIVALVE; LUCINIDAE) in the Paranaguá Estuarine Complex, Paraná - Brazil / Período reprodutivo de Lucina pectinata (BIVLAVE; LUCINIDAE) no Complexo Estuarino de Paranaguá, PR - Brasil

Abstract The objectives of the present study is to describe the size for exploitation and gonadal maturation of L. pectinata in Peças Island in Paraná coast. Twenty two individuals were sampled every month, from an intertidal flat of the Peças River, Municipality of Guaraqueçaba, during two periods – summer/autumn and winter of the 2009. Environmental parameter data was obtained at the same time of the biological sampling: temperature, salinity and seawater transparency at the Peças River mouth. The animals’ height, length, width, gross weight, wet weight of meat and dry weight of meat were measured at the lab. The gonad development stages (GDS), condition index (CI) and yield index (Y) were calculated. Sex identification was conducted by direct observation of the gonads and gametes under an optic microscope. Individuals were classified as males (M), females (F) or undetermined (U). The medium height observed was of 49.62 ± 6.84 mm. Period of more expressive gonad repletion were observed in summer when water temperature was higher. Results of GDS in both periods showed a predominance of partially filled gonad stages. This may be related with the fact that L. pectinata has intense gametogenesis activity, that is, the organisms do not have a resting interval, but go back to gonad restructuring rapidly after releasing the gametes. The continuity of the reproductive cycle of the specimens found in both studied periods could demonstrate a possible continuous reproduction of the species and a size for exploitation above 40.00 mm of height.

Resumo O presente estudo tem como objetivo descrever o tamanho de exploração e a maturação gonadal de L. pectinata na Ilha das Peças no litoral do Paraná. Vinte e dois indivíduos foram amostrados mensalmente na região entre-marés no Rio das Peças, Município de Guaraqueçaba, durante 2 períodos – verão/outono e inverno de 2009. Paralelamente às amostragens, foram obtidos dados dos parâmetros ambientais: temperatura, salinidade e transparência da água do mar na foz do Rio das Peças. A altura, comprimento, largura, peso bruto, peso úmido da carne e peso seco da carne dos animais foram medidos no laboratório. Foram calculados os estágios de desenvolvimento gonadal (EDG), índices de condição (IC) e de rendimento (R). A Identificação do sexo foi realizada por observação direta das gônadas e gametas sob microscópio óptico. Os indivíduos foram classificados como: machos (M), fêmeas (F) ou indeterminados (I). A altura média observada foi de 49,62 ± 6,84 mm. O período de maior repleção gonadal foi observado no verão, quando a temperatura da água foi mais elevada. Resultados dos EDG em ambos os períodos mostrou um predomínio de gônadas parcialmente cheias. Isso pode estar relacionado com o fato de que L. pectinata tem atividade gametogênese intensa, ou seja, os organismos não têm um intervalo de repouso, mas voltam a reestruturação das gônadas rapidamente após liberação dos gametas. A continuidade do ciclo reprodutivo dos espécimes encontrados em ambos os períodos estudados, pode demonstrar possível reprodução contínua da espécie e tamanho de exploração superior a 40,00 mm de altura.

Reproductive cycle and embryonic development of the gastropod Melampus coffeus (Linnaeus, 1758) (Ellobiidae) in the Brazilian Northeast / Ciclo reprodutivo e desenvolvimento embrionário do gastrópode Melampus coffeus (Linnaeus, 1758) (Ellobiidae) no Nordeste do Brasil

Melampus coffeus belongs to a primitive group of pulmonate mollusks found mainly in the upper levels of the marine intertidal zone. They are common in the neotropical mangroves. Little is known about the biology of this species, particularly about its reproduction. The aim of this study was to 1) characterize the morphology and histology of M. coffeus' gonad; 2) describe the main gametogenesis events and link them to a range of maturity stages; 3) chronologically evaluate the frequency of the different maturity stages and their relation to environmental factors such as water, air and sediment temperatures, relative humidity, salinity and rainfall; and 4) characterize M. coffeus' spawning, eggs and newly hatched veliger larvae. Samples were collected monthly between February, 2007 and January, 2009 from the mangroves of Praia de Arpoeiras, Acaraú County, State of Ceará, northeastern Brazil. The characterization of the gonad development stages was carried out using routine histological techniques. The results of this study show that Melampus coffeus is a simultaneous hermaphrodite. The follicles have masculine and feminine elements, interleaved within the gonad. M. coffeus presents a well-defined synchronous reproductive cycle, showing successive maturation, release and resting periods. The average diameter of the oocytes was negatively correlated with salinity and positively correlated with rainfall. The results show that no reproductive activity occurs during periods of drought. After the dry season, the increasing rainfall levels and reduced salinity lead to the appearance of very dense populations, predominantly composed of small individuals.

Melampus coffeus encontra-se em um grupo primitivo de moluscos pulmonados, primordialmente marinhos, habitantes dos níveis superiores da zona entremarés, comum em manguezais do Oceano Atlântico. Pouco se sabe sobre a biologia da espécie, em especial, sobre a sua reprodução. Os objetivos deste trabalho foram: 1) caracterizar morfo-histologicamente a gônada de M. coffeus; 2) descrever os principais eventos da gametogênese e associá-los a uma escala de estágios de maturidade; 3) avaliar temporalmente a frequência dos estágios de maturidade e sua possível relação com os fatores ambientais, como a temperatura da água, do ar e do sedimento, a umidade relativa, a salinidade e a pluviosidade, e 4) caracterizar a postura, os ovos e a véliger recém-eclodida de M. coffeus. Foram realizadas coletas mensais de fevereiro de 2007 a janeiro de 2009, no manguezal da Praia de Arpoeiras, município de Acaraú-Ceará, na Região Nordeste do Brasil. A caracterização das fases de desenvolvimento da gônada foi realizada utilizando-se técnicas histológicas de rotina. Os resultados deste estudo mostram que Melampus coffeus é um hermafrodita simultâneo. Os folículos apresentam elementos masculinos e femininos, distribuindo-se na gônada intercalados radialmente. M. coffeus apresenta um ciclo reprodutivo sincrônico bem definido, evidenciando-se períodos sucessivos de amadurecimento, de liberação e de repouso. O diâmetro médio dos oócitos apresentou correlação negativa com a salinidade e positiva com a pluviosidade. Os resultados indicam que, nos períodos de estiagem, não há atividade reprodutiva. Após essa estação, quando os valores de pluviosidade aumentam e a salinidade diminui, as populações são bastante densas e predominam indivíduos pequenos.

Reproductive biology of Echinometra lucunter (Echinodermata: Echinoidea) in a northeast Brazilian sandstone reef

The edible sea urchin Echinometra lucunter (Linnaeus, 1758) is a very common species on the sublittoral-midlittoral in Brazilian rocky shores. The aim of this work was to describe the gametogenesis and reproductive strategy of the E. lucunter population at Muro Alto beach in the Northeast coast of Brazil from August 2004 to August 2005. A total of 240 specimens were collected on the sandstone reef flat from a tidepool during spring low tides. The overall sex ratio was1.12:1,withoutsignificanttemporalvariationexceptinOctober2004. Firsts sexual maturity ocurred in individuals from a diameter of 20.8 mm. There was not a significant difference in gonad index between females and males during the sampling period. The female's gonad index variation was associated with a well-defined spawning, corroborated by the histological analysis of the gonads, which demonstrates sex differences of the gamete production. By contrast, the males showed no clear pattern. It is suggested that continuous reproduction with seasonal peaks in the E. lucunter population occurs at Muro Alto beach.

O ouriço-do-mar comestível Echinometra lucunter (Linnaeus, 1758) é uma espécie muito comum no infralitoral e mediolitoral do Brasil. O objetivo deste trabalho foi descrever a gametogênese e a estratégia reprodutiva da população de E. lucunterna praia de Muro Alto entre agosto de 2004 e agosto de 2005. Um total de 240 espécimes foi capturado de uma poça de maré situada no topo recifal, durante as marés baixas de sizígia. A razão sexual total foi de 1,12:1 sem variação temporal significativa, exceto em outubro de 2004. A primeira maturidade sexual ocorreu em indivíduos a partir de 20,8 mm de diâmetro. Não houve nenhuma diferença significativa no índice gonadal entre fêmeas e machos durante o período de amostragem. A variação do índice gonadal das fêmeas foi associada a um período de desova bem definido, corroborado pela análise histológica das gônadas, que demonstra diferenças sexuais na produção de gametas. Ao contrário, os machos não apresentaram nenhum padrão. Sugere-se que a reprodução da população de E. lucunter na praia de Muro Alto é contínua, compicos sazonais.

Gametogenesis and reproduction of the matrinxã Brycon orthotaenia (Günther, 1864) (Pisces: Characidae) in the São Francisco river, Minas Gerais, Brazil

Estudaram-se a gametogênese e a reprodução de Brycon orthotaenia do rio São Francisco, na região de Pirapora, Minas Gerais, no período de dezembro/1998 a novembro/1999. O matrinxã B. orthotaenia é uma espécie endêmica da bacia do rio São Francisco, Brasil e importante na pesca comercial. O tamanho de 1ª maturação gonadal, indicado pelo comprimento total do menor macho espermiado e da menor fêmea desovada, foi de 32,0 e 40,5 cm, respectivamente. A reprodução ocorreu de outubro a janeiro, quando observam-se altas freqüências de fêmeas e machos no estádio maturação avançada/maduro e fêmeas desovadas. O curto período de desova e as características histológicas de ovários desovados, contendo somente ovócitos nos estádios iniciais de desenvolvimento ao lado de folículos pós-ovulatórios e atrésicos, indicam que a desova de B. orthotaenia é do tipo total.

Symmetric pollen mitosis I and suppression of pollen mitosis II prevent pollen development in Brachiaria jubata (Gramineae)

Microsporogenesis and pollen development were analyzed in a tetraploid (2n = 4x = 36) accession of the forage grass Brachiaria jubata (BRA 007820) from the Embrapa Beef Cattle Brachiaria collection that showed partial male sterility. Microsporocytes and pollen grains were prepared by squashing and staining with 0.5 percent propionic carmine. The meiotic process was typical of polyploids, with precocious chromosome migration to the poles and laggards in both meiosis I and II, resulting in tetrads with micronuclei in some microspores. After callose dissolution, microspores were released into the anther locule and appeared to be normal. Although each microspore initiated its differentiation into a pollen grain, in 11.1 percent of them nucleus polarization was not observed, i.e., pollen mitosis I was symmetric and the typical hemispherical cell plate was not detected. After a central cytokinesis, two equal-sized cells showing equal chromatin condensation and the same nuclear shape and size were formed. Generative cells and vegetative cells could not be distinguished. These cells did not undergo the second pollen mitosis and after completion of pollen wall synthesis each gave rise to a sterile and uninucleate pollen grain. The frequency of abnormal pollen mitosis varied among flowers and also among inflorescences. All plants were equally affected. The absence of fertile sperm cells in a considerable amount of pollen grains in this accession of B. jubata may compromise its use in breeding and could explain, at least in part, why seed production is low when compared with the amount of flowers per raceme.

Reproductive biology of Palythoa caribaeorum and Protopalythoa variabilis (Cnidaria, Anthozoa, Zoanthidea) from the southeastern coast of Brazil

A biologia reprodutiva de Palythoa caribaeorum (Duchassaing & Michelotti 1860) e Protopalythoa variabilis (Duerden 1898) foi estudada por amostras mensais de colônias etiquetadas de junho de 1996 a junho de 1997, no canal de São Sebastião, São Paulo, Brasil (45º26'W, 23º50'S). A gametogênese apresentou-se semelhante à de outros zoantídeos, como evidenciado em preparações histológicas. O diâmetro dos oócitos e os estágios de maturação dos folículos testiculares foram avaliados por preparações do tipo "squash". Ambas as espécies mostraram hermafroditismo seqüencial protogínico, com alta freqüência de pólipos férteis (83% em P. variabilis e 72% em P. caribaeorum) e de colônias na condição sexual feminina (65,3% para P. variabilis e 41,7% para P. caribaeorum), e, aparentemente, gametogênese contínua. Em P. caribaeorum, a liberação de oócitos foi contínua e a liberação de espermatozóides ocorreu durante metade do período analisado. Para P. variabilis, a liberação de oócitos e de espermatozóides ocorreu em abril-maio e fevereiro-março de 1997, respectivamente.

Large scale culture technique for pure Plasmodium falciparum gametocytes.

A large scale technique for pure gametocyte cultures of Plasmodium falciparum was established in culture flasks by using treated erythrocytes and RPMI medium supplemented with 15% human plasma instead of serum. Pure gametocyte cultures were successfully obtained following treatment with 5% sorbitol on day 8 and 9 of cultivation. This method resulted in approximately 97% reduction of asexual parasites and provided pure gametocytes in culture. The highest numbers of gametocytes were obtained from cultures starting with 2% parasitemia and 2% erythrocyte suspension. On day 12 of cultivation, approximately 35 x 10(6) gametocytes per 100 ml of cell suspension could be harvested.