Análise de alterações na expressão de genes relacionados com a imunidade inata em células humanas infectadas com Apeu virus / Analysis of changes in the expression of genes related to innate immunity in human cells infected with virus Apeu

A família Bunyaviridae consiste em uma das maiores e mais diversificadas famílias de vírus de RNA, contendo cerca de 350 vírus sorologicamente distintos. O Apeu virus (APEUV) é um vírus da família Bunyaviridae que se destaca por seu grande potencial emergente. Isolado pela primeira no Brasil, este vírus pode causar uma doença que apresenta sintomas semelhantes aos da gripe, como febre alta, dor de cabeça e mialgia, associadas geralmente a náuseas, vômitos, fraqueza e fotofobia. Entretanto, apesar de seu potencial patogênico, pouco se sabe sobre a sua interação com o sistema imunológico humano. Com o objetivo de estudar alguns aspectos da resposta imune, principalmente a reposta inata desencadeada pela infecção do APEUV, a expressão de 19 genes (TLR3, TLR7, TLR8, TLR9, MyD88,IRF3, IRF5, IRF7, IRF9, IRAK4, TRAF3, TRAF6, TICAM1, JUN, ROBO-3(RIG-1),IFIH1(MDA-5), IFNα, IFNβ, IFNy) foi analisada. Para tal, foram feitos ensaios de qPCR baseados na metodologia TaqMan®, utilizando cDNA obtido a partir de RNA total extraído de células mononucleares do sangue periférico (PBMC) e de células A549 (linhagem derivada de carcinoma pulmonar humano), infectadas ou não com APEUV por períodos de 4 ou 8 horas...

Como controles, foram utilizadas células infectadas com o vírus da estomatite vesicular (VSV) como controle positivo de uma infecção por vírus de RNA fita simples, e células tratadas com o mock das amostras de vírus como controle negativo. Os dados obtidos foram analisados em software específico. Nossos resultados indicam que PBMC infectadas com APEUV por 4horas (m.o.i.=1 e m.o.i.=3) induzem um aumento na expressão de TLR9 e IFNβ. Quando quantificada a expressão de genes em células A549 infectadas com APEUV(m.o.i.=1 por 4 horas) comparadas com o mock, verificou-se um aumento da expressão dos genes TLR9, IRF3 e IRF7 e no período de 8 horas, também comparando com o mock, verificou-se aumento de forma significativa na expressão de TLR 9, além de um aumento na expressão de TLR3, TLR7, TRAF3 , IRF7 e IFNβ.Verificamos ainda que, após escolher um gene housekeeping através de método estatístico, células A549 infectadas com APEUV em uma m.o.i.=1, tende a aumentara expressão dos genes IFNβ e TICAM-I, fundamentais na indução de um estado celular antiviral. Estudos posteriores são necessários para a determinação dos mecanismos envolvidos na resposta imune inata humana contra o Apeu virus...

Análise de alterações na expressão de genes relacionados com a imunidade inata em células humanas infectadas com Apeu virus

A família Bunyaviridae consiste em uma das maiores e mais diversificadas famílias de vírus de RNA, contendo cerca de 350 vírus sorologicamente distintos. O Apeu virus (APEUV) é um vírus da família Bunyaviridae que se destaca por seu grande potencial emergente. Isolado pela primeira no Brasil, este vírus pode causar uma doença que apresenta sintomas semelhantes aos da gripe, como febre alta, dor de cabeça e mialgia, associadas geralmente a náuseas, vômitos, fraqueza e fotofobia. Entretanto, apesar de seu potencial patogênico, pouco se sabe sobre a sua interação com o sistema imunológico humano. Com o objetivo de estudar alguns aspectos da resposta imune, principalmente a reposta inata desencadeada pela infecção do APEUV, a expressão de 19 genes (TLR3, TLR7, TLR8, TLR9, MyD88,IRF3, IRF5, IRF7, IRF9, IRAK4, TRAF3, TRAF6, TICAM1, JUN, ROBO-3(RIG-1),IFIH1(MDA-5), IFNα, IFNβ, IFNy) foi analisada. Para tal, foram feitos ensaios de qPCR baseados na metodologia TaqMan®, utilizando cDNA obtido a partir de RNA total extraído de células mononucleares do sangue periférico (PBMC) e de células A549 (linhagem derivada de carcinoma pulmonar humano), infectadas ou não com APEUV por períodos de 4 ou 8 horas.

Como controles, foram utilizadas células infectadas com o vírus da estomatite vesicular (VSV) como controle positivo de uma infecção por vírus de RNA fita simples, e células tratadas com o mock das amostras de vírus como controle negativo. Os dados obtidos foram analisados em software específico. Nossos resultados indicam que PBMC infectadas com APEUV por 4horas (m.o.i.=1 e m.o.i.=3) induzem um aumento na expressão de TLR9 e IFNβ. Quando quantificada a expressão de genes em células A549 infectadas com APEUV(m.o.i.=1 por 4 horas) comparadas com o mock, verificou-se um aumento da expressão dos genes TLR9, IRF3 e IRF7 e no período de 8 horas, também comparando com o mock, verificou-se aumento de forma significativa na expressão de TLR 9, além de um aumento na expressão de TLR3, TLR7, TRAF3 , IRF7 e IFNβ.Verificamos ainda que, após escolher um gene housekeeping através de método estatístico, células A549 infectadas com APEUV em uma m.o.i.=1, tende a aumentara expressão dos genes IFNβ e TICAM-I, fundamentais na indução de um estado celular antiviral. Estudos posteriores são necessários para a determinação dos mecanismos envolvidos na resposta imune inata humana contra o Apeu virus.

Acute respiratory viral infections in children in Rio de Janeiro and Teresópolis, Brazil / Infecções respiratórias agudas causadas por vírus em crianças do Rio de Janeiro e de Teresópolis, Brasil

The frequency of viral pathogens causing respiratory infections in children in the cities of Rio de Janeiro and Teresópolis was investigated. Nasal swabs from children with acute respiratory illnesses were collected between March 2006 and October 2007. Specimens were tested for viral detection by conventional (RT)-PCR and/or real time PCR. Of the 205 nasal swabs tested, 64 (31.2%) were positive for at least one of the viral pathogens. Single infections were detected in 56 samples, 50 of those were caused by RNA viruses: 33 samples tested positive for rhinovirus, five for influenza A, five for metapneumovirus, four for coronavirus and, three for respiratory syncytial virus. For the DNA viruses, five samples were positive for bocavirus and one for adenovirus. Co-infections with these viruses were detected in eight samples. Our data demonstrate a high frequency of viral respiratory infections, emphasizing the need for a more accurate diagnosis particularly for the emerging respiratory viruses. The fact that the emerging respiratory viruses were present in 9.2% of the tested samples suggests that these viruses could be important respiratory pathogens in the country.

Neste estudo foi investigada a frequência de patógenos virais causando infecção em crianças nas cidades do Rio de Janeiro e Teresópolis. Foram coletados 205 swabs nasais de crianças com infecção aguda do trato respiratório no período de março de 2006 a outubro de 2007. Os espécimes foram testados para detecção de vírus através de (RT)-PCR e/ou PCR em tempo real. Dentre as 205 amostras testadas, 64 (31,2%) foram positivas para pelo menos um vírus. Infecções causadas por um único agente viral foram detectadas em 56 amostras, 50 das quais eram causadas por vírus de RNA: 33 amostras foram positivas para rinovírus, cinco amostras foram positivas para influenza A, cinco amostras foram positivas para metapneumovírus, quatro amostras foram positivas para coronavírus e três amostras foram positivas para vírus respiratório sincicial. Para os vírus de DNA foram detectadas cinco amostras positivas para bocavírus humano e uma amostra positiva para adenovírus. Foram identificados oito casos de co-infecção. Nossos dados demonstram frequência elevada de infecções respiratórias virais, enfatizando a necessidade de um diagnóstico mais acurado destes patógenos, principalmente os vírus considerados emergentes. O fato de alguns vírus respiratórios emergentes terem sido detectados em 9,2% das amostras testadas sugere que estes vírus podem ser patógenos respiratórios importantes no país.

Isolation and identification of betanodavirus causing mass mortalities in golden grey mullet [Liza auratus] in the Caspian Sea

Outbreaks causing mass mortalities have been observed in the golden grey mullet [Liza auratus] population in southern coastal area of the Caspian Sea since 2002. The clinical signs include neurological abnormalities, such as erratic swimming behavior, spiral swimming, belly-up at rest and over inflation of the swim bladder. Three hundred and twelve samples of moribund fish with sizes that ranged from 15-26 cm showing abdominal enlargement were collected from 2006-2008. No pathogenic bacteria and parasite were found. The observed histopathological changes in 29 fish were necrosis and vacuolation of the brain, optic nerve and retina. Cytopathological effects of nodavirus characterized by vacuolation were observed in the SSN-1 cell line at 25°C, 5 d after inoculation with the filtered supernatant of the brain and eye of four affected fish. The recovered virus from cell line exhibited 10[4] TCID[50] per mL when titrated. Indirect immunoflorescent antibody test showed nodavirus antigens in the retina and positive-CPE SSN-1 cells. Also, a RT-PCR product of approximately 289 bp was amplified from the brain and retina of the 23 samples, including the SSN-1 positive samples. This is the first report of the isolation and characterization of nodavirus from golden grey mullet from the Caspian Sea and, therefore, possible infections in other valuable species of the Caspian Sea warrant further studies

Influenza y gripe aviar: algunas consideraciones / Influenza and avian influenza: some considerations

La Organización Mundial de la Salud (OMS) y otras organizaciones internacionales han definido que una pandemia de influenza (gripe) es inminente e inevitables. Tales aseveraciones en la persistencia de una cepa altamente virulenta de virus influenza aviario (H5N1) en Asia. Las pandemias de gripe no son nuevas. Tres pandemias de gripe han causado emergencias de salud en el {ultimo siglo y los expertos predicen que otra esta cerca. La actual epidemia de una cepa altamente patogénica de gripe aviar (A/H5N1), diseminada en los criaderos de pollos en Asia, hace sospechar que tal evento puede ocurrir en un futuro cercano. Las consecuencias de una pandemia por virus de influenza puede ser seria, con un número mucho mayor de personas enfermas y con enfermedad más grave que la epidemias anuales de gripe.

Detection of betanodaviruses in apparently healthy aquarium fishes and invertebrates

Betanodaviruses are the causative agents of viral nervous necrosis (VNN) in cultured marine fish. A total of 237 apparently healthy aquarium fish, marine (65 species) and freshwater (12 species) fishes and marine invertebrates (4 species), which were stocked in a commercial aquarium in Seoul, South Korea, were collected from November 2005 to February 2006. The brains of the fish and other tissues of the invertebrates were examined by reverse transcriptasepolymerase chain reaction (RT-PCR) and nested PCR to detect betanodavirus. Positive nested PCR results were obtained from the brains of 8 marine fish species (shrimp fish Aeoliscus strigatus, milkfish Chanos chanos, three spot damsel Dascyllus trimaculatus, Japanese anchovy Engraulis japonicus, pinecone fish Monocentris japonica, blue ribbon eel Rhinomuraena quaesita, look down fish Selene vomer, yellow tang Zebrasoma flavesenes), 1 marine invertebrate species (spiny lobster Pamulirus versicolor), and 2 freshwater fish species (South American leaf fish Monocirrhus polyacanthus and red piranha Pygocentrus nattereri). The detection rate in nested PCR was 11/237 (4.64%). These subclinically infected aquarium fish and invertebrates may constitute an inoculum source of betanodaviruses for cultured fishes in the Korean Peninsula.

Primer caso de dengue autóctono atendido en el Hospital de Enfermedades Infecciosas Dr. Lucio Córdova / The first case of autochthonous Dengue disease admitted at the Lucio Cordova Infectious Diseases Hospital

Se presenta el caso de un paciente de sexo masculino de 51 años con cuadro clínico de dengue contraído en Isla de Pascua durante el verano del 2002. Este caso se produjo durante la epidemia de esta enfermedad, que ocurrió en ese territorio, a partir de febrero- marzo de ese año. El paciente tuvo una evolución favorable y su diagnóstico fue confirmado mediante serología (IgM) en el Instituto de Salud Pública (ISP). Fue el segundo caso de dengue autóctono diagnosticado durante la epidemia, y el primero en ser atendido en un hospital del servicio público de salud de Santiago. Se revisa brevemente el cuadro clínico y criterios diagnósticos para esta enfermedad.

Dengue clássica e dengue hemorrágica / Dengue and dengue hemorrhagyc fever

A epidemia de dengue, iniciada no Brasil na década de 80, tem sido percebida, interpretada e acompanhada pelo poder público através das variaçöes no tempo dos níveis de incidência da doença. Nesse trabalho, os autores procuram demonstrar que essas variaçöes säo muito mais dependentes da imunopatologia da doença do que da eficiência do poder público em combater as causas da epidemia. Finalmente, sugerem que sejam observados como parâmetros epidemiológicos principalmente os percentuais de infestaçäo predial pelo vetor da dengue e febre amarela e, associado a esses índices de infestaçäo predial, o crescente percentual de populaçäo já primoinfectada e, conseqüentemente, predisposta a eventos de dengue hemorrágica.