Detección del virus del dengue en larvas y pupas de Aedes aegypti recolectadas en áreas rurales del municipio de Anapoima, Cundinamarca, Colombia / Dengue virus detection in Aedes aegypti larvae and pupae collected in rural areas of Anapoima, Cundinamarca, Colombia

Resumen Introducción. La incidencia y la prevalencia del dengue en Cundinamarca son elevadas y, recientemente, se detectó Aedes aegypti en algunas áreas rurales del departamento. Objetivo. Evaluar la transmisión transovárica del virus del dengue en larvas y pupas recolectadas en áreas rurales del municipio de Anapoima. Materiales y métodos. Se recolectaron ejemplares vivos en 53 viviendas y se transportaron al laboratorio de Anapoima, donde se clasificaron, se agruparon y se congelaron. Llevadas a Bogotá, se las homogeneizó, se les extrajo el ARN con Trizol ® , se las sometió a una reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa (Reverse Transcription Polymerase change reaction, RT-PCR) y a PCR convencional, y los productos amplificados se analizaron en geles de agarosa al 2 %. Resultados. En 54,7 % de las viviendas evaluadas se encontraron formas inmaduras del vector y el serotipo más frecuente fue el DENV-1. Sin embargo, en algunos pools se detectó la presencia simultánea de los serotipos DENV 1 y 2, DENV 1 y 3, y DENV 1 y 4, así como los serotipos DENV 1, 2 y 3. Conclusión. Los resultados confirmaron la transmisión vertical del virus de manera natural en el área rural del municipio, lo cual reafirma la capacidad vectorial de A. aegypti y explica, en parte, la persistencia del virus en la región y la posibilidad de que en la fase adulta el vector lo transmita sin haber consumido sangre infectada. Esta situación aumenta el riesgo de infección por el virus del dengue en Colombia y, por lo tanto, la necesidad de adelantar programas de prevención y control en todas las zonas con presencia del mosquito.

Abstract Introduction: There is a high incidence and prevalence of dengue in the department of Cundinamarca, and recently Aedes aegypti, the main vector of dengue virus (DENV), was detected in some of its rural areas. Objective: To evaluate viral transovarial transmission in larvae and pupae collected in rural areas of the municipality of Anapoima, Cundinamarca. Materials and methods: Live larvae and pupae were collected from 53 homes and later they were taken to the laboratory in Anapoima, where they were classified, pooled and frozen. In Bogotá, they were homogenized, RNA was extracted with Trizol™ , and RT-PCR and conventional PCR were performed. The amplified products were analyzed on 2% agarose gels. Results: In 54.7% of the houses we found A. aegypti in immature stages, and DENV-1 was the most frequent serotype. However, the simultaneous presence of DENV 1 and 2, DENV 1 and 3, DENV 1 and 4, and DENV 1, 2 and 3 serotypes was detected in some pools. Conclusion: The results confirmed the natural vertical transmission of the virus in the rural area under study. These findings confirmed the vector capacity of A. aegypti, and partly explains the persistence of the virus in the region and the possibility of transmission by the vector during adulthood without having ingested infected blood. This situation increases the risk of DENV infection in Colombia and the need for prevention and control programs in all areas where the mosquito is present.

Histopathology of cotton bollworm midgut infected with Helicoverpa armigera cytoplasmic polyhedrosis virus

This research was carried out to examine cytopathological effects of Helicoverpa armigera Cytoplasmic polyhedrosis virus (HaCPV) on infected midgut cotton bollworm (Helicoverpa armigera) using transmission and scanning electron microscope. The symptoms on infected host larvae of the host, compared with healthy ones, were getting swollen with milky-white and fragile Histopathological examinations showed infection with HaCPV small polyhedral inclusion bodies (PIB) after 1 or 2 days which were observed in columnar cells of midgut. Virions were partially or completely occupied in a polyhedral matrix to form polyhedral inclusion bodies (PIB) at periphery of virogenic stroma. PIBs were measured 0.5 to 3.5 mm and virions about 46 nm in diameter. Microvilli of infected columnar cells were affected and degenerated immediately prior to rupture of the cell. Some infected columnar cells ruptured to release PIB into the gut lumen 3 days after infection. In addition,PIB were found in goblet cells, 5 or 6 days after infection. Infected goblet cells degenerate to such an extent that only a few of the original microvillus-like cytoplasmic projections and cell organells were left. These cytopathic effects caused in the midgut by HaCPV on cotton bollworm larvae are essentially similar to those have been reported for lepidoperan and dipteran infection by CPV.

Cocirculation of two dengue virus serotypes in individual and pooled samples of Aedes aegypti and Aedes albopictus larvae / Cocirculação de dois sorotipos do vírus dengue em amostras individuais e pools de larvas de Aedes aegypti e Aedes albopictus

INTRODUCTION: To detect dengue virus, eggs of Aedes sp were collected in the city of Belo Horizonte, Brazil, in 2007. METHODS: Egg samples were subsequently hatched and the larvae were tested for the presence of dengue virus RNA by RT-PCR. RESULTS: Among the Aedes aegypti larvae samples, 163 (37.4 percent) out of 435 were positive, including 32 (10.9 percent) of 293 individual larvae samples concomitantly positive for two serotypes. CONCLUSIONS: Virological surveillance detecting coinfected vectors in the field could represent an important strategy for understanding the numerous factors involved in the transmission and clinical presentation of dengue.

INTRODUÇÃO: Para a detecção do vírus da dengue, ovos de Aedes sp foram coletados em Belo Horizonte, Brasil, em 2007. MÉTODOS: Amostras de ovos eclodiram e suas larvas foram testadas para a presença de RNA do vírus dengue por RT-PCR. RESULTADOS: Das amostras de larvas de Aedes aegypti, 163 (37,4 por cento) de 435 foram positivas, incluindo 32 (10,9 por cento) das 293 amostras individuais que foram concomitantemente positivas para dois sorotipos. CONCLUSÕES: A vigilância virológica de vetores no campo poderia representar uma estratégia importante para a compreensão dos diversos fatores envolvidos na transmissão e apresentação clínica da dengue.

Análise da distribuição espaço-temporal de dengue e da infestação larvária no município de Tupã, Estado de São Paulo / Analysis on the spatial-temporal distribution of dengue and larval infestation in the municipality of Tupã, State of São Paulo

INTRODUÇÃO: O vírus da dengue é transmitido pela picada do mosquito Aedes aegypti e, o atual programa de controle não atinge o objetivo de impedir sua transmissão. Este trabalho objetivou analisar a relação entre a distribuição espaço-temporal de casos de dengue e os indicadores larvários no município de Tupã, de janeiro de 2004 a dezembro de 2007. MÉTODOS: Foram construídos indicadores larvários por quarteirão e totalidade do município. Utilizou-se o método cross-lagged correlation para avaliar a correlação entre casos de dengue e indicadores larvários. Foi utilizado estimador kernel para análise espacial. RESULTADOS: A correlação cruzada defasada entre casos de dengue e indicadores larvários foi significativa. Os mapas do estimador Kernel da positividade de recipientes indicam uma distribuição heterogênea, ao longo do período estudado. Nos dois anos de transmissão, a epidemia ocorreu em diferentes regiões. CONCLUSÕES: Não ficou evidenciada relação espacial entre infestação larvária e ocorrência de dengue. A incorporação de técnicas de geoprocessamento e análise espacial no programa, desde que utilizados imediatamente após a realização das atividades, podem contribuir com as ações de controle, indicando os aglomerados espaciais de maior incidência.

INTRODUCTION: The dengue virus is transmitted by the bite of the mosquito Aedes aegypti and the current control program has not met the target of preventing its transmission. This study aimed to analyze the relationship between the spatial-temporal distribution of dengue cases and the larval indices in the municipality of Tupã between January 2004 and December 2007. METHODS: Larval indices were built up block by block and for the entire municipality. We used the cross-lagged correlation method to assess the correlation between dengue cases and larval indices. The kernel estimator was used for spatial analysis. RESULTS: The cross-lagged correlation between dengue cases and larval indices was significant. The kernel estimator maps of positive findings among recipients indicated heterogeneous distribution over the course of the study period. Over two years of transmission, the epidemic occurred in different regions. CONCLUSIONS: There was no evidence of a relationship between larval infestation and dengue occurrence. Incorporation of geoprocessing techniques and spatial analysis into the program, if used immediately after completion of activities, might contribute towards the control actions, thereby indicating spatial agglomerations of higher incidence.

Interactions among insect-resistant soybean genotypes extracts with populations of Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Noctuidae) susceptible and resistant to its nucleopolyhedrovirus

Anticarsia gemmatalis nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) is being used in Brazil as a biological insecticide. Host plant resistance of soybean to insects is been searched for and some authors have mentioned the interference of plant chemistry in virus efficiency. Interactions among soybean extracts of genotypes used as a source of resistance (PI 274454 and PI 227687) with different AgMNPV concentrations in populations of A. geatalis susceptible (S) and resistant (R) to the virus were studied at laboratory condition. Higher mortality was observed when larvae fed on diets with extracts of the soybean genotypes compared with those fed on a plain diet (control). The mean lethal concentration (LC50) was reduced about 10 ties in the S-population fed on diets containing PI 274454 extracts and different concentrations of AgMNPV, compared to control diet. Additive effect was predominantly observed when larvae fed on diets with extracts of soybean genotypes (PI 274454 and PI 227687) and AgMNPV for both larval populations. The pupal weight was negatively influenced by the extracts incorporated to the diets compared to control, for both larval populations, notably for R-population. The results suggest that, in general, leaf extracts of soybean resistant genotype did not cause any harmful effect on virus efficiency.

O nucleopoliedrovirus de Anticarsia gemmatalis (AgMNPV) tem sido utilizado como um inseticida biológico no Brasil. A resistência de plantas de soja a insetos tem sido pesquisada e alguns autores têm mencionado a interferência de substâncias químicas de plantas sobre a eficiência de vírus. As interações entre extratos de genótipos de soja utilizados como fontes de resistência (PI 274454 e PI 227687) com diferentes concentrações do AgMNPV em populações de A. gemmatalis suscetível (S) e resistente (R) ao vírus foram estudadas em condições de laboratório. Mortalidades elevadas foram observadas quando as larvas foram alimentadas com dietas contendo extratos dos genótipos de soja, em relação às larvas alimentadas com dieta artificial sem a presença de extratos (testemunha). A concentração letal média (CL50) foi reduzida em aproximadamente 10 vezes, na população s alimentada com dieta contendo extratos da PI 274454 e diferentes concentrações do AgMNPV, comparada à dieta testemunha. Um efeito aditivo foi predominantemente observado quando as larvas se alimentaram em dietas com extratos dos genótipos de soja (PI 274454 e PI 227687) e o AgMNPV, para ambas as populações (S e R). O peso de pupa foi negativamente influenciado pela dieta contendo os extratos em relação à dieta testemunha, para ambas as populações, com destaque para a população R. Os resultados indicam que, no geral, os extratos de folhas de genótipos de soja resistentes não causam efeitos negativos na eficiência do vírus.

Natural vertical transmission by Stegomyia albopicta as dengue vector in Brazil / Transmissão vertical natural de Stegomyia albopicta como vetor de dengue no Brasil

The mosquito Stegomyia albopicta is among the most important arbovirus vectors in the world, particularly for Dengue viruses. Their natural history suggests that biologically these viruses are highly adapted to their mosquito hosts and they were most likely mosquito viruses prior to becoming adapted to lower primates and humans. As well as being maintained by transmission among susceptible humans, Dengue viruses may also be maintained by vertical transmission in mosquitoes during inter-epidemic periods. The larvae and mosquitoes of Stegomyia albopicta were used to identify the vertical transmission of the dengue virus in nature and to confirm the vectorial capacity concerning the Dengue virus type 2 infection. The minimum infection rate concerning S. albopicta infection with the Dengue virus was 1:36.45. In Brazil this was the first time that high minimum infection rates of vertical transmission of S. albopicta were detected in this species.

O mosquito Stegomyia albopicta está dentre os mais importantes vetores de arbovírus do mundo, particularmente para o Dengue virus. A história natural sugere que biologicamente esses vírus são altamente adaptados aos seus mosquitos vetores e foram, provavelmente, os vírus que infectavam mosquitos antes de se tornarem adaptados a primatas não humanos e humanos. Além de serem mantidos entre os homens susceptíveis, os Dengue viruses podem também ser mantidos pela transmissão vertical em mosquitos durante os períodos interepidêmicos. As larvas e mosquitos da espécie Stegomyia albopicta foram utilizados para a identificação da transmissão vertical do vírus dengue na natureza e para confirmar a capacidade vetorial em relação à infecção pelo DENV-2 infection. A taxa mínima de infecção em relação à infecção do S. albopicta com o Dengue virus foi de 1:36,45. No Brasil, esta é a primeira vez que altas taxas de infecção mínima da transmissão vertical de S. albopicta foram detectadas nessa espécie.

Vírus dengue em larvas de Aedes aegypti e sua dinâmica de infestação, Roraima, Brasil / Virus dengue en larvas de Aedes aegypti y su dinámica de infestación, Roraima, Brasil / Dengue virus in Aedes aegypti larvae and infestation dynamics in Roraima, Brazil

OBJETIVO: Identificar a presença do vírus dengue em formas larvais de Aedes aegypti e relacionar a presença do vetor com índice pluviométrico e número de casos de dengue. MÉTODOS: Dezoito domicílios foram selecionados aleatoriamente para coleta de ovos em um bairro da cidade de Boa Vista (RR). Foram instaladas duas ovitrampas por domicílio e removidas após uma semana, mensalmente, de novembro de 2006 a maio de 2007. Foram calculados o índice de positividade de ovitrampa e o índice de densidade dos ovos. Após eclosão de 1.422 ovos coletados, foram formados 44 pools de no máximo 30 larvas para teste de presença do vírus dengue por meio de RT-PCR e hemi-nested PCR. O índice de incidência de dengue no período foi correlacionado com a precipitação pluvial. A associação entre essas variáveis e número de ovos coletados foi analisada pelo coeficiente de Pearson. RESULTADOS: Nenhum dos pools apresentou positividade para o vírus dengue, apesar do bairro ter apresentado elevados índices de incidência de dengue no período estudado. A densidade da população de Ae. aegypti aumentou conforme a pluviosidade, mas não apresentou correlação com índices de incidência de casos de dengue...

OBJECTIVE: To detect the presence of dengue virus in larval forms of Aedes aegypti and to associate vector presence with rainfall and incidence of disease. METHODS: Eighteen households were randomly selected for egg collection in a neighborhood of the city of Boa Vista, Roraima, in Northern Brazil. Two oviposition traps were installed per home, and removed after one week. This was repeated on a monthly basis between November 2006 and May 2007. Trap positivity rate and egg density were calculated. Following the eclosion of 1,422 eggs, 44 pools of at least 30 larvae each were formed, which were evaluated for presence of dengue virus using RT-PCR and hemi-nested PCR. Dengue incidence rates in the period were correlated with rainfall rates. The association between these two variables and the number of eggs collected was determined using Pearson correlation. RESULTS: None of the pools tested positive for presence of dengue virus, despite the high incidence of dengue in the neighborhood during the studied period. The density of Ae. aegypti increased with rainfall, but was not correlated with incidence of dengue...

OBJETIVO: Identificar la presencia del virus dengue en forma larvales de Aedes aegypti y relacionar la presencia del vector con índice pluviométrico y número de casos de dengue en el período estudiado. MÉTODOS: Dieciocho domicilios fueron seleccionados al azar para colectar huevos en una urbanización de la ciudad de Boa Vista (Norte de Brasil). Se instalaron dos ovitrampas por domicilio, y se removieron una semana después, mensualmente, de noviembre de 2006 a mayo de 2007. Se calcularon el índice de positividad por ovitrampa y el índice de densidad de huevos. Posterior a la eclosión de 1422 huevos colectados, se formaron 44 pools de máximo 30 larvas para evaluar presencia del virus dengue por medio de RT-PCR y hemi-nested PCR. El índice de incidencia de dengue en el período fue correlacionado con la precipitación pluvial. La asociación entre esas variables y número de huevos colectados fue analizada por el coeficiente de Pearson. RESULTADOS: Ninguno de los pools presentó positividad para el virus dengue, a pesar de que en la urbanización se presentaron elevados índices de incidencia de dengue en el período de estudio. La densidad de la población de Ae. aegypti aumentó conforme a la pluviosidad, pero no presentó correlación con los índices de incidencia de casos de dengue...

Una infección viral en la glándula cervical de larvas de Dione junio (Lepidoptera: Nymphalidae) / A viral infection in the neck glandula of larvae of Dione junio (Lepidoptera: Nymphalidae)

Lepidopteran larvae may be attacked by different viruses, many of which belong to the Baculoviridae family. Whilst studying the ultrastructure of the neck gland in Dione junio larvae we found that in later instars the larvae showed symptoms of attack by two types of virus. The glands were prepared for optical and electron microscopy using sodium cacodylate buffer and standard procedures (0.1M, pH 7.2). The neck gland is composed of two oval internal sacks which communicate with the exterior via an extracellular channel. Each sack contains, in its external region, cells with large, irregular nuclei and a dense cytoplasm containing numerous small mitochondria. In infected larvae, the tissues are damaged and the nuclear polyhedrosis virus can be observed in several of the nuclei. In the cytoplasm another "rickettsia type" virus, may be observed. The pathogenic viruses present in D. junio larvae could be studied as potential biological controls of this pest.

Factors favoring houseplant container infestation with Aedes aegypti larve in Marilia, Sao Paulo, Brazil / Factores que favorecen la infestación de recipientes con plantas domésticas por larvas de Aedes aegypti en Marília, São Paulo, Brasil

Desde 1985, después de la reinfestación de mosquitos Aedes aegypti (L.) en el Estado de São Paulo, se encontró que ­a pesar de la diseminación de mensajes educativos destinados a su control­ las macetas y floreros son un hábitat importante de las larvas. Los objetivos de este estudio fueron identificar las macetas y floreros como hábitats de larvas de mosquitos en relación con su número y grado de infestación, los tipos de plantas involucradas y la localización específica de las larvas; investigar los nombres locales de las plantas domésticas y examinar los factores que afectan al cumplimiento de las medidas de control. Los resultados mostraron un promedio de más de cuatro posibles hábitats de larvas relacionados con plantas por cada sitio, de los cuales solo 0,4% tenían el vector. Los recipientes para plantas representaron 31% de todos los receptáculos con larvas de A. aegypti. A pesar de que de una muestra de 126 personas entrevistadas enumeraron 105 nombres de plantas domésticas, 49% de las plantas asociadas con larvas fueron solo de dos tipos: helechos y la planta ornamental Dieffenbachia avoena. La evidente falta de voluntad de la población para aceptar las medidas de control contra A. aegypti en lo que respecta a plantas domésticas parece deberse a la poca frecuencia relativa de A. aegypti en los recipientes domésticos, la falta de confianza en los programas de control como fuente idónea de información sobre plantas y la opinión de que las medidas de control recomendadas son dañinas para las plantas. Actualmente se está planeando una intervención para el control del dengue en la que se usará material educativo que trata específicamente sobre las plantas cuyos recipientes albergan con mayor frecuencia las larvas de A. aegypti. También se hará uso de fuentes de información botánica con mayor credibilidad en materia de plantas. Además, se formulará un plan diferente con un enfoque más atractivo desde el punto de vista de la salud de las plantas para incrementar su posibilidad de aceptación.

Desde 1985, después de la reinfestación de mosquitos Aedes aegypti (L.) en el Estado de São Paulo, se encontró que ­a pesar de la diseminación de mensajes educativos destinados a su control­ las macetas y floreros son un hábitat importante de las larvas. Los objetivos de este estudio fueron identificar las macetas y floreros como hábitats de larvas de mosquitos en relación con su número y grado de infestación, los tipos de plantas involucradas y la localización específica de las larvas; investigar los nombres locales de las plantas domésticas y examinar los factores que afectan al cumplimiento de las medidas de control. Los resultados mostraron un promedio de más de cuatro posibles hábitats de larvas relacionados con plantas por cada sitio, de los cuales solo 0,4% tenían el vector. Los recipientes para plantas representaron 31% de todos los receptáculos con larvas de A. aegypti. A pesar de que de una muestra de 126 personas entrevistadas enumeraron 105 nombres de plantas domésticas, 49% de las plantas asociadas con larvas fueron solo de dos tipos: helechos y la planta ornamental Dieffenbachia avoena. La evidente falta de voluntad de la población para aceptar las medidas de control contra A. aegypti en lo que respecta a plantas domésticas parece deberse a la poca frecuencia relativa de A. aegypti en los recipientes domésticos, la falta de confianza en los programas de control como fuente idónea de información sobre plantas y la opinión de que las medidas de control recomendadas son dañinas para las plantas. Actualmente se está planeando una intervención para el control del dengue en la que se usará material educativo que trata específicamente sobre las plantas cuyos recipientes albergan con mayor frecuencia las larvas de A. aegypti. También se hará uso de fuentes de información botánica con mayor credibilidad en materia de plantas. Además, se formulará un plan diferente con un enfoque más atractivo desde el punto de vista de la salud de las plantas para incrementar su posibilidad de aceptación.