Cloning and heterologous expression of a hydrophobin gene Ltr. hyd from the tiger milk mushroom Lentinus tuber-regium in yeast-like cells of Tremella fuciformis

Background: Hydrophobins are small proteins secreted by filamentous fungi, which show a highly surface activity. Because of the signally self-assembling abilities and surface activities, hydrophobins were considered as candidates in many aspects, for example, stabilizing foams and emulsions in food products. Lentinus tuber-regium, known as tiger milk mushroom, is both an edible and medicinal sclerotium-producing mushroom. Up to now, the hydrophobins of L. tuber-regium have not been identified. Results: In this paper, a Class I hydrophobin gene, Ltr.hyd, was cloned from L. tuber-regium and expressed in the yeast-like cells of Tremella fuciformis mediated by Agrobacterium tumefaciens. The expression vector pGEH-GH was under the control of T. fuciformis glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase gene (gpd) promoter. The integration of Ltr.hyd into the genome of T. fuciformis was confirmed by PCR, Southern blot, fluorescence observation and quantitative real-time PCR (qRT-PCR). Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) demonstrated that recombinant hydrophobin rLtr.HYD with an expected molecular mass of 13 kDa was extracted. The yield of rLtr.HYD was 0.66 mg/g dry weight. The emulsifying activity of rLtr.HYD was better than the typical food emulsifiers sodium caseinate and Tween 20. Conclusions: We evaluated the emulsifying property of hydrophobin Ltr.HYD, which can be potentially used as a food emulsifier.

Utilización de residuos de plátano para la producción de metabolitos secundarios por fermentación en estado sólido con el hongo lentinus crinitus / Utilization of plantain waste for the production of secondary metabolites by solid substrate fermentation using the fungi lentinus crinitus

En este articulo se presenta la producción de metabolitos secundarios de interés farmacéutico y alimentario obtenidos de los residuos del cultivo de plátano al emplearse como sustrato en un proceso de fermentación en estado sólido con el hongo de la podredumbre de la madera Lentinus crinitus.La producción de metabolitos se determina durante el crecimiento del microorganismo por un periodo de 21 días, en un sistema de fermentación conformado por 7 combinaciones de sustrato: tallo-fruto, hojas-fruto, hojas-tallo, hojas, tallo, fruto y hojas-tallo-fruto. La mejor combinación para la producción de las enzimas ligninoperoxidasa (LiP) y manganesoperoxidasa (MnP) es la conformada por hojas-tallo de plátano Musa paradisiaca. Esto es importante para aprovechar el enorme potencial que tienen estos residuos para la producción de enzimas peroxidasas, las cuales tienen muchas aplicaciones. También es importante destacar que anteriormente no se tienen reportes en la literatura a cerca de la producción de la enzima ligninoperoxidasa por el hongo Lentinus crinitus. En los sistemas donde se obtiene actividad enzimática: (tallo-fruto, hojas-fruto, hojas-tallo y hojas-tallo-fruto) se evalúa la presencia de los compuestos aromáticos ácido ferúlico, vainilla, ácido vainillínico y eugenol en los días 11, 16 y 21. Los análisis se hacen por cromatografía líquida de alta eficienia (HPLC). En los sistemas de mayor actividad enzimática conformados por la mezcla de hojas-tallos, los productos aromáticos de interés se detectaron en muy baja concentración. En el sistema conformado por hojas-frutos donde solo se destaca la producción de la enzima LiP, se encuentra ácido ferúlico, vainilla, ácido vainillínico y eugenol en cantidades importantes durante el día 16

Use of remazol blue dyed avicel for the determination of cellullolytic activity in basidiomycetes

A modified method for direct determination of cellulolytic activity using Avicel colored with Remazol Brilliant Blue R (RBBR) in Agar test tubes in discussed. Refinaments were introduced in a simple method for qunatitation of cellulase activity, based on the release of dye from Avicel-RBBR medium by enzimatic hydrolysis. Modification in Avicel-dye preparation were enhanced and a spectrophotometer improved the precision of the collected data, since absorbance measurements could be done at the maxmum wavelenght for RBBR (595 nm).