Letter to the editor: Respective Contribution of Liquid and Solid Media to Mycobacterial Yields from Pleural Fluid in Tuberculous Pleural Effusion

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Impact of Implementation of an Automated Liquid Culture System on Diagnosis of Tuberculous Pleurisy

This study was conducted to evaluate the impact of implementation of an automated liquid culture system on the diagnosis of tuberculous pleurisy in an HIV-uninfected patient population. We retrospectively compared the culture yield, time to positivity, and contamination rate of pleural effusion samples in the BACTEC Mycobacteria Growth Indicator Tube 960 (MGIT) and Ogawa media among patients with tuberculous pleurisy. Out of 104 effusion samples, 43 (41.3%) were culture positive on either the MGIT or the Ogawa media. The culture yield of MGIT was higher (40.4%, 42/104) than that of Ogawa media (18.3%, 19/104) (P<0.001). One of the samples was positive only on the Ogawa medium. The median time to positivity was faster in the MGIT (18 days, range 8-32 days) than in the Ogawa media (37 days, range 20-59 days) (P<0.001). No contamination or growth of nontuberculous mycobacterium was observed on either of the culture media. In conclusion, the automated liquid culture system could provide approximately twice as high yields and fast results in effusion culture, compared to solid media. Supplemental solid media may have a limited impact on maximizing sensitivity in effusion culture; however, further studies are required.

Evaluación del efecto del medio MS y la temperatura en el desarrollo de propágulos de Marchantia polymorpha L (Marchantiaceae) bajo condiciones in vitro y ex vitro / Evaluating the effect of MS medium and temperature in developing Marchantia polymorpha L (Marchantiaceae) propagules in in vitro and ex vitro conditions

En este trabajo de investigación se propagaron, bajo condiciones in vitro, propágulos de Marchantia polymorpha evaluando su desarrollo vegetativo mediante observaciones y registros semanales a cada cultivo por tratamiento en función del tiempo de desarrollo. En este contexto, se evaluó cualitativamente la forma y las características del talo, las cuales se valoraron mediante observaciones y registros semanales. Se analizaron los resultados cuantitativos mediante un análisis de varianza con diseño al azar y arreglo factorial 4 x 2, mediante la prueba estadística de Fisher. Las condiciones apropiadas de cultivo para propágulos de M. polymorpha se establecieron en una concentración de 25% de sales minerales Murashige y Skoog (1962), incubados a una temperatura de 25 ± 1 ºC. Luego de 13 semanas de desarrollo bajo condiciones in vitro, se adaptaron a condiciones naturales mediante un cambio de sustrato, y controlando la temperatura y humedad en el lugar de desarrollo. En esta etapa se evaluó la sobrevivencia de plantas durante 10 semanas; posteriormente al cambio de condiciones, y como característica cualitativa, se tuvo en cuenta el vigor del talo. Este protocolo de propagación de M. polymorpha, pionero en Colombia, es un modelo que permite conservar y cultivar de manera masiva diferentes especies de briófitos, especialmente aquellos que se encuentran en vías de extinción en nuestro país.

Marchantia polymorpha propagules were propagated in this research in in vitro conditions to assess their growth in terms of development time. Development rate and contamination regarding each treatment were also evaluated by weekly observations and crop records for each experimental unit per treatment. Talus shape and characteristics were also qualitatively evaluated by weekly observations and records. Fisher’s statistical test was used for analysing quantitative results by variance analysis with random design and 4 x 2 factorial arrangement. Appropriate conditions for cultivating M. polymorpha propagules were established at 25% Murashige and Skoog mineral salt concentration (1962), incubated at 25ºC ± 1ºC. After 13 weeks development in in vitro conditions, they were adapted to natural conditions by changing development site substrate and controlling temperature and humidity. Plant survival was evaluated for 10 weeks during this stage. Conditions were then changed and (as qualitative characteristic) talus vigour was taken into account. In was also determined that the ex vitro cultivation level should allow for gradual adjustment to new humidity, temperature and substrate conditions, taking special care that these conditions were not so altered as to become insurmountable. This pioneering M. polymorpha propagation protocol in Colombia is a model for the future maintenance and mass development of different bryophyte species, especially those which are endangered in our country.

Obtención de cultivo axénico de amastigotes de tres cepas de Leishmania (Leishmania) mexicana a partir de promastigotes aislados de pacientes con leishmaniasis cutánea localizada en México / Obtention of axenic cultivation of amastigotes of the three strains of Leishmania (Leishmania) mexicana using promastigotes isolated from patients with cutaneous leishmaniasis in Mexico

Introducción. La Leishmaniasis Cutánea Localizada, en la Península de Yucatán, es causada predominantemente por Leishmania (L.) mexicana. Las especies de Leishmania son parásitos intracelulares obligados dimórficos. Los promastigotes, formas flageladas y móviles, se replican y diferencian en el intestino del insecto vector. Los mastigotes, formas intracelulares inmóviles, viven dentro del fagolisosoma del macrófago huésped. Los amastigotes son más difíciles de obtener, debido a que se requieren ser aislados de tejidos y/o cultivos en líneas celulares de macrófagos. La alternativa es el cultivo axénico de formas de amastigotes. Material y métodos. El presente estudio describe la obtención de formas de amastigotes de tres cepas de Leishmania (L.) mexicana, (M/HOM/MX/94/VMC/663,M/HOM/MX/94/JM/758,M/HOM/MX/MX/95LPD/787), mediante la variación del pH y la temperatura de incubación en el medio de cultivo de Grace. Resultados. Los resultados mostraron un comportamiento diferente en cada cepa, determinado por la densidad celular y el porcentaje relativo de transformación. Los promastigotes de cada cepa se transformaron en más del 80 por ciento a formas de amastigotes al segundo día de incubación a pH 5.5 y temperatura de 35ºC. Por otro lado, la variación del pH, de 7.2 a 5.5 a 25ºC, permitió la transformación de promastigotes en metacíclicos. Conclusiones. La variación del pH y la temperatura de incubación permitió obtener las tres etapas de transformación del parásito (promastigotes, metacíclicos y amastigotes), los cuales podrán emplearse en futuros estudios bioquímicos e inmunológicos

Indices epidemiológicos de trematodos monogenésicos en branquias de colossoma macropomum bajo cultivo / Trematod monogenesis epidemiological index in gills of colossoma macropomum under culture

Los trematodos monogenésicos que parasitan las branquias de peces causan en éstos una enfermedad denominada dactilogirosis, la cual es de gran importancia económica para la acuacultura, ya que puede afectar seriamente la salud de peces sometidos a cultivo. Dicha enfermedad no había sido debidamente estudiada en las estaciones piscícolas, por tanto, en la Estación Experimental Papelón, centro de acuacultura ubicado en el Estado Portuguesa, se realizó un estudio con el objeto de conocer la variación poblacional mensual (prevalencia, frecuencia y abundancia) de los trematodos branquiales Anacanthorus spatulatus y Linguadactyloides brinkmanni. Para ello, se extirparon las branquias de 247 ejemplares de Colossoma macropomum y se procedió a identificar y cuantificar los trematodos; durante el período marzo 1992 a diciembre 1992 los resultados indicaron que la prevalencia global fué de 98.37 por ciento para A. spatulatus y 17.07 por ciento para L. brinkmanni. De 68.518 parásitos cuantificados, el 99.42 por ciento correspondió a A. spatulatus y el 0.57 por ciento para L. brinkmanni. En un 17.07 por ciento de los casos se detectó infestación mixta

Studies on prevalence of strongyloides infection in Holambra and Maceio, Brazil, by the agar plate faecal culture method

Foi feito levantamento sobre a prevalencia da infeccao por Strongyloides stercoralis em tres areas do Brasil, atraves do desenvolvimento de metodo de cultura de fezes (cultura em placa de agar). A infeccao por Strongyloides foi confirmada em 11,3 por cento de 432 pacientes examinados. A eficacia do diagnostico pela cultura em placa de agar foi de 93,9 por cento comparado com apenas 28,5 por cento e 26,5 por cento pelo metodo de Harada-Mori de cultura em papel de filtro e metodo de concentracao de fezes, quando amostras de fezes foram examinadas simultaneamente por estes tres metodos. Entre as 49 amostras positivas, aproximadamente 60 por cento foram confirmadas como positivas somente pela cultura em placa de agar. Estes resultados indicam que a cultura em placa de agar e um novo metodo sensivel para o diagnostico correto da infeccao cronica pelo Strongyloides

Sorotipos de pneumococos isolados de criancas com pneumonia: implicacao com a imunizacao especifica anti-pneumococica / Streptococcus pneumoniaie serotypes in children with pneumonia: vaccine especific for pneumococcal disease

Os autores identificaram q22 cepas de pneumococos isolados de 124 criancas internadas com pneumonia aguda durante um periodo de 15 anos. Estas pertenciam a 19 sorotipos (16 sorogrupos). A vacina anti-pneumococica com 23 antigenos permitiria potencial cobertura a 89,3 por cento dos casos de pneumonia, observando-se apenas os sorotipos envolvidos. Porem, e constatada eficacia reduzida desta vacina em criancas menores de dois anos, faixa etaria que abrange a maior parte dos casos estudados (mediana=1 ano). Outras vacinas anti-pneumococicas que contem um maximo de antigenos pertencentes a oito sorogrupos tem sido testadas. Nesta circunstancias os dados coletados no presente estudo sugerem a inclusao dos sorogrupos 1, 4, 5, 6, 7, 14, 19 e 23 que abrangem 89,3 por cento das cepas analisadas. O estudo constata variacao regional da frequencia dos sorogrupos de pneumococo implicados com patologias pediatricas.

Bacteremias hospitalares no Instituto do Coracao do Hospital das Clinicas FMUSP: estudo retrospectivo de quatro anos consecutivos / Nosocomial bacteremias at the \"Instituto do Coracao do Hospital das Clinicas da FMUSP\": retrospective study of 4 years

Os relatorios de ocorrencia de infeccoes hospitalares aos anos de 1989 a 1992 do Instituto do Coracao-HC-FMUSP(InCor) foram revistos com a finalidade de classificar as hemoculturas positivas em bacteremias primarias, bacteremias secundarias e contaminantes. Este trabalho descreve os resultados desta classificacao bem como os dados de prevalencia de bacteremias hospitalares, a letalidade associada e os principais agentes etiologicos envolvidos.

Assessment of media using B-D-Glucoronidase activity for the detection of Escherichia coli in water

Quatro meios de cultura contendo B-D-glucoronide MUG (Lauril Sulfato Fluorocult, ECD Fluorocult Agar, Caldo Lauril Triptose e Agar nutriente suplementados com MUG) foram comparados com meios convencionais (caldo Lauril Triptose, Caldo E.C. e Agar M-Endo LES) para verificar se havia diferenças entre eles na detecçäo de E. coli. As amostras de água foram contaminadas artificialmente com E.coli isoladas tanto do ambiente quanto de espécimes clínicos e analisados pelas técnicas dos tubos múltiplos e de membrana filtrante usando os meios acima descritos. Entre as cepas previamente analisadas para o preparo das amostras artificialmente contaminadas, 6,4 por cento näo apresentaram atividade B-D-Glucoronidase quando testadas com meio contendo MUG. Os resultados obtidos foram submetidos ao Teste de Wilcoxon que mostrou que Lauril Sulfato Fluorocult, caldo Lauril Triptose com MUG e Agar Nutriente com MUG foram täo sensíveis quanto o Caldo Lauril Triptose e meio E.C. e Agar M-Endo LES, e que o ECD Fluorocult Agar apresentou uma sensibilidade muito baixa. Esta técnica é de grande importância pois pode ser aplicada em métodos mais rápidos para detecçäo de E.coli e em automaçäo

Estado actual del manejo de gametos y preembriones / State-of art in gamete and pre-embryo management

El laboratorio de Gametos y Pre-embiones es una pieza fundamental en el éxito de los programas de Reproducción Asistida. Sus actividades abarcan la preparación de medios de cultivo óptimos, la capacitación espermática, el control de calidad de los medios y el equipo, la correcta identificación de la madurez de los ovocitos, la realización de la conjugación de los gametos, la observación sistemática de la segmentación del huevo, la criopreservación de gametos y pre-embriones, y el suministro de un medio ambiental adecuados para las fases extracorpóreas. Están en fase experiemental algunas técnicas que buscan mejorar la eficiencia de los procedimientos de Reproducción Asistida, tales como la micromanipulación celular y la detección temprana de alteraciones genéticas.

Comparación de tres métodos empleados para el control de calidad de medios de cultivo sólido / Comparison of three methods employed in tue quality control of solid culture media

El objetivo de este estudio fue comparar tres métodos utilizados en el control de calidad de medios de cultivo: a)el método original de Miles-Mirsa; b)el ecométrico y c)el método de estrías. Para comparar estos métodos, se evaluaron la productividad (crecimiento de un microorganismo que habitualmente se desarrolla en un medio de cultivo) y la selectividad (supresión del crecimiento de un microorganismo, que se espera sea inhibido en un medio de cultivo) de seis medios sólidos de cultivo usados para el aislamiento de Salmonella spp. y Shigella spp. Los resultados que se obtuvieron al comparar los 3 métodos, mediante la prueba de Chi2, reflejan que existe diferencia significativa (p<0.05) entre el método de estrías y los otros 2 en lo referente a la productividad, no existiendo diferencia significativa entre los 3 métodos, en cuanto a selectividad. De los 3 métodos ensayados, el ecométrico resultó el de más fácil y rápida ejecución

Evaluación de cuatro medios selectivas para el aislamiento de hongos patógenos

Se aislaron cuatro medios de cultivo comerciales para el aislamiento de hongos patógenos que contienen agar, peptona, glucosa, cicloheximida y cloranfenicol. En cada uno se determinó la frecuencia de aislamiento de hongos patógenos así como sus características morfológicas, su tiempo de crecimiento y la rapidez e intensidad de la contaminación bacteriana y/o micótica, con el objeto de puntualizar diferencias entre ellos. Se estudiaron 100 muestras de casos con sospecha clínica de dermatomicosis o micosis subcutáneas y 50 de pacientes con diagnostico presuntivo de micosis profunda. se aislaron 56 patógenos en el primer grupo y P. brasiliensis en tres esputos seriados

Estudio comparativo de tres medios de cultivo para el aislamiento y numeración de pseudomonas aeroginosa / Comparative study of thre culture media for the isolated and numeration of pseudomonas aeroginosa

Se ha realizado el estudio evaluativo de tres medios selectivos para el recuento de P.aeroginosa. Los medios utilizados fueron:Agar cetrimida (T1), agar ácido nalídico-cetrimida (t2), agar nitrofurentoina (t3) y agar base (t4), como medio control. Para los ensayos de recuperación se emplearon dos cepas de pseudomonas aeroginosa procedentes de aguas y de cosméticos, utilizándose la técnica de inoculación en superficie. Los datos fueron procesados estadísticamente por computación, aplicándose el diseño en base al análisis de varianza. Se recomienda el medio de agar nitrofurantoina para el uso rutinario en el laboratorio de microbiología, para el aislamiento de P.aeroginosa procedente de diferentes fuentes por la sensibilidad, rapidez facilidad en la lectura y por su bajo costo.