Genotipificación y evaluación de la dinámica de infección de un aislamiento colombiano de Leptospira santarosai en el modelo experimental en hámster / Genotyping and evaluation of infection dynamics in a Colombian isolate of Leptospira santarosai in hamster as an experimental model

Introducción. Es necesario desarrollar modelos de estudio de la leptospirosis. Objetivo. Genotipificar un aislamiento de Leptospira proveniente de una persona con síndrome de Weil y evaluar, con el modelo experimental en Mesocricetus auratus , su dinámica de infección. Materiales y métodos. Se hizo la genotipificación por análisis de las secuencias génicas rrs 16S y lipL32 . Se determinó la dosis letal media en hámster inoculada por vía intraperitoneal. Se identificaron los patrones de química clínica, la duración de la leptospiremia, la leptospiruria y la histopatología, comparados con el mismo modelo inoculado con la cepa de Leptospira interrogans (Fiocruz L1-130). Resultados. Mediante análisis molecular se determinó que el aislamiento correspondía a la especie patógena Leptospira santarosai . La bacteria se recuperó a partir de tejido de riñón y de pulmón, y se detectó por medio de PCR lipL32 en el tercer día después de la infección. La proteína C reactiva aumentó en el quinto día después de la infección (3,25 mg/dl; valor normal: 0,3 mg/dl) con una disminución en el día 18 (2,60 mg/dl; valor normal: 0,8 mg/dl). Los biomarcadores de urea mostraron alteraciones indicativas de falla renal aguda (día 5 después de la infección: 49,01 mg/dl y día 18: 53,71 mg/dl). La histopatología mostró neumonía intersticial con diferentes grados de hemorragia, así como nefritis intersticial. Conclusión. Se identificó la presencia de la especie L. santarosai con capacidad patógena comparable con la cepa Fiocruz L1-130 de L. interrogans , de reconocida virulencia y tropismo pulmonar, en cuanto a los aspectos histopatológicos de tropismo a pulmón y riñón. Nunca antes se había evaluado en un modelo experimental un aislamiento de origen local bajo estos criterios biológicos.

Introduction: Is necessary to develop models for the study of leptospirosis. Objective: To genotype a Colombian strain of Leptospira isolated from a human with Weil´s syndrome and to evaluate its infection dynamics in the hamster experimental model. Materials and methods: Genotyping was performed by amplification and sequence analysis of the rrs 16S and lipL32 genes. The median lethal dose was determined in intraperitoneally inoculated hamsters. The patterns of clinical chemistry, the duration of leptospiremia, leptospiruria and pathological findings were studied and compared in the same animal model infected with L. interrogans (Fiocruz L1-130). Results: Molecular typing revealed that the isolate corresponded to the pathogenic species L. santarosai, which was recovered from hamsters´ kidneys and lungs and detected by lipL32 PCR from day 3 post-infection in these organs. There was a marked increase of C-reactive protein in animals at day 5 post-infection (3.25 mg/dl; normal value: 0.3 mg/dl) with decreases by day 18 (2.60 mg/dl: normal value: 0.8 mg/dl). Biomarkers of urea showed changes consistent with possible renal acute failure (day 5 post-infection: 49.01 mg/dl and day 18 post-infection: 53.71 mg/dl). Histopathological changes included interstitial pneumonia with varying degrees of hemorrhage and interstitial nephritis. Conclusion: The pathogenic species L. santarosai was identified in Colombia. Its pathogenicity as determined by tropism to lung and kidney was comparable to that of L. interrogans Fiocruz L1-130, well known for its virulence and pulmonar tropism. The biological aspects studied here had never before been evaluated in an autochthonous isolate.

Desarrollo de un nuevo modelo animal experimental hámster sirio dorado para el estudio de la inffección por Escherichia coli enterotoxigénica (ETEC) / Development of a new experimental aniaml model Sirian golden hamster for the study of enterotoxigenic Escherichia coli infection

Existen diversos modelos animales para el estudio de la patogenicidad, virulencia e inmunidad. Sin embargo, carecen de fidelidad y facilidad en su manejo por requerir manipulación quirúrgica, lo que limita de forma importante su uso para estudios de inmunidad y protección. El hámster sirio dorado (HSD) (M. auratus) tan sólo procede de tres líneas capturadas en Aleppo, Siria, y existe la posibilidad de que los genes de histocompatibilidad sean reflejo del número de genes de la línea original. Es conocido que las colonias de hámsters se mantienen cerradas en condiciones higiénicas, y su equivalencia es la libre de patógenos específicos en la rata. Este trabajo postula, y valida un nuevo modelo animal HSD para el estudio de la infección por Escherichia coli enterotoxigénica (ETEC). Se tomó a cuatro grupos de seis HDS divididos por edad en semanas y se infectó oralmente a cada grupo con un inóculo de ETEC de 2 x 10 a la 8 bacterias por mililitros. Se mantuvieron los HSD con agua ad libitum antes y durante la infección. Los parámetros evaluados fueron: presencia, duración y gravedad de la diarrea, así como el número de días y el porcentaje de ETEC excretada. Los resultados se analizaron por la prueba de distribución de chi cuadrada. Todos los grupos de HSD mostraron alta susceptibilidad a la infección por ETEC. Particularmente, el grupo de siete semanas mostró un 100 por ciento de presencia de diarrea, en comparación con 50 por ciento, 16 por ciento y 0 por ciento en los grupos de 10, 11 y13, respectivamante. La duración y la gravedad de la diarrea fue tres veces mayor en el grupo de siete semanas al ser comparado con los otros grupos. Los días promedio de excreción en el grupo de siete semanas fueron 5.7 contra 2.4, 2 y 0.5 días, respectivamante; el análisis de chi cuadrada de las variables mencionadas mostró una p< 0.0001. El modelo del HSD de siete semanas resultó ser fácilmente manipulable, reproducible, de bajo costo, y, por lo tanto, altamnte eficiente para el estudio de la infección experimental por ETEC