Graft application and dexamethasone treatment influences new bone formation in rat tibial bone defects / Aplicación de injerto y tratamiento con dexametasona influyen en la formación de hueso nuevo en los defectos en la tibia de rata

SUMMARY: The objective of this study were bone defect complications that occur due to traumas or infections. Bone grafts are required to provide support, fill gaps and improve biological repair in skeletal damage. Dexamethasone plays role in calcium signaling modulation and used in diseases. Aim of this study was to evaluate osteonectin and osteopontin expressions in new bone development after dexamethasone application on tibial bone defects. Rats were divided into defect, defect+graft and defect+graft+dexamethasone treated groups. Tibial bone defect created, and rats were kept immobile for 28 days. Alloplastic material was placed in defect area in second and group third groups. 2.5 mg/kg Dex and normal saline were injected to dexamethasone and defect groups twice a week for 56 days. Inflammation and congestion were increased in defect and defect+graft groups. Defect+graft+dexamethasone group; increased number of osteoblast and osteocyte cells, dense bone matrix, formation of new bone trabeculae was observed. Defect+graft group; osteonectin expression in graft regions, osteoblast cells, some connective tissue cells and fibers were seen whereas in defect+graft+dexamethasone group; osteopontin expression in osteoblast and osteocyte cells of new bone trabeculae were observed. Dexamethasone may lead to formation of new bone trabeculae into the graft material resulting in increased osteoconduction and osteoinductive effect for differentiation of osteon.

RESUMEN: Los defectos óseos son complicaciones que ocurren debido a traumas o infecciones. Se requieren injertos óseos para proporcionar apoyo, llenar los espacios y mejorar la reparación biológica en el hueso dañado. La dexametasona desempeña un papel importante en la modulación de la señalización del calcio y se usa en enfermedades. El objetivo de este estudio fue evaluar las expresiones de osteonectina y osteopontina en el desarrollo óseo después de la aplicación de dexametasona en defectos óseos tibiales. Las ratas se dividieron en grupos: defecto, defecto + injerto y defecto + injerto + grupos tratados con dexametasona. Se creó un defecto óseo tibial, y las ratas se mantuvieron inmóviles durante 28 días. El material aloplástico se colocó en el área del defecto en el segundo y tercer grupo. Se inyectaron 2,5 mg / kg de dexametasona y solución salina normal a grupos de defectos dos veces por semana durante 56 días. La inflamación y la congestión aumentaron en los grupos de defectos y defectos + injerto; En el grupo defecto + injerto + grupo tratado con dexametasona se observó un aumento en el número de osteoblastos y osteocitos, de matriz ósea densa y en la formación de nuevas trabéculas óseas. En el grupo defecto + grupo de injerto se observó la expresión de osteonectina en las áreas de injerto, osteoblastos, algunas células y fibras de tejido conectivo, mientras que en el grupo defecto + injerto + dexametasona se observó la expresión de osteopontina en osteoblastos y osteocitos y formación de nuevas trabéculas óseas . En conclusión la dexametasona puede conducir a la formación de nuevas trabéculas óseas en el material de injerto, lo que resulta en un aumento de la osteoconducción y un efecto osteoinductivo para la diferenciación del osteón.

Obtençäo e caracterizaçäo de linhagem de células osteoblásticas / Development and characterization of osteoblast-like cell line

Apresentamos metodologia para obtençäo de linhagem de células osteoblástica propagada a partir de tecido ósseo normal. Por meio de técnica de dispersäo enzimática células isoladas do osso parietal de ratos recém-nascidos foram cultivadas em meio de Eagle modificado por Dullbecco supplementado com soro fetal bovino (10 por cento). Após a primeira passagem as culturas foram induzidas pela suplementaçäo do meio com ß-glicerofosfato de sódio (10mM), ácido ascórbico (50ug/ml) e dexametasona (10 elevado a -8 M) para obtençäo de diferenciçäo fenotípica e funcional. A morfologia, presença de atividade de fosfatase alcalina, produçäo de nódulos calcificados, expressäo imunocitoquímica de proteínas do tecido ósseo colagênicas (colágeno tipo I) e näo colagênicas (osteonectina e sialoproteína óssea-II) comprovaram a natureza osteoblástica da linhagem obtida. O sistema desenvolvido confirmou que a técnica de cultivo celular primário a partir de tecido ósseo normal é viável e origina células com as características básicas dos osteoblastos. Essa metodologia de obtençäo de células osteoblásticas pode ser utilizada amplamente em Odontologia, em especial, nos estudos da fisio-patologia óssea e em testes de compatibilidade de biomateriais que estaräo em contato constante com o tecido ósseo

Rol del gen SPARC en la capacidad tumorigénica de células de melanoma humano / The role of SPARC gene in tumorigenic capacity of human melanoma cells

En un estudio previo demostramos que líneas celulares y tumores de melanoma humano expresan altos niveles de la proteína de matriz extracelular SPARC. Para determinar su rol en la progresión del melanoma humano, la línea IIB-MELLES fue transfectada con el cDNA de SPARC anti-sentido. Se aislaron tres clones con expresión disminuida de SPARC. Ninguno de ellos mostró cambios en la cinética de crecimiento in vitro comparado con las células control. La inyección s.c. de células control en ratones atímicos mostró desarrollo tumoral en el 100 por ciento de los animales, mientras que ninguno de los clones dio origen a tumores. Estos estudios demuestran que SPARC podría jugar un rol central en la progresión del melanoma humano.