Rotavirus and adenovirus in diarrheic and non-diarrheic feces of children, in Araraquara, SP, Brazil

Procurando verificar a participaçäo de rotavirus e adenovirus na etiologia da gastrenterite infantil, 280 amostras de fezes de crianças da faixa etária de 0 a 5 anos foram coletadas em Araraquara-SP, sendo 140 de crianças com diarréia e 140 do grupo de controle. A pesquisa desses vírus foi realizada através de um ensaio imunoenzimático (EIARA) e adicionalmente, rotavirus foi pesquisado através da eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE). No grupo diarréico, rotavirus foi detectado em 8,6% das amostras usando EIARA e em 7,9% usando PAGE. Nenhuma das amostras do grupo controle se mostrou positiva para esse vírus. Adenovirus foi detectado em 2,9% das amostras do grupo diarréico e em 1,4 % das fezes do grupo controle. Os resultados mostram que o rotavirus participam ativamente da etiologia da diarreia infantil em nossa cidade

Detecçäo de rotavírus em diarréias crônicas e gastrenterites agudas infantis em Belo Horizonte, MG / Detection of rotavirus in stools of diarrhoeic children in Belo Horizonte, MG, Brazil

Foi realizado um estudo em crianças atendidas no HC da UFMG, tendo sido o rotavírus detectado em amostras fecais de 36 (17,14%) crianças näo hospitalizadas, em um grupo de 210 crianças com diarréia; e em 14 (56,0%) crianças de um grupo de 25 crianças hospitalizadas com gastrenterite aguda. As amostras fecais foram testadas em ELISA e os perfis eletroforéticos do RNA foram determinados em gel de poliacarilamida. Entre 42 amostras de vírus analisadas, 3 diferentes eletroforetipos foram observados, com marcada predominância de um tipo

Comparaçao das tecnicas de microscopia eletronica (ME) eletroforese em gel de poliacrilamida (EPGA), ensaio imunoenzimatico (EI) e aglutinaçao do latex (AL) no diagnostico / Comparative study of the electron microscopy (EM),polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE),enzyme immunoassay (EIA) and latex agglutination (LA) for the rotativiruses diagnosis

Duzentos e trinta e uma amostras fecais,coletadas durante o periodo de julho de 1984 a julho de 1988, originarias de crianças de um mes a cinco anos de idade, acometidas de diarreia aguda, foram analisadas atraves de microscopia eletronica (ME), ensaio imunoenzimatico (IE), eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA) do RNA viral e aglutinaçao do latex (AL), a fim de se comparar a sensibilidade e a importancia das tecnicas usadas. Constatou-se que do total, 47 amostras (47/231, 20,3%)foram consideradas positivas para rotavirus por pelo menos uma tecnica, 32 amostras detectadas por ME (32/47,68,0%); 31 amostras por EGPA (31/47, 65,9%), 31 por IE (31/47,65,9%) e 30 amostras por AL (30/47,63,8%). Dezoito amostras (18/47,38,2%) foram positivas pelas quatro tecnicas, nove amostras (9/47,19,1%) positivas por tres tecnicas, sete amostras (7/47, 14,8%) positivas por duas tecnicas e 184 amostras (l84/231,79,6%) negativas pelas quatro tecnicas. A concordancia entre as quatro tecnicas foi de 87,4% (202/231). A analise estatistica (Teste de McNemar) entre os resultados dos testes em que se detectou maior diferença de positividade,i.e., ME x AL, mostrou nao haver diferença significativa na sensibilidade dos metodos utilizados (P>0,5).

A possible fifth human rotavirus serotype and an unusual serotype 2, subgroup II rotavirus strains

Uma cepa de rotavírus, obtida de criança diarreica com 22 meses de idade, näo reagiu com anticorpos monoclonais para os quatro sorotipos desse agente, emergindo como um possível novo sorotipo. Essa amostra se caracterizou por pertencer ao subgrupo II, exibindo perfil genômico, por eletroforese em gel de policrilamida, tipicamente longo. Detectou-se, ainda, outra amostra de rotavírus, oriunda de criança com 19 meses de idade, assintomática, com características sorológicas que a classificaram como sorotipo 2, monoclonais. Näo se obtiveram padröes de eletroforese nucleica suficientemente nítidos, bem como näo se logrou a replicaçäo virótica dessa cepa em células da linhagem "MA 104", quer a partir da simples suspensäo de fezes, quer após efetuada a purificaçäo em gradiente de cloreto de césio. Ambos os achados acima referidos decorreram de estudo longitudinal envolvendo 88 crianças, habitantes da área periférica de Belém, observados desde o seu nascimento até os três anos de idade

A reaçäo de imunofluorescência indireta no diagnóstico de gastroenterites por rotavírus / The indirect immunofluorescence as say for the diagnosis of human rotavirus gastroenteritis

Utilizando a cepa de rotavírus SA-11, cultivada em células MA-104 e purificadas em gradiente de CsCl, soros antirotavírus foram preparados em cobaias para uso no diagnóstico de gastroenterites por rotavírus, através da reaçäo de imunofluorescência indireta. Do total de 268 casos estudados, analisados por imunofluorescência indireta, feita em microplacas com culturas de células MA-104, obteve-se uma porcentagem de positividade de 14,93% (40 amostras). A comparaçäo desta prova com o ensaio imunoenzimático (EIERA) e a eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA), revelou boa concordância entre os três ensaios, com valores para kappa entre 0,72 e 0,83, significativamente maior que a concordância obtida ao acaso.

Enzimoinmunoanalisis para rotavirus con nylon como fase solida / Enzyme-linked immunoassay for ratavirus using nylon as solid phase

El presente trabajo describe un enzimoinmunoanálisis (EIA) para detectar Rotavirus en heces usando anticuerpos preparados en conejo inmovilizaods en nylon como fase de captura, y un segundo anticuerpo, preparado en cabra conjugado a enzima como fase de revelado. El conjugado se preparó usando peroxidas de rábano picante mediante la técnica de oxidación con periodato de Nakane. La fase sólida consistió en dados de nylon (66 CNL) de 3 mm de lado, los que fueron sometidos a hidrólisis parcial con ácido para liberar los grupos amino reactivos. El acople de anticuerpo de captura a la fase sólida se hizo mediante el uso de un brazo químico de glutarraldehido y resultó en una unión covalente entre la gamma globulina y el nylon. Como sustrato de revelado se usó o-fenilendiamina en buffer fosfato citrato pH 5,0 con 0,5% de peróxido de hidrógeno. El EIA se realizó con extractos acuosos de heces que fueron incubados con un dado de nylon sensibilizado con anticuerpos y posteriormente revelado incubado con el conjugado y posterior agregado del sustrato. Se leyerion como positivo todas aquellas muestras que desarrollaron color y cuya DO a 492 nm fue superior a 0,350. El método mostró perfecta correlación con muestras positivas y testigos negativos frente a un reactivo obtenido comercialmente