ABSTRACT
The expression of cell surface antigens of the spontaneous transplantable M3-murine tumour was studied by means of the monoclonal antibody (MAb) B2C114 which recognizes the human blood group-A carbohydrate antigen. Following radioiodination the MAb retained their immunoreactivity and demonstrated a significantly higher in vitro binding with isolated M3-tumour cells as compared with a control antibody. B2C114 revealed 10(6) antigenic sites per cell, with a constant affinity of 5.1 x 10(9)/M. Biodistribution studies showed that B2C114 discriminated between malignant tumour and mouse normal tissues. Radioimmunodetection of Balb/c mice bearing s.c. M3-tumour showed that tumour was specifically defined without subtraction 1 day after injection of the radiolabelled antibody.
Subject(s)
Adenocarcinoma/diagnostic imaging , Antibodies, Monoclonal/metabolism , Mammary Neoplasms, Experimental/diagnostic imaging , ABO Blood-Group System/immunology , Adenocarcinoma/metabolism , Animals , Antibodies, Monoclonal/isolation & purification , Female , Injections, Intraperitoneal , Iodine Radioisotopes , Mammary Neoplasms, Experimental/metabolism , Mice , Mice, Inbred BALB C , Radionuclide Imaging , Tissue Distribution , Tumor Cells, Cultured/metabolismABSTRACT
Se demuestra en el presente trabajo la utilidad de anticuerpos monoclonales anti-grupo sanguíneo. A obtenidos a partir de un híbrido generado por fusión entre linfocitos de bazo de ratón inmunizado y células de mieloma. El clon productor del anticuerpo monoclonal, denominado B2/C114, fue propagado como tumor ascítico en ratones, lo que permitió su conservación y producción en gran escala. El reactivo obtenido es útil para la evaluación rutinaria de grupos sanguíneos, presentando gran avidez, estabilidad superior a 12 meses y alto título, condiciones que satisfacen ampliamente los requerimientos de seguridad diagnóstica y costo efectivo (AU)
Subject(s)
Mice , Animals , Humans , Antibodies, Monoclonal/biosynthesis , Blood Group Antigens/immunology , Agglutination , Carcinoembryonic Antigen/immunology , Antibody-Producing Cells , Hybridomas/metabolism , Immunoglobulin G/biosynthesisABSTRACT
Se demuestra en el presente trabajo la utilidad de anticuerpos monoclonales anti-grupo sanguíneo. A obtenidos a partir de un híbrido generado por fusión entre linfocitos de bazo de ratón inmunizado y células de mieloma. El clon productor del anticuerpo monoclonal, denominado B2/C114, fue propagado como tumor ascítico en ratones, lo que permitió su conservación y producción en gran escala. El reactivo obtenido es útil para la evaluación rutinaria de grupos sanguíneos, presentando gran avidez, estabilidad superior a 12 meses y alto título, condiciones que satisfacen ampliamente los requerimientos de seguridad diagnóstica y costo efectivo
Subject(s)
Mice , Animals , Humans , Agglutination , Antibodies, Monoclonal/biosynthesis , Blood Group Antigens/immunology , Antibody-Producing Cells , Carcinoembryonic Antigen/immunology , Hybridomas/metabolism , Immunoglobulin G/biosynthesisABSTRACT
Several of aminopterin's drawbacks such as photosensitivity and high toxicity prompted us to compare the ability of methotrexate to select for hybridomas. Assessing the effect of both drugs on X63/Ag 8.653 myeloma cells and hybrid cells secreting monoclonal antibodies by tritiated thymidine incorporation and percentage of viable cells, we have shown that methotrexate could be used in place of aminopterin for the rescue of hybrid cells in selective medium. In addition, methotrexate hybrids develop more rapidly and can therefore be processed earlier. The stability and low toxicity of methotrexate also favor its use in the selection of hybridomas.
Subject(s)
Aminopterin/pharmacology , Hybridomas/drug effects , Methotrexate/pharmacology , Antibody Formation/drug effects , Antibody-Producing Cells/drug effects , Cell Survival/drug effects , Culture Media/physiology , Hybridomas/metabolism , Thymidine/metabolism , TritiumABSTRACT
A monoclonal anti-equine infectious anemia virus (anti-EIAV) antibody (1B15) has been generated by fusion of X63 Ag 8.653 myeloma cells and spleen cells from mice hypersensitized with viral antigen p29. Ouchterlony double-diffusion analysis indicated that antibody 1B15 is of the IgG class. The specificity of the immune reaction for p29 was confirmed by cross-over immunoelectrophoresis and disc-gel electrophoresis. MAb 1B15 was used to devise a solid-phase 'capture' RIA for EIAV-p29 antigen. The antigen, bound by 1B15 adsorbed onto wells of flexible microtitre plates, was detected using a rabbit anti-p29 serum followed by a 125I-labelled tracer. The assay was applied to detected using a of virus in horse serum and infected cell culture fluids.
Subject(s)
Antibodies, Monoclonal/biosynthesis , Antibodies, Viral/biosynthesis , Antigens, Viral/analysis , Infectious Anemia Virus, Equine/immunology , Animals , Antibodies, Monoclonal/immunology , Antibodies, Viral/immunology , Cell Line , Counterimmunoelectrophoresis , Electrophoresis, Disc , Epitopes , Equine Infectious Anemia/diagnosis , Horses , Hybridomas , Immunodiffusion , Immunoglobulin G/biosynthesis , Immunoglobulin G/immunology , Mice , Mice, Inbred BALB C , Radioimmunoassay , Viral Proteins/immunologyABSTRACT
El objetivo del presente trabajo fue la producción, caracterización y aplicación de anticuerpos monoclonales anti-antígeno carcinoembrionario. Ratones Balb/c fueron inmunizados con 2 dosis ip de 5 y 10 microng de antígeno carcinoembrionario en adyuvante completo de Freund cada 30 días, y 3 dosis de refuerzo durante días consecutivos. Las células esplénicas fueron fusionadas con células de mieloma X63/Ag8.653 en presencia de polietilenglicol, y los híbridos rescatados en medio selectivo conteniendo hipoxantina-methotrexate-timidina. La detección de híbridos productores de anticuerpos monoclonales dirigidos contra el antígeno se realizó por radioinmunoanálisis en fase sólida, utilizando como trazador imunoglobulina de conejo anti-ratón marcada con 125I. Se obtuvo una eficiencia del 65% en crescimiento y del 13% en positividad. Los híbridos fueron clonados y estabilizados por miniclonado repetitivo, con un 65% de crecimiento y 40% de positividad. De 11 hibridomas productores se seleccionaron 3 que fueron inyectados en ratones BALB/c para la obtención de tumores ascíticos. La inmuno-especificidad de los anticuerpos monoclonales A4, A15 y A19 fue determinada por inmunoelectroforesis crozada, detectándose la formación de inmunoprecipitados específicos entre los anticuerpos monoclonales y el antígeno carcinoembrionario marcado con 125I. El anticuerpo monoclonal A4, de altas afinidad (K=1,60x10*10 litros/mol) fue activo en el radioinmunoensayo hasta la dilución 1: 10 000 testada, permitiendo detectar valores de aproximadamente 0,5ng/ml. En ensayos de competición contra el anticuerpo policlonal, el rango de inhibición obtenido fue del 28 al 35% utilizando antígeno purificado, y del 10 al 15% con sueros de pacientes afectados por cáncer de colon...(AU)
Subject(s)
Mice , Animals , Humans , Female , In Vitro Techniques , Antibodies, Monoclonal/biosynthesis , Carcinoembryonic Antigen/isolation & purification , Antibody Specificity/methods , Hybridization, Genetic , Hybridomas/immunology , Antibodies, Monoclonal/isolation & purification , Culture Techniques , Hybridomas , Mice, Inbred BALB CABSTRACT
El objetivo del presente trabajo fue la producción, caracterización y aplicación de anticuerpos monoclonales anti-antígeno carcinoembrionario. Ratones Balb/c fueron inmunizados con 2 dosis ip de 5 y 10 microng de antígeno carcinoembrionario en adyuvante completo de Freund cada 30 días, y 3 dosis de refuerzo durante días consecutivos. Las células esplénicas fueron fusionadas con células de mieloma X63/Ag8.653 en presencia de polietilenglicol, y los híbridos rescatados en medio selectivo conteniendo hipoxantina-methotrexate-timidina. La detección de híbridos productores de anticuerpos monoclonales dirigidos contra el antígeno se realizó por radioinmunoanálisis en fase sólida, utilizando como trazador imunoglobulina de conejo anti-ratón marcada con 125I. Se obtuvo una eficiencia del 65% en crescimiento y del 13% en positividad. Los híbridos fueron clonados y estabilizados por miniclonado repetitivo, con un 65% de crecimiento y 40% de positividad. De 11 hibridomas productores se seleccionaron 3 que fueron inyectados en ratones BALB/c para la obtención de tumores ascíticos. La inmuno-especificidad de los anticuerpos monoclonales A4, A15 y A19 fue determinada por inmunoelectroforesis crozada, detectándose la formación de inmunoprecipitados específicos entre los anticuerpos monoclonales y el antígeno carcinoembrionario marcado con 125I. El anticuerpo monoclonal A4, de altas afinidad (K=1,60x10*10 litros/mol) fue activo en el radioinmunoensayo hasta la dilución 1: 10 000 testada, permitiendo detectar valores de aproximadamente 0,5ng/ml. En ensayos de competición contra el anticuerpo policlonal, el rango de inhibición obtenido fue del 28 al 35% utilizando antígeno purificado, y del 10 al 15% con sueros de pacientes afectados por cáncer de colon...
Subject(s)
Mice , Animals , Humans , Female , Antibodies, Monoclonal/biosynthesis , Antibody Specificity/methods , Carcinoembryonic Antigen/isolation & purification , Hybridization, Genetic , Hybridomas/immunology , In Vitro Techniques , Antibodies, Monoclonal/isolation & purification , Culture Techniques , Hybridomas/transplantation , Mice, Inbred BALB CSubject(s)
Chorionic Gonadotropin/blood , Dysgerminoma/blood , Testicular Neoplasms/blood , alpha-Fetoproteins/analysis , Adolescent , Adult , Child , Child, Preschool , Humans , Male , Middle Aged , Prognosis , RadioimmunoassaySubject(s)
Child, Preschool , Child , Adolescent , Adult , Middle Aged , Humans , Male , alpha-Fetoproteins , Chorionic Gonadotropin , Testicular Neoplasms , DysgerminomaSubject(s)
Adult , Middle Aged , Aged , Humans , Esophageal Neoplasms , Dinitrochlorobenzene , Lymphocytes , Skin TestsSubject(s)
Child, Preschool , Child , Adolescent , Adult , Middle Aged , Humans , Male , alpha-Fetoproteins , Chorionic Gonadotropin , Testicular Neoplasms , DysgerminomaSubject(s)
Adult , Middle Aged , Humans , Esophageal Neoplasms , Dinitrochlorobenzene , Lymphocytes , Skin TestsSubject(s)
Urogenital Neoplasms/immunology , Adolescent , Adult , Aged , Antigen-Antibody Complex/analysis , Carcinoembryonic Antigen/analysis , Female , Humans , Hypersensitivity, Delayed/immunology , Intradermal Tests , Lymphocyte Activation , Male , Middle Aged , Urologic Diseases/immunology , alpha-Fetoproteins/analysisABSTRACT
One hundred and thirty-four patients (118 males and 16 females) with epidermoid carcinoma of the head and neck were studied. After treatment of the primary lesion, they were randomized into two groups: 69 received levamisole, 150 mg/day orally for 3 consecutive days every other week, and 65 received placebo. Immune status was also evaluated. Positive reactions to dinitrochlorobenzene increased significantly after primary tumor therapy in both levamisole- and placebo-treated patients. There were no significant differences in immune responses between the two groups, except in recall antigen reactivity, which was decreased in both groups overall recurrence and death rates at 36 months did not differ between the two groups of patients. However, stage I and II patients treated with levamisole had a significantly higher incidence of recurrence than the placebo-treated patients (P less than 0.02), while there was some evidence that levamisole-treated stage IV patients did better. It is concluded that the overall outcome in patients with squamous cell carcinoma controlled locally by surgery or radiation was not favorably affected by levamisole in the dose and schedule used in this protocol.