Inhibition of erythrocyte aminolevulinate dehydratase by a 56.2-kD peptide from uremic plasma.

Among the abnormalities in erythrocyte porphyrin metabolism already described in patients with chronic renal failure on hemodialysis, a decrease in blood aminolevulinate dehydratase activity has been reported, suggesting the presence in uremic plasma of an inhibitor of the enzyme. The aim of this work has been to isolate and characterize such an inhibitor. Blood samples from 105 patients with chronic uremia were collected; plasma was applied to Sephadex G-100 columns and the fraction with the highest inhibiting capacity was identified and purified by subsequent SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, followed by electroelution and electroblotting. It was demonstrated that the factor present in plasma of uremic patients inhibited blood aminolevulinate dehydratase in a concentration-dependent manner; its inhibitory properties were abolished after heat, trypsin and TCA treatment indicating its peptidic nature. The purified inhibitor has an apparent molecular mass of 56.2 kD, it inhibits blood aminolevulinate dehydratase in a competitive way and the Ki value is 12x10(-6) M. The amino acid composition of the inhibitor has been determined and it has been found that its N-terminal amino acid is blocked. The isolated peptide may play a role in heme biosynthesis disturbances and in the pathogenesis of uremic anemia.

Urodecarboxilasa en sangre de pacientes hemodializados / Decarboxylase in blood in hemodialysed patients

En la porfiria cutánea tarda(PCT) hay una falla en la uroporfirinógeno decarboxilasa (Uro-D) hepática, como consecuencia se incrementa la concentración de porfirinas altamente carboxiladas. Enla PCT hereditaria la Uro-D está disminuída en sangre y es normal en la PCT adquirida. Parte de la población hemodializada presenta signos cutáneos que son histológica y morfológicamente semejantes a la PCT, asociado a niveles aumentados de porfirias plasmáticas. Se estudió el contenido de porfirinas plasmáticas y la actividad de la Uro-D eritrocitaria, en 12 pacientes hemodializados sin lesiones cutáneas, uno de ellos portador de PCT hereditaria. El contenido de porfirias en plasma estuvo aumentado(0,084 mas igual 0,,10 ug/ml; uroporfirina igual 80 por ciento, cproporfirina igual 20 por ciento) en 30 por ciento de los pacientes estudiados( valor normal: 0,048 mas igual 0,010 ug/ml; coproporfirina igual 100 por ciento). Las porfirinas plasmáticas del paciente PCT al inicio del tratamiento con S-adenosil-L-metionina fue: 1,71 ug/ml; uroporfirina igual 48 por ciento, firiaporfirina igual 41 por ciento hexaporfirina igual 7 por ciento, pentaporfirina igual 3 por ciento y coproporfirina igual 1 por ciento) y luego de 6 años, al final del tratamiento, los valores fueron: 0,089 ug/ml; uriporfirina igual 80 por ciento, firiaporfirina igual 20 por ciento. La remisión clínica se correlacionó con la bioquímica. En los pacientes hemodializados la actividad de URO_D estuvo dentro de los valores normales(12,45 mas igual 1,o U/ml GR), excepto en el portador de la PCT hereditaria en el cual la actividad estuvodisminuída al 50 por ciento. Estos resultados sugieren que la hemodialisis per se no modificaria a la actividad de URO-D eritrocitaria.

Urodecarboxilasa en sangre de pacientes hemodializados / Decarboxylase in blood in hemodialysed patients

En la porfiria cutánea tarda(PCT) hay una falla en la uroporfirinógeno decarboxilasa (Uro-D) hepática, como consecuencia se incrementa la concentración de porfirinas altamente carboxiladas. Enla PCT hereditaria la Uro-D está disminuída en sangre y es normal en la PCT adquirida. Parte de la población hemodializada presenta signos cutáneos que son histológica y morfológicamente semejantes a la PCT, asociado a niveles aumentados de porfirias plasmáticas. Se estudió el contenido de porfirinas plasmáticas y la actividad de la Uro-D eritrocitaria, en 12 pacientes hemodializados sin lesiones cutáneas, uno de ellos portador de PCT hereditaria. El contenido de porfirias en plasma estuvo aumentado(0,084 mas igual 0,,10 ug/ml; uroporfirina igual 80 por ciento, cproporfirina igual 20 por ciento) en 30 por ciento de los pacientes estudiados( valor normal: 0,048 mas igual 0,010 ug/ml; coproporfirina igual 100 por ciento). Las porfirinas plasmáticas del paciente PCT al inicio del tratamiento con S-adenosil-L-metionina fue: 1,71 ug/ml; uroporfirina igual 48 por ciento, firiaporfirina igual 41 por ciento hexaporfirina igual 7 por ciento, pentaporfirina igual 3 por ciento y coproporfirina igual 1 por ciento) y luego de 6 años, al final del tratamiento, los valores fueron: 0,089 ug/ml; uriporfirina igual 80 por ciento, firiaporfirina igual 20 por ciento. La remisión clínica se correlacionó con la bioquímica. En los pacientes hemodializados la actividad de URO_D estuvo dentro de los valores normales(12,45 mas igual 1,o U/ml GR), excepto en el portador de la PCT hereditaria en el cual la actividad estuvodisminuída al 50 por ciento. Estos resultados sugieren que la hemodialisis per se no modificaria a la actividad de URO-D eritrocitaria. (AU)

Altered 5-aminolevulinic acid metabolism leading to pseudoporphyria in hemodialysed patients.

Hemodialysed patients with no history of porphyria may present neurological symptoms similar to those seen in acute porphyrias. Porphyria has been associated with an increase in plasma levels of 5-aminolevulinic acid and porphobilinogen. Our aim was to evaluate these parameters and the activities of the enzymes involved in the first steps of heme metabolism in non-porphyric hemodialysed patients. The activities of 5-aminolevulinate dehydratase and deaminase were determined in red blood cells (RBC) from 78 hemodialysed patients, before and after dialysis. Plasma levels of 5-aminolevulinic acid, porphobilinogen and zinc were also measured. These parameters were also measured in 40 volunteers to obtain controls levels. The levels of 5-aminolevulinic acid (0.98 +/- 0.09 microgram/ml) and porphobilinogen (1.32 +/- 0.13 micrograms/ml) were raised in non-porphyric patients prior to hemodialysis (P < 0.001) compared with controls (5-aminolevulinic acid 0.13 +/- 0.02 microgram/ml; porphobilinogen 0.90 +/- 0.09 microgram/ml). After dialysis there was a decrease in both 5-aminolevulinic acid (to 0.61 +/- 0.05 microgram/ml) and porphobilinogen (to 1.10 +/- 0.16 micrograms/ml) although both parameters remained higher than controls (P < 0.001). The activities of both 5-aminolevulinate dehydratase (0.550 +/- 0.095 U/ml RBC), and deaminase (54.13 +/- 9.13 U/ml RBC) were diminished in blood samples of patients before dialysis (P < 0.001) compared to controls (dehydratase 0.975 +/- 0.115 U/ml RBC; deaminase 77.32 +/- 10.00 U/ml RBC). After dialysis 5-aminolevulinate dehydratase activity was partially recovered (to 0.666 +/- 0.100 U/ml RBC) while deaminase returned to normal values (73.45 +/- 9.46 U/ml RBC). The plasma zinc concentration in hemodialysed patients (44 +/- 12 micrograms/100 ml) was significantly lower than controls (105 +/- 30 micrograms/100 ml, P < 0.001). Addition of 22.5 mM zinc to the dehydratase reaction mixture raised the activity of 5-aminolevulinate dehydratase in blood samples of hemodialysed patients taken before and after dialysis. The study reports a partial loss of activity of 5-aminolevulinate dehydratase and deaminase activities in red blood cells from non-porphyric patients undergoing hemodialysis. Since plasma zinc levels were below normal in hemodialysed patients, and the activity of 5-aminolevulinate dehydratase could be restored by the addition of zinc, it is suggested that these abnormalities in heme metabolism may be explained by altered zinc and associated antioxidant status following dialysis.

Porfiria cutánea tardia infantil en una niña con transplante renal / Porphyria cutanea tarda in one child with renal transplant

La porfiria cutánea tardía (PCT) es la más frecuente de las porfirias cutáneas. La forma infantil es poco frecuente. En el CIPYP se han eatudiados 16 casos de PCT infantil, que representan el 28 por ciento de la PCT infantil en la literatura internacional y el 3 por ciento del total de pacientes PCT adultos estudiados en el CIPYP. Se presentan los parámetros bioquímicos de un nuevo caso de PCT infantil (C:A, 9 años, sexo femenino); y de su grupo familiar. La niña ha exibido desde muy corta edad pelo tipo lanudo en espalda y abdomen. A la edad de 3 años (DIC: 1989) padeció de trastornos renales crónicos, y a los 5 años fue sometida a dialisis peritoneal durante 12 meses y hemodiálisis (3 h x 3/semana ) durante 25 meses, finalmente se le practicó transplante renal (25 de abril de 1992 ). Al mes siguiente al transplante manisfestó los signos clínicos de PCT (fragilidad cutánea, ampollas con contenido seroso en manos, hiperpigmentación);16 meses más tarde se confirmó el diagnóstico de PCT, sobre la base de la excreción elevada de porfirinas urinarias (7528 ug/24 h; VN:menor o igual 250 ug/24 h) y patrón (uroporfirina = 60 por ciento, firiaporfirina = 30 por ciento, hexaporfirina = 1 por ciento,pentaporfirina = 3 por ciento coproporfirina = 6 por ciento; VN = copro: 100 por ciento) y de porfirinas fecales (526 ug/g seco,VN menor o igual 130 ug/g seco), disminución de la uroporfiribógeno Decarboxilasa (URO-D =2.5 U/ml GR; VN = 12 mas menos 0,90 U/mnl GR) y elevado índice de porfirinas plasmático (5,87 =618 nm, VN menor o igual 13,= 618 nm). La actividad de la delta-aminolevulico dehidrasa ( ALA-D) eritrocitaria estuvo disminuida 47 por ciento (0,49 U/ml GR ) respecto a los controles normales (infantil = 0,84 más menos 0,20 U/ml GR). Los farmacos recibidos durante la diálisis extracorporea (hierro), y después del transplante renal( fenobarbital) pudierón ser algunos de los factores desencadenantes de la enfermedad. El contenido de porfirinas urinarias después del tratamiento con S-Adenosil-L-metionina (SAM) 30 mg/kg/ día oral y 200 mg de cloroquina durante solo una semana, se triplico a los 30 días (22825 mug/24 h ) y se habia reducido a la quinta parte del contenido inicial a los 210 días (1379 mug/24 h) de su comienzo,pero si llegar aún a valores normales

Porfiria cutánea tardia infantil en una niña con transplante renal / Porphyria cutanea tarda in one child with renal transplant

La porfiria cutánea tardía (PCT) es la más frecuente de las porfirias cutáneas. La forma infantil es poco frecuente. En el CIPYP se han eatudiados 16 casos de PCT infantil, que representan el 28 por ciento de la PCT infantil en la literatura internacional y el 3 por ciento del total de pacientes PCT adultos estudiados en el CIPYP. Se presentan los parámetros bioquímicos de un nuevo caso de PCT infantil (C:A, 9 años, sexo femenino); y de su grupo familiar. La niña ha exibido desde muy corta edad pelo tipo lanudo en espalda y abdomen. A la edad de 3 años (DIC: 1989) padeció de trastornos renales crónicos, y a los 5 años fue sometida a dialisis peritoneal durante 12 meses y hemodiálisis (3 h x 3/semana ) durante 25 meses, finalmente se le practicó transplante renal (25 de abril de 1992 ). Al mes siguiente al transplante manisfestó los signos clínicos de PCT (fragilidad cutánea, ampollas con contenido seroso en manos, hiperpigmentación);16 meses más tarde se confirmó el diagnóstico de PCT, sobre la base de la excreción elevada de porfirinas urinarias (7528 ug/24 h; VN:menor o igual 250 ug/24 h) y patrón (uroporfirina = 60 por ciento, firiaporfirina = 30 por ciento, hexaporfirina = 1 por ciento,pentaporfirina = 3 por ciento coproporfirina = 6 por ciento; VN = copro: 100 por ciento) y de porfirinas fecales (526 ug/g seco,VN menor o igual 130 ug/g seco), disminución de la uroporfiribógeno Decarboxilasa (URO-D =2.5 U/ml GR; VN = 12 mas menos 0,90 U/mnl GR) y elevado índice de porfirinas plasmático (5,87 =618 nm, VN menor o igual 13,= 618 nm). La actividad de la delta-aminolevulico dehidrasa ( ALA-D) eritrocitaria estuvo disminuida 47 por ciento (0,49 U/ml GR ) respecto a los controles normales (infantil = 0,84 más menos 0,20 U/ml GR). Los farmacos recibidos durante la diálisis extracorporea (hierro), y después del transplante renal( fenobarbital) pudierón ser algunos de los factores desencadenantes de la enfermedad. El contenido de porfirinas urinarias después del tratamiento con S-Adenosil-L-metionina (SAM) 30 mg/kg/ día oral y 200 mg de cloroquina durante solo una semana, se triplico a los 30 días (22825 mug/24 h ) y se habia reducido a la quinta parte del contenido inicial a los 210 días (1379 mug/24 h) de su comienzo,pero si llegar aún a valores normales(AU)

Hexaclorobenceno y pentacloro fenol en tejido adiposo y orina de un nino con porfiria cutanea tardia: evaluacion del tratamiento(s-adenosil-L-metionina y bajas dosis de cloriquina): a cuatro anos de inicido el mismo / Hexaclorobenzene and poentachlorophenol in fatty tissue and urine of child with porfiria cutanea tarda. Treatment evaluation (S-Adenosyl-L-Methionine and low dose of Chloroquine) four years after

Se ha estudiado el contenido de hexaclorobenceno(HCB) y pentaclorofenol(PCP)en tejido adiposo y orina de un ninio con porfiria cutanea tardia (PCT) hereditaria y del producto quimico con el cual estuvo en contacto. El contenido de HCB (2,3 ug/g) en orinayPCF (5,0 ml) fueron elevados respectoa los valores normales (HCB tej. adiposo<1 ug/gyPCF urinario ,0,1 ng/ml). L presencia de PCF en orina,indicador de intoxicacion por HCB,esta sugiriendo que este policlorado fue el desencadenante de la PCT en este ninio portador de la enfermedad. La variacion del contenido de porfirinas urinarias durante los tratamientos con A)bicarbonato (10mg/dia)y B) conbinado:S adenosil-L-Metionina(SAM)(12mg/kg/diax20dias) y cloroquina(2x110mg/semana) mostraron: En A)disminucion del 50 por ciento de las porfirinas iniciales (1700 ug/24h) luego de 50 meses de tratamiento,B) disminucion hasta alcanzar los valores normales(20-250 ug/24 h) luego de 4 meses de tratamiento. Las porfirinas se mantuvieron en valores normalesaun hasta 4 anios de iniciada la terapia con SAM y cloriquina

Hexaclorobenceno y pentacloro fenol en tejido adiposo y orina de un nino con porfiria cutanea tardia: evaluacion del tratamiento(s-adenosil-L-metionina y bajas dosis de cloriquina): a cuatro anos de inicido el mismo / Hexaclorobenzene and poentachlorophenol in fatty tissue and urine of child with porfiria cutanea tarda. Treatment evaluation (S-Adenosyl-L-Methionine and low dose of Chloroquine) four years after

Se ha estudiado el contenido de hexaclorobenceno(HCB) y pentaclorofenol(PCP)en tejido adiposo y orina de un ninio con porfiria cutanea tardia (PCT) hereditaria y del producto quimico con el cual estuvo en contacto. El contenido de HCB (2,3 ug/g) en orinayPCF (5,0 ml) fueron elevados respectoa los valores normales (HCB tej. adiposo<1 ug/gyPCF urinario ,0,1 ng/ml). L presencia de PCF en orina,indicador de intoxicacion por HCB,esta sugiriendo que este policlorado fue el desencadenante de la PCT en este ninio portador de la enfermedad. La variacion del contenido de porfirinas urinarias durante los tratamientos con A)bicarbonato (10mg/dia)y B) conbinado:S adenosil-L-Metionina(SAM)(12mg/kg/diax20dias) y cloroquina(2x110mg/semana) mostraron: En A)disminucion del 50 por ciento de las porfirinas iniciales (1700 ug/24h) luego de 50 meses de tratamiento,B) disminucion hasta alcanzar los valores normales(20-250 ug/24 h) luego de 4 meses de tratamiento. Las porfirinas se mantuvieron en valores normalesaun hasta 4 anios de iniciada la terapia con SAM y cloriquina