Monoclonal antibodies specific for carcinoembryonic antigen produced by hybridoma technology

El objetivo del presente trabajo fue la producción, caracterización y aplicación de anticuerpos monoclonales anti-antígeno carcinoembrionario. Ratones Balb/c fueron inmunizados con 2 dosis ip de 5 y 10 microng de antígeno carcinoembrionario en adyuvante completo de Freund cada 30 días, y 3 dosis de refuerzo durante días consecutivos. Las células esplénicas fueron fusionadas con células de mieloma X63/Ag8.653 en presencia de polietilenglicol, y los híbridos rescatados en medio selectivo conteniendo hipoxantina-methotrexate-timidina. La detección de híbridos productores de anticuerpos monoclonales dirigidos contra el antígeno se realizó por radioinmunoanálisis en fase sólida, utilizando como trazador imunoglobulina de conejo anti-ratón marcada con 125I. Se obtuvo una eficiencia del 65% en crescimiento y del 13% en positividad. Los híbridos fueron clonados y estabilizados por miniclonado repetitivo, con un 65% de crecimiento y 40% de positividad. De 11 hibridomas productores se seleccionaron 3 que fueron inyectados en ratones BALB/c para la obtención de tumores ascíticos. La inmuno-especificidad de los anticuerpos monoclonales A4, A15 y A19 fue determinada por inmunoelectroforesis crozada, detectándose la formación de inmunoprecipitados específicos entre los anticuerpos monoclonales y el antígeno carcinoembrionario marcado con 125I. El anticuerpo monoclonal A4, de altas afinidad (K=1,60x10*10 litros/mol) fue activo en el radioinmunoensayo hasta la dilución 1: 10 000 testada, permitiendo detectar valores de aproximadamente 0,5ng/ml. En ensayos de competición contra el anticuerpo policlonal, el rango de inhibición obtenido fue del 28 al 35% utilizando antígeno purificado, y del 10 al 15% con sueros de pacientes afectados por cáncer de colon...(AU)

Monoclonal antibodies specific for carcinoembryonic antigen produced by hybridoma technology

El objetivo del presente trabajo fue la producción, caracterización y aplicación de anticuerpos monoclonales anti-antígeno carcinoembrionario. Ratones Balb/c fueron inmunizados con 2 dosis ip de 5 y 10 microng de antígeno carcinoembrionario en adyuvante completo de Freund cada 30 días, y 3 dosis de refuerzo durante días consecutivos. Las células esplénicas fueron fusionadas con células de mieloma X63/Ag8.653 en presencia de polietilenglicol, y los híbridos rescatados en medio selectivo conteniendo hipoxantina-methotrexate-timidina. La detección de híbridos productores de anticuerpos monoclonales dirigidos contra el antígeno se realizó por radioinmunoanálisis en fase sólida, utilizando como trazador imunoglobulina de conejo anti-ratón marcada con 125I. Se obtuvo una eficiencia del 65% en crescimiento y del 13% en positividad. Los híbridos fueron clonados y estabilizados por miniclonado repetitivo, con un 65% de crecimiento y 40% de positividad. De 11 hibridomas productores se seleccionaron 3 que fueron inyectados en ratones BALB/c para la obtención de tumores ascíticos. La inmuno-especificidad de los anticuerpos monoclonales A4, A15 y A19 fue determinada por inmunoelectroforesis crozada, detectándose la formación de inmunoprecipitados específicos entre los anticuerpos monoclonales y el antígeno carcinoembrionario marcado con 125I. El anticuerpo monoclonal A4, de altas afinidad (K=1,60x10*10 litros/mol) fue activo en el radioinmunoensayo hasta la dilución 1: 10 000 testada, permitiendo detectar valores de aproximadamente 0,5ng/ml. En ensayos de competición contra el anticuerpo policlonal, el rango de inhibición obtenido fue del 28 al 35% utilizando antígeno purificado, y del 10 al 15% con sueros de pacientes afectados por cáncer de colon...

Levamisole in squamous cell carcinoma of the head and neck.

One hundred and thirty-four patients (118 males and 16 females) with epidermoid carcinoma of the head and neck were studied. After treatment of the primary lesion, they were randomized into two groups: 69 received levamisole, 150 mg/day orally for 3 consecutive days every other week, and 65 received placebo. Immune status was also evaluated. Positive reactions to dinitrochlorobenzene increased significantly after primary tumor therapy in both levamisole- and placebo-treated patients. There were no significant differences in immune responses between the two groups, except in recall antigen reactivity, which was decreased in both groups overall recurrence and death rates at 36 months did not differ between the two groups of patients. However, stage I and II patients treated with levamisole had a significantly higher incidence of recurrence than the placebo-treated patients (P less than 0.02), while there was some evidence that levamisole-treated stage IV patients did better. It is concluded that the overall outcome in patients with squamous cell carcinoma controlled locally by surgery or radiation was not favorably affected by levamisole in the dose and schedule used in this protocol.

Levamisole in advanced human breast cancer.

A clinical trial of levamisole, an orally effective modifier of the immune response, is reported in women with primary inoperable breast cancer (stage III). After being rendered clinically disease-free by radiotherapy to the breast, supraclavicular area, and axilla, patients were allocated alternately to a control group (no further treatment) and a levamisole-treated group (150 mg orally three times a week on alternate weeks) and were followed-up by physical examination and laboratory tests. In 43 patients (23 control and 20 levamisole), there was significant prolongation of the median disease-free interval (25 v. 9 months) and survival (90% v. 35% alive at 30 months) in the levamisole-treated group compared with the controls. Levamisole treatment was also associated with an increase in the percentage and intensity of delayed hypersensitivity skin reactions and in the absolute lymphocyte-counts. No significant toxicity of levamisole was observed.