QUANTIFICATION OF ENTEROBACTERIA AND CLOSTRIDIUM SPP. IN POULTRY SLAUGHTERHOUSES SANITARY CONVEYORS BELTS

The increase in production and consumption of chicken meat has occurred due to modernization in this area. Such increase caused the concern about the transmission of pathogens to humans; however, with proper hygiene this transmission can be controlled. Thus, this study aimed to evaluate the pre-operational and operational hygiene in sanitary conveyors belts of chicken cuts in slaughterhouses through Clostridium spp. and Enterobacteria quantification. Statistical data analysis for Clostridium spp. colony count showed a difference between the studied slaughterhouses and the types of cleaning performed on sanitary conveyors belts (p

Quantification of enterobacteria and clostridium spp. In poultry slaughterhouses sanitary conveyors belts / Quantificação de enterobactérias e clostridium spp. Em esteiras condutoras de cortes de frango em frigoríficos

The increase in production and consumption of chicken meat has occurred due to modernization in this area. Such increase caused the concern about the transmission of pathogens to humans; however, with proper hygiene this transmission can be controlled. Thus, this study aimed to evaluate the pre-operational and operational hygiene insanitary conveyors belts of chicken cuts in slaughterhouses through Clostridium spp. and Enterobacteria quantification.Statistical data analysis for Clostridium spp. colony count showed a difference between the studied slaughterhouses and the types of cleaning performed on sanitary conveyors belts (p<0,0001). Already statistical analysis for Enterobacteriaceae colony count showed significant differences only between the visited slaughterhouses (p<0,0001),with no difference between the types of conveyors belts cleaning (p=0,4057). The results showed that there was avariation in bacterial count among the slaughterhouses and the hygiene process in sanitary conveyors belts were deficient because they presented counts higher than the values recommended by the international organizations.(AU)

O aumento da produção e do consumo per capita de carne de frango ocorreu devido a modernização neste setor. Tal aumento gerou preocupação com a transmissão de patógenos para o ser humano, porém com uma higienização adequada essa transmissão pode ser controlada. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a higiene pré-operacional e operacional das esteiras condutoras de cortes de frangos através da quantificação de Clostridium spp. e Enterobactérias. As análises estatísticas da contagem de Clostridium spp. mostraram uma diferença entre os frigoríficos visitados e entre os tipos de limpeza realizados nas esteiras (p<0,0001). Já as análises estatísticas para a contagem de Enterobactérias mostraram diferenças significativas somente entre os frigoríficos visitados (p<0,0001), não havendo diferença entre os tipos de limpeza das esteiras (p=0,4057). Os resultados demonstraram que houve uma variação na contagem bacteriana entre os frigoríficos e que a higienização das esteiras foram deficientes pois apresentaram contagens superiores aos valores recomendado pelas organizações internacionais.(AU)

Quantification of enterobacteria and clostridium spp. In poultry slaughterhouses sanitary conveyors belts / Quantificação de enterobactérias e clostridium spp. Em esteiras condutoras de cortes de frango em frigoríficos

The increase in production and consumption of chicken meat has occurred due to modernization in this area. Such increase caused the concern about the transmission of pathogens to humans; however, with proper hygiene this transmission can be controlled. Thus, this study aimed to evaluate the pre-operational and operational hygiene insanitary conveyors belts of chicken cuts in slaughterhouses through Clostridium spp. and Enterobacteria quantification.Statistical data analysis for Clostridium spp. colony count showed a difference between the studied slaughterhouses and the types of cleaning performed on sanitary conveyors belts (p<0,0001). Already statistical analysis for Enterobacteriaceae colony count showed significant differences only between the visited slaughterhouses (p<0,0001),with no difference between the types of conveyors belts cleaning (p=0,4057). The results showed that there was avariation in bacterial count among the slaughterhouses and the hygiene process in sanitary conveyors belts were deficient because they presented counts higher than the values recommended by the international organizations.

O aumento da produção e do consumo per capita de carne de frango ocorreu devido a modernização neste setor. Tal aumento gerou preocupação com a transmissão de patógenos para o ser humano, porém com uma higienização adequada essa transmissão pode ser controlada. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a higiene pré-operacional e operacional das esteiras condutoras de cortes de frangos através da quantificação de Clostridium spp. e Enterobactérias. As análises estatísticas da contagem de Clostridium spp. mostraram uma diferença entre os frigoríficos visitados e entre os tipos de limpeza realizados nas esteiras (p<0,0001). Já as análises estatísticas para a contagem de Enterobactérias mostraram diferenças significativas somente entre os frigoríficos visitados (p<0,0001), não havendo diferença entre os tipos de limpeza das esteiras (p=0,4057). Os resultados demonstraram que houve uma variação na contagem bacteriana entre os frigoríficos e que a higienização das esteiras foram deficientes pois apresentaram contagens superiores aos valores recomendado pelas organizações internacionais.

Microbiological profile of donor corneas stored for tectonic transplantation purposes in rabbits / Microbiologia de amostras de bancos de córneas destinadas a transplantes, em coelhos

This study aimed to evaluate the microbiota of donor rabbit corneas stored for tectonic transplantation purposes. Swabs from both corneas of 20 rabbits were carefully collected and submitted to microorganism isolation and identification. After this first swab collection, rabbits were euthanized for reasons other than this project and the eyes were enucleated. The corneas were collected and stored to compose the cornea tissue bank. Corneas were stored in a 0.3% tobramycin solution at -20ºC. After 30 days, the corneas were thawed at room temperature and removed from the antibiotic. New swabs were obtained from the corneas and submitted to microorganism isolation and identification. Gram positive organisms were predominant in the rabbit corneal flora before storage and the Staphylococcus sp. was the most common microorganism isolated from those samples. No growth was observed on the samples collected after storage. The methods used for collection and storage of the corneas were efficient to constitute a sterile donor corneal tissue bank.

Analisaram-se córneas armazenadas para transplantes tectônicos usando-se suabes coletados de 20 coelhos, visando ao isolamento e à identificação de microrganismos. Após a coleta das amostras, os coelhos foram submetidos à eutanásia, por razões alheias ao estudo, e enucleados. As córneas foram coletadas e armazenadas a fim de se constituir o banco de córneas. O armazenamento deu-se em solução de tobramicina 0,3% a -20ºC, por 30 dias. Após esse período, as córneas foram descongeladas à temperatura ambiente e removidas da solução de antibiótico. Novos suabes foram coletados e submetidos ao isolamento e à identificação dos microrganismos. A flora corneal mostrou-se predominantemente composta por bactérias Gram positivas, sendo o Staphylococcus sp. o mais identificado. Não se verificou crescimento de colônias bacterianas ou fúngicas nas amostras após o armazenamento. Considerando-se a maneira como a pesquisa foi concebida e as injunções do meio em que ela foi realizada, há como admitir, pela ausência de crescimento microbiano nas amostras armazenadas, que a técnica de armazenamento empregada é segura para a estocagem de córneas destinadas a transplantes.

Presença de Clostridium perfringens em frangos de corte provenientes de aviários da região de Ribeirão Preto SP / Presence of clostridium perfringens in broiler from chicken farms in Ribeirão Preto-SP

Visando estudar a presença de Clostridium perfringens em frangos de cortes provenientes de aviários da região de Ribeirão Preto-SP, amostras de conteúdo cecal de aves foram pesquisadas quanto a presença desse microrganismo. As amostras foram semeadas em meios seletivos para clostrídios e incubadas anaerobica­mente. As culturas foram identificadas e caracterizadas pelo método de Gram e séries bioquímicas. Posteriormente realizou-se teste de inoculação em camundongos para confirmar patogenicidade. De um total de 560 amostras coletadas, 374(66,78%) foram positivas para o gênero Clostridium, sendo 94 (16,78 %) Clostridium perfringens. Verificou–se que 19 (3,4%) amostras foram positivas para outras espécies de clostrídios patogênicos como Clostridium chauvoei (3 - 0,54 %), Clostridium sordelli (9 - 1,61%), Clostridium bifermentans (3 - 0,54%), Clostridium septicum (3 - 0,54%) e Clostridium tetani (1 - 0,18%).(AU)

The aim of the present study was to detect Clostridium perfringens in broiler chickens from intensive poultry farms in Ribeirão Preto-SP. We collected 516 samples of caecal content that were cultivated onto selective medium for Clostridium and incubated under anaerobic conditions. Gram smears were carried out from the positive samples and identified using biochemical tests. Mice inoculation test was performed in order to confirm pathogenicity. The results showed that 66.78% of the samples were positive for Clostridia, of which 16.78% were C. perfringens. It was confirmed that 19 (3.4%) of the samples were positive to other Clostridia pathogenic species such as Clostridium chauvoei (3 - 0.54%), Clostridium sordelli (9 - 1.61%), Clostridium bifermentans (3 - 0.54%), Clostridium septicum (3 - 0.54%) and Clostridium tetani (1 - 0.18%).(AU)

Microbiological profile of donor corneas stored for tectonic transplantation purposes in rabbits / Microbiologia de amostras de bancos de córneas destinadas a transplantes, em coelhos

This study aimed to evaluate the microbiota of donor rabbit corneas stored for tectonic transplantation purposes. Swabs from both corneas of 20 rabbits were carefully collected and submitted to microorganism isolation and identification. After this first swab collection, rabbits were euthanized for reasons other than this project and the eyes were enucleated. The corneas were collected and stored to compose the cornea tissue bank. Corneas were stored in a 0.3% tobramycin solution at -20ºC. After 30 days, the corneas were thawed at room temperature and removed from the antibiotic. New swabs were obtained from the corneas and submitted to microorganism isolation and identification. Gram positive organisms were predominant in the rabbit corneal flora before storage and the Staphylococcus sp. was the most common microorganism isolated from those samples. No growth was observed on the samples collected after storage. The methods used for collection and storage of the corneas were efficient to constitute a sterile donor corneal tissue bank.(AU)

Analisaram-se córneas armazenadas para transplantes tectônicos usando-se suabes coletados de 20 coelhos, visando ao isolamento e à identificação de microrganismos. Após a coleta das amostras, os coelhos foram submetidos à eutanásia, por razões alheias ao estudo, e enucleados. As córneas foram coletadas e armazenadas a fim de se constituir o banco de córneas. O armazenamento deu-se em solução de tobramicina 0,3% a -20ºC, por 30 dias. Após esse período, as córneas foram descongeladas à temperatura ambiente e removidas da solução de antibiótico. Novos suabes foram coletados e submetidos ao isolamento e à identificação dos microrganismos. A flora corneal mostrou-se predominantemente composta por bactérias Gram positivas, sendo o Staphylococcus sp. o mais identificado. Não se verificou crescimento de colônias bacterianas ou fúngicas nas amostras após o armazenamento. Considerando-se a maneira como a pesquisa foi concebida e as injunções do meio em que ela foi realizada, há como admitir, pela ausência de crescimento microbiano nas amostras armazenadas, que a técnica de armazenamento empregada é segura para a estocagem de córneas destinadas a transplantes.(AU)

Presença de Clostridium perfringens em frangos de corte provenientes de aviários da região de Ribeirão Preto – SP / Presence of clostridium perfringens in broiler from chicken farms in Ribeirão Preto-SP

Visando estudar a presença de Clostridium perfringens em frangos de cortes provenientes de aviários da região de Ribeirão Preto-SP, amostras de conteúdo cecal de aves foram pesquisadas quanto a presença desse microrganismo. As amostras foram semeadas em meios seletivos para clostrídios e incubadas anaerobica­mente. As culturas foram identificadas e caracterizadas pelo método de Gram e séries bioquímicas. Posteriormente realizou-se teste de inoculação em camundongos para confirmar patogenicidade. De um total de 560 amostras coletadas, 374(66,78%) foram positivas para o gênero Clostridium, sendo 94 (16,78 %) Clostridium perfringens. Verificou–se que 19 (3,4%) amostras foram positivas para outras espécies de clostrídios patogênicos como Clostridium chauvoei (3 - 0,54 %), Clostridium sordelli (9 - 1,61%), Clostridium bifermentans (3 - 0,54%), Clostridium septicum (3 - 0,54%) e Clostridium tetani (1 - 0,18%).

The aim of the present study was to detect Clostridium perfringens in broiler chickens from intensive poultry farms in Ribeirão Preto-SP. We collected 516 samples of caecal content that were cultivated onto selective medium for Clostridium and incubated under anaerobic conditions. Gram smears were carried out from the positive samples and identified using biochemical tests. Mice inoculation test was performed in order to confirm pathogenicity. The results showed that 66.78% of the samples were positive for Clostridia, of which 16.78% were C. perfringens. It was confirmed that 19 (3.4%) of the samples were positive to other Clostridia pathogenic species such as Clostridium chauvoei (3 - 0.54%), Clostridium sordelli (9 - 1.61%), Clostridium bifermentans (3 - 0.54%), Clostridium septicum (3 - 0.54%) and Clostridium tetani (1 - 0.18%).

Morfologia e quantificação da microbiota intestinal do curimbatá (Prochilodus lineatus) e do cascudo cinza (Pterygoplichthys anisitsi) cultivados em cativeiro / Morphology and quantification of intestinal microbiota of curimbatá (Prochilodus lineatus) and the gray armored catfish (Pterygoplichthys anisitsi) reared in captivity

Todos os animais vivem em íntima associação com micro-organismos que desempenham importantes funções em seu desenvolvimento normal. Nos vertebrados, a mais populosa e complexa comunidade de micro-organismos reside no trato intestinal. O intuito do estudo foi quantificar, classificar e verificar morfologicamente a população microbiana intestinal de duas importantes espécies de peixes de água doce, o curimbatá (Prochilodus lineatus) e o cascudo cinza (Pterygoplichthys anisitsi). As amostras foram coletadas por meio de raspagens da mucosa intestinal, diluídas seriadamente até 10-4, semeadas em placas contendo ágar soja tripticaseína (TSA) e ágar chocolate (AC) para contagem de bactérias totais e identificação morfológica por Gram, em aerobiose e em anaerobiose facultativa, respectivamente. As contagens de bactérias totais mostraram resultados que variaram entre 10³ e 10(4)ufc.mL-1. Os tipos morfológicos encontrados foram cocos, leveduras e bastonetes Gram negativos e positivos. Estudos adicionais sobre os padrões de colonização microbiana e a morfologia dos micro-organismos aderidos à mucosa intestinal foram possíveis com o uso da microscopia eletrônica de varredura (MEV), sendo encontradas formas variadas de micro-organismos, tais como leveduras, formas cocoides e bacilares flageladas e não flageladas. A microbiota intestinal do curimbatá e a do cascudo cinza provaram ser bastante diversas e populosas, com o predomínio de micro-organismos Gram negativos.

All animals exist in intimate associations with microorganisms that play important roles in the hosts' normal development. In vertebrates, the most populous and complex community of microbes resides in the digestive tract.The aim of this research was to morphologically quantify, classify and verify the composition of intestinal microbiota of two species of freshwater fish, the Prochilodus lineatus and the Pterygoplichthys anisitsi. The samples were collected by scrapings of intestinal mucosa, serially diluted to 10-4, plated on tryptic soy agar (TSA) and chocolate agar (CA) for total bacterial counting and morphological identification by Gram, in aerobiosis and facultative anaerobiosis conditions, respectively. In the total bacterial counting results ranged between 10³ to 10(4) cfu.mL-1. The morphological types found were cocci, yeasts and Gram negative and positive rods. Additional studies about patterns of microbial colonization and the morphology of the adhered microorganisms to the intestinal mucosa were possible using the scanning electron microscopy (SEM) and several forms of microorganisms, such as yeasts, cocci and bacillary shapes flagellated and non-flagellated were found. The intestinal microbiota of P. lineatus and P. anisitsi was diverse and populous, with a predominance of Gram negative microorganisms.

Morfologia e quantificação da microbiota intestinal do curimbatá (Prochilodus lineatus) e do cascudo cinza (Pterygoplichthys anisitsi) cultivados em cativeiro / Morphology and quantification of intestinal microbiota of curimbatá (Prochilodus lineatus) and the gray armored catfish (Pterygoplichthys anisitsi) reared in captivity

Todos os animais vivem em íntima associação com micro-organismos que desempenham importantes funções em seu desenvolvimento normal. Nos vertebrados, a mais populosa e complexa comunidade de micro-organismos reside no trato intestinal. O intuito do estudo foi quantificar, classificar e verificar morfologicamente a população microbiana intestinal de duas importantes espécies de peixes de água doce, o curimbatá (Prochilodus lineatus) e o cascudo cinza (Pterygoplichthys anisitsi). As amostras foram coletadas por meio de raspagens da mucosa intestinal, diluídas seriadamente até 10-4, semeadas em placas contendo ágar soja tripticaseína (TSA) e ágar chocolate (AC) para contagem de bactérias totais e identificação morfológica por Gram, em aerobiose e em anaerobiose facultativa, respectivamente. As contagens de bactérias totais mostraram resultados que variaram entre 10³ e 10(4)ufc.mL-1. Os tipos morfológicos encontrados foram cocos, leveduras e bastonetes Gram negativos e positivos. Estudos adicionais sobre os padrões de colonização microbiana e a morfologia dos micro-organismos aderidos à mucosa intestinal foram possíveis com o uso da microscopia eletrônica de varredura (MEV), sendo encontradas formas variadas de micro-organismos, tais como leveduras, formas cocoides e bacilares flageladas e não flageladas. A microbiota intestinal do curimbatá e a do cascudo cinza provaram ser bastante diversas e populosas, com o predomínio de micro-organismos Gram negativos.(AU)

All animals exist in intimate associations with microorganisms that play important roles in the hosts' normal development. In vertebrates, the most populous and complex community of microbes resides in the digestive tract.The aim of this research was to morphologically quantify, classify and verify the composition of intestinal microbiota of two species of freshwater fish, the Prochilodus lineatus and the Pterygoplichthys anisitsi. The samples were collected by scrapings of intestinal mucosa, serially diluted to 10-4, plated on tryptic soy agar (TSA) and chocolate agar (CA) for total bacterial counting and morphological identification by Gram, in aerobiosis and facultative anaerobiosis conditions, respectively. In the total bacterial counting results ranged between 10³ to 10(4) cfu.mL-1. The morphological types found were cocci, yeasts and Gram negative and positive rods. Additional studies about patterns of microbial colonization and the morphology of the adhered microorganisms to the intestinal mucosa were possible using the scanning electron microscopy (SEM) and several forms of microorganisms, such as yeasts, cocci and bacillary shapes flagellated and non-flagellated were found. The intestinal microbiota of P. lineatus and P. anisitsi was diverse and populous, with a predominance of Gram negative microorganisms.(AU)

HEMOLYTIC ACTIVITY AND RESISTANCE TO ANTIMICROBIALS BY Aeromonas SPECIES ISOLATED FROM INTENSIVE REARING OF NILE TILAPIA (Oreochromis niloticus) / Atividade hemolítica e resistência a antimicrobianos por Aeromonas spp. isoladas de criação ...

Este trabalho objetivou avaliar espécies de Aeromonas isoladas em amostras de tilápias do Nilo criadas em tanques-rede e da água do local de criação. As amostras foram plaqueadas em meios seletivos ADA e m-aeromonas e colônias típicas foram submetidas a testes bioquímicos para identificação da espécie. Isolados foram avaliados para produção de hemolisina utilizando ágar sangue e teste de resistência a antimicrobianos conforme o método de difusão de discos. Nas amostras de água e superfície dos peixes A. hydrophila foi a espécie mais isolada, seguida por Aeromonas caviae e Aeromonas sobria e no rim dos peixes as espécies isoladas foram A. hydrophila e A. veronii. Das culturas estudadas, 65 (57%) apresentaram atividade hemolítica. O teste com antimicrobianos revelou resistência de todos os isolados pela amoxicilina e resistência variável a eritromicina. É importante considerar que a lagoa estudada, além da criação de peixes e usada para fins recreativos; portanto a presença de aeromonas pode implicar em doenças nos peixes e em seres humanos e atenção deve ser dada ao uso de antimicrobianos, devido à porcentagem de resistência apresentada. SummaryThe objective of the work was to evaluate Aeromonas isolated from samples of Nile tilapia reared in net-cage and from the lake water. The samples were cultured in m-aeromonas and ADA selective media and the colonies underwent typical bioc

Hemolytic activity and resistance to antimicrobials by Aeromonas species isolated from intensive rearing of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) / Atividade hemolítica e resistência a antimicrobianos por Aeromonas spp. isoladas de criação intensiva de tilápias do nilo (Oreochromis niloticus)

The objective of the work was to evaluate Aeromonas isolated from samples of Nile tilapia reared in net-cage and from the lake water. The samples were cultured in m-aeromonas and ADA selective media and the colonies underwent typical biochemical tests to identify the species. Isolates were evaluated for hemolysin production using blood agar and antimicrobial resistance test according to disk diffusion method. In water and fish body surface samples. A. hydrophila was the most occurring species, followed by Aeromonas caviae and Aeromonas sobria. While in the fish kidneys, the most occuring species were A. hydrophila and A. veronii. Of the studied cultures, 57% had hemolytic activity. The antimicrobial resistance test showed that all isolate by were resistant to amoxicillin and offered variable resistance to erythromycin. It is important to notice that the studied lake, in addition to being used for rearing fish, is also used for recreational purposes. Therefore, the presence of aeromonas may result in fish and human diseases; and special attention should be placed to the use of antimicrobial due to the high resistance displayed.

Este trabalho objetivou avaliar espécies de Aeromonas isoladas em amostras de tilápias do Nilo criadas em tanques-rede e da água do local de criação. As amostras foram plaqueadas em meios seletivos ADA e m-aeromonas e colônias típicas foram submetidas a testes bioquímicos para identificação da espécie. Isolados foram avaliados para produção de hemolisina utilizando ágar sangue e teste de resistência a antimicrobianos conforme o método de difusão de discos. Nas amostras de água e superfície dos peixes A. hydrophila foi a espécie mais isolada, seguida por Aeromonas caviae e Aeromonas sobria e no rim dos peixes as espécies isoladas foram A. hydrophila e A. veronii. Das culturas estudadas, 57% apresentaram atividade hemolítica. O teste com antimicrobianos revelou resistência de todos os isolados pela amoxicilina e resistência variável a eritromicina. É importante considerar que a lagoa estudada, além da criação de peixes e usada para fins recreativos; portanto a presença de aeromonas pode implicar em doenças nos peixes e em seres humanos e atenção deve ser dada ao uso de antimicrobianos, devido à porcentagem de resistência apresentada.

Isolamento e resistência a antimicrobianos de cepas de Streptococcus spp. provenientes de rãs-touro (Lithobates catesbeianus) / Isolation and antimicrobial resistance of Streptococcus spp. strains from bullfrog (Lithobates catesbeiana)

Twelve bullfrogs were selected from two commercial frog farms and clinically diagnosed as attacked by Streptococcus disease. Sixty samples were collected, and Streptococcus spp. was isolated from all bullfrog, being 12 (100%) from the encephalus, seven from the kidneys (58.3%), three from the liver (25%), two from the spleen (16.6%), and one from the ascitic liquid (8.3%). Streptococcus "-hemolytic were isolated from all the 60 samples, which were sensible to chloramphenicol (100%), gentamycin (100%), vancomycin (96%), cefotaxime (96%), and cefoxitine (92%).(AU)

Isolamento e resistência a antimicrobianos de cepas de Streptococcus spp. provenientes de rãs-touro (Lithobates catesbeianus) / Isolation and antimicrobial resistance of Streptococcus spp. strains from bullfrog (Lithobates catesbeiana)

Twelve bullfrogs were selected from two commercial frog farms and clinically diagnosed as attacked by Streptococcus disease. Sixty samples were collected, and Streptococcus spp. was isolated from all bullfrog, being 12 (100%) from the encephalus, seven from the kidneys (58.3%), three from the liver (25%), two from the spleen (16.6%), and one from the ascitic liquid (8.3%). Streptococcus "-hemolytic were isolated from all the 60 samples, which were sensible to chloramphenicol (100%), gentamycin (100%), vancomycin (96%), cefotaxime (96%), and cefoxitine (92%).

Errata: Isolamento e caracterização de possível agente patogênico causador de mortalidade em imagos de Rana catesbeiana Shaw, 1802 / Errata: Isolation and characterization of a possible pathogenic agent responsible for mortality in tadpoles of Rana catesbeiana Shaw, 1802 / Errata: Aislamiento y caracterización del posible agente patógeno causante de mortalidad en imagos de Rana catesbeiana Shaw, 1802

O presente estudo teve como objetivo isolar e caracterizar o patógeno causador de mortalidade em imagos de Rana catesbeiana, ocorrido no ranário experimental do Centro de Aquicultura da Unesp - Jaboticabal. Durante um surto de mortalidade, 20 imagos que apresentavam prostração, anorexia, pele ressecada e edemas cutâneos foram abatidos e submetidos ao procedimento padrão de necropsia. Foram assepticamente coletadas amostras de coração, figado, swab da cavidade abdominal e conteúdo do trato gastrintestinal, sendo posteriormente semeadas em meios de cultura seletivos para diferentes bactérias. Foi observado crescimento de colônias características de Escherichia coli em placas com meio seletivos EMB e Mac Conkey, as quais foram submetidas a séries bioquímicas para identificação e tipificação, que confirmaram se tratar de E. coli. Cepas obtidas a partir das colônias isoladas, foram semeadas em placas contendo ágar-sangue e apresentaram hemolise, o que caracteriza as bactérias como patogênicas, sendo assim a E.coli uma possível responsável pelo surto de mortalidade.

This study aimed isolating and characterizing the pathogen responsible for the mortality of Rana catesbeiana tadpoles that occurred in the Experimental Aquaculture Center of São Paulo State University (Unesp), Campus of Jaboticabal, Brazil. During a mortality outbreak, twenty tadpoles presenting prostration, anorexia, and dried and swollen skin were killed and submitted to post-mortem examination. Heart, liver, abdominal cavity, and bowel samples were aseptically collected. The materials were plated onto a selective medium for different bacteria. Colonies characteristic of Escherichia coli were seen in dishes with EMB and Mac Conkey selective mediums. Biochemical series identified and characterized the presence of E. coli. Strains obtained from isolated colonies were plated onto Petri dishes with Blood Agar, resulting in hemolysis, which is a characteristic of pathogenic bacteria. Therefore, E. coli could be ascribed as one of the responsible agents for the death outbreak.

El presente estudio tuvo como objetivo aislar y caracterizar el patógeno causante de mortalidad en imagos deRana catesbeiana, ocurrida en el ranario experimental del Centro de Acuicultura de la FCAV/UNESP-Jaboticabal, SP, Brasil. Duranteun brote de mortalidad, 20 imagos que presentaban postración, anorexia, piel reseca y edemas cutáneos fueron abatidos y sometidos alos procedimientos estándar de necropsia. Fueron asépticamente colectadas muestras de corazón, hígado, hisopos de la cavidadabdominal y contenido del tracto gastrointestinal, siendo posteriormente sembradas en medios de cultivo selectivos para diferentesbacterias. Fue observado crecimiento de colonias características de Escherichia coli en las placas con medio selectivo EMB y McConkey, las cuáles fueron sometidas a series bioquímicas para la identificación y tipificación, que confirmaron que se trataba de E.coli. Las cepas obtenidas a partir de las colonias aisladas fueron sembradas en placas de Agar Sangre y presentaron hemólisis, lo quecaracteriza las bacterias como patogénicas. De esta forma, la E. coli es la posible responsable por el brote de mortalidad.

Occurrence of toxigenic Escherichia coli in raw milk cheese in Brazil / Ocorrência de Escherichia coli toxigênica em queijo-de-minas frescal no Brasil

The occurrence of toxigenic Escherichia coli in raw milk cheese was surveyed in Middle Western Brazil. Fifty samples of cheese from different supermarkets were analyzed for E.coli. The isolates were serotyped and screened for the presence of verotoxigenic E. coli (VTEC) and enterotoxigenic E. coli (ETEC) by Polymerase Chain Reaction (PCR). The susceptibility to thirteen antimicrobial agents was evaluated by the disk diffusion method. E.coli were recovered from 48 (96.0 percent) of the samples. The serogroups identified were O125 (6.0 percent), O111 (4.0 percent), O55 (2.0 percent) and O119 (2.0 percent). Three (6.0 percent) and 1(2.0 percent) of the E.coli isolates were VTEC and ETEC, respectively. Most frequent resistance was observed to the following antimicrobials: cephalothin (60.0 percent), nalidixic acid (40.0 percent), doxycyclin (33.0 percent), tetracycline (31.0 percent) and ampicillin (29.0 percent).(AU)

Pesquisou-se a ocorrência de Escherichia coli toxigênica, em queijo produzido com leite não pasteurizado, na Região Centro Oeste do Brazil. Foram utilizados 50 queijos adquiridos em diferentes supermercados. As amostras isoladas foram classificadas por sorogrupo, avaliadas em relação à sensibilidade para 13 agentes antimicrobianos e submetidas à reação em cadeia da polimerase para a presença de genes característicos de E. coli verotoxigênica (VTEC) e enterotoxigênica (ETEC). E. coli foi recuperada em 48(96,0 por cento) dos queijos. Foram identificados os sorogrupos O125 (6,0 por cento), O111 (4,0 por cento), O55 (2,0 por cento) e O119 (2,0 por cento). Três (6,0 por cento) amostras de E. coli foram classificadas como VTEC e uma (2,0 por cento) como ETEC. Os maiores índices de resistência foram verificados para: cefalotina (60,0 por cento), ácido nalidíxico (40,0 por cento), doxiciclina (33,0 por cento), tetraciclina (31,0 por cento) e ampicilina (29,0 por cento).(AU)

Occurrence of toxigenic Escherichia coli in raw milk cheese in Brazil

The occurrence of toxigenic Escherichia coli in raw milk cheese was surveyed in Middle Western Brazil. Fifty samples of cheese from different supermarkets were analyzed for E.coli. The isolates were serotyped and screened for the presence of verotoxigenic E. coli (VTEC) and enterotoxigenic E. coli (ETEC) by Polymerase Chain Reaction (PCR). The susceptibility to thirteen antimicrobial agents was evaluated by the disk diffusion method. E.coli were recovered from 48 (96.0 percent) of the samples. The serogroups identified were O125 (6.0 percent), O111 (4.0 percent), O55 (2.0 percent) and O119 (2.0 percent). Three (6.0 percent) and 1(2.0 percent) of the E.coli isolates were VTEC and ETEC, respectively. Most frequent resistance was observed to the following antimicrobials: cephalothin (60.0 percent), nalidixic acid (40.0 percent), doxycyclin (33.0 percent), tetracycline (31.0 percent) and ampicillin (29.0 percent).

Pesquisou-se a ocorrência de Escherichia coli toxigênica, em queijo produzido com leite não pasteurizado, na Região Centro Oeste do Brazil. Foram utilizados 50 queijos adquiridos em diferentes supermercados. As amostras isoladas foram classificadas por sorogrupo, avaliadas em relação à sensibilidade para 13 agentes antimicrobianos e submetidas à reação em cadeia da polimerase para a presença de genes característicos de E. coli verotoxigênica (VTEC) e enterotoxigênica (ETEC). E. coli foi recuperada em 48(96,0 por cento) dos queijos. Foram identificados os sorogrupos O125 (6,0 por cento), O111 (4,0 por cento), O55 (2,0 por cento) e O119 (2,0 por cento). Três (6,0 por cento) amostras de E. coli foram classificadas como VTEC e uma (2,0 por cento) como ETEC. Os maiores índices de resistência foram verificados para: cefalotina (60,0 por cento), ácido nalidíxico (40,0 por cento), doxiciclina (33,0 por cento), tetraciclina (31,0 por cento) e ampicilina (29,0 por cento).

ANALYSIS OF THE GENETIC DIVERSITY AMONG Clostridium perfringens ISOLATES FROM CHICKENS. / ANÁLISE DA DIVERSIDADE GENÉTICA DE ISOLADOS DE Clostridium perfringens EM FRANGOS.

This study aimed to analyze the genetic diversity among Clostridium perfringens isolates from commercial broiler chickens with necrotic enteritis. Isolates (n = 48) collected from chickens from different farms of São Paulo State, Brazil, were characterized by their in vitro susceptibility to antibiotics and PCR ribotyping. A high genetic diversity was found by both methods. Results showed that PCR ribotyping is suitable for classifying C. perfringens isolates below the species level and may be considered for epidemiological investigations of necrotic enteritis caused by this pathogen. KEY-WORDS: Clostridium perfringens. Necrotic enteritis. PCR-ribotyping. Chicken enteritis.

O presente estudo teve como objetivo analisar a diversidade genética entre estirpes de Clostridium perfringens isoladas em frangos acometidos pela enterite necrótica. As estirpes (n = 48) foram isoladas em frangos de diferentes granjas no Estado de São Paulo e caracterizadas de acordo com a sensibilidade in vitro aos antimicrobianos e a PCR ribotipagem. Foi observada uma grande diversidade em ambos os métodos. Os resultados mostraram que a PCRribotipagem é util para a classificação detalhada de isolados de C. perfringens e pode ser considerada para estudos epidemiológicos da enterite necrótica causada por esse patógeno.PALAVRAS-CHAVE: Clostridium perfringens. Enterite necrótica. PCR-ribotipagem. Enterite de frangos.

ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF A POSSIBLE PATHOGENIC AGENT RESPONSIBLE FOR MORTALITY IN TADPOLES OF Rana catesbeiana Shaw, 1802. / ISOLAMENTO E CARACTERIZAÇÃO DE POSSÍVEL AGENTE PATOGÊNICO CAUSADOR DE MORTALIDADE EM IMAGOS DE Rana catesbeiana Shaw, 1802.

This study aimed isolating and characterizing the pathogen responsible for the mortality of Rana catesbeiana tadpoles that occurred in the Experimental Aquaculture Center of São Paulo State University (Unesp), Campus of Jaboticabal, Brazil. During a mortality outbreak, twenty tadpoles presenting prostration, anorexia, and dried and swollen skin were killed and submitted to post-mortem examination. Heart, liver, abdominal cavity, and bowel samples were aseptically collected. The materials were plated onto a selective medium for different bacteria. Colonies characteristic of Escherichia coli were seen in dishes with EMB and Mac Conkey selective mediums. Biochemical series identified and characterized the presence of E. coli. Strains obtained from isolated colonies were plated onto Petri dishes with Blood Agar, resulting in hemolysis, which is a characteristic of pathogenic bacteria. Therefore, E. coli could be ascribed as one of the responsible agents for the death outbreak. KEY -WORDS: Rana catesbeiana. Escherichia coli. Mortality.

O presente estudo teve como objetivo isolar e caracterizar o patógeno causador de mortalidade em imagos de Rana catesbeiana, ocorrido no ranário experimental do Centro de Aqüicultura da Unesp - Jaboticabal. Durante um surto de mortalidade, 20 imagos que apresentavam prostração, anorexia, pele ressecada e edemas cutâneos foram abatidos e submetidos ao procedimento padrão de necropsia. Foram assepticamente coletadas amostras de coração, fígado, swab da cavidade abdominal e conteúdo do trato gastrintestinal, sendo posteriormente semeadas em meios de cultura seletivos para diferentes bactérias. Foi observado crescimento de colônias características de Escherichia coli em placas com meio seletivos EMB e Mac Conkey, as quais foram submetidas a séries bioquímicas para identificação e tipificação, que confirmaram se tratar de E. coli. Cepas obtidas a partir das colônias isoladas, foram semeadas em placas contendo ágarsangue e apresentaram hemólise, o que caracteriza as bactérias como patogênicas, sendo assim a E .coli uma possível responsável pelo surto de mortalidade.PALAVRAS-CHAVE: Rana catesbeiana. Escherichia coli. Mortalidade.