The right to be forgotten versus the right to disclosure of gamete donors' id: ethical and legal considerations / El derecho al olvido frente al derecho a revelar la identificación de los donantes de gametos: consideraciones éticas y jurídicas / O direito ao esquecimento versus o direito à divulgação da identificação de dadores de gâmetas: considerações éticas e legais

Abstract: 15. The anonymity of gamete donors in the context of medically-assisted reproduction techniques (ART) and the right of the offspring to know their genetic or biological parents' identity is a controversial and widely debated topic in the scientific literature. The positions on the issue in each country are different. Sometimes they are in opposition to each other even in countries with strong similarities, such as those in the European Union (EU), in the framework of shared ethical values. Although some countries still enshrine the rule of anonymity, there is an undeniable tendency to guarantee the right to know one's origins by creating relevant exceptions or abolishing donor anonymity status altogether. 16. This article offers ethical and legal considerations of whether the so-called 'right to be forgotten' (RTBF) could be extended to include gamete donors' right to remain anonymous. This perspective goes against the general trend, certainly in Europe, of recognizing that offspring born from donor gametes have a right to access information relating to their genetic progenitors. The novel addition is to question whether the General Data Protection Regulation (GDPR) might provide fertile ground for questioning this approach, and effectively support those jurisdictions where anonymity is still possible.

Resumen: 20. El anonimato de los donantes de gametos en el contexto de las técnicas de reproducción médicamente asistida (RM) y el derecho de la descendencia a conocer su identidad genética o biológica es un tema controvertido y ampliamente debatido en la literatura científica. Las posiciones sobre el tema en cada país son diferentes. A veces se oponen entre sí, incluso en países con fuertes similitudes, como los de la Unión Europea (UE), en el marco de valores éticos compartidos. Aunque algunos países siguen consagrando la norma del anonimato, es innegable la tendencia a garantizar el derecho a conocer el propio origen creando las excepciones pertinentes o suprimiendo por completo el estatus de anonimato del donante. 21. Este artículo ofrece consideraciones éticas y jurídicas sobre si el llamado "derecho al olvido" podría ampliarse para incluir el derecho de los donantes de gametos a permanecer en el anonimato. Esta opinión es contraria a la tendencia general, ciertamente en Europa, de reconocer que los hijos nacidos de gametos donados tienen derecho a acceder a la información relativa a sus padres genéticos. La nueva adición consiste en debatir si el Reglamento general de protección de datos (RGPD) podría proporcionar un terreno fértil para cuestionar este enfoque y apoyar efectivamente a las jurisdicciones en las que el anonimato sigue siendo posible.

Resumo 25. O anonimato dos dadores de gâmetas no contexto das técnicas de reprodução medicamente assistida (RMA) e o direito da descendência a conhecer a sua identidade genética ou biológica é um tema controverso e amplamente debatido na literatura científica. As posições sobre a questão em cada país são diferentes. Por vezes estão em oposição umas às outras, mesmo em países com fortes semelhanças, como os da União Europeia (UE), no quadro de valores éticos partilhados. Embora alguns países ainda consagrem a regra do anonimato, existe uma tendência inegável para garantir o direito de conhecer as suas origens, criando exceções relevantes ou abolindo completamente o estatuto de anonimato dos dadores. 26. Este artigo oferece considerações éticas e legais sobre se o chamado "direito ao esquecimento" poderia ser alargado para incluir o direito dos dadores de gâmetas a permanecerem anónimos. Esta perspetiva vai contra a tendência geral, certamente na Europa, de reconhecer que os descendentes nascidos de gâmetas doadas têm o direito de aceder à informação relacionada com os seus progenitores genéticos. O novo aditamento é debater se o Regulamento Geral de Proteção de Dados (RGPD) poderá fornecer um terreno fértil para questionar esta abordagem, e apoiar efetivamente as jurisdições onde o anonimato ainda é possível.

Photoperiod in aquaculture of the sea urchin Arbacia dufresnii (Echinodermata: Echinoidea): Effects on gamete production and maturity / Fotoperiodo en la acuicultura del erizo de mar Arbacia dufresnii (Echinodermata: Echinoidea): El efecto en la producción y madurez de gametas

Introduction: Photoperiod is, together with temperature and food availability, one of the main stimuli in the regulation of gametogenesis in a wide variety of species. Objective: To evaluate the effect of photoperiod on the production of mature gametes in cultured Arbacia dufresnii. Methods: An experiment was carried out with three varying light-dark regimes/treatments: constant light (24 h light), neutral photoperiod (12 h light, 12 h darkness), and constant darkness (24 h darkness). Twenty females were used in each treatment. All were induced to spawn and, ten randomly selected females from each treatment were induced to spawn again after 30 days. After 60 days, spawning was induced in the remaining females. The gametes were collected in filtered seawater, fixed in Davidson solution, quantified and measured per individual in triplicate in a Sedgewick-Rafter chamber. To determine maturation, fertilization success was evaluated 30 minutes after fertilization. Results: Our results showed that in the aquaculture system, after only two months, mature gametes were obtained, and in the neutral light regime there were 10 times more gametes than the number produced in wild sea urchins during the spawning period in question. We also found that with a greater exposure to light, a lower number of mature gametes was produced. Conclusions: This study suggests the viability of the production of mature gametes in a short period of time as regards Arbacia dufresnii.

Introducción: El fotoperiodo es, junto con la temperatura y la disponibilidad de alimentos, uno de los principales estímulos para el desarrollo de la gametogénesis en una amplia variedad de especies. Objetivo: Evaluar el efecto del fotoperiodo en la producción de gametas maduras de Arbacia dufresnii en un sistema de recirculación cerrado para determinar el mejor fotoperiodo para una acuicultura novedosa, enfocada en la producción de gametas con alta concentración de pigmentos para usos biotecnológicos. Métodos: Se realizó un experimento con tres regímenes/tratamientos diferentes de luz y oscuridad: luz constante (luz durante 24 h), fotoperiodo neutro (12 h de luz, 12 h de oscuridad) y oscuridad constante (oscuridad durante 24 h). Se utilizaron veinte hembras en cada tratamiento. Se indujo a todas las hembras a desovar al comienzo del experimento. Después de 30 días, diez hembras seleccionadas al azar de cada tratamiento fueron inducidas a desovar nuevamente. Al final del experimento, después de 60 días, se indujo el desove a las hembras restantes en cada tratamiento. Las gametas se recolectaron en agua de mar filtrada, se fijaron en solución de Davidson, se cuantificaron y midieron por triplicado en una cámara Sedgewick-Rafter. Para determinar la maduración, se evaluó el éxito de la fecundación después de 30 minutos de fertilización, calculando el porcentaje de huevos fertilizados. Resultados: Nuestros resultados muestran que, en el sistema acuícola, en solo dos meses se obtuvieron gametas maduras y casi 10 veces más la cantidad producida por los erizos de mar en su ambiente natural usando el fotoperiodo neutro (12 h luz:12 h oscuridad). También encontramos que la mayor exposición a la luz produce la menor cantidad de gametas maduras. Conclusión: Este estudio sugiere la viabilidad de la producción de gametos maduros en un corto período de tiempo en Arbacia dufresnii.

Prostaglandin F2α as ovulatory stimulus in dairy cows and buffaloes raised in the Amazon biome / Prostaglandina F2α como estímulo ovulatório em vacas e búfalas leiteiras criadas no bioma Amazônia

This study evaluated the effect of a prostaglandin F2? (PGF) analogue as an ovulatory stimulus in dairy cows and buffaloes raised in the Amazon biome. To this end, three experiments were performed in the state of Rondônia, located in the Amazon biome. In Experiment 1, 22 lactating dairy buffaloes received 2 mg of intramuscular (I.M.) estradiol benzoate (EB) on day 0 and an intravaginal progesterone-releasing device (CIDR) from day 0 to day 9 of the protocol. On days 8 and 9, all cows were given 500 ?g of I.M. d-cloprostenol (PGF analogue). On day 10, buffaloes were divided into two groups to receive 500 ?g of PGF (PGF group, n = 8) or no treatment (CTL group, n = 14), respectively. In Experiment 2, 16 lactating crossbred dairy cows (Holstein x Gir) received 2 mg of EB on day 0 and a CIDR insert from day 0 to day 8. On days 7 and 8, all cows were given 500 ?g of d-cloprostenol. On day 9, cows were divided into two groups to receive 500 ?g of d-cloprostenol (PGF group, n = 8) or no treatment (CTL group, n = 8), respectively. In Experiment 3, 16 lactating crossbred dairy cows (Holstein x Gir) were handled and treated similarly as in Experiment 2, although cows did not receive d-cloprostenol on day 8. Single-point outcome variables were analyzed using one-way analysis of variance (ANOVA), while proportions with dichotomous outcomes were analyzed with the chi-square test.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de um análogo de prostaglandina F2α (PGF) como indutor ovulatório em vacas leiteiras e búfalas. Para este fim, três experimentos foram realizados no estado de Rondônia, localizado no bioma Amazônia. No Experimento 1, 22 búfalas leiteiras em lactação receberam 2 mg de benzoato de estradiol (EB) im, no Dia 0 e um dispositivo intravaginal de liberação de progesterona (CIDR) do Dia 0 ao Dia 9 do protocolo. Nos Dias 8 e 9, todas as vacas receberam 150μg de d-Cloprostenol (análogo PGF), im. No Dia 10, as búfalas foram divididas em dois grupos para receber 150μg de PGF (Grupo PGF, n = 8) ou nenhum tratamento (Grupo CTL, n = 14). No experimento 2, 16 vacas leiteiras mestiças (Holandês x Gir) receberam 2 mg de EB no Dia 0 e um dispositivo intravaginal (CIDR) do Dia 0 ao Dia 8. Nos Dias 7 e 8 todas as vacas receberam 150μg de d-Cloprostenol. No Dia 9, as vacas foram divididas em dois grupos para receber 150μg de d-Cloprostenol (Grupo PGF, n = 8) ou nenhum tratamento (Grupo CTL, n = 8). No Experimento 3, 16 vacas leiteiras mestiças (Holandês x Gir) foram tratadas da mesma forma que no Experimento 2, porém, as vacas não receberam d-Cloprostenol no Dia 8. Variáveis quantitativas foram analisados por análise de variância - one-way ANOVA e variáveis dicotômicas foram analisados pelo teste do qui-quadrado. No Experimento 1, não houve diferença (P = 0,30) na taxa de ovulação entre os grupos, em média 68% das búfalas ovularam após o tratamento. Além disso, não houve diferença entre os grupos no intervalo de ovulação (P = 0,61) e no diâmetro do folículo pré-ovulatório (P = 0,47). No Experimento 2, apenas uma vaca do Grupo PG não ovulou. Não houve diferenças no intervalo de ovulação entre os grupos CTL e PG (P = 0,69). Em média, a ovulação ocorreu 82 horas após a remoção do CIDR. No Experimento 3, vacas tratadas com PGF ovularam antes do Grupo CTL (62,5 ± 5,8 vs 94,5 ± 13,5 h; P = 0,05). Coletivamente, esses resultados sugeriram que a PGF antecipa a ovulação em vacas leiteiras em lactação, porém seu efeito não foi observado em búfalas.(AU)

Prostaglandin F2α as ovulatory stimulus in dairy cows and buffaloes raised in the Amazon biome / Prostaglandina F2α como estímulo ovulatório em vacas e búfalas leiteiras criadas no bioma Amazônia

This study evaluated the effect of a prostaglandin F2? (PGF) analogue as an ovulatory stimulus in dairy cows and buffaloes raised in the Amazon biome. To this end, three experiments were performed in the state of Rondônia, located in the Amazon biome. In Experiment 1, 22 lactating dairy buffaloes received 2 mg of intramuscular (I.M.) estradiol benzoate (EB) on day 0 and an intravaginal progesterone-releasing device (CIDR) from day 0 to day 9 of the protocol. On days 8 and 9, all cows were given 500 ?g of I.M. d-cloprostenol (PGF analogue). On day 10, buffaloes were divided into two groups to receive 500 ?g of PGF (PGF group, n = 8) or no treatment (CTL group, n = 14), respectively. In Experiment 2, 16 lactating crossbred dairy cows (Holstein x Gir) received 2 mg of EB on day 0 and a CIDR insert from day 0 to day 8. On days 7 and 8, all cows were given 500 ?g of d-cloprostenol. On day 9, cows were divided into two groups to receive 500 ?g of d-cloprostenol (PGF group, n = 8) or no treatment (CTL group, n = 8), respectively. In Experiment 3, 16 lactating crossbred dairy cows (Holstein x Gir) were handled and treated similarly as in Experiment 2, although cows did not receive d-cloprostenol on day 8. Single-point outcome variables were analyzed using one-way analysis of variance (ANOVA), while proportions with dichotomous outcomes were analyzed with the chi-square test.

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de um análogo de prostaglandina F2α (PGF) como indutor ovulatório em vacas leiteiras e búfalas. Para este fim, três experimentos foram realizados no estado de Rondônia, localizado no bioma Amazônia. No Experimento 1, 22 búfalas leiteiras em lactação receberam 2 mg de benzoato de estradiol (EB) im, no Dia 0 e um dispositivo intravaginal de liberação de progesterona (CIDR) do Dia 0 ao Dia 9 do protocolo. Nos Dias 8 e 9, todas as vacas receberam 150μg de d-Cloprostenol (análogo PGF), im. No Dia 10, as búfalas foram divididas em dois grupos para receber 150μg de PGF (Grupo PGF, n = 8) ou nenhum tratamento (Grupo CTL, n = 14). No experimento 2, 16 vacas leiteiras mestiças (Holandês x Gir) receberam 2 mg de EB no Dia 0 e um dispositivo intravaginal (CIDR) do Dia 0 ao Dia 8. Nos Dias 7 e 8 todas as vacas receberam 150μg de d-Cloprostenol. No Dia 9, as vacas foram divididas em dois grupos para receber 150μg de d-Cloprostenol (Grupo PGF, n = 8) ou nenhum tratamento (Grupo CTL, n = 8). No Experimento 3, 16 vacas leiteiras mestiças (Holandês x Gir) foram tratadas da mesma forma que no Experimento 2, porém, as vacas não receberam d-Cloprostenol no Dia 8. Variáveis quantitativas foram analisados por análise de variância - one-way ANOVA e variáveis dicotômicas foram analisados pelo teste do qui-quadrado. No Experimento 1, não houve diferença (P = 0,30) na taxa de ovulação entre os grupos, em média 68% das búfalas ovularam após o tratamento. Além disso, não houve diferença entre os grupos no intervalo de ovulação (P = 0,61) e no diâmetro do folículo pré-ovulatório (P = 0,47). No Experimento 2, apenas uma vaca do Grupo PG não ovulou. Não houve diferenças no intervalo de ovulação entre os grupos CTL e PG (P = 0,69). Em média, a ovulação ocorreu 82 horas após a remoção do CIDR. No Experimento 3, vacas tratadas com PGF ovularam antes do Grupo CTL (62,5 ± 5,8 vs 94,5 ± 13,5 h; P = 0,05). Coletivamente, esses resultados sugeriram que a PGF antecipa a ovulação em vacas leiteiras em lactação, porém seu efeito não foi observado em búfalas.

Biotecnologias da reprodução animal: de Aristóteles à edição gênica / Biotechnologies of animal reproduction: from Aristotle to gene editing

Atualmente, com a rapidez e a facilidade da difusão da informação, os jovens acadêmicos têm percepção de que o conhecimento é um produto pronto, onde as características podem ser manipuladas e empregadas como um objeto oriundo de uma fábrica. A compreensão da realidade que nos cerca é um desejo desde os primórdios da presença do homem sobre a terra e os conceitos se modificam na medida em que o conhecimento avança. As tecnologias reprodutivas surgiram e evoluíram ao longo dos tempos, levando a aplicações com diferentes impactos na produção e seleção animal, com repercussões na saúde animal, na saúde humana, na preservação de espécies em extinção e em diferentes cenários da atividade humana. Este texto traça uma linha de tempo das ações em reprodução animal, sob a ótica dos autores, dando ênfase ao gradual desenvolvimento das biotécnicas como ferramenta auxiliar na rotina experimental e nos diversos sistemas de produção animal.(AU)

Today the rapid and ease information diffusion makes young academics have a perception that knowledge is a ready product, where characteristics could be manipulated and used as an object from a factory. The understanding of the reality that surrounds us is a desire from the earliest days of man's presence on earth and the concepts change as knowledge advances. Reproductive technologies have emerged and evolved over time, leading to applications with different impacts on animal production and selection, with repercussions on animal and human health, on the preservation of endangered species and on different scenarios of human activity. This text summarizes the evolution of thought, knowledge and actions in animal reproduction from the perspective of the authors, emphasizing the gradual development of biotechnology as an auxiliary tool in the experimental routine and in the various systems of animal production.(AU)

Biotecnologias da reprodução animal: de Aristóteles à edição gênica / Biotechnologies of animal reproduction: from Aristotle to gene editing

Atualmente, com a rapidez e a facilidade da difusão da informação, os jovens acadêmicos têm percepção de que o conhecimento é um produto pronto, onde as características podem ser manipuladas e empregadas como um objeto oriundo de uma fábrica. A compreensão da realidade que nos cerca é um desejo desde os primórdios da presença do homem sobre a terra e os conceitos se modificam na medida em que o conhecimento avança. As tecnologias reprodutivas surgiram e evoluíram ao longo dos tempos, levando a aplicações com diferentes impactos na produção e seleção animal, com repercussões na saúde animal, na saúde humana, na preservação de espécies em extinção e em diferentes cenários da atividade humana. Este texto traça uma linha de tempo das ações em reprodução animal, sob a ótica dos autores, dando ênfase ao gradual desenvolvimento das biotécnicas como ferramenta auxiliar na rotina experimental e nos diversos sistemas de produção animal.

Today the rapid and ease information diffusion makes young academics have a perception that knowledge is a ready product, where characteristics could be manipulated and used as an object from a factory. The understanding of the reality that surrounds us is a desire from the earliest days of man's presence on earth and the concepts change as knowledge advances. Reproductive technologies have emerged and evolved over time, leading to applications with different impacts on animal production and selection, with repercussions on animal and human health, on the preservation of endangered species and on different scenarios of human activity. This text summarizes the evolution of thought, knowledge and actions in animal reproduction from the perspective of the authors, emphasizing the gradual development of biotechnology as an auxiliary tool in the experimental routine and in the various systems of animal production.

Aspectos uterinos, foliculares e seminais que afetam a IATF em vacas de corte no período pós-parto / Uterine, follicular and seminal aspects that affect timed AI

O objetivo desse artigo é apresentar os resultados de pesquisas realizadas pelo laboratório de Biotecnologia da Embrapa Rondônia acerca de alguns dos eventos uterinos, foliculares e seminais que afetam a fertilidade de vacas submetidas a protocolos de inseminação artificial em tempo-fixo (IATF). Em avaliação retrospectiva dos resultados de IATF de 1152 vacas de corte no período pós-parto submetidas à IATF em diferentes dias pós-parto (DPP), observou-se que vacas submetidas à IATF antes de 35 DPP tem menor (P ≤ 0,05) prenhez por IA (P/IA). Além disso, no intuito de esclarecer a relação entre DPP e fertilidade dos protocolos de IATF, realizou-se um estudo prospectivo que avaliou a condição uterina de 244 vacas Nelore em diferentes DPP por meio da proporção de células polimorfonucleares (PMN) no tecido endometrial. Observou-se que as vacas submetidas à IATF antes dos 30 DPP apresentaram maior proporção de células PMN (9,0%; P < 0.001) no útero e maior descarga vaginal purulenta quando comparadas às vacas submetidas à IATF entre 31 e 45 DPP e entre 46 e 60 DPP (3,8 e 2,2 %, respectivamente; P < 0.001). Em relação à P/IA, vacas submetidas à IATF entre 31 e 35 DPP e entre 46 e 60 DPP apresentaram uma maior (P < 0.001) P/IA (45.2%, 52/115 e 52.3%, 34/65, respectivamente) quando comparado à vacas submetidas antes dos 30 DPP (29.7%, 19/64). Experimentos avaliando a resposta ovariana de vacas submetidas à IATF também foram realizados. Em estudos retrospectivos pode-se observar que a resposta ovariana de vacas apresenta-se, de acordo com a distribuição do diâmetro do folículo pré-ovulatório (FPO), de forma gaussiana. Assim, sugeriu-se atrasar a inseminação de vacas que desenvolveram menor FPO e verificou-se que vacas multíparas submetidas à protocolos de 3 manejos que desenvolvem FPOs menores podem ser inseminadas mais tarde em relação à vacas que desenvolvem FPOs maiores. Dessa forma, pode-se observar melhora na P/IA em comparação à protocolos tradicionais. Por fim, baseado no fato de que diferentes partidas de sêmen podem apresentar diferença na cinética espermática, realizou-se um experimento em que vacas com ovulação precoce e tardia foram inseminadas com sêmen hiperativado (H+) e não-hiperativado (H-). Nesse estudo observou-se que vacas com FPOs menores tem uma menor probabilidade de emprenhar quando inseminadas com sêmen H+. Em contrapartida, as vacas com ovulação tardia e precoce, quando inseminadas com sêmen H- podem alcançar boa P/IA. Conclui-se que é importante considerar um adequado período voluntário de espera para submeter vacas de corte à programas de IATF. Além disso, notou-se que é possível realizar algumas mudanças no momento da inseminação, de acordo com a resposta ovariana, que podem melhorar a fertilidade, sendo que resposta ovariana ainda pode servir como ferramenta para ser associada às características cinéticas do sêmen no intuito de aumentar a fertilidade de vacas pós-parto submetidas à IATF.(AU)

The objective of this study was to demonstrate the research data collected by the laboratory of biotechnology from Embrapa Rondonia on some uterine, follicular and seminal events that affect the fertility of timed insemination artificial (TAI). A retrospective analyses of the data from 1,152 cows subjected to TAI in different days postpartum (DPP), it was observed that cows that entered into the TAI protocol before 35 DPP had lower (P ≤ 0.05) pregnancy per AI (P/AI). Furthermore, aiming to study the relationship between DPP, uterine health and the fertility of TAI protocols, a prospective study that evaluated 244 Nelore cows in different DPP was performed. Endometrial samples were collected on Day 0 of the TAI protocol to analyse the proportion of polymorphonuclear cells. It was observed that cows subjected to TAI before 30 DPP had less (P < 0.05) pregnancies per AI (P/AI) than cows from Middle and Late groups; 29.7% (19/64), 45.2% (52/115), and 52.31% (34/65), respectively. Accordingly, cows subjected to TAI before 30 DPP had a greater (P < 0.05) proportion of PMN cells in the uterus than cows with 30 to 45 and cows with 46 to 60 DPP (9.0%, 3.8%, and 2.2%, respectively). Studies aiming evaluate the ovarian response from cows subjected to TAI protocols were also performed. It was observed that the proportion of cows developing preovulatory follicles (POF) presented a gaussian curve. Thus, it was suggested that cows with smaller POFs can be inseminated later than cows with larger POFs. Therefore, it was observed that this methodology increases P/AI in comparison to conventional protocols. Finally, since different semen batches can demonstrate different kinematics characteristics, an experiment in wich cows with Early and Late ovulation (EO and LO, respectively) were inseminated with semen considered as Hyperactivated (H+), and Non-Hyperactivated (H-) was performed. Pregnancy per AI (P/AI) was higher (P < 0.05) for EOH+, EOH-, and LOH- groups than for LOH+ group. Based on these considerations, it was observed that is important to consider an adequate waiting voluntary period to subject beef cows to TAI programs. Moreover, it was infered that some changes in the time of AI, according to the POF diameter, can increase fertility. Therefore, the the ovarian response can be an important tool to associate to the kinematics characteristics of semen aiming to increase fertility of postpartum cows subjected to TAI.(AU)

Células-tronco pluripotentes induzidas (células iPS) em animais domésticos e a possibilidade de geração in vitro de gametas / Induced pluripotent stem cells (iPS cells) in domestic animals and the possibility to generate gametes in vitro

Células-tronco são conhecidas pela característica de alto potencial de auto-renovação e podem ser classificadas segundo seu estágio de indiferenciação e perfil epigenético. Células-tronco embrionárias (CTEs) e células-tronco adultas são bastante estudadas e caracterizadas, principalmente nos modelos humano e em camundongos por apresentarem novas possibilidades tanto para a medicina regenerativa quanto para o entendimento do desenvolvimento inicial dos mamíferos. Contudo, a derivação e a manutenção de CTEs em espécies domésticas é desafiadora e apresenta resultados inconsistentes em relação à manutenção da pluripotência in vitro. Nesse contexto, a geração das células pluripotentes induzidas in vitro (células iPS ou iPSCs) é imprescindível para a geração de novas possibilidades na medicina veterinária regenerativa e reprodutiva devido à capacidade de diferenciação destas em uma variedade de outros tipos celulares, inclusive em animais. Assim, esta revisão apresenta a geração das células iPS em animais domésticos, e em especial, recentes estudos sobre as etapas necessárias para a possibilidade de geração de gametas funcionais in vitro, uma importante contribuição na correção de infertilidades, conservação de espécies ameaçadas de extinção e geração de indivíduos geneticamente superiores ou modificados para aplicações agropecuárias ou biomédicas.(AU)

Stem cells are widely known for their high potential for self-renewal, being classified according to their stage of undifferentiation and epigenetic profile. Embryonic stem cells (ES) and adult stem cells are already well studied and characterized, mainly in human and mouse models, once they present new possibilities both for regenerative medicine and for understanding the initial development of mammals. However, the derivation and maintenance of ES in domestic species is challenging and presents inconsistent results regarding maintenance of in vitro pluripotency. In this context, the derivation of in vitro induced pluripotent cells (iPS cells or iPSCs) enables new possibilities in regenerative and reproductive veterinary medicine due to their ability to differentiate into a variety of other cell types. Therefore, this review presents the generation of iPS cells in domestic animals, and focuses on recent studies on the steps necessary for the generation of functional gametes in vitro, an important contribution of stem cells aiming the correction of infertility, the conservation of species in risk of extinction and for the generation of genetically superior or modified organisms for agricultural and biomedical applications.(AU)

Short-term storage of lebranche mullet Mugil liza (Valenciennes, 1836) semen in natura and diluted with CF-HBSS / Armazenamento a curto prazo do sêmen da tainha Mugil liza (Valenciennes, 1836) in natura e diluído com CF-HBSS

The present study aimed to evaluate the activation characteristics of the lebranche mullet spermatozoa in natura and diluted with CF-HBSS for 96h at 4±2°C. The semen was collected from eight wild fish in Florianópolis – SC (Brazil) (27°S) in May, during reproductive migration. Three pools of semen were divided into two treatments: in natura and diluted with CF-HBSS 1:3. The semen was activated with seawater (salinity of 34, pH 8.7 and 4±2°C) to determine: motility time, motility rate and sperm cell membrane integrity. Dilution with CF-HBSS 1:3 increased motility time of diluted semen (15- 20% for 6, 12 and 18h). Motility rate was equal to fresh semen for up to 24h of refrigeration and it was 30% higher than in natura semen at 12, 18 and 24h. Cell membrane integrity was maintained in fresh semen up to 6h, and it was 15-20% higher than in natura semen from 6 to 48h (p < 0.05). The use of CF-HBSS as diluent in the ratio 1:3 is recommended for semen refrigeration of lebranche mullet.

O objetivo do presente estudo foi avaliar em tainha as características de ativação dos espermatozoides in natura e diluídos com CF-HBSS mantidos por 96h a 4±2°C. O sêmen foi coletado de oito peixes selvagens em Florianópolis – SC (27°S) em maio, durante a migração reprodutiva. Três pool de sêmen foram divididos em dois tratamentos: in natura e diluído com CF-HBSS 1:3. O sêmen foi ativado com água oceânica (34 de salinidade, pH 8,7 e 4±2°C) para determinar: tempo de motilidade, taxa de ativação espermática e integridade da membrana celular. A diluição com CF-HBSS 1:3 propiciou o aumento no tempo de motilidade do sêmen diluído (15-20% para 6, 12 e 18h); manteve a taxa de motilidade igual ao sêmen fresco por até 24h de refrigeração e foi 30% maior do que em in natura em 12, 18 e 24h; manteve também a integridade da membrana celular igual ao sêmen fresco por 6h e 15-20% maior que em sêmen in natura (p < 0.05) para o período de 6 a 48h. O uso do CF-HBSS como diluidor na proporção 1:3 é recomendado para a refrigeração do sêmen da tainha.

Short-term storage of lebranche mullet Mugil liza (Valenciennes, 1836) semen in natura and diluted with CF-HBSS / Armazenamento a curto prazo do sêmen da tainha Mugil liza (Valenciennes, 1836) in natura e diluído com CF-HBSS

The present study aimed to evaluate the activation characteristics of the lebranche mullet spermatozoa in natura and diluted with CF-HBSS for 96h at 4±2°C. The semen was collected from eight wild fish in Florianópolis SC (Brazil) (27°S) in May, during reproductive migration. Three pools of semen were divided into two treatments: in natura and diluted with CF-HBSS 1:3. The semen was activated with seawater (salinity of 34, pH 8.7 and 4±2°C) to determine: motility time, motility rate and sperm cell membrane integrity. Dilution with CF-HBSS 1:3 increased motility time of diluted semen (15- 20% for 6, 12 and 18h). Motility rate was equal to fresh semen for up to 24h of refrigeration and it was 30% higher than in natura semen at 12, 18 and 24h. Cell membrane integrity was maintained in fresh semen up to 6h, and it was 15-20% higher than in natura semen from 6 to 48h (p < 0.05). The use of CF-HBSS as diluent in the ratio 1:3 is recommended for semen refrigeration of lebranche mullet.(AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar em tainha as características de ativação dos espermatozoides in natura e diluídos com CF-HBSS mantidos por 96h a 4±2°C. O sêmen foi coletado de oito peixes selvagens em Florianópolis SC (27°S) em maio, durante a migração reprodutiva. Três pool de sêmen foram divididos em dois tratamentos: in natura e diluído com CF-HBSS 1:3. O sêmen foi ativado com água oceânica (34 de salinidade, pH 8,7 e 4±2°C) para determinar: tempo de motilidade, taxa de ativação espermática e integridade da membrana celular. A diluição com CF-HBSS 1:3 propiciou o aumento no tempo de motilidade do sêmen diluído (15-20% para 6, 12 e 18h); manteve a taxa de motilidade igual ao sêmen fresco por até 24h de refrigeração e foi 30% maior do que em in natura em 12, 18 e 24h; manteve também a integridade da membrana celular igual ao sêmen fresco por 6h e 15-20% maior que em sêmen in natura (p < 0.05) para o período de 6 a 48h. O uso do CF-HBSS como diluidor na proporção 1:3 é recomendado para a refrigeração do sêmen da tainha.(AU)

Aspectos uterinos, foliculares e seminais que afetam a IATF em vacas de corte no período pós-parto / Uterine, follicular and seminal aspects that affect timed AI

O objetivo desse artigo é apresentar os resultados de pesquisas realizadas pelo laboratório de Biotecnologia da Embrapa Rondônia acerca de alguns dos eventos uterinos, foliculares e seminais que afetam a fertilidade de vacas submetidas a protocolos de inseminação artificial em tempo-fixo (IATF). Em avaliação retrospectiva dos resultados de IATF de 1152 vacas de corte no período pós-parto submetidas à IATF em diferentes dias pós-parto (DPP), observou-se que vacas submetidas à IATF antes de 35 DPP tem menor (P ≤ 0,05) prenhez por IA (P/IA). Além disso, no intuito de esclarecer a relação entre DPP e fertilidade dos protocolos de IATF, realizou-se um estudo prospectivo que avaliou a condição uterina de 244 vacas Nelore em diferentes DPP por meio da proporção de células polimorfonucleares (PMN) no tecido endometrial. Observou-se que as vacas submetidas à IATF antes dos 30 DPP apresentaram maior proporção de células PMN (9,0%; P < 0.001) no útero e maior descarga vaginal purulenta quando comparadas às vacas submetidas à IATF entre 31 e 45 DPP e entre 46 e 60 DPP (3,8 e 2,2 %, respectivamente; P < 0.001). Em relação à P/IA, vacas submetidas à IATF entre 31 e 35 DPP e entre 46 e 60 DPP apresentaram uma maior (P < 0.001) P/IA (45.2%, 52/115 e 52.3%, 34/65, respectivamente) quando comparado à vacas submetidas antes dos 30 DPP (29.7%, 19/64). Experimentos avaliando a resposta ovariana de vacas submetidas à IATF também foram realizados. Em estudos retrospectivos pode-se observar que a resposta ovariana de vacas apresenta-se, de acordo com a distribuição do diâmetro do folículo pré-ovulatório (FPO), de forma gaussiana. Assim, sugeriu-se atrasar a inseminação de vacas que desenvolveram menor FPO e verificou-se que vacas multíparas submetidas à protocolos de 3 manejos que desenvolvem FPOs menores podem ser inseminadas mais tarde em relação à vacas que desenvolvem FPOs maiores. Dessa forma, pode-se observar melhora na P/IA em comparação à protocolos tradicionais. Por fim, baseado no fato de que diferentes partidas de sêmen podem apresentar diferença na cinética espermática, realizou-se um experimento em que vacas com ovulação precoce e tardia foram inseminadas com sêmen hiperativado (H+) e não-hiperativado (H-). Nesse estudo observou-se que vacas com FPOs menores tem uma menor probabilidade de emprenhar quando inseminadas com sêmen H+. Em contrapartida, as vacas com ovulação tardia e precoce, quando inseminadas com sêmen H- podem alcançar boa P/IA. Conclui-se que é importante considerar um adequado período voluntário de espera para submeter vacas de corte à programas de IATF. Além disso, notou-se que é possível realizar algumas mudanças no momento da inseminação, de acordo com a resposta ovariana, que podem melhorar a fertilidade, sendo que resposta ovariana ainda pode servir como ferramenta para ser associada às características cinéticas do sêmen no intuito de aumentar a fertilidade de vacas pós-parto submetidas à IATF.

The objective of this study was to demonstrate the research data collected by the laboratory of biotechnology from Embrapa Rondonia on some uterine, follicular and seminal events that affect the fertility of timed insemination artificial (TAI). A retrospective analyses of the data from 1,152 cows subjected to TAI in different days postpartum (DPP), it was observed that cows that entered into the TAI protocol before 35 DPP had lower (P ≤ 0.05) pregnancy per AI (P/AI). Furthermore, aiming to study the relationship between DPP, uterine health and the fertility of TAI protocols, a prospective study that evaluated 244 Nelore cows in different DPP was performed. Endometrial samples were collected on Day 0 of the TAI protocol to analyse the proportion of polymorphonuclear cells. It was observed that cows subjected to TAI before 30 DPP had less (P < 0.05) pregnancies per AI (P/AI) than cows from Middle and Late groups; 29.7% (19/64), 45.2% (52/115), and 52.31% (34/65), respectively. Accordingly, cows subjected to TAI before 30 DPP had a greater (P < 0.05) proportion of PMN cells in the uterus than cows with 30 to 45 and cows with 46 to 60 DPP (9.0%, 3.8%, and 2.2%, respectively). Studies aiming evaluate the ovarian response from cows subjected to TAI protocols were also performed. It was observed that the proportion of cows developing preovulatory follicles (POF) presented a gaussian curve. Thus, it was suggested that cows with smaller POFs can be inseminated later than cows with larger POFs. Therefore, it was observed that this methodology increases P/AI in comparison to conventional protocols. Finally, since different semen batches can demonstrate different kinematics characteristics, an experiment in wich cows with Early and Late ovulation (EO and LO, respectively) were inseminated with semen considered as Hyperactivated (H+), and Non-Hyperactivated (H-) was performed. Pregnancy per AI (P/AI) was higher (P < 0.05) for EOH+, EOH-, and LOH- groups than for LOH+ group. Based on these considerations, it was observed that is important to consider an adequate waiting voluntary period to subject beef cows to TAI programs. Moreover, it was infered that some changes in the time of AI, according to the POF diameter, can increase fertility. Therefore, the the ovarian response can be an important tool to associate to the kinematics characteristics of semen aiming to increase fertility of postpartum cows subjected to TAI.

Células-tronco pluripotentes induzidas (células iPS) em animais domésticos e a possibilidade de geração in vitro de gametas / Induced pluripotent stem cells (iPS cells) in domestic animals and the possibility to generate gametes in vitro

Células-tronco são conhecidas pela característica de alto potencial de auto-renovação e podem ser classificadas segundo seu estágio de indiferenciação e perfil epigenético. Células-tronco embrionárias (CTEs) e células-tronco adultas são bastante estudadas e caracterizadas, principalmente nos modelos humano e em camundongos por apresentarem novas possibilidades tanto para a medicina regenerativa quanto para o entendimento do desenvolvimento inicial dos mamíferos. Contudo, a derivação e a manutenção de CTEs em espécies domésticas é desafiadora e apresenta resultados inconsistentes em relação à manutenção da pluripotência in vitro. Nesse contexto, a geração das células pluripotentes induzidas in vitro (células iPS ou iPSCs) é imprescindível para a geração de novas possibilidades na medicina veterinária regenerativa e reprodutiva devido à capacidade de diferenciação destas em uma variedade de outros tipos celulares, inclusive em animais. Assim, esta revisão apresenta a geração das células iPS em animais domésticos, e em especial, recentes estudos sobre as etapas necessárias para a possibilidade de geração de gametas funcionais in vitro, uma importante contribuição na correção de infertilidades, conservação de espécies ameaçadas de extinção e geração de indivíduos geneticamente superiores ou modificados para aplicações agropecuárias ou biomédicas.

Stem cells are widely known for their high potential for self-renewal, being classified according to their stage of undifferentiation and epigenetic profile. Embryonic stem cells (ES) and adult stem cells are already well studied and characterized, mainly in human and mouse models, once they present new possibilities both for regenerative medicine and for understanding the initial development of mammals. However, the derivation and maintenance of ES in domestic species is challenging and presents inconsistent results regarding maintenance of in vitro pluripotency. In this context, the derivation of in vitro induced pluripotent cells (iPS cells or iPSCs) enables new possibilities in regenerative and reproductive veterinary medicine due to their ability to differentiate into a variety of other cell types. Therefore, this review presents the generation of iPS cells in domestic animals, and focuses on recent studies on the steps necessary for the generation of functional gametes in vitro, an important contribution of stem cells aiming the correction of infertility, the conservation of species in risk of extinction and for the generation of genetically superior or modified organisms for agricultural and biomedical applications.

Metilação de histonas em oócitos e embriões mamíferos / Methylation of histones in mammalian oocytes and embryos

A epigenética consiste no estudo de mudanças na função gênica que não dependem de mudanças na estrutura primária do DNA e que podem ser hereditárias. As mudanças epigenéticas desempenham um importante papel no processo de diferenciação celular, permitindo que as células mantenham características estáveis diferentes, apesar de conterem o mesmo material genético. As histonas possuem uma importante função na estrutura do DNA, e alterações bioquímicas em sua cauda aminoterminal, alteram a estrutura da cromatina e suas funções. Dessa forma são fundamentais para o controle da expressão gênica, ativação do genoma embrionário, metilação do DNA e inativação do cromossomo X. O desenvolvimento oocitário e embrionário envolvem uma série de modificações epigenéticas importantes, incluindo as modificações pós-traducionais das histonas, que são imprescindíveis para o desenvolvimento normal do embrião. O melhor entendimento a respeito do epigenoma e sua influência sobre a oogênese e embriogênese podem permitir a otimização das biotecnologias da reprodução.(AU)

Epigenetic is the study of changes in genetic function which do not depend on change in the primary structure of DNA, and can be heritable. Epigenetic changes play an important role in cellular differentiation process, allowing the cells to keep different stable characteristics, though they contain the same genomic material. Histones are not only structural proteins, but are also critical to the control of gene expression, embryonic genome activation, DNA methylation and inactivation of the X chromosome. The histones have an important function in the structure of the DNA, consequently histone methylation can alter its structure and its functions. The oocyte and embryo development involve several important epigenetic modifications, including post-translation modifications of histones, which are essential for normal development of the embryo. The best understanding of the epigenome and its influence on oogenesis and embryogenesis may allow the optimization of reproduction biotechnologies.(AU)

Metilação de histonas em oócitos e embriões mamíferos / Methylation of histones in mammalian oocytes and embryos

A epigenética consiste no estudo de mudanças na função gênica que não dependem de mudanças na estrutura primária do DNA e que podem ser hereditárias. As mudanças epigenéticas desempenham um importante papel no processo de diferenciação celular, permitindo que as células mantenham características estáveis diferentes, apesar de conterem o mesmo material genético. As histonas possuem uma importante função na estrutura do DNA, e alterações bioquímicas em sua cauda aminoterminal, alteram a estrutura da cromatina e suas funções. Dessa forma são fundamentais para o controle da expressão gênica, ativação do genoma embrionário, metilação do DNA e inativação do cromossomo X. O desenvolvimento oocitário e embrionário envolvem uma série de modificações epigenéticas importantes, incluindo as modificações pós-traducionais das histonas, que são imprescindíveis para o desenvolvimento normal do embrião. O melhor entendimento a respeito do epigenoma e sua influência sobre a oogênese e embriogênese podem permitir a otimização das biotecnologias da reprodução.

Epigenetic is the study of changes in genetic function which do not depend on change in the primary structure of DNA, and can be heritable. Epigenetic changes play an important role in cellular differentiation process, allowing the cells to keep different stable characteristics, though they contain the same genomic material. Histones are not only structural proteins, but are also critical to the control of gene expression, embryonic genome activation, DNA methylation and inactivation of the X chromosome. The histones have an important function in the structure of the DNA, consequently histone methylation can alter its structure and its functions. The oocyte and embryo development involve several important epigenetic modifications, including post-translation modifications of histones, which are essential for normal development of the embryo. The best understanding of the epigenome and its influence on oogenesis and embryogenesis may allow the optimization of reproduction biotechnologies.

BoHV-1 (o vírus da IBR) e sua relação com estruturas e órgãos genitais da fêmea bovina / Study of the relationship between BoHV-1 (IBR virus) and cows genital structures and organs

A Rinotraqueíte Infecciosa Bovina é uma relevante doença, tendo em vista os transtornos reprodutivoscausados, a facilidade de disseminação, o difícil controle e a ampla disseminação nos rebanhos bovinos de cortee de leite. O herpesvírus bovino 1 (BoHV-1) pode estar presente em fluidos onde os embriões são recolhidos,manipulados, criopreservados ou transferidos, assim como no sêmen, nos órgãos genitais e também no líquidofolicular e ovócitos. A interação do BoHV-1 com estruturas e órgãos genitais da fêmea bovina vem sendoestudada pelo Grupo de trabalho. Até o presente foram encontrados resultados relevantes nesta interação. ODNA viral foi detectado em ovários, ovócitos e em complexos cumulus oophorus de animais soropositivos.Verificou-se ainda que vacas infectadas naturalmente apresentam comprometimento na taxa de maturaçãonuclear ovocitária. Trabalhos em andamento estão demonstrando, em animais soropositivos, a presença departículas virais em tecido ovariano, uterino e tubárico, sendo em substancial quantidade no tecido ovariano.Teria o vírus alguma afinidade por estes órgãos? Os resultados ainda são parciais, sugerindo a necessidade deaprofundar os estudos a respeito.(AU)

Infectious Bovine Rhinotracheitis (IBR) is an important disease because it can cause reproductiveproblems. It is also highly contagious with a high prevalence in beef and dairy herds, making it very difficult tocontrol viral spread. BoHV-1 might be present in embryo fluids when collected, manipulated, cryopreserved, ortransferred, as well as in the semen, genital organs, follicular fluids, and oocytes. Here, we investigated therelationship between BoHV-1 and cows genital organs. Our results showed relevant findings regarding thisrelationship. For instance, viral DNA was detected in the ovary, oocytes, and cumulus-oocyte complex fromBoHV-1 positive cows. Our results also showed that the oocyte nuclear maturation rate was compromised innaturally infected cows. Furthermore, BoHV-1 particles were detected in the ovary, uterus, and the uterine tubetissues, in which the highest number of viral particles was found in the ovary tissue. Despite the promisingresults, they are still preliminary to make conclusions about the tropism of the virus for these organs, andtherefore, further investigation is still required for that.(AU)

BoHV-1 (o vírus da IBR) e sua relação com estruturas e órgãos genitais da fêmea bovina / Study of the relationship between BoHV-1 (IBR virus) and cows’ genital structures and organs

A Rinotraqueíte Infecciosa Bovina é uma relevante doença, tendo em vista os transtornos reprodutivoscausados, a facilidade de disseminação, o difícil controle e a ampla disseminação nos rebanhos bovinos de cortee de leite. O herpesvírus bovino 1 (BoHV-1) pode estar presente em fluidos onde os embriões são recolhidos,manipulados, criopreservados ou transferidos, assim como no sêmen, nos órgãos genitais e também no líquidofolicular e ovócitos. A interação do BoHV-1 com estruturas e órgãos genitais da fêmea bovina vem sendoestudada pelo Grupo de trabalho. Até o presente foram encontrados resultados relevantes nesta interação. ODNA viral foi detectado em ovários, ovócitos e em complexos cumulus oophorus de animais soropositivos.Verificou-se ainda que vacas infectadas naturalmente apresentam comprometimento na taxa de maturaçãonuclear ovocitária. Trabalhos em andamento estão demonstrando, em animais soropositivos, a presença departículas virais em tecido ovariano, uterino e tubárico, sendo em substancial quantidade no tecido ovariano.Teria o vírus alguma afinidade por estes órgãos? Os resultados ainda são parciais, sugerindo a necessidade deaprofundar os estudos a respeito.

Infectious Bovine Rhinotracheitis (IBR) is an important disease because it can cause reproductiveproblems. It is also highly contagious with a high prevalence in beef and dairy herds, making it very difficult tocontrol viral spread. BoHV-1 might be present in embryo fluids when collected, manipulated, cryopreserved, ortransferred, as well as in the semen, genital organs, follicular fluids, and oocytes. Here, we investigated therelationship between BoHV-1 and cows’ genital organs. Our results showed relevant findings regarding thisrelationship. For instance, viral DNA was detected in the ovary, oocytes, and cumulus-oocyte complex fromBoHV-1 positive cows. Our results also showed that the oocyte nuclear maturation rate was compromised innaturally infected cows. Furthermore, BoHV-1 particles were detected in the ovary, uterus, and the uterine tubetissues, in which the highest number of viral particles was found in the ovary tissue. Despite the promisingresults, they are still preliminary to make conclusions about the tropism of the virus for these organs, andtherefore, further investigation is still required for that.

Preservação da fertilidade em doentes oncológicos ou sob terapêutica gonadotóxica: estado da arte / Fertility preservation in oncologic patients or undergoing gonadotoxic therapies: state of art

O câncer não é incomum nem incurável: 85% dos doentes com menos de 45 anos diagnosticados nos EUA em 2002 sobreviveram mais de 10 anos. As maiores taxas de sobrevivência verificam‐se nos doentes jovens com câncer da mama, testicular e hematológico. Contudo, é para tratar estes tumores que são usados os fármacos mais gonadotóxicos, assim como doenças hematológicas e autoimunes também requerem terapêuticas potencialmente lesivas para as gônadas para o seu controle. O comité ético da Sociedade Americana de Medicina da Reprodução considera que “existem fortes argumentos para a preservação da fertilidade em doentes jovens com cânceres tratáveis”. Cabe ao médico assistente (oncologista, hematologista, cirurgião, internista) decidir o tratamento do paciente e considerar: o risco de falência ovárica/testicular; o prognóstico e o timing para iniciar tratamentos. Por outro lado, ao especialista em medicina da reprodução cabe desenvolver estratégias para preservar gâmetas/embriões de acordo com idade, tempo disponível até início do tratamento, tipo de câncer, status marital e risco de infertilidade com a terapêutica proposta. A colaboração contínua entre esses especialistas, incluindo os doentes e os parceiros, é a chave para a tomada de decisões que permitam a preservação da função reprodutiva após controle da doença de base.

Cancer is not unusual neither incurable: in USA 85% of patients under 45 years diagnosed in 2002 survived more than 10 years. The highest survival rates occur in young patients with breast, testicular and hematologic cancer. However, these tumors are treated with drugs wich most affect fertility and there is evidence that the discussion of preserving fertility is of great importance. Moreover, hematologic and autoimmune diseases may also require the use of potentially gonadotoxic drugs for their control. The ethics committee of the American Society for Reproductive Medicine believes that “there are strong arguments for the preservation of fertility in young patients with treatable cancers”. It is up to the physician (oncologist, hematologist, surgeon, internist) to decide the best treatment to the patient evaluating the risk of ovarian/testicular failure; the prognosis and the timing to start treatments. Moreover, the specialist in reproductive medicine should develop strategies to preserve gametes/embryos according to: age; time to treatment; type of cancer; marital status and risk of infertility, with the proposed therapy. The ongoing collaboration between these specialists, including patients and partners in the discussion, is the key to making decisions that allow the preservation of reproductive function after control of the primary disease.

Resfriamento e criopreservação em invertebrados aquáticos: aspectos relevantes / Cooling and cryopreservation in aquatic invertebrates: relevant aspects

A biotecnologia que envolve as técnicas de resfriamento e criopreservação pode permitir a conservaçãode material genético e ser utilizada para preservação de desovas de animais ameaçados de extinção. No entanto,o sucesso da aplicação dessas técnicas abrange o entendimento da ação de diluidores, fluxo e influxo de agentescrioprotetores, toxicidade, curvas de resfriamento, além dos processos de congelamento e descongelamento.Também é importante levar em consideração que a influência de todos esses fatores varia dentre as diversasespécies de animais. Assim, este artigo sistematiza os recentes avanços no resfriamento e na criopreservação deinvertebrados aquáticos de interesse comercial.(AU)

Biotechnology involving cooling and cryopreservation techniques can allow the preservation of geneticmaterial and be used to preserve spawning of endangered animals. However the application of these techniquessuccessfully includes understanding extenders action, flux and influx of cryoprotectants agents as well as theirtoxicity, cooling, plus the process of freezing/thawing until reaching the freezing itself, considering that theinfluence of all these factors varies among the various species of animals. Thus, this article systematizes recentadvances in cooling and cryopreservation of aquatic invertebrates commercially interesting.(AU)

Resfriamento e criopreservação em invertebrados aquáticos: aspectos relevantes / Cooling and cryopreservation in aquatic invertebrates: relevant aspects

A biotecnologia que envolve as técnicas de resfriamento e criopreservação pode permitir a conservaçãode material genético e ser utilizada para preservação de desovas de animais ameaçados de extinção. No entanto,o sucesso da aplicação dessas técnicas abrange o entendimento da ação de diluidores, fluxo e influxo de agentescrioprotetores, toxicidade, curvas de resfriamento, além dos processos de congelamento e descongelamento.Também é importante levar em consideração que a influência de todos esses fatores varia dentre as diversasespécies de animais. Assim, este artigo sistematiza os recentes avanços no resfriamento e na criopreservação deinvertebrados aquáticos de interesse comercial.

Biotechnology involving cooling and cryopreservation techniques can allow the preservation of geneticmaterial and be used to preserve spawning of endangered animals. However the application of these techniquessuccessfully includes understanding extenders action, flux and influx of cryoprotectants agents as well as theirtoxicity, cooling, plus the process of freezing/thawing until reaching the freezing itself, considering that theinfluence of all these factors varies among the various species of animals. Thus, this article systematizes recentadvances in cooling and cryopreservation of aquatic invertebrates commercially interesting.

Cryopreserved sperm for oocyte fertilization of dourado Salminus brasiliensis / Sêmen criopreservado na fertilização de ovócitos de dourado Salminus brasiliensis

Salminus brasiliensis is a migratory fish that has attracted considerable interest for aquaculture. Several procedures for induced spawning are known; however, there is a lack of protocol which enables the use of cryopreserved semen. Therefore, this study was conducted to investigate the use of cryopreserved semen using different volumes of cryopreserved semen relative to oocytes, different activators solutions and different maintenance time during the fertilization of dourado to evaluate the impact of these parameters on the fertilization rate. The semen was collected, cryopreserved in 0.5mL straws and stored in a dry shipper. Oocytes samples were fertilized according to each treatment. The different activator solutions and the contact times of the gametes with activators affected significantly the fertilization rates, which ranged between 13.4 and 27.8%, while fresh semen fertility rate was 80.8%. The relationship between oocyte and cryopreserved semen was significant, being the best ratio 0.05mL of cryopreserved semen per 10g of oocytes, while upper or lower volumes promoted a reduction in fertilization. The use of cryopreserved semen was effective to fertilize S. brasiliensis oocytes, however produced lower fertility rate than fresh semen.(AU)

O dourado, Salminus brasiliensis, é um peixe migrador que tem despertado interesse para piscicultura. Os procedimentos convencionais para a sua reprodução são conhecidos, contudo, falta um protocolo para o uso do sêmen criopreservado. Dessa forma, objetivou-se avaliar diferentes volumes de sêmen criopreservado, ouso de diferentes soluções ativadoras e com diferentes tempos de contato do sêmen com os ovócitos na taxa de fertilização. Para tal, o sêmen foi coletado e criopreservado em palhetas de 0,5mL em vapor de nitrogênio líquido. Amostras de ovócitos foram fertilizadas conforme os distintos tratamentos. As diferentes soluções testadas e o tempo de contato dos ativadores afetaram significativamente as taxas de fertilização, com valores que variaram entre 13,4 e 27,8%, enquanto o sêmen fresco propiciou 80,8% de taxa de fertilização. O volume de sêmen criopreservado afetou a taxa de fertilização dos ovos, sendo 0,05mL para 10g de ovócitos, o que promoveu os melhores resultados, sendo que volumes superiores e inferiores promoveram redução na fertilização. O uso de sêmen criopreservado foi efetivo na fertilização dos ovócitos de dourado, no entanto, foram obtidas taxas de fertilização inferiores àquelas observadas com o uso de sêmen fresco.(AU)