Inmunidad post COVID / Post-COVID Immunity

A más de año y medio del inicio de la pandemia por COVID-19, la salud y la economía global siguen siendo afectadas. Si bien las tasas de mortalidad han bajado, gracias a la inmunización, especialmente en los países desarrollados, el mundo sigue sufriendo picos de contagios. Lo que no está claro aún es cuán duradera es la respuesta inmune anti COVID, y si queda inmunidad celular de memoria, ya sea post infección natural o post vacunación. El objetivo de este trabajo fue investigar la respuesta inmune celular y humoral específica anti SARS-COV-2 en pacientes que fueron diagnosticados por RT-PCR y ya encuentren recuperados, de la ciudad de Mar del Plata. Para ello convocamos 27 voluntarios, a los cuales se les tomó una muestra de sangre. Para evaluar si generaron una respuesta inmune celular de memoria, mediante cultivo in vitro, estimulamos sus células mononucleares con virus inactivado, y usando anticuerpos monoclonales para marcadores de activación y memoria se realizó la lectura en un citómetro de flujo. A su vez se estudió la respuesta humoral mediante un test de ELISA. A diez meses, en promedio, de enfermar por COVID-19, el 74% (20/27) de los voluntarios presentaron anticuerpos IgG anti proteína spike. Luego del cultivo específico, al comparar células en estado basal con aquellas en estado estimulado (RStudio,Wilcoxon test para muestras pareadas), por citómetro de flujo, se observó una respuesta celular de memoria significativa (p < 0.05) para las 3 subpoblaciones linfocitarias estudiadas (LT -CD4 y CD8- y LB), aunque con mayor dispersión en los LB. Si bien las personas al momento de este estudio se encontraban en perfecto estado de salud, sin vacunar, y declararon no haber tenido síntomas compatibles con esta enfermedad en el periodo transcurrido entre su primo infección y estos estudios, nos es imposible afirmar que la respuesta inmune específica anti SARS-COV-2 observada en nuestro laboratorio se deba exclusivamente a la memoria inmunológica generada post infección natural, y no estemos midiendo además respuesta debida a una o más re exposiciones.

Aplicación de la nanobiotecnología con el sistema CRISPR-cas / Application of the nanobiotechnology with the system CRISP-Cas

Resumen Introducción: La nanobiotecnología y la biología sintética son ciencias que impactan en la actualidad con el lanzamiento de aplicaciones innovadoras y beneficiosas para el ser humano, estas ciencias se han fusionado para fabricar nuevos componentes para la construcción de células totalmente artificiales y la creación de biomoléculas sintéticas. Objetivo: Conocer las aplicaciones de la nanobiotecnología relacionadas con el uso del sistema CRISPR/Cas en el almacenamiento de información en el ADN bacteriano y alternativas terapéuticas. Materiales y métodos: Se realizó una revisión bibliográfica sobre las principales aplicaciones de la nanobiotecnología, en las bases de datos ScienceDirect, SciELO, PubMed y en revistas como: Nature biotechnology, Biochemistry, Science y Journal Microbiology. Resultados: La revisión de literatura describe y analiza las nuevas aplicaciones nanobiotecnológicas utilizadas para escribir información en el código genético de las células bacterianas, en el que se emplean el sistema basado en repeticiones palindrómicas cortas agrupadas y regularmente interespaciadas (CRISPR/Cas) y la producción de ADN sintético, así como las alternativas terapéuticas relacionadas con la terapia génica. Conclusión: Entre las aplicaciones nanobiotecnológicas se han demostrado dos métodos para grabar información en el ADN de células bacterianas, de Escherichia coli y Sulfolobus tokodai vinculados con el empleo del sistema CRISPR/Cas y la producción de ADN sintético, así como el uso del CRISPR/Cas en la terapia génica y celular.

Abstract Introduction: Nanobiotechnology and synthetic biology are sciences that impact today with the launching of innovative and beneficial applications for the human being. These sciences have been amalgamated to manufacture new components for the construction of totally artificial cells and the creation of synthetic biomolecules. Objective: To know the applications of nanobiotechnology related to the use of the system CRISPR/Cas in the storage of bacterial DNA and therapeutic alternatives. Materials and methods: A bibliographical review on the main applications of nanobiotechnology was carried out in ScienceDirect, SciELO, PubMed databases and in magazines such as: Nature Biotechnology, Biochemistry, Science and Journal Microbiology. Results: The literature review describes and analyzes the new nanobiotechnology applications used to write information in the genetic code of bacterial cells, in which the system is used based on short grouped and regularly interspaced palindromic repetitions (CRISPR/Cas) and the production of synthetic DNA, as well as therapeutic alternatives related to gene therapy. Conclusion: Among the nanobiotechnology applications, two methods to record information in the DNA of bacterial cells Escherichia coli and Sulfolobus Tokodai have been shown, which are linked to the use of the system CRISPR/Cas and the production of synthetic DNA, as well as the use of CRISPR/Cas in gene and cellular therapy.

Inmunodeficiencia común variable: caracterización clínica e inmunológica de pacientes e identificación de subgrupos homogéneos con base en la tipificación de subpoblaciones de linfocitos B / Common variable immunodeficiency: Clinical and immunological characterization of patients and homogeneous subgroup definition by means of B lymphocyte subpopulation typing

Introducción. La inmunodeficiencia común variable es un síndrome heterogéneo caracterizado por infecciones recurrentes, hipogammaglobulinemia y producción deficiente de anticuerpos específicos. Las anormalidades en subpoblaciones de linfocitos en sangre periférica, particularmente de linfocitos B, permiten la clasificación de los pacientes en grupos homogéneos. Objetivo. Caracterizar clínica e inmunológicamente los linfocitos B y tipificar sus subpoblaciones en doce pacientes colombianos con inmunodeficiencia común variable, para clasificarlos en grupos homogéneos. Materiales y métodos. Se revisaron las historias clínicas de los pacientes y se evaluaron las inmunoglobulinas séricas, la proliferación de linfocitos y la hipersensibilidad retardada, así como las subpoblaciones de linfocitos y de linfocitos B mediante citometría de flujo. Resultados. Todos los pacientes presentaron infecciones respiratorias o gastrointestinales recurrentes y, algunos, infecciones en otros sistemas. Además, todos presentaban disminución de la IgG, en tanto que la IgA y la IgM fueron bajas en nueve y diez pacientes, respectivamente. En todos hubo disminución de la proliferación de linfocitos inducida por mitógenos, pero fue normal frente a antígenos específicos. La tipificación de subpoblaciones reveló valores elevados de linfocitos T en tres pacientes; siete presentaron disminución en la relación CD4+/CD8+ y, cuatro, linfocitos NK bajos. El conteo de linfocitos B fue normal en once pacientes, ocho de los cuales presentaron linfocitos B de memoria bajos, en tanto que cuatro presentaron aumento de linfocitos B de transición o de linfocitos B CD21 low . Conclusión. La tipificación de subpoblaciones de linfocitos solo permitió asignar a 11 de los pacientes a grupos homogéneos según los esquemas de clasificación internacionales, lo que indica la necesidad de agregar más criterios hasta lograr una clasificación ideal. Este estudio permitirá establecer mejores seguimientos médicos para pacientes con inmunodeficiencia común variable en grupos con alto riesgo de desarrollar complicaciones clínicas.

Introduction: Common variable immunodeficiency is a heterogeneous syndrome characterized by recurrent infections, hypogammaglobulinemia and defective production of specific antibodies. Abnormalities in peripheral blood lymphocyte subpopulations, in particular of B lymphocytes, allow the classification of patients into homogeneous groups. Objective: To perform a clinical and immunological characterization and to evaluate lymphocyte subpopulations of twelve Colombian patients with common variable immunodeficiency in order to define homogeneous groups. Materials and methods: We reviewed medical records and evaluated serum immunoglobulins (Ig), lymphoproliferation, delayed hypersensitivity and used flow cytometry to quantify peripheral blood total lymphocyte and B cell populations. Results: All patients had recurrent respiratory and/or gastrointestinal infections, while some also had infections affecting other systems. All patients had abnormally low serum IgG levels, while IgA and IgM levels were reduced in nine and ten patients, respectively. Lymphoproliferation to mitogen was lower in patients than in healthy controls but lymphoproliferation to specific antigen was normal in all. Flow cytometry revealed high numbers of T cells in three patients, while seven had a low CD4+/CD8+ ratio and four had reduced NK cells . Eleven patients had normal B cell counts, and eight of them also showed decreased memory B lymphocytes, and four had increased transitional or CD21 low B lymphocytes. Conclusion: Lymphocyte typing allowed assigning all but one patient to homogeneous groups according to international classification schemes, indicating the necessity of including more criteria until an ideal classification is achieved. This study will lead to a better medical monitoring of common variable immunodeficiency patients in groups at high risk of developing clinical complications.

[Vaccination against hepatitis B. Impact of vaccination programmes after 20 years of use in Spain. Is it time for a change?]. / Vacunación frente a la hepatitisB. Impacto de los programas de vacunación tras 20años de su utilización en España. ¿Es tiempo de cambios?

The highest incidence rate of hepatitis B (HB) in Spain is detected in adults between 20 and 54 years old, whereas the incidence in children under 1 year old is almost nil. The low prevalence of HB in children under 1 year is mainly due to the success of gestational screening strategies for the detection of HBsAg(+) in pregnant women, and vaccination campaigns during childhood. Currently, in Spain, the last dose of the HB included in the national childhood immunization program is administered at 6 months of age, although some studies show that delaying the age of the administration of the last dose of HB vaccine and increasing the time between doses, may improve immune memory by offering greater protection against this virus in the adulthood. In this article, the impact of HB vaccination in Spain is reviewed, and other potential vaccination strategies in our environment are discussed, such as extending the interval between doses, and administering the last dose in the second year of life, adapting the valid strategy in Spain to the current epidemiological context in order to reduce the prevalence of HB in adulthood.

Portadores de Neisseria meningitidis, caracterización de las cepas aisladas y respuesta inmune basal a VA-MENGOC-BC / Neisseria meningitidis carriers, characterization of isolated strains and basal immune response to VA-MENGOC-BC

Con el propósito de conocer la prevalencia de portadores de Neisseria meningitidis en un grupo de adolescentes, los marcadores epidemiológicos de las cepas aisladas, así como los factores de riesgo asociados con el estado de portadory la respuesta inmune basal a VA-MENGOC-BC, se realizó un estudio transversal descriptivo de portadores en 189 estudiantes de 12-19 años de un politécnico de Ciego de Ávila, siguiendo las Normas Bioéticas establecidas. A los estudiantes se les realizó un exudado faríngeo y una extracción de sangre para la obtención de suero, así como unaencuesta relacionada con aspectos de la investigación. La identificación de N meningitidis se hizo por el sistema APINH (bioMérieux). Los serosubtipos e inmunotipos se clasificaron por ELISA de células enteras con anticuerpos monoclonales y la respuesta inmune basal se detectó por el Ensayo Bactericida del Suero. Se determinó la susceptibilidad antimicrobiana de las cepas frente a la penicilina, cloranfenicol, rifampicina, sulfadiacina sódica, ceftriaxona y ciprofloxacina. La prevalencia de portadores de N meningitidis fue del 17 por ciento. Predominaron las cepas no agrupables (84,7 por ciento), seguidas por los serogrupos B (12,5 por ciento) y Z (3,1 por ciento), destacándose la ausencia del C Prevaleció el fenotipo NA:NT:P1.NST:L3,7,9 (12,5 por ciento), las cepas resistentes a la sulfadiacina (78,2 por ciento) y sensibles a penicilina(81,3 por ciento), aunque el 18,7 por ciento mostró sensibilidad intermedia a este fármaco. Al resto de los antimicrobianos todas fueron sensibles. Se constató una respuesta inmune de memoria a la vacuna antimeningocócica (VAMENGOC-BC®), 12 años después de su aplicación, con títulos bactericidas anti C y B de 25 y 42 por ciento, respectivamente, resultados que pudieran estar influenciados por la inmunización sistemática que se realiza en Cuba con esta vacuna desde 1991(AU)

A descriptive transversal study of N meningitidis carriers involving 189 students of 12-19 years old of a Polytechnic School in Ciego de Avila province was carried out. This study aimed at knowing the prevalence of N meningitidis carriers , the epidemiological markers as well as risk factors associated to carrier state and to basal immune response to VA-MENGOC-BC in teenagers. Blood sample and pharyngeal swab tests were carried out to the students, in addition a survey was performed to find out aspects of research. Identification of N meningitidis was carried out by API NH system (bioMérieux). Sero-subtypesand immunotypes were classified by whole cell ELISA with monoclonal antibodies, and basal immune response was detected by Serum Bactericidal Assay (SBA). Antimicrobial susceptibility of strains to Penicillin, Chloramphenicol, Rifampicin, SodicSulfadiazine, Ceftriaxone and Ciprofloxacine was determined. Prevalence of N meningitidis was 17 percent. Non groupable strainswere predominant (84,7 percent), followed by serogroups B (12,5 percent) and Z (3,1 percent), serogroup C was absent. PhenotypeNA:NT:P1.NST:L3,7,9 (12,5 percent) prevailed, resistant strains to sulfadiazine (78,2 percent) and sensitive to penicillin (81,3 percent), though 18,7 percent showed intermediate sensitivity to this drug. All strains were sensitive to the remaining antimicrobial drugs. Memory immune response to meningococcal vaccine (VA-MENGOC-BC) was observed , 12 years after its application, with anti C andB bactericidal titers of 25 and 42 percent respectively. We consider that these results may be influenced by systematic immunization that is carried out with this vaccine in Cuba since 1991(AU)