MORPHOLOGICAL EVALUATION OF THE TESTICLES OF YOUNG SANTA INÊS RAMS SUBMITTED TO DIFFERENT REGIMES OF PROTEIN / AVALIAÇÃO MORFOLÓGICA DOS TESTÍCULOS DE OVINOS JOVENS SANTA INÊS SUBMETIDOS A DIFERENTES REGIMES DE SUPLEMENTAÇÃO ALIMENTAR E VERMIFUGAÇÃO

The present study investigated the effect of protein supplementation and parasite load in relation to testicular morphology, in young Santa Inês male sheep. Twenty-four male lambs, non-castrated, were distributed in four treatments: HPd (dewormed animals + diet with high protein), HPn (animals non dewormed + diet with high protein), LPd (dewormed animals + diet with low protein), LPn (animals not dewormed + diet with low protein) during eight months. At the end of the experiment histological cuts of testicles were taken and cell count analyzed by computer and the program IMAGE PRO-PLUS was used for evaluation of measurements of the seminiferous tubules. The following results were found: LPn presented larger number of spermatogonias, but a reduced number of the other cells parameters (Sertoli cells, spermatocytes, spermatids and spermatozoa) and smaller diameter and circumference of the seminiferous tubules and shorter seminiferous epithelium when compared to other treatments. There was a significant correlation among tubules diameter of the epithelium height and tubules circumference. Correlations between lumen diameter and lumen circumference, as well as epithelium height and tubules circumference also presented high and positive correlations (r>0.70). When the external testis parameters were compared with internal parameters no significant correlation was observed (r 0.

O presente trabalho objetivou a investigação do efeito da suplementação protéica e carga parasitária em relação à morfometria testicular, em carneiros jovens da raça Santa Inês. Utilizaram-se 24 cordeiros, inteiros, distribuídos em quatro tratamentos: HPd (animais vermifugados + concentrado com alta proteína), HPn (animais não-vermifugados + concentrado com alta proteína), LPd (animais vermifugados + concentrado com baixa proteína), LPn (animais não vermifugados + concentrado com baixa proteína) por oito meses. Realizaram-se cortes histológicos dos testículos após abate e análises em computador para contagem de células, mediante o programa IMAGE PRO-PLUS, para avaliação das mensurações testiculares. O tratamento de baixa proteína sem vermifugação (BPn)apresentou número maior de espermatogônias, porém número reduzido para células de Sertoli, espermatócito, espermátide e espermatozóide; o tratamento BPn apresentou menor diâmetro e circunferência do túbulo e altura do epitélio seminífero quando comparado aos demais tratamentos; houve correlação significativa entre o diâmetro do túbulo com altura do epitélio e circunferência do túbulo. As correlações entre o diâmetro do lúmen e a circunferência do lúmen, bem como entre a altura do epitélio e a circunferência do túbulo, também apresentaram correlações altas e positivas (P>0,70); comparando-se os parâmetros testiculares externos c

Morphological evaluation of the testicles of young santa inês rams submitted to different regimes of protein / Avaliação morfológica dos testículos de ovinos jovens santa inês submetidos a diferentes regimes de suplementação alimentar e vermifugação

The present study investigated the effect of protein supplementation and parasite load in relation to testicular morphology, in young Santa Inês male sheep. Twenty-four male lambs, non-castrated, were distributed in four treatments: HPd (dewormed animals + diet with high protein), HPn (animals non dewormed + diet with high protein), LPd (dewormed animals + diet with low protein), LPn (animals not dewormed + diet with low protein) during eight months. At the end of the experiment histological cuts of testicles were taken and cell count analyzed by computer and the program IMAGE PRO-PLUS was used for evaluation of measurements of the seminiferous tubules. The following results were found: LPn presented larger number of spermatogonias, but a reduced number of the other cells parameters (Sertoli cells, spermatocytes, spermatids and spermatozoa) and smaller diameter and circumference of the seminiferous tubules and shorter seminiferous epithelium when compared to other treatments. There was a significant correlation among tubules diameter of the epithelium height and tubules circumference. Correlations between lumen diameter and lumen circumference, as well as epithelium height and tubules circumference also presented high and positive correlations (r>0.70). When the external testis parameters were compared with internal parameters no significant correlation was observed (r 0.

O presente trabalho objetivou a investigação do efeito da suplementação protéica e carga parasitária em relação à morfometria testicular, em carneiros jovens da raça Santa Inês. Utilizaram-se 24 cordeiros, inteiros, distribuídos em quatro tratamentos: HPd (animais vermifugados + concentrado com alta proteína), HPn (animais não-vermifugados + concentrado com alta proteína), LPd (animais vermifugados + concentrado com baixa proteína), LPn (animais não vermifugados + concentrado com baixa proteína) por oito meses. Realizaram-se cortes histológicos dos testículos após abate e análises em computador para contagem de células, mediante o programa IMAGE PRO-PLUS, para avaliação das mensurações testiculares. O tratamento de baixa proteína sem vermifugação (BPn)apresentou número maior de espermatogônias, porém número reduzido para células de Sertoli, espermatócito, espermátide e espermatozóide; o tratamento BPn apresentou menor diâmetro e circunferência do túbulo e altura do epitélio seminífero quando comparado aos demais tratamentos; houve correlação significativa entre o diâmetro do túbulo com altura do epitélio e circunferência do túbulo. As correlações entre o diâmetro do lúmen e a circunferência do lúmen, bem como entre a altura do epitélio e a circunferência do túbulo, também apresentaram correlações altas e positivas (P>0,70); comparando-se os parâmetros testiculares externos c

CULTIVO IN VITRO DE FOL?CULOS PRÉ-ANTRAIS ISOLADOS A PARTIR DE OV?RIOS DE VACAS ZEBU?NAS (Bos taurus indicus)

Dentre as biotecnologias da reprodução, a manipulação de folículos pré-antrais tem sido vista como uma alternativa para a preservação de gametas femininos, uma vez que possibilita o isolamento e o cultivo de um grande número de ovócitos. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar o crescimento in vitro de folículos isolados a partir de ovários de vacas zebuínas. Os folículos foram isolados mecanicamente e cultivados por 4 dias utilizando-se o meio Waymouth MB 752/1 suplementado com piruvato, l-glutamina, hipoxantina, insulina, transferrina, selênio, ácido ascórbico, soro fetal bovino e eCG. Após o período de cultivo, os folículos passaram de 61,0 ± 18,5 (D0) para 86,2 ± 29,6 mm (D4) de diâmetro. Dos 78 folículos pré-antrais analisados 83,5% apresentavam-se morfologicamente normais no último dia de cultivo, enquanto 11,5% mostravam-se degenerados e 5% rompidos. Um total de 23 folículos foi processado para análise por microscopia de luz. Pela observação de figuras mitóticas constatou-se que 47,8% dos folículos apresentavam proliferação das células da granulosa. Em conclusão, este estudo mostrou que folículos pré-antrais isolados a partir de ovários de vacas zebuínas podem crescer in vitro.

CULTIVO IN VITRO DE FOL?CULOS PRÉ-ANTRAIS ISOLADOS A PARTIR DE OV?RIOS DE VACAS ZEBU?NAS (Bos taurus indicus)

Dentre as biotecnologias da reprodução, a manipulação de folículos pré-antrais tem sido vista como uma alternativa para a preservação de gametas femininos, uma vez que possibilita o isolamento e o cultivo de um grande número de ovócitos. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar o crescimento in vitro de folículos isolados a partir de ovários de vacas zebuínas. Os folículos foram isolados mecanicamente e cultivados por 4 dias utilizando-se o meio Waymouth MB 752/1 suplementado com piruvato, l-glutamina, hipoxantina, insulina, transferrina, selênio, ácido ascórbico, soro fetal bovino e eCG. Após o período de cultivo, os folículos passaram de 61,0 ± 18,5 (D0) para 86,2 ± 29,6 mm (D4) de diâmetro. Dos 78 folículos pré-antrais analisados 83,5% apresentavam-se morfologicamente normais no último dia de cultivo, enquanto 11,5% mostravam-se degenerados e 5% rompidos. Um total de 23 folículos foi processado para análise por microscopia de luz. Pela observação de figuras mitóticas constatou-se que 47,8% dos folículos apresentavam proliferação das células da granulosa. Em conclusão, este estudo mostrou que folículos pré-antrais isolados a partir de ovários de vacas zebuínas podem crescer in vitro.

Isolamento mecânico de folículos ovarianos pré-antrais em cabras

For mechanical isolation of caprine preantral follicles, ovaries from 52 undefinined breed type goats were collected at a local slaughterhouse or cirurgically extracted. The method used for preantral follicle isolation was a direct mechanical procedure (DMP). Briefly, ovaries were cut into small fragments using a tissue chopper adjusted to 500mum. The ovarian fragments were suspended 80 times with a pasteur pipette and then, the suspension was filtered successively through 500 and 100mum nylon mesh filters. The DMP resulted in a large number of isolated preantral follicles. On average, 1,067 ± 160 (mean number ± SEM) preantral follicles were isolated per ovary. To increase the number of preantral follicles recovered per ovary, the ovarian fragments remaining in the 500 and 100mum nylon mesh filters were transferred to the tissue chopper, and the procedure was repeated (complementary mechanical procedure - CMP). The use of CM P resulted in a mean increment of 5.2% of the total preantral follicles isolated per ovary. The mean number (mean ± SEM) of follicles isolated per ovary using the mechanical procedure (DPM + CPM) was 1,126 + 163. Irrespective of the procedure used, the number of preantral follicles isolated was characterized by extreme individual variation. The limits minimum and maximum of this variation were 53 and 7,482, respectively. The diameter of follicles isolated showed a range from l5.0mum to 92.7 mum. In conclusion, these results showed, for the first time, that preantral follicles can be successfully isolated from caprine ovary by applying a mechanical procedure.

Com o objetivo de isolar mecanicamente folículos pré-antrais caprinos, 52 ovários de cabras sem raça definida (SRD) foram coletados em matadouros ou extraídos por ovariectomia. O protocolo utilizado para o isolamento dos folículos, denominado procedimento mecânico direto (PMD), consistiu no corte do tecido ovariano em pequenos fragmentos, utilizando-se um cortador de tecidos. Em seguida, os fragmentos obtidos foram dissociados mecanicamente com pipetas de pasteur (1600mim e 600mim de diâmetro) e a suspensão resultante, contendo os fragmentos ovarianos, foi sucessivamente filtrada em malhas de náilon (500mim e 100mim). A realização deste procedimento permitiu isolar um número médio (± EP) de 1.067 ± 160 folículos por ovário. Com a finalidade de aumentar o número de folículos pré-antrais isolados por ovário, foi utilizado um procedimento mecânico complementar (PMC), que consistiu em submeter os fragmentos retidos nas malhas de 500mim e 100mim às etapas descritas no PMD. A utilização desses fragmentos resultou em um incremento médio de 5,2% no total de folículos isolados por ovário. O número médio (± EP) de folículos isolados por ovário, utilizando-se o procedimento mecânico (PMD + PMC), foi 1.126 + 163. Independentemente do procedimento utilizado, observou-se uma grande variação individual no número de folículos isolados por ovário. Os limites mínimo e máximo desta variação foram 53 e 7.482 folículos, respectivamente. O tamanho dos folículos isolados variou de 15,0mim a 92,7mim. É viável a utilização do procedimento mecânico, descrito pela primeira vez, para o isolamento de folículos ovarianos pré-antrais caprinos.

Folículos pré-antrais caprinos isolados mecanicamente em diferentes estágios reprodutivos e parâmetros morfométricos ovarianos

The aïm of this study was to describe the effects of reproductive stages (pre-pubertal, non-pregnant and pregnant adult animals), ovarian anatomic position (left or right), presence of functional corpus luteum, ovarian weight and number of superficial antral follicles on the number of preantral follicles mechanically isolated. The mean number (mean ± SEM) of isolated preantral follicles per ovary was 1,324 ± 193, 866 ±170 and 779 ± 139, respectively for prepubertal, non-pregnant and pregnant adult animals. Anatomic position (except for nonpregnant animals) and the presence or absence of corpus luteum dia nof affect the number and distribution of isolated preantral follicles. In general, the number of primary and secondary follicles was negatively correlated with the ovarian weight. The numbers of primordial and secondary follicles were, respectively, positively and negatively correlated with the number of superficial antral follicles. Analyzing animal categories separately, it was observed that in prepurbetal animals, the number of primordial follicles was positively correlated with the number of superficial antral follicles. However the numbers of primary and secondary follicles were negatively correlated with the number of superficial antral follicles. In the category of pregnant animals, the number of primary follicles was negatively correlated with the ovarian weight. According to ovary category analyzed, were observed significant correlation between the number of primordial, primary and secondary isolated follicles.

O presente trabalho descreve os efeitos do estágio reprodutivo (animais impúberes, adultos não-gestantes e gestantes), posição anatômica do ovário (direito e esquerdo) presença de corpo lúteo funcional, peso do ovário e número de folículos antrais superficiais (FAS) sobre o número de folículos pré-antrais (FPA) isolados mecanicamente. Os FPA isolados foram divididos em 3 classes a saber: primordiais, primários e secundários. O número médio (± EP) de FPA isolados por ovário foi de 1.324 ± 193; 866 + 170 e 779 ± 139, respectivamente para ovários oriundos de animais impúberes, não-gestantes e gestantes, sendo observada diferença significativa somente entre animais impúberes e gestantes. A posição anatômica do ovário (exceto para os animais não-gestantes) e a presença ou ausência de corpo lúteo não exerceram nenhum efeito sobre o número e distribuição dos FPA isolados. De um modo geral, o número de folículos primários e secundários foi negativamente correlacionado com o peso ovariano. Já o número de folículos primordiais e secundários foi, respectivamente, positiva e negativamente correlacionado com o número de FAS. Analisando as categorias de animais isoladamente, observou-se que, nos animais impúberes, o número de folículos primordiais foi positivamente correlacionado com o número de FAZ, enquanto que o número de folículos primários e secundários foi negativamente correlacionado com o número de FAS. No tocante à categoria de animais gestantes, o número de folículos primários foi negativamente correlacionado com o peso ovariano. Dependendo da categoria de ovários estudada, foram observadas associações significativas entre o número de folículos primordiais, primários e secundários.

Folículos pré-antrais caprinos isolados mecanicamente em diferentes estágios reprodutivos e parâmetros morfométricos ovarianos

The aïm of this study was to describe the effects of reproductive stages (pre-pubertal, non-pregnant and pregnant adult animals), ovarian anatomic position (left or right), presence of functional corpus luteum, ovarian weight and number of superficial antral follicles on the number of preantral follicles mechanically isolated. The mean number (mean ± SEM) of isolated preantral follicles per ovary was 1,324 ± 193, 866 ±170 and 779 ± 139, respectively for prepubertal, non-pregnant and pregnant adult animals. Anatomic position (except for nonpregnant animals) and the presence or absence of corpus luteum dia nof affect the number and distribution of isolated preantral follicles. In general, the number of primary and secondary follicles was negatively correlated with the ovarian weight. The numbers of primordial and secondary follicles were, respectively, positively and negatively correlated with the number of superficial antral follicles. Analyzing animal categories separately, it was observed that in prepurbetal animals, the number of primordial follicles was positively correlated with the number of superficial antral follicles. However the numbers of primary and secondary follicles were negatively correlated with the number of superficial antral follicles. In the category of pregnant animals, the number of primary follicles was negatively correlated with the ovarian weight. According to ovary category analyzed, were observed significant correlation between the number of primordial, primary and secondary isolated follicles.

O presente trabalho descreve os efeitos do estágio reprodutivo (animais impúberes, adultos não-gestantes e gestantes), posição anatômica do ovário (direito e esquerdo) presença de corpo lúteo funcional, peso do ovário e número de folículos antrais superficiais (FAS) sobre o número de folículos pré-antrais (FPA) isolados mecanicamente. Os FPA isolados foram divididos em 3 classes a saber: primordiais, primários e secundários. O número médio (± EP) de FPA isolados por ovário foi de 1.324 ± 193; 866 + 170 e 779 ± 139, respectivamente para ovários oriundos de animais impúberes, não-gestantes e gestantes, sendo observada diferença significativa somente entre animais impúberes e gestantes. A posição anatômica do ovário (exceto para os animais não-gestantes) e a presença ou ausência de corpo lúteo não exerceram nenhum efeito sobre o número e distribuição dos FPA isolados. De um modo geral, o número de folículos primários e secundários foi negativamente correlacionado com o peso ovariano. Já o número de folículos primordiais e secundários foi, respectivamente, positiva e negativamente correlacionado com o número de FAS. Analisando as categorias de animais isoladamente, observou-se que, nos animais impúberes, o número de folículos primordiais foi positivamente correlacionado com o número de FAZ, enquanto que o número de folículos primários e secundários foi negativamente correlacionado com o número de FAS. No tocante à categoria de animais gestantes, o número de folículos primários foi negativamente correlacionado com o peso ovariano. Dependendo da categoria de ovários estudada, foram observadas associações significativas entre o número de folículos primordiais, primários e secundários.

Isolamento mecânico de folículos ovarianos pré-antrais em cabras

For mechanical isolation of caprine preantral follicles, ovaries from 52 undefinined breed type goats were collected at a local slaughterhouse or cirurgically extracted. The method used for preantral follicle isolation was a direct mechanical procedure (DMP). Briefly, ovaries were cut into small fragments using a tissue chopper adjusted to 500mum. The ovarian fragments were suspended 80 times with a pasteur pipette and then, the suspension was filtered successively through 500 and 100mum nylon mesh filters. The DMP resulted in a large number of isolated preantral follicles. On average, 1,067 ± 160 (mean number ± SEM) preantral follicles were isolated per ovary. To increase the number of preantral follicles recovered per ovary, the ovarian fragments remaining in the 500 and 100mum nylon mesh filters were transferred to the tissue chopper, and the procedure was repeated (complementary mechanical procedure - CMP). The use of CM P resulted in a mean increment of 5.2% of the total preantral follicles isolated per ovary. The mean number (mean ± SEM) of follicles isolated per ovary using the mechanical procedure (DPM + CPM) was 1,126 + 163. Irrespective of the procedure used, the number of preantral follicles isolated was characterized by extreme individual variation. The limits minimum and maximum of this variation were 53 and 7,482, respectively. The diameter of follicles isolated showed a range from l5.0mum to 92.7 mum. In conclusion, these results showed, for the first time, that preantral follicles can be successfully isolated from caprine ovary by applying a mechanical procedure.

Com o objetivo de isolar mecanicamente folículos pré-antrais caprinos, 52 ovários de cabras sem raça definida (SRD) foram coletados em matadouros ou extraídos por ovariectomia. O protocolo utilizado para o isolamento dos folículos, denominado procedimento mecânico direto (PMD), consistiu no corte do tecido ovariano em pequenos fragmentos, utilizando-se um cortador de tecidos. Em seguida, os fragmentos obtidos foram dissociados mecanicamente com pipetas de pasteur (1600mim e 600mim de diâmetro) e a suspensão resultante, contendo os fragmentos ovarianos, foi sucessivamente filtrada em malhas de náilon (500mim e 100mim). A realização deste procedimento permitiu isolar um número médio (± EP) de 1.067 ± 160 folículos por ovário. Com a finalidade de aumentar o número de folículos pré-antrais isolados por ovário, foi utilizado um procedimento mecânico complementar (PMC), que consistiu em submeter os fragmentos retidos nas malhas de 500mim e 100mim às etapas descritas no PMD. A utilização desses fragmentos resultou em um incremento médio de 5,2% no total de folículos isolados por ovário. O número médio (± EP) de folículos isolados por ovário, utilizando-se o procedimento mecânico (PMD + PMC), foi 1.126 + 163. Independentemente do procedimento utilizado, observou-se uma grande variação individual no número de folículos isolados por ovário. Os limites mínimo e máximo desta variação foram 53 e 7.482 folículos, respectivamente. O tamanho dos folículos isolados variou de 15,0mim a 92,7mim. É viável a utilização do procedimento mecânico, descrito pela primeira vez, para o isolamento de folículos ovarianos pré-antrais caprinos.