Association of variants in MYH7, MYBPC3 and TNNT2 with sudden cardiac death-related risk factors in Brazilian patients with hypertrophic cardiomyopathy

Hypertrophic cardiomyopathy (HCM) is characterized by unexplained left ventricular hypertrophy (LVH) and is one of the major causes of sudden cardiac death (SCD). An exon-targeted gene sequencing strategy was used to investigate the association of functional variants in sarcomeric genes (MYBPC3, MYH7 and TNNT2) with severe LVH and other SCD-related risk factors in Brazilian HCM patients. Clinical data of 55 HCM patients attending a Cardiology Hospital (Sao Paulo city, Brazil) were recorded. Severe LVH, aborted SCD, family history of SCD, syncope, non-sustained ventricular tachycardia and abnormal blood pressure in response to exercise were evaluated as SCD risk factors. Blood samples were obtained for genomic DNA extraction and the exons and untranslated regions of the MYH7, MYBPC3 and TNNT2 were sequenced using Nextera® and MiSEq® reagents. Variants were identified and annotated using in silico tools, and further classified as pathogenic or benign according to the American College of Medical Genetics and Genomics guidelines. Variants with functional effects were identified in MYBPC3 (n = 9), MYH7 (n = 6) and TNNT2 (n = 4). The benign variants MYBPC3 p.Val158Met and TNNT2 p.Lys263Arg were associated with severe LVH (p < 0.05), and the MYH7 p.Val320Met (pathogenic) was associated with family history of SCD (p = 0.037). Increased risk for severe LVH was found in carriers of MYBPC3 Met158 (c.472 A allele, OR = 13.5, 95% CI = 1.80-101.12, p = 0.011) or combined variants (MYBPC3, MYH7 and TNNT2: OR = 12.39, 95% CI = 2.14-60.39, p = 0.004). Carriers of TNNT2 p.Lys263Arg and combined variants had higher values of septum thickness than non-carriers (p < 0.05). Molecular modeling analysis showed that MYBPC3 158Met reduces the interaction of cardiac myosin-binding protein C (cMyBP-C) RASK domain (amino acids Arg215-Ala216-Ser217-Lys218) with tropomyosin. In conclusion, the variants MYBPC3 p.Val158Met, TNNT2 p.Lys263Arg and MYH7 p.Val320Met individually or combined contribute to the risk of sudden cardiac death and other outcomes of hypertrophic cardiomyopathy.

Association of variants in MYH7, MYBPC3 and TNNT2 with sudden cardiac death-related risk factors in Brazilian patients with hypertrophic cardiomyopathy.

Hypertrophic cardiomyopathy (HCM) is characterized by unexplained left ventricular hypertrophy (LVH) and is one of the major causes of sudden cardiac death (SCD). An exon-targeted gene sequencing strategy was used to investigate the association of functional variants in sarcomeric genes (MYBPC3, MYH7 and TNNT2) with severe LVH and other SCD-related risk factors in Brazilian HCM patients. Clinical data of 55 HCM patients attending a Cardiology Hospital (Sao Paulo city, Brazil) were recorded. Severe LVH, aborted SCD, family history of SCD, syncope, non-sustained ventricular tachycardia and abnormal blood pressure in response to exercise were evaluated as SCD risk factors. Blood samples were obtained for genomic DNA extraction and the exons and untranslated regions of the MYH7, MYBPC3 and TNNT2 were sequenced using Nextera® and MiSEq® reagents. Variants were identified and annotated using in silico tools, and further classified as pathogenic or benign according to the American College of Medical Genetics and Genomics guidelines. Variants with functional effects were identified in MYBPC3 (n = 9), MYH7 (n = 6) and TNNT2 (n = 4). The benign variants MYBPC3 p.Val158Met and TNNT2 p.Lys263Arg were associated with severe LVH (p < 0.05), and the MYH7 p.Val320Met (pathogenic) was associated with family history of SCD (p = 0.037). Increased risk for severe LVH was found in carriers of MYBPC3 Met158 (c.472 A allele, OR = 13.5, 95% CI = 1.80-101.12, p = 0.011) or combined variants (MYBPC3, MYH7 and TNNT2: OR = 12.39, 95% CI = 2.14-60.39, p = 0.004). Carriers of TNNT2 p.Lys263Arg and combined variants had higher values of septum thickness than non-carriers (p < 0.05). Molecular modeling analysis showed that MYBPC3 158Met reduces the interaction of cardiac myosin-binding protein C (cMyBP-C) RASK domain (amino acids Arg215-Ala216-Ser217-Lys218) with tropomyosin. In conclusion, the variants MYBPC3 p.Val158Met, TNNT2 p.Lys263Arg and MYH7 p.Val320Met individually or combined contribute to the risk of sudden cardiac death and other outcomes of hypertrophic cardiomyopathy.

Associação de variantes dos genes MYH7, MYBPC3 e TNNT2 com fatores de risco para morte súbita cardíaca em pacientes com cardiomiopatia hipertrófica / Association of MYH7, MYBPC3, and TNNT2 gene variants with risk factors for sudden cardiac death in patients with hypertrophic cardiomyopathy

INTRODUÇÃO: A Cardiomiopatia Hipertrófica (CMH) caracteriza-se por hipetrofia do ventrículo esquerdo (HVE) na ausência de outras doenças cardíacas que justifiquem a hipertrofia. A CMH é um dos principais causadores de Morte Súbita Cardíaca, um desfecho trágico de muitas doenças cardíacas. Mutações nos genes que codificam proteínas sarcoméricas, principalmente nos genes MYH7, MYBPC3 e TNNT2 têm sido associados com HCM em diversas populações. OBJETIVO: Investigar variantes nos genes MYH7, MYBPC3 e TNNT2 e suas associações com HVE severa (espessura maior que 30mm) e demais fatores de risco para SCD em pacientes brasileiros com HCM. MÉTODOS: Dados clínicos de 65 pacientes foram coletados em um hospital de cardiologia do estado de São Paulo, bem como características como HVE severa, MSC recuperada, histórico familiar de MSC antes dos 40 anos (HFMSC), síncope, taquicardia ventricular não-sustentada e resposta anormal da pressão sanguíne no exercício foram avaliados como fatores de risco para MSC e para classificação em grupos. Amostras de sangue foram coletadas para extração de DNA genômico e sequenciamento exômico dos genes MYH7, MYBPC3 e TNNT2, utilizando protocolo Nextera e plataforma MiSeq. RESULTADOS: Das 19 variantes identificadas com potencial de serem associadas com os fatores de risco, a variante MYBPC3 rs3729986 foi associada com HVE severa, cujos pacientes apresentaram 14 vezes mais chance de apresentarem tal características, e também com ausência de episódios de síncope. A variante MYH7 rs376897125 foi associada com o grupo HFMSC, grupo que também apresentou alta frequência de mulheres. A elevada frequência de indivíduos mulheres também foi encontrada no grupo síncope. CONCLUSÕES: Os resultados sugerem que a variante MYBPC3 rs3729986 poderia representar uma das principais variantes de risco para o desenvolvimento de HVE severa, e que a variante MYH rs376897125 poderia estar relacionada com o elevado risco de FHMSC, principalmente em indivíduos do sexo feminino. Portanto, portadores dessas variantes poderiam apresentar elevado grau de risco para MSC, considerando que ambas as características são consideradas fatores de risco para MS|C. (AU)

MIR-183-5P E MIR-421 como biomarcadores epigenéticos precoces da síndrome metabólica / MIR-183-5P and MIR-421 as early epigenetic biomarkers of metabolic syndrome

INTRODUÇÃO: A Síndrome Metabólica (SM) é caracterizada como um conjunto de alterações metabólicas relacionadas ao maior risco de doenças cardiovasculares e, seu desenvolvimento está associado a vários fatores, incluindo os epigenéticos. A SM possui alto impacto na qualidade e expectativa de vida dos pacientes, portanto o diagnóstico e intervenção precoce é de suma importância para o aumento da sobrevida destes indivíduos. OBJETIVO: Identificar os miRNA que podem ser utilizados como biomarcadores epigenéticos precoces da SM. MÉTODOS: Nesse estudo, a SM foi classificada segundo os critérios da 4ª Edição das Diretrizes Brasileiras de Obesidade. Inicialmente foi realizada uma etapa de screening na qual foram selecionados 6 indivíduos para compor cada um dos 5 grupos analisados: SM, Controle (C), Prédiabetes, Hipertrigliceridemia e Hipertensão Arterial Sistêmica, pareados por sexo e idade. Nessa etapa foram selecionados os miRNA diferentemente expressos entre os grupos SM e C. A extração dos miRNA a partir do soro dos pacientes, a síntese de cDNA e o controle de qualidade das amostras foram realizados utilizando kits comerciais. A análise de expressão foi realizada através da PCR quantitativa utilizando a placa miScript miRNA PCR Array Human miFinder 384HC. Os miRNA selecionados foram validados em 230 indivíduos (143 C e 87 SM) com a mesma metodologia, entretanto utilizando placas customizadas que continham além dos miRNA selecionados, os controles endógenos miR-16-5p, miR-21-5p, miR-191-5p, o controle exógeno cel-miR39-3p e, os controles de transcrição reversa e de amplificação. Todas as PCR foram realizadas utilizando a plataforma QuantStudioTM 12K Flex. A análise dos resultados foi realizada através do método 2-ΔCT utilizando o software de análise disponível no site http://pcrdataanalysis.sabiosciences.com/mirna...(AU)