RESUMO
Insecticide resistance is a worldwide threat for vector control around the world, and Aedes aegypti, the main vector of several arboviruses, is a particular concern. To better understand the mechanisms of resistance, four isofemale strains originally from French Guiana were isolated and analysed using combined approaches. The activity of detoxification enzymes involved in insecticide resistance was assayed, and mutations located at positions 1016 and 1534 of the sodium voltage-gated channel gene, which have been associated with pyrethroid resistance in Aedes aegypti populations in Latin America, were monitored. Resistance to other insecticide families (organophosphates and carbamates) was evaluated. A large-scale proteomic analysis was performed to identify proteins involved in insecticide resistance. Our results revealed a metabolic resistance and resistance associated with a mutation of the sodium voltage-gated channel gene at position 1016. Metabolic resistance was mediated through an increase of esterase activity in most strains but also through the shifts in the abundance of several cytochrome P450 (CYP450s). Overall, resistance to deltamethrin was linked in the isofemale strains to resistance to other class of insecticides, suggesting that cross- and multiple resistance occur through selection of mechanisms of metabolic resistance. These results give some insights into resistance to deltamethrin and into multiple resistance phenomena in populations of Ae. aegypti.
Assuntos
Aedes/metabolismo , Sistema Enzimático do Citocromo P-450/genética , Proteínas de Insetos/genética , Resistência a Inseticidas/genética , Canais de Sódio Disparados por Voltagem/genética , Aedes/efeitos dos fármacos , Aedes/genética , Animais , Esterases/metabolismo , Feminino , Guiana Francesa , Técnicas de Silenciamento de Genes , Genótipo , Inativação Metabólica/genética , Proteínas de Insetos/antagonistas & inibidores , Proteínas de Insetos/metabolismo , Inseticidas/farmacologia , Mucosa Intestinal/metabolismo , Nitrilas/farmacologia , Oligonucleotídeos/metabolismo , Polimorfismo de Nucleotídeo Único , Proteoma/análise , Proteômica , Piretrinas/farmacologia , Canais de Sódio Disparados por Voltagem/química , Canais de Sódio Disparados por Voltagem/metabolismoRESUMO
La crotoxina, el mayor componente tóxico del veneno de serpiente cascabel sudamericana Crotalus durissus terrificus, es una fosolipasa A2 neurotóxica que ejerce su acción bloqueando la transmisión neuromuscular. Actúa primariamente alterando la liberación de acetilcolina de las terminales nerviosas mediante un mecanismo todavía no elucidado. Actúa también en membranas postsinápticas estabilizando el receptor de acetilcolina en una configuración inactiva semejante al estado de desensibilización. La crotoxina comprende dos subnuidades distintas: una fosoflipasa A2 básica y débilmente tóxica (componente B) y una acídica y no tóxica (componente A) que no posee actividad enzimática. La subunidad de fosfolipasa A2 se une en forma inespecífica y no saturable a membranas biológicas, mientras que en presencia delo componente A interacciona solamente con un limitado número de sitios de unión de alta afinidad presentes en membranas sinápticas pero no en eritrocitos. Experimentos de unión realizados con vesículas fosfolipídicas unilamelares de diferente composición indicaron que algunos de los fosfolípidos cargados negativamente, como los mono y difosfoinositósidos, podrían ser parte del sitio aceptor de crotoxina. La crotoxina es en realidad una mexcla de diversas isoformas de estructura peptídica similar pero no idéntica. Estas isoformas difieren levemente en su actividad enzimática y farmacológica. Estudios realizados con anticuerpos policonales preparados contra ambas subunidades anticomponente B (Fab) inhiben la actividad fosfolipasa A2 y neutralizan la potencia letal, lo que sugiere que los sitios tóxicos y catalíticos de la crotoxina están relacionados (AU)
Assuntos
Crotoxina , Fosfolipases A/metabolismo , Junção Neuromuscular/fisiologia , Transmissão Sináptica/efeitos dos fármacos , Estrutura MolecularRESUMO
La crotoxina, el mayor componente tóxico del veneno de serpiente cascabel sudamericana Crotalus durissus terrificus, es una fosolipasa A2 neurotóxica que ejerce su acción bloqueando la transmisión neuromuscular. Actúa primariamente alterando la liberación de acetilcolina de las terminales nerviosas mediante un mecanismo todavía no elucidado. Actúa también en membranas postsinápticas estabilizando el receptor de acetilcolina en una configuración inactiva semejante al estado de desensibilización. La crotoxina comprende dos subnuidades distintas: una fosoflipasa A2 básica y débilmente tóxica (componente B) y una acídica y no tóxica (componente A) que no posee actividad enzimática. La subunidad de fosfolipasa A2 se une en forma inespecífica y no saturable a membranas biológicas, mientras que en presencia delo componente A interacciona solamente con un limitado número de sitios de unión de alta afinidad presentes en membranas sinápticas pero no en eritrocitos. Experimentos de unión realizados con vesículas fosfolipídicas unilamelares de diferente composición indicaron que algunos de los fosfolípidos cargados negativamente, como los mono y difosfoinositósidos, podrían ser parte del sitio aceptor de crotoxina. La crotoxina es en realidad una mexcla de diversas isoformas de estructura peptídica similar pero no idéntica. Estas isoformas difieren levemente en su actividad enzimática y farmacológica. Estudios realizados con anticuerpos policonales preparados contra ambas subunidades anticomponente B (Fab) inhiben la actividad fosfolipasa A2 y neutralizan la potencia letal, lo que sugiere que los sitios tóxicos y catalíticos de la crotoxina están relacionados