RESUMO
Avastrovirus infection is associated with enteric disease, nephritis, and hepatitis in birds. In this study, we present a protocol for the complete sequencing of the ORF2 gene of avian nephritis virus (ANV), chicken astrovirus (CAstV), and turkey astrovirus type 1 (TAstV-1) using a conventional Sanger technique. Previously and newly designed primer pairs targeting both the conserved flanking and internal regions of the ORF2 gene of these three viruses were used. The information derived from the astroviral sequences obtained in this study is fundamental for characterizing this virus and providing data regarding several aspects of disease epidemiology and prevention.
As infecções por avastrovírus estão associados à doença entérica, nefrite e hepatite em aves. Aqui, nos presentamos um protocolo planejado para o sequenciamento completo do gene ORF2 em Avian Nephritis Vírus (ANV), Chicken Astrovirus (CAstV) e Turkey Astrovirus tipo 1 (TAstV-1), usando a técnica de sequenciamento convencional de Sanger. Foram usados primers previamente descritos e desenhados neste estudo, tendo como alvo as regiões conservadas flanqueadoras e internas dentro do gene ORF2 nos três vírus. O conhecimento destas sequencias é um elemento chave para caracterizar o vírus e prover de dados em diversos aspectos da epidemiologia e prevenção da doença.
Assuntos
Animais , Avastrovirus/genética , Aves/virologia , Genes Virais , Reação em Cadeia da Polimerase , Sequência de Bases/genética , Marcação in Situ com Primers/métodosRESUMO
Avastrovirus infection is associated with enteric disease, nephritis, and hepatitis in birds. In this study, we present a protocol for the complete sequencing of the ORF2 gene of avian nephritis virus (ANV), chicken astrovirus (CAstV), and turkey astrovirus type 1 (TAstV-1) using a conventional Sanger technique. Previously and newly designed primer pairs targeting both the conserved flanking and internal regions of the ORF2 gene of these three viruses were used. The information derived from the astroviral sequences obtained in this study is fundamental for characterizing this virus and providing data regarding several aspects of disease epidemiology and prevention.(AU)
As infecções por avastrovírus estão associados à doença entérica, nefrite e hepatite em aves. Aqui, nos presentamos um protocolo planejado para o sequenciamento completo do gene ORF2 em Avian Nephritis Vírus (ANV), Chicken Astrovirus (CAstV) e Turkey Astrovirus tipo 1 (TAstV-1), usando a técnica de sequenciamento convencional de Sanger. Foram usados primers previamente descritos e desenhados neste estudo, tendo como alvo as regiões conservadas flanqueadoras e internas dentro do gene ORF2 nos três vírus. O conhecimento destas sequencias é um elemento chave para caracterizar o vírus e prover de dados em diversos aspectos da epidemiologia e prevenção da doença.(AU)
Assuntos
Animais , Avastrovirus/genética , Aves/virologia , Reação em Cadeia da Polimerase , Sequência de Bases/genética , Genes Virais , Marcação in Situ com Primers/métodosRESUMO
Rotavírus é responsável pela ocorrência de diarreia em humanos e em várias espécies animais. Oito pares de oligonucleotídeos iniciadores (primers) foram desenvolvidos e utilizados como estratégia para o sequenciamento do tipo Sanger da região codificadora dos genes NSP1, NSP3 e VP6 com base nas áreas conservadas do genoma dos rotavírus do grupo A de suínos. Um total de 3 amostras previamente triadas como positivas para rotavírus do grupo A, tiveram os respectivos genes amplificados e seqüenciados por estes oligonucleotídeos iniciadores, possibilitando a caracterização das amostras circulantes, cujo conhecimento é essencial para a compreensão da epidemiologia da doença.(AU)
Rotavirus is the causative pathogen of diarrhea in humans and in several animal species. Eight pairs of primers were developed and used for Sanger sequencing of the coding region of the NSP1, NSP3, and VP6 genes based on the conserved regions of the genome of the group A porcine rotavirus. Three samples previously screened as positive for group A rotaviruses were subjected to gene amplification and sequencing to characterize the pathogen. The information generated from this study is crucial for the understanding of the epidemiology of the disease.(AU)
Assuntos
Animais , Proteínas não Estruturais Virais/genética , Proteínas Estruturais Virais/genética , Rotavirus , Primers do DNA , Suínos , Reação em Cadeia da Polimerase , DiarreiaRESUMO
Rotavírus é responsável pela ocorrência de diarreia em humanos e em várias espécies animais. Oito pares de oligonucleotídeos iniciadores (primers) foram desenvolvidos e utilizados como estratégia para o sequenciamento do tipo Sanger da região codificadora dos genes NSP1, NSP3 e VP6 com base nas áreas conservadas do genoma dos rotavírus do grupo A de suínos. Um total de 3 amostras previamente triadas como positivas para rotavírus do grupo A, tiveram os respectivos genes amplificados e seqüenciados por estes oligonucleotídeos iniciadores, possibilitando a caracterização das amostras circulantes, cujo conhecimento é essencial para a compreensão da epidemiologia da doença.
Rotavirus is the causative pathogen of diarrhea in humans and in several animal species. Eight pairs of primers were developed and used for Sanger sequencing of the coding region of the NSP1, NSP3, and VP6 genes based on the conserved regions of the genome of the group A porcine rotavirus. Three samples previously screened as positive for group A rotaviruses were subjected to gene amplification and sequencing to characterize the pathogen. The information generated from this study is crucial for the understanding of the epidemiology of the disease.