Decline in Mycobacterium bovis and Brucella abortus populations during the maturation of experimentally contaminated parmesan-type cheese / Decaimento do Mycobacterium bovis e da Brucella abortus durante a cura de queijo tipo parmesão experimentalmente contaminado

Brazilian legislation allows the manufacture of raw milk cheese with a maturation exceeding 60 days at room temperature above 5C, but there is a lack of solid scientific evidence on the efficacy of this maturation process in inactivating important pathogens that may be present in milk, such as Mycobacterium bovis and Brucella abortus. Thus, the objectives of this study were to produce parmesan-type cheese experimentally contaminated with M. bovis and B. abortus and evaluate the survival of these pathogens along 2-month maturation. Parmesan-type cheese was manufactured in the laboratory using whole pasteurized milk with or without inoculation with M. bovis (SB1033) or B. abortus (1119-3) and matured at 18C for up to 63 days. M. bovis was inoculated in Stonebrink-Leslie medium supplemented with antibiotics and incubated at 37C for 45 days, and B. abortus was incubated in Farrel medium at 36C for 3 days. The average D18C value, weighted by variance, was 37.5 ± 5.3 days for M. bovis and 5.9 ± 0.7 days for B. abortus. The average physicochemical parameters in the cheese at the end of the study were as follows: pH = 4.89, water activity = 0.976, and moisture percentage = 43.1%. The pH might have contributed to the reduction in the population of B. abortus but seems not to have influenced the population of M. bovis. We conclude that the duration of the maturation process influences the size of the surviving populations of M. bovis and B. abortus, and that the shortening of the maturation duration might not ensure a decline in pathogen levels to safe levels. Thus, complementary studies considering the effect of several other technological aspects on the survival of these pathogens are required, including the effect of the lactic acid bacterial population, salt content, and temperature of maturation.(AU)

A legislação brasileira permite a fabricação queijos de leite cru com maturação superior a 60 dias em temperatura acima de 5C, mas falta evidência científica sólida sobre a eficácia do processo de maturação na inativação de importantes patógenos que podem estar presentes no leite, como o Mycobacterium bovis e a Brucella abortus. Assim, os objetivos desse estudo foram produzir o queijo tipo parmesão experimentalmente contaminado com M. bovis e B. abortus e avaliar a sobrevivência desses patógenos ao longo de 2 meses de maturação. Queijo do tipo parmesão foi fabricado em laboratório com leite pasteurizado integral com ou sem inoculo de M. bovis (SB1033) ou B. abortus (1119-3) e maturado a 18C por até 63 dias. M. bovis foi semeado em meio Stonebrink-Leslie, acrescido de antibióticos, e incubado a 37C por 45 dias e a B. abortus foi semeada em meio Farrel a 36C por 3 dias. O valor D18C médio, ponderado pela variância, foi de 37,5 ± 5,3 dias para o M. bovis e de 5,9 ± 0,7 dias para a B. abortus. Os parâmetros físico-químicos médios do queijo no final do estudo foram como se segue: pH = 4,89, atividade de água = 0,976 e umidade percentual = 43,1%. O pH pode ter contribuído para redução da população de B. abortus mas parece não ter influenciado a população de M. bovis. Concluiu-se que a duração do processo de maturação influencia o tamanho da população sobrevivente de M. bovis e de B. abortus e que o encurtamento do período de maturação pode não garantir um declínio desses patógenos para níveis seguros. Assim, estudos complementares que considerem o efeito de vários outros aspectos tecnológicos na sobrevivência desses patógenos são necessários, incluindo o efeito da população de bactérias ácido láticas, teor de sal e temperatura de maturação.(AU)

Decline in Mycobacterium bovis and Brucella abortus populations during the maturation of experimentally contaminated parmesan-type cheese / Decaimento do Mycobacterium bovis e da Brucella abortus durante a cura de queijo tipo parmesão experimentalmente contaminado

Brazilian legislation allows the manufacture of raw milk cheese with a maturation exceeding 60 days at room temperature above 5C, but there is a lack of solid scientific evidence on the efficacy of this maturation process in inactivating important pathogens that may be present in milk, such as Mycobacterium bovis and Brucella abortus. Thus, the objectives of this study were to produce parmesan-type cheese experimentally contaminated with M. bovis and B. abortus and evaluate the survival of these pathogens along 2-month maturation. Parmesan-type cheese was manufactured in the laboratory using whole pasteurized milk with or without inoculation with M. bovis (SB1033) or B. abortus (1119-3) and matured at 18C for up to 63 days. M. bovis was inoculated in Stonebrink-Leslie medium supplemented with antibiotics and incubated at 37C for 45 days, and B. abortus was incubated in Farrel medium at 36C for 3 days. The average D18C value, weighted by variance, was 37.5 ± 5.3 days for M. bovis and 5.9 ± 0.7 days for B. abortus. The average physicochemical parameters in the cheese at the end of the study were as follows: pH = 4.89, water activity = 0.976, and moisture percentage = 43.1%. The pH might have contributed to the reduction in the population of B. abortus but seems not to have influenced the population of M. bovis. We conclude that the duration of the maturation process influences the size of the surviving populations of M. bovis and B. abortus, and that the shortening of the maturation duration might not ensure a decline in pathogen levels to safe levels. Thus, complementary studies considering the effect of several other technological aspects on the survival of these pathogens are required, including the effect of the lactic acid bacterial population, salt content, and temperature of maturation.

A legislação brasileira permite a fabricação queijos de leite cru com maturação superior a 60 dias em temperatura acima de 5C, mas falta evidência científica sólida sobre a eficácia do processo de maturação na inativação de importantes patógenos que podem estar presentes no leite, como o Mycobacterium bovis e a Brucella abortus. Assim, os objetivos desse estudo foram produzir o queijo tipo parmesão experimentalmente contaminado com M. bovis e B. abortus e avaliar a sobrevivência desses patógenos ao longo de 2 meses de maturação. Queijo do tipo parmesão foi fabricado em laboratório com leite pasteurizado integral com ou sem inoculo de M. bovis (SB1033) ou B. abortus (1119-3) e maturado a 18C por até 63 dias. M. bovis foi semeado em meio Stonebrink-Leslie, acrescido de antibióticos, e incubado a 37C por 45 dias e a B. abortus foi semeada em meio Farrel a 36C por 3 dias. O valor D18C médio, ponderado pela variância, foi de 37,5 ± 5,3 dias para o M. bovis e de 5,9 ± 0,7 dias para a B. abortus. Os parâmetros físico-químicos médios do queijo no final do estudo foram como se segue: pH = 4,89, atividade de água = 0,976 e umidade percentual = 43,1%. O pH pode ter contribuído para redução da população de B. abortus mas parece não ter influenciado a população de M. bovis. Concluiu-se que a duração do processo de maturação influencia o tamanho da população sobrevivente de M. bovis e de B. abortus e que o encurtamento do período de maturação pode não garantir um declínio desses patógenos para níveis seguros. Assim, estudos complementares que considerem o efeito de vários outros aspectos tecnológicos na sobrevivência desses patógenos são necessários, incluindo o efeito da população de bactérias ácido láticas, teor de sal e temperatura de maturação.

Viabilidade da Brucella abortus durante a cura de queijo parmesão fabricado com leite experimentalmente contaminado / Viability of Brucella abortus during the ripening of parmesan type cheese made from experimentally contaminated milk

A legislação brasileira permite o uso de leite cru na fabricação de queijos curados se o período de cura for superior a 60 dias (a 5°C ou mais). Entretanto, não há evidência científica sólida de que durante a cura ocorre suficiente inativação de Brucella abortus, sob a perspectiva da segurança dos alimentos. Além disso, não há metodologia oficial para quantificação de brucelas em matriz alimentar. Desta forma este projeto propõe um protocolo para estudos da curva de decaimento de Brucella abortus durante a cura de queijos. Três partidas de queijo tipo parmesão foram feitas com leite tipo A pasteurizado, artificialmente contaminado com uma cepa pouco patogênica de Brucella abortus (1119-3). O queijo foi curado a 18°C e analisado a cada 3-4 dias até o 60º dia ou até que duas análises consecutivas fossem negativas. As amostras foram submetidas à pesquisa quantitativa de brucela em meio Farrel (36°C/3 dias). A média do Tempo de Redução Decimal (D18°C), ponderado pelas incertezas, foi de 4,31 ± 0,49 dias. Estes resultados são preliminares e é necessário realizar mais análises para gerar dados mais precisos sobre esse parâmetro, especialmente usando cepas de campo. O Tempo de Redução Decimal associado à cura do queijo é um parâmetro importante para os modelos de avaliação de risco da transmissão de brucelose pelo consumo de queijo

Brazilian legislation allows the use of raw milk to produce ripened cheeses, when the ripening period is over 60 days (at 5°C or above). However, there is not solid scientific evidence that the ripening process inactivates enough amounts of Brucella abortus, from the food safety perspective. In addition, there is no official methodology for brucela counting in food matrix. So, this project proposes a protocol to study the decay curve of Brucella abortus during cheese ripening. Three batches of parmesan type cheese were made with pasteurized milk artificially contaminated with a less pathogenic strain of Brucella abortus (1119-3). The cheese was ripened at 18°C and analyzed each 3-4 days until 60th or until two consecutive negative results. The samples were submitted to quantitative culture for brucela in Farrel medium (36°C/3 days). The average of Decimal Reduction Time (D18°C), weighted by uncertainties, was 4,31 ± 0,49 days. This is a preliminary result and we need to run more samples to generate more accurate data about this parameter, specially using field strains. The Decimal Reduction Time associated with ripening step is an important data to input risk assessment models for cheese-born brucelosis

Performance of 2% and 20% glucose-containing potato agar for quatitative and qualitative and qualitative detecting molds and yeasts from noninspected qualitative and qualitative detecting molds and yeasts from noninspected

The Brazilian official methodology hah established the employment of two culture media for determining molds and yeasts in honey samples, being...