Influence of nanostructure composition on its morphometric characterization by different techniques.

Morphometric characterization of nanoparticles is crucial to determine their biological effects and to obtain a formulation pattern. Determining the best technique requires knowledge of the particles being analyzed, the intended application of the particles, and the limitations of the techniques being considered. The aim of this article was to present transmission (TEM) and scanning (SEM) electron microscopy protocols for the analysis of two different nanostructures, namely polymeric nanoemulsion and poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) nanoparticles, and to compare these results with conventional dynamic light scattering (DLS) measurements. The mean hydrodynamic diameter, the polydispersity index, and zeta potential of the nanostructures of polymeric nanoemulsion were 370.5 ± 0.8 nm, 0.133 ± 0.01, and -36.1 ± 0.15 mV, respectively, and for PLGA nanoparticles were 246.79 ± 5.03 nm, 0.096 ± 0.025, and -4.94 ± 0.86 mV, respectively. TEM analysis of polymeric nanoemulsion revealed a mean diameter of 374 ± 117 nm. SEM analysis showed a mean diameter of 368 ± 69 nm prior to gold coating and 448 ± 70 nm after gold coating. PLGA nanoparticles had a diameter of 131 ± 41.18 nm in TEM and 193 ± 101 nm in SEM. Morphologically, in TEM analysis, the polymeric nanoemulsions were spherical, with variable electron density, very few showing an electron-dense core and others an electron-dense surface. PLGA nanoparticles were round, with an electron-lucent core and electron-dense surface. In SEM, polymeric nanoemulsions were also spherical with a rough surface, and PLGA nanoparticles were round with a smooth surface. The results show that the "gold standards" for morphometric characterization of polymeric nanoemulsion and PLGA nanoparticles were, respectively, SEM without gold coating and TEM with negative staining.

Avaliação histológica dos testículos de ovinos da raça Santa Inês nascidos em diferentes estações do ano

Four groups of Santa Inês male sheep born in four seasons in the Distrito Federal were analyzed to evaluate the age and body weight at puberty, at which point were castrated. Histological measurements were carried out on the testicles to evaluate cellular parameters and size measurements of the seminiferous tubules. The effect of the group on cellular parameters was significant (P 0.01). Animals born in the dry season were more precocious than the others, but showed the worst histological profile of the testis. The histological traits of the testis of the Santa Inês rams were influenced by the season. The end of the rainy season was shown to the best season for births of sheep in the Central region of Brazil, with histological testicular traits at puberty being superior to the other groups.

Foram analisados quatro grupos de ovinos machos da raça Santa Inês nascidos em quatro estações do ano, no Distrito Federal, a fim de observar as idades e o peso corporal em que estes atingiram a puberdade. A partir dos cortes histológicos dos testículos, foram analisados parâmetros celulares e mensurações dos túbulos seminíferos. O efeito da data de nascimento sobre os parâmetros avaliados foi significativo (P 0,01), indicando que a estação do ano influenciou as características histológicas dos testículos dos cordeiros Santa Inês. Os animais nascidos no período da seca apresentaram maior precocidade à puberdade, porém pior perfil histológico dos testículos. O final da época de águas apresentou-se como a melhor estação para nascimentos de ovinos na região Central do Brasil, com características histológicas testiculares mais desejáveis na puberdade desses animais.

Avaliação histológica dos testículos de ovinos da raça Santa Inês nascidos em diferentes estações do ano

Four groups of Santa Inês male sheep born in four seasons in the Distrito Federal were analyzed to evaluate the age and body weight at puberty, at which point were castrated. Histological measurements were carried out on the testicles to evaluate cellular parameters and size measurements of the seminiferous tubules. The effect of the group on cellular parameters was significant (P 0.01). Animals born in the dry season were more precocious than the others, but showed the worst histological profile of the testis. The histological traits of the testis of the Santa Inês rams were influenced by the season. The end of the rainy season was shown to the best season for births of sheep in the Central region of Brazil, with histological testicular traits at puberty being superior to the other groups.

Foram analisados quatro grupos de ovinos machos da raça Santa Inês nascidos em quatro estações do ano, no Distrito Federal, a fim de observar as idades e o peso corporal em que estes atingiram a puberdade. A partir dos cortes histológicos dos testículos, foram analisados parâmetros celulares e mensurações dos túbulos seminíferos. O efeito da data de nascimento sobre os parâmetros avaliados foi significativo (P 0,01), indicando que a estação do ano influenciou as características histológicas dos testículos dos cordeiros Santa Inês. Os animais nascidos no período da seca apresentaram maior precocidade à puberdade, porém pior perfil histológico dos testículos. O final da época de águas apresentou-se como a melhor estação para nascimentos de ovinos na região Central do Brasil, com características histológicas testiculares mais desejáveis na puberdade desses animais.

Avaliação histológica dos testículos de ovinos da raça Santa Inês nascidos em diferentes estações do ano

Four groups of Santa Inês male sheep born in four seasons in the Distrito Federal were analyzed to evaluate the age and body weight at puberty, at which point were castrated. Histological measurements were carried out on the testicles to evaluate cellular parameters and size measurements of the seminiferous tubules. The effect of the group on cellular parameters was significant (P 0.01). Animals born in the dry season were more precocious than the others, but showed the worst histological profile of the testis. The histological traits of the testis of the Santa Inês rams were influenced by the season. The end of the rainy season was shown to the best season for births of sheep in the Central region of Brazil, with histological testicular traits at puberty being superior to the other groups.

Foram analisados quatro grupos de ovinos machos da raça Santa Inês nascidos em quatro estações do ano, no Distrito Federal, a fim de observar as idades e o peso corporal em que estes atingiram a puberdade. A partir dos cortes histológicos dos testículos, foram analisados parâmetros celulares e mensurações dos túbulos seminíferos. O efeito da data de nascimento sobre os parâmetros avaliados foi significativo (P 0,01), indicando que a estação do ano influenciou as características histológicas dos testículos dos cordeiros Santa Inês. Os animais nascidos no período da seca apresentaram maior precocidade à puberdade, porém pior perfil histológico dos testículos. O final da época de águas apresentou-se como a melhor estação para nascimentos de ovinos na região Central do Brasil, com características histológicas testiculares mais desejáveis na puberdade desses animais.

TESTICULAR BIOMETRIC CHARACTERISTICS IN SANTA INÊS SHEEP SUBMITTED TO PROTEIN SUPPLEMENTATION AND ANTI-HELMINTH TREATMENTS / CARACTERÍSTICAS BIOMÉTRICAS TESTICULARES EM CARNEIROS SANTA INÊS SUBMETIDOS A DIFERENTES REGIMES DE SUPLEMENTAÇÃO PROTÉICA E TRATAMENTOS ANTI-HELMÍNTICOS

Biometric testicular traits were evaluated on 24 entire male Santa Inês lambs, with mean initial weight of 24.5 kg ± 2.88. These were distributed in four treatments (n=6): HPv (animals drenched + high protein concentrate), HPn: (animals not drenched + high protein concentrate), LPv: (animals drenched + low protein concentrate), LPn: (animals not drenched + low protein concentrate) for eight and a half months. Before slaughter testicular measurements were taken in situ. Scrotal perimeter (SC) was measured using tape as well as length (LENG) and width (WID) using calipers. Testicular shape and volume (using prolate and cylinder equation) were calculated. After slaughter the measurements were taken in vitro. Real testicle volume (VOLR) was measured using water displacement. Length (LENGV) and width (WIDV) were measured with calipers after skin removal. The testicles were symmetrical and calipers were an accurate means of in situ measurement of the testicle size. The form of the testicles affected the volume. The average of the prolate sphere and cylinder equations gave the best estimate for real testicle volume. High protein levels in the diet accompanied by antihelminth treatment led to higher body weight in the sheep, this being the main factor for variation in testicle biometric traits. KEY WORDS: Shape, sheep, testicle biometry, volume.

Para avaliar as características biométricas testiculares de carneiros da raça Santa Inês, 24 cordeiros machos, inteiros, com peso médio inicial de 24,5 kg ± 2,88, aos quatro meses de idade, foram distribuídos em quatro tratamentos: APv (animais vermifugados + concentrado com alta proteína), APn (animais não-vermifugados + concentrado com alta proteína), BPv (animais vermifugados + concentrado com baixa proteína), BPn (animais não vermifugados + concentrado com baixa proteína) durante 8 meses e meio. Antes do abate, realizaram-se as medições testiculares in situ: perímetro escrotal (PE), comprimento (COMP), largura testicular (LARG) e a forma dos testículos, bem como o volume testicular (cilindro e prolato esferóide). Após o abate, determinaram-se o volume testicular real (VOLR), o comprimento (COMPV) e a largura testicular (LARGV). Observou-se que os testículos dos animais eram simétricos e que o uso do paquímetro é uma forma altamente confiável para se realizar as medições testiculares in situ. O formato dos testículos afetou diretamente seu volume. O valor médio das equações do prolato esferóide e cilíndrica é a forma mais acurada para se estimar o volume testicular real em ovinos Santa Inês. O alto teor de proteína da dieta e o tratamento antiparasitário possibilitaram uma melhoria do peso corporal dos ovinos, sendo o principal fator de variação para as características biomé

MORPHOLOGICAL EVALUATION OF THE TESTICLES OF YOUNG SANTA INÊS RAMS SUBMITTED TO DIFFERENT REGIMES OF PROTEIN / AVALIAÇÃO MORFOLÓGICA DOS TESTÍCULOS DE OVINOS JOVENS SANTA INÊS SUBMETIDOS A DIFERENTES REGIMES DE SUPLEMENTAÇÃO ALIMENTAR E VERMIFUGAÇÃO

The present study investigated the effect of protein supplementation and parasite load in relation to testicular morphology, in young Santa Inês male sheep. Twenty-four male lambs, non-castrated, were distributed in four treatments: HPd (dewormed animals + diet with high protein), HPn (animals non dewormed + diet with high protein), LPd (dewormed animals + diet with low protein), LPn (animals not dewormed + diet with low protein) during eight months. At the end of the experiment histological cuts of testicles were taken and cell count analyzed by computer and the program IMAGE PRO-PLUS was used for evaluation of measurements of the seminiferous tubules. The following results were found: LPn presented larger number of spermatogonias, but a reduced number of the other cells parameters (Sertoli cells, spermatocytes, spermatids and spermatozoa) and smaller diameter and circumference of the seminiferous tubules and shorter seminiferous epithelium when compared to other treatments. There was a significant correlation among tubules diameter of the epithelium height and tubules circumference. Correlations between lumen diameter and lumen circumference, as well as epithelium height and tubules circumference also presented high and positive correlations (r>0.70). When the external testis parameters were compared with internal parameters no significant correlation was observed (r 0.

O presente trabalho objetivou a investigação do efeito da suplementação protéica e carga parasitária em relação à morfometria testicular, em carneiros jovens da raça Santa Inês. Utilizaram-se 24 cordeiros, inteiros, distribuídos em quatro tratamentos: HPd (animais vermifugados + concentrado com alta proteína), HPn (animais não-vermifugados + concentrado com alta proteína), LPd (animais vermifugados + concentrado com baixa proteína), LPn (animais não vermifugados + concentrado com baixa proteína) por oito meses. Realizaram-se cortes histológicos dos testículos após abate e análises em computador para contagem de células, mediante o programa IMAGE PRO-PLUS, para avaliação das mensurações testiculares. O tratamento de baixa proteína sem vermifugação (BPn)apresentou número maior de espermatogônias, porém número reduzido para células de Sertoli, espermatócito, espermátide e espermatozóide; o tratamento BPn apresentou menor diâmetro e circunferência do túbulo e altura do epitélio seminífero quando comparado aos demais tratamentos; houve correlação significativa entre o diâmetro do túbulo com altura do epitélio e circunferência do túbulo. As correlações entre o diâmetro do lúmen e a circunferência do lúmen, bem como entre a altura do epitélio e a circunferência do túbulo, também apresentaram correlações altas e positivas (P>0,70); comparando-se os parâmetros testiculares externos c

Morphological evaluation of the testicles of young santa inês rams submitted to different regimes of protein / Avaliação morfológica dos testículos de ovinos jovens santa inês submetidos a diferentes regimes de suplementação alimentar e vermifugação

The present study investigated the effect of protein supplementation and parasite load in relation to testicular morphology, in young Santa Inês male sheep. Twenty-four male lambs, non-castrated, were distributed in four treatments: HPd (dewormed animals + diet with high protein), HPn (animals non dewormed + diet with high protein), LPd (dewormed animals + diet with low protein), LPn (animals not dewormed + diet with low protein) during eight months. At the end of the experiment histological cuts of testicles were taken and cell count analyzed by computer and the program IMAGE PRO-PLUS was used for evaluation of measurements of the seminiferous tubules. The following results were found: LPn presented larger number of spermatogonias, but a reduced number of the other cells parameters (Sertoli cells, spermatocytes, spermatids and spermatozoa) and smaller diameter and circumference of the seminiferous tubules and shorter seminiferous epithelium when compared to other treatments. There was a significant correlation among tubules diameter of the epithelium height and tubules circumference. Correlations between lumen diameter and lumen circumference, as well as epithelium height and tubules circumference also presented high and positive correlations (r>0.70). When the external testis parameters were compared with internal parameters no significant correlation was observed (r 0.

O presente trabalho objetivou a investigação do efeito da suplementação protéica e carga parasitária em relação à morfometria testicular, em carneiros jovens da raça Santa Inês. Utilizaram-se 24 cordeiros, inteiros, distribuídos em quatro tratamentos: HPd (animais vermifugados + concentrado com alta proteína), HPn (animais não-vermifugados + concentrado com alta proteína), LPd (animais vermifugados + concentrado com baixa proteína), LPn (animais não vermifugados + concentrado com baixa proteína) por oito meses. Realizaram-se cortes histológicos dos testículos após abate e análises em computador para contagem de células, mediante o programa IMAGE PRO-PLUS, para avaliação das mensurações testiculares. O tratamento de baixa proteína sem vermifugação (BPn)apresentou número maior de espermatogônias, porém número reduzido para células de Sertoli, espermatócito, espermátide e espermatozóide; o tratamento BPn apresentou menor diâmetro e circunferência do túbulo e altura do epitélio seminífero quando comparado aos demais tratamentos; houve correlação significativa entre o diâmetro do túbulo com altura do epitélio e circunferência do túbulo. As correlações entre o diâmetro do lúmen e a circunferência do lúmen, bem como entre a altura do epitélio e a circunferência do túbulo, também apresentaram correlações altas e positivas (P>0,70); comparando-se os parâmetros testiculares externos c

Testicular biometric characteristics in santa inês sheep submitted to protein supplementation and anti-helminth treatments / Características biométricas testiculares em carneiros santa inês submetidos a diferentes regimes de suplementação protéica e tratamentos anti-helmínticos

Biometric testicular traits were evaluated on 24 entire male Santa Inês lambs, with mean initial weight of 24.5 kg ± 2.88. These were distributed in four treatments (n=6): HPv (animals drenched + high protein concentrate), HPn: (animals not drenched + high protein concentrate), LPv: (animals drenched + low protein concentrate), LPn: (animals not drenched + low protein concentrate) for eight and a half months. Before slaughter testicular measurements were taken in situ. Scrotal perimeter (SC) was measured using tape as well as length (LENG) and width (WID) using calipers. Testicular shape and volume (using prolate and cylinder equation) were calculated. After slaughter the measurements were taken in vitro. Real testicle volume (VOLR) was measured using water displacement. Length (LENGV) and width (WIDV) were measured with calipers after skin removal. The testicles were symmetrical and calipers were an accurate means of in situ measurement of the testicle size. The form of the testicles affected the volume. The average of the prolate sphere and cylinder equations gave the best estimate for real testicle volume. High protein levels in the diet accompanied by antihelminth treatment led to higher body weight in the sheep, this being the main factor for variation in testicle biometric traits. KEY WORDS: Shape, sheep, testicle biometry, volume.

Para avaliar as características biométricas testiculares de carneiros da raça Santa Inês, 24 cordeiros machos, inteiros, com peso médio inicial de 24,5 kg ± 2,88, aos quatro meses de idade, foram distribuídos em quatro tratamentos: APv (animais vermifugados + concentrado com alta proteína), APn (animais não-vermifugados + concentrado com alta proteína), BPv (animais vermifugados + concentrado com baixa proteína), BPn (animais não vermifugados + concentrado com baixa proteína) durante 8 meses e meio. Antes do abate, realizaram-se as medições testiculares in situ: perímetro escrotal (PE), comprimento (COMP), largura testicular (LARG) e a forma dos testículos, bem como o volume testicular (cilindro e prolato esferóide). Após o abate, determinaram-se o volume testicular real (VOLR), o comprimento (COMPV) e a largura testicular (LARGV). Observou-se que os testículos dos animais eram simétricos e que o uso do paquímetro é uma forma altamente confiável para se realizar as medições testiculares in situ. O formato dos testículos afetou diretamente seu volume. O valor médio das equações do prolato esferóide e cilíndrica é a forma mais acurada para se estimar o volume testicular real em ovinos Santa Inês. O alto teor de proteína da dieta e o tratamento antiparasitário possibilitaram uma melhoria do peso corporal dos ovinos, sendo o principal fator de variação para as características biomé

EVALUATION OF FOETAL DEVELOPMENT IN SANTA INÊS SHEEP USING ULTRA-SOUND / AVALIAÇÃO DOS PARÂMETROS ECOGRÁFICOS DE DESENVOLVIMENTO GESTACIONAL DE OVINOS DA RAÇA SANTA INÊS

Thirty two Santa Inês ewes were synchronized and bred, resulting in 18 pregnancies. These were use to inves-tigate the reliability of developmental parameters in the estimation of gestational age. The ultra-sound evaluations were carried out from day 8 to 55 of pregnancy, with day zero being the first day of breeding.  For positive pregnancy diagnosis the visualization of the fetus and heart beat were considered.  Gestational age was determined using: cranial-caudal length (CCC), biparietal diameter (DBP), thoracic diameter (DT), and measurements of the gestational sac. All parameters had a positive correlation with gestational age, especially DBP which was more reliable and easier to measure.  In addition, growth equations were calculated to determine gestational age from the measurements.  In terms of methods of carrying out the ecograph, the trans-rectal route was more practical up to 45 days after service.  After this the transabdominal route was seen to be more adequate. KEY-WORDS: Age, ewe, fetal measuring, gestational. 

Tendo como objetivo principal investigar a confiabi-lidade dos parâmetros de desenvolvimento para estimativa da idade gestacional, 32 ovelhas da raça Santa Inês foram submetidas a um programa de sincronização estral e aca-saladas, resultando na gestação de 18 delas. As avaliações ultra-sonográficas foram realizadas do 8 ao 55 dia de prenhez, considerando dia zero como o primeiro dia da cobertura. Estabeleceram-se como critérios para o diag-nóstico, de prenhez, a visualização do feto e os batimentos cardíacos. Para avaliação da idade gestacional, utilizaram-se os seguintes parâmetros: o comprimento crânio-caudal (CCC), o diâmetro biparietal (DBP), o diâmetro torácico (DT), e a mensuração da vesícula gestacional. Todos os parâmetros apresentaram correlação positiva com a idade gestacional, com destaque para o DBP, tanto pela maior confiança como facilidade de avaliação.  Adicionalmente, foram elaboradas equações de crescimento para determina-ção da idade gestacional a partir das medidas realizadas. Em relação à via de acesso para exame ecográfico, a transretal evidenciou maior praticidade até os 45 dias pós-serviço. A partir desse período, a transabdominal demonstrou ser mais adequada. PALAVRAS-CHAVES: Fetometria, idade gestacional, ovelha.

Evaluation of foetal development in santa inês sheep using ultra-sound / Avaliação dos parâmetros ecográficos de desenvolvimento gestacional de ovinos da raça santa inês

Thirty two Santa Inês ewes were synchronized and bred, resulting in 18 pregnancies. These were use to inves-tigate the reliability of developmental parameters in the estimation of gestational age. The ultra-sound evaluations were carried out from day 8 to 55 of pregnancy, with day zero being the first day of breeding.  For positive pregnancy diagnosis the visualization of the fetus and heart beat were considered.  Gestational age was determined using: cranial-caudal length (CCC), biparietal diameter (DBP), thoracic diameter (DT), and measurements of the gestational sac. All parameters had a positive correlation with gestational age, especially DBP which was more reliable and easier to measure.  In addition, growth equations were calculated to determine gestational age from the measurements.  In terms of methods of carrying out the ecograph, the trans-rectal route was more practical up to 45 days after service.  After this the transabdominal route was seen to be more adequate. KEY-WORDS: Age, ewe, fetal measuring, gestational.

Tendo como objetivo principal investigar a confiabi-lidade dos parâmetros de desenvolvimento para estimativa da idade gestacional, 32 ovelhas da raça Santa Inês foram submetidas a um programa de sincronização estral e aca-saladas, resultando na gestação de 18 delas. As avaliações ultra-sonográficas foram realizadas do 8 ao 55 dia de prenhez, considerando dia zero como o primeiro dia da cobertura. Estabeleceram-se como critérios para o diag-nóstico, de prenhez, a visualização do feto e os batimentos cardíacos. Para avaliação da idade gestacional, utilizaram-se os seguintes parâmetros: o comprimento crânio-caudal (CCC), o diâmetro biparietal (DBP), o diâmetro torácico (DT), e a mensuração da vesícula gestacional. Todos os parâmetros apresentaram correlação positiva com a idade gestacional, com destaque para o DBP, tanto pela maior confiança como facilidade de avaliação.  Adicionalmente, foram elaboradas equações de crescimento para determina-ção da idade gestacional a partir das medidas realizadas. Em relação à via de acesso para exame ecográfico, a transretal evidenciou maior praticidade até os 45 dias pós-serviço. A partir desse período, a transabdominal demonstrou ser mais adequada. PALAVRAS-CHAVES: Fetometria, idade gestacional, ovelha.

CULTIVO IN VITRO DE FOL?CULOS PRÉ-ANTRAIS ISOLADOS A PARTIR DE OV?RIOS DE VACAS ZEBU?NAS (Bos taurus indicus)

Dentre as biotecnologias da reprodução, a manipulação de folículos pré-antrais tem sido vista como uma alternativa para a preservação de gametas femininos, uma vez que possibilita o isolamento e o cultivo de um grande número de ovócitos. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar o crescimento in vitro de folículos isolados a partir de ovários de vacas zebuínas. Os folículos foram isolados mecanicamente e cultivados por 4 dias utilizando-se o meio Waymouth MB 752/1 suplementado com piruvato, l-glutamina, hipoxantina, insulina, transferrina, selênio, ácido ascórbico, soro fetal bovino e eCG. Após o período de cultivo, os folículos passaram de 61,0 ± 18,5 (D0) para 86,2 ± 29,6 mm (D4) de diâmetro. Dos 78 folículos pré-antrais analisados 83,5% apresentavam-se morfologicamente normais no último dia de cultivo, enquanto 11,5% mostravam-se degenerados e 5% rompidos. Um total de 23 folículos foi processado para análise por microscopia de luz. Pela observação de figuras mitóticas constatou-se que 47,8% dos folículos apresentavam proliferação das células da granulosa. Em conclusão, este estudo mostrou que folículos pré-antrais isolados a partir de ovários de vacas zebuínas podem crescer in vitro.

CULTIVO IN VITRO DE FOL?CULOS PRÉ-ANTRAIS ISOLADOS A PARTIR DE OV?RIOS DE VACAS ZEBU?NAS (Bos taurus indicus)

Dentre as biotecnologias da reprodução, a manipulação de folículos pré-antrais tem sido vista como uma alternativa para a preservação de gametas femininos, uma vez que possibilita o isolamento e o cultivo de um grande número de ovócitos. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar o crescimento in vitro de folículos isolados a partir de ovários de vacas zebuínas. Os folículos foram isolados mecanicamente e cultivados por 4 dias utilizando-se o meio Waymouth MB 752/1 suplementado com piruvato, l-glutamina, hipoxantina, insulina, transferrina, selênio, ácido ascórbico, soro fetal bovino e eCG. Após o período de cultivo, os folículos passaram de 61,0 ± 18,5 (D0) para 86,2 ± 29,6 mm (D4) de diâmetro. Dos 78 folículos pré-antrais analisados 83,5% apresentavam-se morfologicamente normais no último dia de cultivo, enquanto 11,5% mostravam-se degenerados e 5% rompidos. Um total de 23 folículos foi processado para análise por microscopia de luz. Pela observação de figuras mitóticas constatou-se que 47,8% dos folículos apresentavam proliferação das células da granulosa. Em conclusão, este estudo mostrou que folículos pré-antrais isolados a partir de ovários de vacas zebuínas podem crescer in vitro.

Isolamento mecânico de folículos ovarianos pré-antrais em cabras

For mechanical isolation of caprine preantral follicles, ovaries from 52 undefinined breed type goats were collected at a local slaughterhouse or cirurgically extracted. The method used for preantral follicle isolation was a direct mechanical procedure (DMP). Briefly, ovaries were cut into small fragments using a tissue chopper adjusted to 500mum. The ovarian fragments were suspended 80 times with a pasteur pipette and then, the suspension was filtered successively through 500 and 100mum nylon mesh filters. The DMP resulted in a large number of isolated preantral follicles. On average, 1,067 ± 160 (mean number ± SEM) preantral follicles were isolated per ovary. To increase the number of preantral follicles recovered per ovary, the ovarian fragments remaining in the 500 and 100mum nylon mesh filters were transferred to the tissue chopper, and the procedure was repeated (complementary mechanical procedure - CMP). The use of CM P resulted in a mean increment of 5.2% of the total preantral follicles isolated per ovary. The mean number (mean ± SEM) of follicles isolated per ovary using the mechanical procedure (DPM + CPM) was 1,126 + 163. Irrespective of the procedure used, the number of preantral follicles isolated was characterized by extreme individual variation. The limits minimum and maximum of this variation were 53 and 7,482, respectively. The diameter of follicles isolated showed a range from l5.0mum to 92.7 mum. In conclusion, these results showed, for the first time, that preantral follicles can be successfully isolated from caprine ovary by applying a mechanical procedure.

Com o objetivo de isolar mecanicamente folículos pré-antrais caprinos, 52 ovários de cabras sem raça definida (SRD) foram coletados em matadouros ou extraídos por ovariectomia. O protocolo utilizado para o isolamento dos folículos, denominado procedimento mecânico direto (PMD), consistiu no corte do tecido ovariano em pequenos fragmentos, utilizando-se um cortador de tecidos. Em seguida, os fragmentos obtidos foram dissociados mecanicamente com pipetas de pasteur (1600mim e 600mim de diâmetro) e a suspensão resultante, contendo os fragmentos ovarianos, foi sucessivamente filtrada em malhas de náilon (500mim e 100mim). A realização deste procedimento permitiu isolar um número médio (± EP) de 1.067 ± 160 folículos por ovário. Com a finalidade de aumentar o número de folículos pré-antrais isolados por ovário, foi utilizado um procedimento mecânico complementar (PMC), que consistiu em submeter os fragmentos retidos nas malhas de 500mim e 100mim às etapas descritas no PMD. A utilização desses fragmentos resultou em um incremento médio de 5,2% no total de folículos isolados por ovário. O número médio (± EP) de folículos isolados por ovário, utilizando-se o procedimento mecânico (PMD + PMC), foi 1.126 + 163. Independentemente do procedimento utilizado, observou-se uma grande variação individual no número de folículos isolados por ovário. Os limites mínimo e máximo desta variação foram 53 e 7.482 folículos, respectivamente. O tamanho dos folículos isolados variou de 15,0mim a 92,7mim. É viável a utilização do procedimento mecânico, descrito pela primeira vez, para o isolamento de folículos ovarianos pré-antrais caprinos.

Folículos pré-antrais caprinos isolados mecanicamente em diferentes estágios reprodutivos e parâmetros morfométricos ovarianos

The aïm of this study was to describe the effects of reproductive stages (pre-pubertal, non-pregnant and pregnant adult animals), ovarian anatomic position (left or right), presence of functional corpus luteum, ovarian weight and number of superficial antral follicles on the number of preantral follicles mechanically isolated. The mean number (mean ± SEM) of isolated preantral follicles per ovary was 1,324 ± 193, 866 ±170 and 779 ± 139, respectively for prepubertal, non-pregnant and pregnant adult animals. Anatomic position (except for nonpregnant animals) and the presence or absence of corpus luteum dia nof affect the number and distribution of isolated preantral follicles. In general, the number of primary and secondary follicles was negatively correlated with the ovarian weight. The numbers of primordial and secondary follicles were, respectively, positively and negatively correlated with the number of superficial antral follicles. Analyzing animal categories separately, it was observed that in prepurbetal animals, the number of primordial follicles was positively correlated with the number of superficial antral follicles. However the numbers of primary and secondary follicles were negatively correlated with the number of superficial antral follicles. In the category of pregnant animals, the number of primary follicles was negatively correlated with the ovarian weight. According to ovary category analyzed, were observed significant correlation between the number of primordial, primary and secondary isolated follicles.

O presente trabalho descreve os efeitos do estágio reprodutivo (animais impúberes, adultos não-gestantes e gestantes), posição anatômica do ovário (direito e esquerdo) presença de corpo lúteo funcional, peso do ovário e número de folículos antrais superficiais (FAS) sobre o número de folículos pré-antrais (FPA) isolados mecanicamente. Os FPA isolados foram divididos em 3 classes a saber: primordiais, primários e secundários. O número médio (± EP) de FPA isolados por ovário foi de 1.324 ± 193; 866 + 170 e 779 ± 139, respectivamente para ovários oriundos de animais impúberes, não-gestantes e gestantes, sendo observada diferença significativa somente entre animais impúberes e gestantes. A posição anatômica do ovário (exceto para os animais não-gestantes) e a presença ou ausência de corpo lúteo não exerceram nenhum efeito sobre o número e distribuição dos FPA isolados. De um modo geral, o número de folículos primários e secundários foi negativamente correlacionado com o peso ovariano. Já o número de folículos primordiais e secundários foi, respectivamente, positiva e negativamente correlacionado com o número de FAS. Analisando as categorias de animais isoladamente, observou-se que, nos animais impúberes, o número de folículos primordiais foi positivamente correlacionado com o número de FAZ, enquanto que o número de folículos primários e secundários foi negativamente correlacionado com o número de FAS. No tocante à categoria de animais gestantes, o número de folículos primários foi negativamente correlacionado com o peso ovariano. Dependendo da categoria de ovários estudada, foram observadas associações significativas entre o número de folículos primordiais, primários e secundários.

Folículos pré-antrais caprinos isolados mecanicamente em diferentes estágios reprodutivos e parâmetros morfométricos ovarianos

The aïm of this study was to describe the effects of reproductive stages (pre-pubertal, non-pregnant and pregnant adult animals), ovarian anatomic position (left or right), presence of functional corpus luteum, ovarian weight and number of superficial antral follicles on the number of preantral follicles mechanically isolated. The mean number (mean ± SEM) of isolated preantral follicles per ovary was 1,324 ± 193, 866 ±170 and 779 ± 139, respectively for prepubertal, non-pregnant and pregnant adult animals. Anatomic position (except for nonpregnant animals) and the presence or absence of corpus luteum dia nof affect the number and distribution of isolated preantral follicles. In general, the number of primary and secondary follicles was negatively correlated with the ovarian weight. The numbers of primordial and secondary follicles were, respectively, positively and negatively correlated with the number of superficial antral follicles. Analyzing animal categories separately, it was observed that in prepurbetal animals, the number of primordial follicles was positively correlated with the number of superficial antral follicles. However the numbers of primary and secondary follicles were negatively correlated with the number of superficial antral follicles. In the category of pregnant animals, the number of primary follicles was negatively correlated with the ovarian weight. According to ovary category analyzed, were observed significant correlation between the number of primordial, primary and secondary isolated follicles.

O presente trabalho descreve os efeitos do estágio reprodutivo (animais impúberes, adultos não-gestantes e gestantes), posição anatômica do ovário (direito e esquerdo) presença de corpo lúteo funcional, peso do ovário e número de folículos antrais superficiais (FAS) sobre o número de folículos pré-antrais (FPA) isolados mecanicamente. Os FPA isolados foram divididos em 3 classes a saber: primordiais, primários e secundários. O número médio (± EP) de FPA isolados por ovário foi de 1.324 ± 193; 866 + 170 e 779 ± 139, respectivamente para ovários oriundos de animais impúberes, não-gestantes e gestantes, sendo observada diferença significativa somente entre animais impúberes e gestantes. A posição anatômica do ovário (exceto para os animais não-gestantes) e a presença ou ausência de corpo lúteo não exerceram nenhum efeito sobre o número e distribuição dos FPA isolados. De um modo geral, o número de folículos primários e secundários foi negativamente correlacionado com o peso ovariano. Já o número de folículos primordiais e secundários foi, respectivamente, positiva e negativamente correlacionado com o número de FAS. Analisando as categorias de animais isoladamente, observou-se que, nos animais impúberes, o número de folículos primordiais foi positivamente correlacionado com o número de FAZ, enquanto que o número de folículos primários e secundários foi negativamente correlacionado com o número de FAS. No tocante à categoria de animais gestantes, o número de folículos primários foi negativamente correlacionado com o peso ovariano. Dependendo da categoria de ovários estudada, foram observadas associações significativas entre o número de folículos primordiais, primários e secundários.

Isolamento mecânico de folículos ovarianos pré-antrais em cabras

For mechanical isolation of caprine preantral follicles, ovaries from 52 undefinined breed type goats were collected at a local slaughterhouse or cirurgically extracted. The method used for preantral follicle isolation was a direct mechanical procedure (DMP). Briefly, ovaries were cut into small fragments using a tissue chopper adjusted to 500mum. The ovarian fragments were suspended 80 times with a pasteur pipette and then, the suspension was filtered successively through 500 and 100mum nylon mesh filters. The DMP resulted in a large number of isolated preantral follicles. On average, 1,067 ± 160 (mean number ± SEM) preantral follicles were isolated per ovary. To increase the number of preantral follicles recovered per ovary, the ovarian fragments remaining in the 500 and 100mum nylon mesh filters were transferred to the tissue chopper, and the procedure was repeated (complementary mechanical procedure - CMP). The use of CM P resulted in a mean increment of 5.2% of the total preantral follicles isolated per ovary. The mean number (mean ± SEM) of follicles isolated per ovary using the mechanical procedure (DPM + CPM) was 1,126 + 163. Irrespective of the procedure used, the number of preantral follicles isolated was characterized by extreme individual variation. The limits minimum and maximum of this variation were 53 and 7,482, respectively. The diameter of follicles isolated showed a range from l5.0mum to 92.7 mum. In conclusion, these results showed, for the first time, that preantral follicles can be successfully isolated from caprine ovary by applying a mechanical procedure.

Com o objetivo de isolar mecanicamente folículos pré-antrais caprinos, 52 ovários de cabras sem raça definida (SRD) foram coletados em matadouros ou extraídos por ovariectomia. O protocolo utilizado para o isolamento dos folículos, denominado procedimento mecânico direto (PMD), consistiu no corte do tecido ovariano em pequenos fragmentos, utilizando-se um cortador de tecidos. Em seguida, os fragmentos obtidos foram dissociados mecanicamente com pipetas de pasteur (1600mim e 600mim de diâmetro) e a suspensão resultante, contendo os fragmentos ovarianos, foi sucessivamente filtrada em malhas de náilon (500mim e 100mim). A realização deste procedimento permitiu isolar um número médio (± EP) de 1.067 ± 160 folículos por ovário. Com a finalidade de aumentar o número de folículos pré-antrais isolados por ovário, foi utilizado um procedimento mecânico complementar (PMC), que consistiu em submeter os fragmentos retidos nas malhas de 500mim e 100mim às etapas descritas no PMD. A utilização desses fragmentos resultou em um incremento médio de 5,2% no total de folículos isolados por ovário. O número médio (± EP) de folículos isolados por ovário, utilizando-se o procedimento mecânico (PMD + PMC), foi 1.126 + 163. Independentemente do procedimento utilizado, observou-se uma grande variação individual no número de folículos isolados por ovário. Os limites mínimo e máximo desta variação foram 53 e 7.482 folículos, respectivamente. O tamanho dos folículos isolados variou de 15,0mim a 92,7mim. É viável a utilização do procedimento mecânico, descrito pela primeira vez, para o isolamento de folículos ovarianos pré-antrais caprinos.