A Native CPP from Rattlesnake with Therapeutic and Theranostic Properties.

The cell-penetrating peptides (CPPs) are characterized by the ability of internalization into cells in vitro and in vivo, and the ability of these peptides can rely on a high content of positive charges, as it is the case of the native CPP crotamine. Crotamine is a polypeptide of about 42 amino acid residues with high content of basic residues as Arg and Lys. Although most of known CPPs are linear peptides, native crotamine from the venom of a South American rattlesnake has a well-defined 3D structure stabilized by three disulfide bonds which guarantee the exposure of side chains of basic amino acids. This 3D structure also protects this amphipathic polypeptide from the degradation even if administered by oral route, therefore, protecting also the biological activities of crotamine. As several different biological properties of crotamine are dependent of cell penetration, the methods mainly employed for analyzing crotamine properties as anthelminthic and antimalarial activities, antimicrobial and antitumor activities, with a unique selective cytotoxic property against actively proliferating cells, as tumor cells, were chosen based on crotamine ability of internalization mediated by its positive charge. This native cationic polypeptide is also able to efficiently carry, with no need of covalent linkage with the cargo, genetic material into cells in vitro and in vivo, suggesting its use in gene therapy. Moreover, the possibility of decorating gold nanoparticles keeping the ability of transfecting cells was demonstrated. More recently, the ability of crotamine to interfere in animal metabolism, inducing browning of adipose tissue and increasing the energy expenditure, and its application in renal therapy was demonstrated. As crotamine also accumulates specifically in tumor cells in vivo, and the potential utility of crotamine as a theranostic agent was then suggested. Therefore, diverse methodologies employed for the characterization and exploration of the therapeutic applications of this promising native CPP for remediation of several pathogenic conditions are presented here.

Métodos de análise da cinza insolúvel em ácido utilizada como indicador na determinação da energia metabolizável do milho para aves / Analytical methods of acid-insoluble ash used as marker to determining the metabolizable energy of corn for poultry

The objective was to evaluate methods of analysis of acid-insoluble ash (AIA) as an indicator for the measurement of apparent metabolisable energy (AME) on corn for poultry compared with the standard technique of total collection of excreta. Was formulated reference diet (RD) based on corn and soybean meal and a test diet (DT) with inclusion of 40% corn to the RD. It was added 1% of Celite to the diets as a source of acid-insoluble ash. We used a total of 60 chicks, Cobb500, from 12 to 21 days of age, distributed in a completely randomized design, with two treatments and six repetitions with five birds each. The AME of the RD and DT were determined using four methods of analysis of AIA (indicator) and using the formulas recommended by the method of total excreta collection. There wasn`t significant difference in AME of corn determined using the AIA as an indicator when compared to the method of total excreta collection. However, it was observed that the methods of analysis gave the AIA great variability in results AME of corn that had standard deviations ranging from 88-229kcal/kg. The acid insoluble ash (AIA) can be determined for most techniques and used to estimate the AME of corn.

Objetivou-se avaliar métodos de análise da cinza insolúvel em ácido como indicador na determinação da energia metabolizável do milho para aves em relação ao procedimento padrão de coleta total de excretas. Foi formulada uma dieta referência a base de milho e farelo de soja e uma dieta teste com inclusão de 40% de milho à dieta referência. Foi adicionado 1% de celite às dietas, como fonte de cinza insolúvel em ácido. Foram utilizados 60 pintos de corte, da linhagem Cobb500, dos 12 aos 21 dias de idade, distribuídos em um delineamento experimental inteiramente casualizado com duas dietas e seis repetições de cinco aves cada. A energia metabolizável da dieta referência e dieta teste foram determinadas utilizando quatros métodos de análise de cinza insolúvel em ácido (indicador) e também utilizando as fórmulas preconizadas pelo procedimento de coleta total de excretas. Não houve diferença significativa na energia metabolizável do milho determinada com a cinza insolúvel em ácido como indicador quando comparada ao procedimento de coleta total de excretas. Entretanto, observou-se que os métodos de análise da cinza insolúvel em ácido proporcionaram grande variabilidade nos resultados de energia metabolizável do milho, que apresentaram desvio padrão oscilando entre 88 a 229kcal/kg. A cinza insolúvel em ácido pode ser determinada por vários métodos e utilizada como indicador para estimar a energia metabolizável do milho.

Métodos de análise da cinza insolúvel em ácido utilizada como indicador na determinação da energia metabolizável do milho para aves / Analytical methods of acid-insoluble ash used as marker to determining the metabolizable energy of corn for poultry

The objective was to evaluate methods of analysis of acid-insoluble ash (AIA) as an indicator for the measurement of apparent metabolisable energy (AME) on corn for poultry compared with the standard technique of total collection of excreta. Was formulated reference diet (RD) based on corn and soybean meal and a test diet (DT) with inclusion of 40% corn to the RD. It was added 1% of Celite to the diets as a source of acid-insoluble ash. We used a total of 60 chicks, Cobb500, from 12 to 21 days of age, distributed in a completely randomized design, with two treatments and six repetitions with five birds each. The AME of the RD and DT were determined using four methods of analysis of AIA (indicator) and using the formulas recommended by the method of total excreta collection. There wasn`t significant difference in AME of corn determined using the AIA as an indicator when compared to the method of total excreta collection. However, it was observed that the methods of analysis gave the AIA great variability in results AME of corn that had standard deviations ranging from 88-229kcal/kg. The acid insoluble ash (AIA) can be determined for most techniques and used to estimate the AME of corn.(AU)

Objetivou-se avaliar métodos de análise da cinza insolúvel em ácido como indicador na determinação da energia metabolizável do milho para aves em relação ao procedimento padrão de coleta total de excretas. Foi formulada uma dieta referência a base de milho e farelo de soja e uma dieta teste com inclusão de 40% de milho à dieta referência. Foi adicionado 1% de celite às dietas, como fonte de cinza insolúvel em ácido. Foram utilizados 60 pintos de corte, da linhagem Cobb500, dos 12 aos 21 dias de idade, distribuídos em um delineamento experimental inteiramente casualizado com duas dietas e seis repetições de cinco aves cada. A energia metabolizável da dieta referência e dieta teste foram determinadas utilizando quatros métodos de análise de cinza insolúvel em ácido (indicador) e também utilizando as fórmulas preconizadas pelo procedimento de coleta total de excretas. Não houve diferença significativa na energia metabolizável do milho determinada com a cinza insolúvel em ácido como indicador quando comparada ao procedimento de coleta total de excretas. Entretanto, observou-se que os métodos de análise da cinza insolúvel em ácido proporcionaram grande variabilidade nos resultados de energia metabolizável do milho, que apresentaram desvio padrão oscilando entre 88 a 229kcal/kg. A cinza insolúvel em ácido pode ser determinada por vários métodos e utilizada como indicador para estimar a energia metabolizável do milho.(AU)

Considerações sobre os principais indicadores utilizados em estudos de nutrição com ruminantes / Considerations on the main markers used in nutrition studies with rumlnants / Consideraciones acerca de los principales indicadores utilizados en estudios de nutrición con ruminantes

Em estudos de metabolismo animal, muitas vezes, não é possível obter de forma direta a informação desejada, sendo necessário o uso de substâncias denominadas indicadores, possibilitando a estimativa de determinados parâmetros fisiológicos e nutricionais. Os indicadores são divididos em internos, representados por substâncias indigestíveis presentes naturalmente na dieta, ou externos, quando adicionados à dieta ou fornecidos via oral ou ruminal aos animais. Para que uma substância possa ser utilizada como indicador, deve atender a determinados critérios, sendo vários os problemas associados ao seu uso, especialmente a incompleta recuperação do indicador no duodeno ou fezes. Cada grupo de indicadores possui suas características próprias, definindo em que situação ele melhor se aplica. O óxido crômico é o indicador externo mais aplamente difundido, apresentando uma grande amplitude de aplicações, associada ainda às vantagens de fácil utilização baixo custo. Entre os indicadores internos, a utilização da porção da fibra indigestível dos alimentos vem se destacando pela facilidade de uso e bons resultados apresentados pela literatura. A utilização dos n-alcanos, sobretudo em estimativa de consumo de animais em regime de pastejo, tem apresentado resultados bastante satisfatórios. No momento da escolha, devem ser estabelecidos critérios, como facilidade de uso e determinação, que norteiem a decisão pelo indicador que melhor se adapte aos parâmetros a ser avaliados.(AU)

In animal metabolism studies, sometimes its not possible to obtain the desired information in a direct way, and therefore it is necessary to make use of substances designated as markers, which allow the estimative of determined physiological and nutritional parameters. The markers are grouped into internal, which are represented by indigestible materials occurring naturally on a diet, and external markers, which are materials that are either added to the diet or administered orally or intraruminally to the animal. However, in order to be used as a marker, a substance must comply with some essential criteria. There are several problems associated to the use of markers, specially their incomplete recovery in the duodenum or faeces. Each group of markers has its own characteristics, which will defi ne its application. Chromium oxide is the most extensively used external marker, presenting a great wide application, especially because it is easy to use and it cost is low. Among the internal markers, the use of the indigestible fi bre portion of the foods is recommended for its facility to use and has demonstrated reliable and accurate values in several studies. The use of n-alkanes, especially for the intake estimation in grazing animals, has provided quite satisfactory values. Several criteria, like the facility to use and determination must be established to guide the decision by the marker which better adapts to the parameters that will be assessed.(AU)

En estudios de metabolismo animal, muchas veces no es posible obtener de forma directa la información deseada, debiéndose entonces, hacer uso de sustancias denominadas indicadores, haciendo posible con eso la estimación de determinados parámetros fi siológicos y nutricionales. Los indicadores son divididos en internos y externos, existiendo una gran variedad de indicadores que deben ser escogidos de acuerdo con la respuesta a ser encontrada. Por tanto, para que una sustancia pueda ser utilizada como indicador, ella debe atender a determinados criterios básicos. Diversos son los problemas asociados al uso de indicadores, especialmente su incompleta recuperación en el duodeno o heces. Cada grupo de indicadores posee sus propias características, defi niéndose en que situación se aplica mejor. El óxido de cromo es el indicador externo mas ampliamente difundido, presentando una grande amplitud de aplicaciones, asociado además a las ventajas de fácil uso y bajo costo. Entre los indicadores internos, la utilización de la porción de la fi bra indigestible de los alimentos fue destacada por la facilidad de uso y de buenos resultados presentados por la literatura. La utilización de n-alcanos, sobre todo en estimaciones de consumo de alimento de animales en régimen de pastoreo presentó resultados bastante satisfactorios. En el momento de elegir el indicador para ser utilizado, deben ser establecidos criterios que norteen la decisión por el indicador que mejor se adecue a los parámetros evaluados y a sus facilidades de uso y determinación.(AU)

Considerações sobre os principais indicadores utilizados em estudos de nutrição com ruminantes / Considerations on the main markers used in nutrition studies with rumlnants / Consideraciones acerca de los principales indicadores utilizados en estudios de nutrición con rumiantes

ABSTRACT: In animal metabolism studies, sometimes it's not possible to obtain the desired information in a direct way, and therefore it is necessary to make use of substances designated as markers, which allow the estimative of determined physiological and nutritional parameters. The markers are grouped into internal, which are represented by indigestible materials occurring naturally on a diet, and external markers, which are materials that are either added to the diet or administered orally or intraruminally to the animal. However, in order to be used as a marker, a substance must comply with some essential criteria. There are several problems associated to the use of markers, specially their incomplete recovery in the duodenum or faeces. Each group of markers has its own characteristics, which will defi ne its application. Chromium oxide is the most extensively used external marker, presenting a great wide application, especially because it is easy to use and it cost is low.Among the internal markers, the use of the indigestible fi bre portion of the foods is recommended for its facility to use and has demonstrated reliable and accurate values in several studies. The use of n-alkanes, especially for the intake estimation in grazing animals, has provided quite satisfactory values. Several criteria, like the facility to use and determination must be established to guide the decision by the marker which better adapts to the parameters that will be assessed.KEYWORDS: Markers, animal metabolism, methodology, nutrition

RESUMO: Em estudos de metabolismo animal, muitas vezes, não é possível obter de forma direta a informação desejada, sendo necessário o uso de substâncias denominadas indicadores, possibilitando a estimativa de determinados parâmetros fi siológicos e nutricionais. Os indicadores são divididos em internos, representados por substâncias indigestíveis presentes naturalmente na dieta, ou externos, quando adicionados à dieta ou fornecidos via oral ou ruminal aos animais. Para que uma substância possa ser utilizada como indicador, deve atender a determinados critérios, sendo vários os problemas associados ao seu uso, especialmente a incompleta recuperação do indicador no duodeno ou fezes. Cada grupo de indicadores possui suas características próprias, defi nindo em que situação ele melhor se aplica. O óxido crômico é o indicador externo mais amplamente difundido, apresentando uma grande amplitude de aplicações, associada ainda às vantagens de fácil utilização e baixo custo. Entre os indicadores internos, a utilização da porção da fi bra indigestível dos alimentos vem se destacando pela facilidade de uso e bons resultados apresentados pela literatura. A utilização dos n-alcanos, sobretudo em estimativa de consumo de animais em regime de pastejo, tem apresentado resultados bastante satisfatórios. No momento da escolha, devem ser estabelecidos critérios, como facilidade de uso e determinação, que norteiem a decisão pelo indicador que melhor se adapte aos parâmetros a ser avaliados

RESUMEN: En estudios de metabolismo animal, muchas veces no es posible obtener de forma directa la información deseada, debiéndose entonces, hacer uso de sustancias denominadas indicadores, haciendo posible con eso la estimación de determinados parámetros fi siológicos y nutricionales. Los indicadores son divididos en internos y externos, existiendo una gran variedad de indicadores que deben ser escogidos de acuerdo con la respuesta a ser encontrada. Por tanto, para que una sustancia pueda ser utilizada como indicador, ella debe atender a determinados criterios básicos. Diversos son los problemas asociados al uso de indicadores, especialmente su incompleta recuperación en el duodeno o heces. Cada grupo de indicadores posee sus propias características, defi niéndose en que situación se aplica mejor. El óxido de cromo es el indicador externo mas ampliamente difundido, presentando una grande amplitud de aplicaciones, asociado además a las ventajas de fácil uso y bajo costo. Entre los indicadores internos, la utilización de la porción de la fi bra indigestible de los alimentos fue destacada por la facilidad de uso y de buenos resultados presentados por la literatura. La utilización de n-alcanos, sobre todo en estimaciones de consumo de alimento de animales en régimen de pastoreo presentó resultados bastante satisfactorios. En el momento de elegir el indicador para ser utilizado, deben ser establecidos criterios que norteen la decisión por el indicador que mejor se adecue a los parámetros evaluados y a sus facilidades de uso y determinación.