Leishmanicidal activity of brazilian propolis hydroalcoholic extract in Leishmania amazonensis / Atividade leishmanicida de extrato hidroalcoólico de própolisbrasileira em Leishmania amazonensis

As leishmanioses são consideradas doenças negligenciadas devido às altas incidências, ampla distribuição geográfica e dificuldade no tratamento sendo incluídas na relação de doenças prioritárias pela Organização Mundial da Saúde. Os tratamentos disponíveis para estas doenças apresentam elevada toxicidade,justificando a busca por fármacos alternativos. Estudos prévios com própolis, resina produzida por abelhas,demonstraram sua atividade antiparasitária e imunomoduladora em diversos modelos experimentais. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito in vitro do extrato hidroalcoólico de própolis brasileira, coletadona cidade de Botucatu no estado de São Paulo, sobre formas promastigotas de Leishmania amazonensis, bem como analisar seu efeito in vivo sobre a carga parasitária em baço de camundongos susceptíveis à infecção. Assim, formas promastigotas tratadas com extrato hidroalcoólico de própolis brasileira nas concentrações 5, 10, 25, 50 ou 100 µg/mL apresentaram efeito inibitório sobre a proliferação desses parasitos nos tempos de 24, 96 e 168 h. No entanto, as concentrações de 50 e 100 µg/mL mostraram-se mais eficazes quando comparadas ao controle e às demais concentrações em todos os tempos avaliados.Em relação à carga parasitária, após 30 dias de infecção com L. amazonensis, camundongos BALB/c foram tratados diariamente com a própolis (5mg/kg), via oral ou intraperitoneal, durante 60 dias. Posteriormente,o baço destes animais foi coletado para análise da carga parasitária. O tratamento por via oral reduziu 40%da carga parasitária. Desta forma, a amostra de própolis brasileira testada apresentou ação leishmanicida sobre L. amazonensis em cultura e em camundongos infectados com este protozoário.

Leishmaniosis are considered neglected diseases due to its high incidence, widespread and difficultyin treatment being included in the list of priority diseases by the World Health Organization. Available treatments for these diseases have high toxicity, which explains the search for more effective drugs. Previous studies with propolis - a resinous substance produced by bees - demonstrated immunomodulatory and anti-parasitic activity in several experimental models. The objective of this study was to evaluatethe effect in vitro of Brazilian propolis hydroalcoholic extract, collected in the city of Botucatu in SãoPaulo State, on promastigotes forms of Leishmania amazonensis as well as its effect on the parasiteload in the spleen of infected mice. Thus, promastigote forms treated with 5, 10, 25, 50 or 100 μg/mLof Brazilian propolis hydroalcoholic extract at 24, 96 and 168 hours showed inhibitory effect on the spread of these pararasite at all indicated times. However, the concentrations of 50 and 100 μg/mL were more effective, reducing the parasite spread when compared to the control and other concentrations at all times. Regarding parasitic load, after 30 days of infection with L. amazonensis, BALB/c mice were treated on a daily basis with propolis (5mg/kg) orally or intraperitoneally for 60 days. Further, the spleen was collected for parasite load analysis. Oral treatment reduced 40% of the parasitic load. Thus, the tested Brazilian propolis sample showed antileishmanial activity on L. amazonensis in culture andin parasite- infected mice.

Detection of Lsr2 gene of Mycobacterium leprae in nasal mucus

In the present study, nasal mucus from patients with leprosy were analyzed by PCR using specific primers for Lsr2 gene of Mycobacterium leprae. The presence of Lsr2 gene in the nasal mucus was detected in 25.80% of patients with paucibacillari leprosy, and 23.07% of contacts. Despite the absence of clinical features in the contact individuals, it was possible to detect the presence of Lsr2 gene in the nasal mucus of these individuals. Therefore, PCR detection of M. leprae targeting Lsr2 gene using nasal mucus samples could contribute to early diagnosis of leprosy.

Interações entre candida albicans e hospedeiro / Interactions between candida albicans and host

Candida albicans pode causar graves infecções em pacientes que estão imunocomprometidos por doenças, por cirurgias ou por terapia imunossupressiva. Os altos níveis de morbidade e mortalidade resultantes de infecções em pacientes hospitalizados mostraram que C. albicans tornou-se um patógeno humano de grande relevância clínica. Mesmo o sistema imune sendo o principal fator que define a transição do fungo de comensal para patogênico, fatores de virulência expressos por C. albicans, tais como adesinas, mudança fenotípica, comportamento dimórfico, e secreção de enzimas hidrolíticas, podem contribuir para a persistência da colonização, assim como o desenvolvimento de episódios sintomáticos. A defesa do hospedeiro compreende ingestão e eliminação do fungo por células fagocíticas que possuem vários receptores, como o Toll-4, dectina-1 associado a receptores tipo Toll-2 e receptores de manose. A interleucina-10 (IL-10) produzida por fagócitos determina a susceptibilidade do hospedeiro a infecção fúngica, enquanto a IL-10 produzida por células T reguladoras é responsável pelo comensalismo. Em contraste, a produção de fator de necrose tumoral- α (TNF-α), interleucina –1 β (lL-1 β), (IL-6), (Il-12) e IL-17 conferem imunidade protetora. O interferon-γ (IFN- γ) produzido por células natural “killer” e células Th1 estimula a migração de fagócitos e maior eficácia na destruição do fungo. Nas células epiteliais de mucosas os receptores NOD-like e defensinas-β citoplasmáticos evitam a translocação de C. albicans da microbiota para os tecidos os quais são modulados por citocinas IL-1 β,IL-17 e IL-22.

Candida albicans can cause grave infections in patients who are immunocompromised by diseases, by surgery, or by immunesupresive therapy. The high levels of morbidity and mortality resulting from those infections in hospitalized patients show that C. albicans became a prominent human pathogen. Although the host immune system is the major factor balancing the transition from commensalisms to pathogenicity, several virulence attributes expressed by C. albicans, such as adhesion factors, phenotypic switching, dimorphic behavior, and secretion of hydrolytic enzymes, might contribute to the persistence of colonization as well as the development of symptomatic episodes. Host defense against candidiasis relies mainly on the ingestion and elimination of C. albicans by phagocytic cells, which present receptors Toll-like 4, dectin–1 associated to receptors Toll-like2 and mannose receptors. The cytokine IL-10 (IL-10) produced by phagocytes has a crucial role on susceptibility of host fungal infection, whereas IL-10 produced by regulatory T cells is mainly responsible by commensalisms. In contrast, productions of tumour necrosis factor - α (TNF-α), interleukin–1 β (lL-1 β), (IL-6) and (Il-12) provided protective cell–mediated immunity. The interferon-γ produced by natural killer and TH1 cells stimulates migration of phagocytes and major efficacy on destruction of fungi. In epithelial cells from mucosas the NOD-like receptors and defensins-β cytoplasmatic prevent the translocation of C. albicans from microbiota to tissues, which are modulated by IL-1 β, Il-17 and Il-22 cytokines.

Ação do extrato de própolis na Leishmaniose / Propolis extract action in Leishmaniasis

A leishmaniose causa mortalidade e morbidade em mais de 80 países e caracteriza-se como uma doença parasitária com diversas manifestações, por isso constitui um sério problema de saúde pública. No Novo Mundo ocorre a Leishmaniose Visceral (LV) e Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA). A LTA é considerada uma enfermidade polimórfica, espectral da pele e das mucosas, agrupada em diferentes formas clínicas: a leishmaniose cutânea, a cutaneomucosa e a cutânea difusa. A Organização Mundial da Saúde recomenda os antimoniais pentavalentes como drogas de primeira escolha no tratamento da leishmaniose. Entretanto, devido aos efeitos indesejados dessas drogas, tem sido proposto o estudo para o desenvolvimento de novos fármacos para seu tratamento. Assim, tem-se investigado o uso da própolis, visto que está relacionada a muitas atividades biológicas, como antibacteriana, antifúngica, antiulcerativa, antiviral, antiprotozoária, antiinflamatória, hepatoprotetora, antioxidante, antitumoral, entre outras. Estudos recentes mostraram que a própolis verde ativa macrófagos e estimula os linfócitos B a produzirem anticorpos. A própolis tem demonstrado potencial atividade leishmanicida, por diminuir o diâmetro das lesões, causar alterações morfológicas nas formas promastigotas ou ainda por melhorar a resposta imunológica frente às Leishmanias, ativando macrófagos.Portanto, o objetivo deste trabalho foi relatar as principais atividades leishmanicidas da própolis, por meio de pesquisa bibliográfica eletrônica no PubMed e Scielo durante o ano de 2009. .

Leishmaniasis is a public health problem causing morbidity and mortality in over 80 countries and features a parasitic disease with several manifestations. In the New World occur Visceral Leishmaniasis (VL) and American Cutaneous Leishmaniasis (ACL). The ACL is considered a disease polymorphic of skin and mucous membranes, grouped in different clinical forms: cutaneous leishmaniasis in the skin and mucosa and diffuse cutaneous, and the evolution of this disease is closely related to the mechanisms of escape of the protozoan Leishmania from the immune response, allowing the development of the disease and consequently the onset of clinical manifestations known. The World Health Organization recommends the pentavalent antimony as the first choice drugs. However, they usually give unsatisfactory results, requiring the development of new and affordable drugs for its treatment. It has been investigated that use of propolis it is related to exhibit several biological activities such as antibacterial, antifungal,anti-ulcer agents, antiviral, anti-protozoan, anti-inflammatory, hepatoprotective, antioxidant, antitumor, among others. Recent studies have shown that green propolis active macrophages and stimulates lymphocytes B to produce antibodies. It was also reported that propolis shows a potential antileishmanial activity by reducing the diameter of the lesions, avoiding complications of the lesions by bacteria or by improving the immune response against the Leishmania through macrophages activation. The aim of this work was related the main activities leishmanicida using propolis, by searched the electronic literature PubMed and Scielo during the year 2009..

Participação de células T regulatórias (Tregs) na imunopatogênese da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana 1 (HIV-1) / Regulatory T cells participation in the infection immunopathogenesis by the Human Immunodeficiency Vírus

A sobrevivência de pacientes infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV-1) é relacionada à prevenção e ao tratamento eficaz de infecções oportunistas. É conhecido que os principais parâmetros para avaliar a progressão da doença causada pelo HIV-1 são contagem de células T CD4+ e carga viral do HIV-1. Células T regulatórias têm sido foco de intensas investigações dentro do sistema imunológico como também na patogênese de diversas doenças. Sabe-se que as células T reguladoras (Tregs) CD4+CD25+FoxP3+ atuam na modulação da ativação imune, funcionando como mediadores críticos da homeostasia imune e da auto-tolerância. Além disso, recentes estudos têm demonstrado que as células Tregs não se limitam à prevenção de auto-imunidade, mas são importantes no controle todas as formas de respostas imunes no contexto de inflamação, infecção, alergia, transplantes e imunidade tumoral. Muitos autores têm identificado as Tregs como células efetoras benéficas no contexto da AIDS, porém há discordância. Tregs podem sustentar importante função na imunopatologia da infecção pelo HIV devido a atividade supressora sobre ativação celular e função efetora. Neste contexto, esta revisão aborda os aspectos moleculares e imunológicos das Tregs no sistema HIV.

The survival of patients infected with human immunodeficiency virus (HIV-1) is related to the prevention and effective treatment of opportunistic infections. It is known that the main parameters to evaluate the progression of disease caused by HIV-1 is the counting of CD4 + T cells and viral load of HIV-1. Regulatory T cells has been considered the focus of intense research within the immune system as well as in the pathogenesis of several diseases. Natural regulatory T cells (Tregs) CD4+CD25+ act in the modulation of immune activation, functioning as critical mediators of immune homeostasis and self-tolerance. Furthermore, recent studies has shown that the function of Tregs cells is not limited to the prevention of autoimmunity, but is also important to control all forms of immune responses in the context of inflammation, infection, allergy, transplantation and tumor immunity. Many authors have identified Tregs as beneficial effector cells in the context of AIDS, but other researchers disagree. Tregs can exert an important role in the immunopathology of HIV infection due to the suppressor activity on cellular activation and effector function. Thus, this review discusses the molecular and immunological aspects of Tregs in the HIV system.

Resposta imune a Candida albicans / Immune response to Candida albicans

Candida albicans causa infecções na pele, cavidade oral e esôfago, trato gastrointestinal, vagina e sistema vascular de humanos. As infecções ocorrem em hospedeiros imunocomprometidos ou pacientes debilitados. Acima de 90 por cento dos pacientes HIV+ sofrem de candidíase de mucosas ao menos uma vez no decorrer da doença. A severidade e cronicidade da candidíase oral em pacientes com AIDS são atribuídas, principalmente, à imunodeficiência induzida pelo HIV nos indivíduos afetados, a saber, perda de funções de célula T auxiliar e redução do número de linfócitos T CD4. Na colonização de mucosase infecções sistêmicas de camundongos por este fungo, células Th1 medeiam a proteção dependente de fagócitos, cujas citocinas mais importantes são IL-2, IFN-γ e IL-12, TNF-α. Ao contrario, produção de citocinas inibidoras tais como, IL-4 e IL-10 por células Th2 estão associadas à desativação de fagócitos e à progressão da doença. Possivelmente, o crescimento de formas filamentosas está melhor adaptado para evadir das células do sistema imune, enquanto a forma de levedura pode ser o modo de proliferação em tecidos infectados. Pela produção discriminativa de IL-12 em resposta a levedura e de IL-4 a hifa, as células dendríticas adquirem a capacidade para induzir a diferenciação de células TCD4 para o fenótipo Th1 ou Th2.

Candida albicans causes infections of the skin, oral cavity and esophagus, gastrointestinal tract, vaginaand vascular system. Most infections occur in immunocompromised hosts or debilitated patients. Morethan 90 percent of HIV positive patients suffer from mucosal candidiasis at least once in the course of thisdisease. The overall severity and chronicity of oral candidiasis in patients with AIDS are mainly attributedto the HIV-induced immune deficiency in the affected individuals, namely, the loss of T-helper cells andreduction in the number of CD4+ T lymphocytes. In mucosal colonization and systemic infections ofmice by this fungus, Th1 cells mediate phagocyte-dependent protection, whose most important cytokinesare IL-2, IFN-γ, TNF-α and IL-12. In contrast, production of inhibitory cytokines such as IL-4 and IL-10 by Th2 cells are associated with disactivation of phagocytes and disease progression. Possibly, thegrowth of filamentous forms is better adapted to evade the cells of the immune system, whereas theyeast form may be the mode of proliferation in infected tissues. By the discriminative production of IL-12 or IL-4 in response to the yeast or filamentous forms respectively, dendritic cells acquire the capacityof inducing the differentiation of CD4+ cells towards the Th1 or Th2 phenotypes.Keywords: Candida albicans. Immune response. Systemic infection.

Treatment of serum with supernatants from cultures of Candida albicans reduces its serum-dependent phagocytosis

Candida albicans is a potent activator of the complement system, and heat labile opsonins produced by activation of C3 (C3b and iC3b) enhance phagocytosis of C. albicans mediated by complement receptors. In this study we treated mouse serum with supernatants from cultures of a protease producer strain of C. albicans and evaluated the ability of this serum to enhance phagocytosis of C. albicans. Cell-free supernatants from cultures of C. albicans were concentrated 5 fold and added to mouse serum for 30 min at 37§C, before using this serum for opsonization of glutaraldehyde-fixed yeast cells. We observed that normal mouse serum increased about 3 fold the phagocytosis of C. albicans by mice peritoneal macrophages, whereas supernatant-treated serum did not increase phagocytosis. This effect of supernatants on serum was prevented by addition of pepstatin (5 µg/ ml; an inhibitor of C. albicans acid proteases) to the medium. Serum treated with supernatants from cultures of a protease-deficient mutant of C. albicans also increased about 3 fold phagocytosis of the yeast. These results suggest that a protease produced by C. albicans causes proteolysis of serum opsonins, thereby reducing the phagocytosis of the yeast.

Características patogênicas de Escherichia coli / Pathogenic features of Escherichia coli

Esta revisäo aborda, de modo geral, características patogênicas de cepas de Escherichia coli que provocam infecçöes instetinais e extra-intestinais assim como as estratégias que os microrganismos apresentam em oposiçäo aos mecanismos de defesa do hospedeiro