Optimización y validación de un método de PCR en tiempo real para el diagnóstico de Pneumocystis jirovecii en muestras respiratorias de pacientes pediátricos / Optimization and validation of a real-time PCR method for the diagnosis of Pneumocystis jirovecii in respiratory samples of pediatric patients

Pneumocystis jirovecii (PCP) es un hongo oportunista, que causa neumonía en pacientes con un sistema inmunitario seriamente comprometido. La prevalencia de la enfermedad disminuyó dramáticamente con la introducción de la terapia antirretroviral combinada (HAART) y actualmente las infecciones ocurren en aquellos pacientes que no reciben adecuada profilaxis o no la completan. Es una enfermedad grave con elevada tasa de mortalidad (30-60%) en pacientes oncohematológicos y receptores de trasplante de células progenitoras hematopoyéticas (HSCT), pero prevenible con profilaxis adecuada, por lo que el reconocimiento temprano de los pacientes en riesgo es crítico. El diagnóstico de certeza es de laboratorio ya que los hallazgos clínicos son inespecíficos y las imágenes no son patognomónicas de este agente. Actualmente las técnicas moleculares como la PCR en tiempo real son las metodologías recomendadas ya que poseen elevada sensibilidad, especificidad, rapidez y eficiencia. En el presente estudio se optimizó un método de PCR en tiempo real con iniciadores dirigidos al gen del ARNr de la subunidad grande mitocondrial, en formato dúplex junto con el gen constitutivo RNAsa P. El método demostró ser muy sensible y rápido para el diagnóstico clínico de PCP, con una concordancia қ: 0,789 con el método convencional de PCR anidada que emplea como target a la región espaciadora transcrita interna (ITS) del gen del ARNr de PCP, a la vez de ser mucho menos laborioso y con menor riesgo de contaminación, lo que permite el manejo de un alto número de muestras clínicas (AU)

Pneumocystis jirovecii (PCP) is an opportunistic fungus causing pneumonia in severely immunocompromised patients. Prevalence of the disease has dramatically decreased after the introduction of combined antiretroviral therapy (HAART) and currently these infections occur in patients who do not receive adequate prophylaxis or do not complete treatment. PCP is a severe disease with a high mortality rate (30-60%) in oncology-hematology patients and hematopoietic stem-cell transplantation (HSCT) recipients, but is preventable with adequate prophylaxis. Therefore, early recognition of at-risk patients is essential. Laboratory studies are the gold standard for the diagnosis as clinical findings are unspecific and imaging studies are not pathognomonic for this agent. Currently, molecular techniques, such as real-time PCR, are the methodology of choice because of their high sensitivity, specificity, speed, and efficiency. In this study, a real-time PCR method was optimized with primers targeting the gene of the mitochondrial large subunit rRNA in a duplex format together with the constitutive gene RNAsa P. The method showed to be very sensitive and fast for the clinical diagnosis of PCP, with a concordance of қ: 0.789 with the conventional nested PCR method targeting the internal transcribed spacer (ITS) region of the rRNA gene of PCP, and is much easier to perform with a lower contamination risk allowing a high through-put of clinical samples (AU)

Estimación de masa grasa en niños chilenos: ecuaciones de pliegues subcutáneos vs densitometría de doble fotón / Estimation of body fat in Chilean children: comparing subcutaneous fold equations amd doble photon densitometry

Estimation of thickness of subcutabeous folds (SqF) is a simple way to estimate body composition in children, although it has its limitations. Double photon densitometry (DXA) is considered a new standard. Objective: To compare the precision of estimation of body fat by SqF and DXA in a population of Chilean children. Patients and Methods: Body fat was estimated in 128 eutrophic healthy children (70 females, 58 males), between 2 and 18 y.o. through SqF equations and DXA. Differences between both methods were evaluated through the Bland and Altman method and Lin concordance coefficient. Results: Most SqF equations had poor concordance with DXA. There was better concordance if the Westrate and Deurenberg equation was used among prepuberal and children of all ages (average difference of 2,96 +/- 1,20 percent and 4,92 +/- 0,98 percent and Lin concordance index of 0,50 +/- 0,22 and 0,43 +/- 0,88, respectively). Conclusions: Body fat estimated through subcutaneous fold measurements is poorly correlated with double photon densitometry among Chilean children. However, until more precise equations are developed, Westrate and Deurenberg for all ages, and Westrate/Deurenberg specific for pre-puberal age can be used.

La estimación del grosor de pliegues subcutáneos (PS) es una manera simple de estimar composición corporal en niños, sin embargo, tiene limitaciones. La densitometría de doble fotón (DXA) es considerada como el nuevo estándar de referencia. Objetivo: Comparar la precisión de la estimación del porcentaje de masa grasa por PS con la obtenida por DXA en población infantil chilena. Pacientes y Método: Se estimó el porcentaje de masa grasa en 128 niños (70 mujeres y 58 hombres) sanos, eutróficos, entre 2 y 18 años, por diversas ecuaciones de PS y se comparó con DXA. La diferencia entre ambos mediciones fue evaluada mediante el método de Bland y Altman y el coeficiente de concordancia de Lin. Resultados: La mayoría de las ecuaciones de PS tuvieron un pobre nivel de concordancia con DXA. Sin embargo, existe una mejor concordancia entre lo calculado según PS y DXA tanto en niños pre-puberales con la fórmula específica de Westrate y Deurenberg y en niños de todas las edades, con la ecuación general de Westrate y Deurenberg (diferencia promedio de 2,96 +/- 1,20 por ciento y 4,92 +/- 0,98 por ciento e índice de concordancia de Lin de 0,50 +/- 0,22 y 0,43 +/- 0,88, respectivamente) Conclusiones: La estimación del porcentaje de masa grasa a partir de los PS, tiene una baja concordancia, sin embargo, mientras no se desarrollen ecuaciones con una precisión más alta se podrían utilizar las ecuaciones de Westrate y Deurenberg a todas las edades y la de Westrate y Deurenberg específica para la edad pre-puberal.

Avances en el diagnóstico de las alteraciones del eje somatotrófico que causan retardo del crecimiento / An update on the diagnosis of growth hormone axis disturbances that cause stunting

Human growth is a complex process regulated by several genes, most of which are unknown. Recently, our knowledge regarding the etiology of genetically determined causes of short stature has greatly increased, so molecular analysis is becoming essential for the diagnosis of growth retardation. The advances in our understanding of the molecular mechanisms involved in the function of the somatotrophic axis have resulted in a dramatic enhancement of our ability to diagnose and treat growth disorders. We hope that in the next few years improved methods for identifying specific abnormalities which cause short stature will expand our ability to diagnose other causes of growth retardation, and reduce the proportion of patients with "idiopathic" short stature.

Balance metabólico nutricional en pacientes con insufuciencia renal crónica durante el tratamiento con hemodiálisis / Nutritional metabolic balance in patients with chronic renal failure during the treatment with hemodialysis

La dieta ideal del paciente catabólico no está bien definida. Aunque muchas fórmulas nutricionales están disponibles, aun los investigadores trabajan en la búsqueda de una "dieta diseñada a la medida", que responda a las necesidades específicas del paciente renal. Se realiza investigación prospectiva del balance metabólico - nutricional a ocho pacientes masculinos con diagnóstico de insuficiencia renal crónica terminal durante tratamiento con hemodiálisis. Durante doce semanas fueron sometidos a una intervención dietética que consistía en el registro mediante técnica de recordatorio del consumo de alimentos y de un menú dirigido durante tres días de diálisis cada semana. La dieta de intervención fue confeccionada según los criterios de las XV Guías alimentarias de Asociación Norteamericana de Nefrología y los comités de expertos en proteínas de FAO/OMS. Se analizaron las variables dependientes albúmina sérica, hemoglobina, bicarbonato, ionograna, creatinina, urea y ácido úrico así como el índice de masa corporal y el diámetro vena cava por técnica de ultrasonido. El procesamiento de los datos fue analizado según la normalidad de las variables su distribución y sus medias. Se aplica prueba t de Student para muestras independientes y análisis de regresión por pasos para las varialbes seleccionadas. Se realizó el procesamiento estadístico por la versión 10.0 del programas SPSS. Los resultados demostraron una asociación significativa entre la hemoglobina y la albúmina sérica con los ingresos de nitrógeno y sus cambios en los días de díalisis durante las doce semanas...

Hiperinsulinismo neonatal persistente: análisis del diagnóstico diferencial a propósito de dos casos clínicos / Persistent neonatal hyperinsulinism: report of two cases

Persistent neonatal hyperinsulinism is the most common cause of refractory hypoglycemia during the first year of life. Inadequate insulin secretion is associated to mutations of four different genes, that can be diagnosed to orient patient management. We report two patients: a female newborn that presented a hypoglycemia of 16 mg/dl two hours after birth, was subjected to a subtotal pancreatectomy that did not correct hypoglycemia, requiring a total pancreatectomy. Pathological study of the pancreas showed a focal adenomatous hyperplasia. At the present time, she is three years of age and maintains euglycemia with fractionated feeding. A male newborn that had seizures at 28 hours of life and a hypoglycemia of 15 mg/dl was detected. He was also subjected to a subtotal pancreatectomy, that did not correct hypoglycemia and had to be extended to a total pancreatectomy. At the present time, he is 3 years and 11 months of age and has a normal psychomotor development (Rev Méd Chile 2004; 132: 995-1000).

Tiroiditis aguda supurada en un paciente pediátrico / Acute suppurative thyroiditis: report of a pediatric case

Acute suppurative thyroiditis (AST) is an uncommon condition because thyroid gland is remarkably resistant to infections. In children, anatomic defects such as a left pyriform sinus fistula or a thyroglossal duct remnant predispose to this infection. Once the diagnosis is confirmed by ultrasound or computed tomography, antimicrobial therapy based on the culture and Gram staining must be started. After two or three weeks of treatment, predisposing anatomic defects must be sought cautiously. We report a 13 years old girl presenting with cervical pain and fever. A cervical ultrasound showed an enlarged thyroid lobule with hypoecogenic zones that suggested a supurative collection. Cefotaxime and cloxacillin were started. A needle aspiration of the collection obtained a purulent material. The culture of this material yielded a Streptococcus Pneumoniae. The clinical condition of the patient improved and she was discharged in good conditions. Two months later a contrast esophagus X ray did not show predisposing anatomic defects.