Infección por Trypanosoma cruzi en mujeres puérperas y sus neonatos en Barcelona, estado Anzoátegui, Venezuela / Trypanosoma cruzi infection in puerperal women and their neonates at Barcelona, Anzoategui State, Venezuela

Introducción. Trypanosoma cruzi se transmite principalmente por vía vectorial, sin embargo, las rutas oral y congénita han tomado relevancia. Objetivo. Evaluar la infección por T. cruzi en mujeres puérperas y sus neonatos en el Hospital Universitario Dr. Luis Razetti de Barcelona, estado Anzoátegui, Venezuela. Materiales y métodos. Se hizo un estudio prospectivo de corte transversal, de mayo de 2015 a agosto de 2016, en el que se evaluaron 1.200 mujeres para determinar la infección mediante las pruebas ELISA, MABA e IFI. Los neonatos de las madres seropositivas se evaluaron con la prueba de PCR y por serología a los nueve meses de edad. Se estimó la prevalencia de la infección por T. cruzi en mujeres puérperas y sus neonatos. Para establecer los factores de riesgo asociados a la infección, se usó la prueba de ji al cuadrado (c2) y la razón de probabilidad (OR). Resultados. En total, 78 (6,50 %) mujeres resultaron positivas (IC95% 5,10-7,89 %). En seis (9,09 %) recién nacidos de madres seropositivas, se detectó ADN parasitario. Tras nueve meses de nacidos, once lactantes evaluados resultaron serológicamente negativos. La infección estuvo asociada con la duración del embarazo (OR=0,36; IC95% 0,15-0,84), origen del domicilio actual (OR=0,34; IC95% 0,24-0,62) o previo (OR=2,50; IC95% 1,38-4,52) y el tener familiares con la enfermedad de Chagas (OR=1,75; IC95% 1,02-3,01). Conclusiones. La seroprevalencia para la infección por T. cruzi en mujeres puérperas del medio rural, fue elevada. La detección de ADN parasitario al momento del nacimiento no es indicativa de enfermedad de Chagas congénita.

Introduction. Trypanosoma cruzi is mainly transmitted by vectors. Other pathways such as oral and congenital transmission have become increasingly relevant. Objective. To evaluate T. cruzi infections in post-partum women and their newborns who attended the Hospital Universitario Dr. Luis Razetti (Barcelona, Anzoátegui state, Venezuela). Materials and methods. A prospective cross-sectional study was undertaken from May, 2015, to August, 2016. ELISA, MABA and IFI assays were used to determine the infection in 1,200 post-partum women. The newborns of seropositive women were then examined for T. cruzi by PCR amplification and serological tests at nine months old. The prevalence of the parasitic infection in post-partum women and their newborns was then estimated. To establish the relationship between risk factors and infection, the chi-square test (c2) and the probability ratio (OR) was applied. Results. A total of 78 women were identified as seropositive (6.50 %) (CI 95%: 5.10-7.89%), and parasitic DNA was detected in six of their newborns (9.09%). Nine months after birth eleven infants were examined, and all were found to be serologically negative. Risk factors detected were pregnancy duration (OR: 0,36; CI95%: 0,15-0,84), where the patients lived at present (OR: 0,34; CI95%: 0,24-0,62) or previously (OR: 2,50; CI95%: 1,38-4,52) and having relatives with Chagas disease (OR: 1,75; CI95%: 1,02-3,01). Conclusions. Seroprevalence for T. cruzi infection in young post-partum women in rural areas was high. The detection of parasite DNA at birth was not indicative of congenital Chagas disease.

Estandarización, validación y aplicación de la inmunofluorescencia indirecta en un estudio epidemiológico de la infección por Trypanosoma cruzi / Standardization, validation and application of indirect immunofluorescence assay in an epidemiological study of Trypanosoma cruzi infection

En el presente trabajo se estandarizó una prueba de inmunofluorescencia indirecta (IFI) utilizando epimastigotes fijados de T. cruzi (aislado MHOM/VE/08/AU), se validó y posteriormente se aplicó para conocer la seroepidemiología de la infección por T. cruzi en Río Brito (estado Sucre). Los parásitos se cultivaron en infusión hígado triptosa y se fijaron con formaldehido (2%). Para la validación se usaron 49 sueros confirmados como positivos y 50 negativos para esta infección y para evaluar reacciones cruzadas se analizaron 48 sueros de pacientes confirmados con leishmaniasis cutánea, toxoplasmosis y helmintiasis. La prueba de IFI se aplicó para evaluar 50 muestras de sangre recogidas sobre papel de filtro, provenientes de Rio Brito, estado Sucre. Los factores de riesgo epidemiológicos se determinaron a través de la prueba de Fisher y la razón de probabilidades. La IFI fue 100% sensible y 93,9% específica. La seroprevalencia de la infección en la comunidad de Río Brito fue de 16%. Las variables asociadas a la infección fueron el reconocimiento del vector y su presencia alrededor de las viviendas. La seroprevalencia de esta parasitosis es elevada en Río Brito, en donde existen las variables epidemiológicas para mantener el ciclo del parásito.

An indirect immunofluorescence assay (IIF) was standardized using fixed epimastigotes of T. cruzi (isolate MHOM/VE/08/AU) and after validation was applied to determine the seroepidemiology of T. cruzi infection in Rio Brito (Sucre State). The parasites were grown in liver infusion tryptose and fixed with formaldehyde (2%). To validate, the test 49 confirmed as positive and 50 as negative for infection sera were used. To assess cross-reactions 48 sera from patients with confirmed cutaneous leishmaniasis, toxoplasmosis and helminthiasis were analyzed. The IIF test was used to evaluate 50 blood samples collected on filter paper, from Rio Brito, Sucre state population. The epidemiological risk factors were determined by Fisher’s exact test and the odds ratio. The IIF was 100% sensitive and 93.87% specific. The seroprevalence of infection in the community of Rio Brito was 16%. The variables associated with infection were the recognition of the vector and its presence around the houses. The seroprevalence of this infection is high in Rio Brito, where there are epidemiological variables to maintain the cycle of the parasite.

Fibrilación auricular en pacientes con diagnóstico de chagas crónico procedentes de la zona norte del Estado Anzoátegui / Atrial fibrillation in patients with a diagnosis of chronic disease from the northern Anzoategui State

La fibrilación auricular que acompaña a la cardiopatíachagásica crónica constituye un mal pronóstico, dada suasociación con la grave disfunción sistólica ventricularizquierda y la formación de trombos auriculares con tendenciaa la embolización sistémica. Se analizó la fibrilaciónauricular en pacientes chagásicos de la zona norte del estado Anzoátegui. Se estableció la relación de la fibrilación auricularcon eventos cardíacos mayores como la enfermedad vascularcerebral, la muerte cardiovascular y la hospitalizaciónpor causas cardíacas no planificadas. 98 pacientes chagásicos 56 sexo masculino y 42 sexo femenino, con edad promedio de 63,56 años fueron clasificados en losgrupos sero-positivo Ch I (electrocardiograma normal), Ch II(electrocardiograma anormal) y Ch III (electrocardiogramaanormal e insuficiencia cardíaca) y evaluados por tres años consecutivos para determinar la prevalencia de fibrilación auricular y su asociación con los eventos cardíacos mayores. La prevalencia de fibrilación auricular en la totalidad de los pacientes chagásicos fue 22,84 ± 2,76%, con una mayor frecuencia en el grupo Ch III (p = 0,0001). El 69,42 ± 4,65% de los pacientes sufrió uno o más eventos cardíacos mayores (p = 0,06) con un riesgo relativo de 2,42 veces para estos sucesos [RR 2,4 IC 95 % (0,9 – 6,54)]. La asociación independiente entre fibrilación auricular y eventos cardíacos mayores no demostró diferencias estadísticamente significativas entre los grupos. La fibrilación auricular no se encontró asociada a la presencia de eventos cardíacos mayores, pero su incidencia en los pacientes con cardiopatía chagásica crónica es importante en los estadios avanzados de la enfermedad, principalmente en aquellos pacientes que presentan frecuencia ventricular izquierda deprimida.

Atrial fibrillation that accompanies chronic chagasiccardiomyopathy carries a poor prognosis, given its association with severe left ventricular systolic dysfunction and the formation of auricular thrombi with a tendency to systemic embolization. Atrial fibrillation was examined inpatients with Chagas disease in the northern Anzoátegui State.The relationship was examined between atrial fibrillation and major cardiac events such as cerebral vascular disease, death and non-elective hospitalization for cardiac causes. 98 patients chagásicos 56 male and 42 female with average age of 63.56 were classified into a sero-positive Ch I (normal electrocardiogram) group, a Ch II (abnormal electrocardiogram) group and a Ch III (abnormal ECG and heart failure) group and were followed for three consecutive years to determine the prevalence of atrial fibrillation and its association with the major cardiac events. The prevalence of atrial fibrillation in all the patients with Chagas disease was 22.84 ± 2.76%, found more frequently in the Ch III group (p = 0.0001). There were 69.42 ± 4.65% patients who suffered one or more major cardiac events (p = 0.06)with a relative risk of 2.42 for such events [RR 2.4 IC 95% (0.9 – 6.54)]. The independent association between atrial fibrillation and major cardiac events showed no statistically significant differences between groups. The atrial fibrillation not found associated with the presence of major cardiac events, but its impact the incidence of atrial fibrillation in patients with chronic chagasic cardiomyopathy is important in the later stages of the disease, mainly in those patients who have depressed left ventricular function.

Turbulencia de la frecuencia en pacientes portadores de chagas crónico procedentes de la zona norte del estado Anzoátegui / Heart rate variability in patients with chronic chagas disease from the northern zone of Anzoategui state

El estudio de las alteraciones en la turbulencia de la frecuencia cardíaca, como respuesta fisiológica bifásica del modo sinusal a contracciones ventriculares prematuras, es de interés como factor de riesgo en la cardiopatía isquémica. Analizar la turbulencia de la frecuencia cardíaca en pacientes chagásicos en distintos estadios de la enfermedad cardíaca. Se realizó un estudio observacional de corte transversal, con una muestra no probabilística dividida en: grupo sero-negativo a anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi (control) y grupos sero-positivos Ch I (electrocardiograma normal), Ch II (Eelectrocardiograma anormal) y Ch III (electrocardiograma anormal e insuficiencia cardíaca). Se realizó el análisis comparativo entre los grupos para los parámetros del inicio de la turbulencia y de la pendiente de la turbulencia. El inicio de la turbulencia demostró diferencias significativas entre los grupos control (Media-3,32 IC 95%: (-4,30-2,24)) y CH III (Media:-2,24 IC 95% (-54-5), P:=,02); así también la pendiente de la turbulencia resultó estadísticamente diferente entre los grupos control (Media 14,22 IC 95%:(10,50-17,94)) y Ch III (media: 2,35 IC 95% (-2,59-7,30), P: 0,002). Aunque el análisis multivariable no demostró diferencias significativas entre los grupos de pacientes chagásicos analizados para estos dos parámetros, existió una clara tendencia a la disminución de la pendiente de la turbulencia en los estadios avanzados de la cardiomiopatía chagásica. Estos resultados revelan importantes alteraciones en la función autonómica de los pacientes con cardiopatía chagásica evaluada mediante la turbulencia de la frecuencia cardiaca, información que consideramos de interés para el análisis de los factores de riesgo y terapéutica en los estadios avanzados de la enfermedad cardíaca de estos pacientes.

Presently it is estimated that about 20 million people are infected and another 90 million are at risk of being infected with the parasite globally, thus representing the third most geographically widespread tropical illness. To estimate changes in parasymthetic control through Heart Rate Variability which is based on the two-phased response from the sinus node to premature ventricular contractions. Cross-sectional, observational study. Non probabilistic sample divided into four groups: Sero -ve or control group and sero +ve which was classified into three groups: Group 1 (Ch 1), those patients without electrical alteration. Group 2 (Ch 2), patients with alterations in their electrocardiogram and Group 3 (Ch 3), patients with an abdominal electrocardiogram and with symptoms of ICC. For the calculation of Heart Rate Variability, two paramenters were taken into consideration: Onset of the Variability and the Slope of the Variability (SV), Onset of the Variability showed no statistically significant differences when compared between patients with negative serology and Ch 1 patients. Sero-ve: 3.32 95 % CI: (-4.30-2.24) vs. Ch 1: mean -4.28. 95 % CI: (4.28-2.72). p=NS). There a statiscally significant difference between the Sero-ve mean -3.32. 95 % CI: (-4.30-2.34) vs Ch 2 mean -1.50. 95 % CI: (-2.45-0.54). P=0.02 and Ch 3 mean: -0.24 95% CI (-1.54) P=0.02. The Stope of the Variability showed no statiscally significant differences between the sero-ve vs Ch 1. Seronegative: 14.22 95 % CI: (5.25-17.17), p=NS and Ch 2 mean 6.27. 95 % CI: (2.63-9.91), p=NS and contrary to Ch 3 the means: 2.35 95 % CI (-2.59-7.30) P=o.002. Onset of the Variability as well as Slope of the Variability showed no statistically significant difference when compared with the groups of patients with chagas disease. The results reveal that patients with Chagas Disease demostrate variability in their autonomic function at intermediate stage of the illness.

Purificación de una fracción de antígenos de tripomastigotes de Trypanosoma cruzi para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas / Purification of a trypomastigote antigen fraction from Trypanosoma cruzi for Chagas’ disease diagnosis

Los antígenos excretados/secretados por las formas tripomastigotes de T. cruzi (antígenos TESA) pertenecen a la familia de las transialidasas, las cuales son responsables de la transferencia de ácido siálico exógeno a moléculas aceptadoras en la superficie de los tripomastigotes. En el presente trabajo se purifican varias proteínas de los antígenos TESA utilizando cromatografía de afinidad con resina de sefarosa B4-concanavalina A, con la intención de ser utilizados en el diagnóstico de la enfermedad de Chagas. El buffer de elución contenía una mezcla de α-D-manopiranósido y α-D-glucopiranósido. Se realizó electroforesis unidimensional en gel con poliacrilamida para identificar las bandas purificadas y la prueba de inmunoelectrotransferencia para visualizar las bandas reactivas con el pool de sueros de individuos con infección por T. cruzi. El gel teñido con azul de Coomassie coloidal permitió visualizar 3 bandas de aproximadamente 220, 170, y 20 kDa. La inmunoelectrotransferencia utilizando un pool de sueros positivos, confirmados para la infección por T. cruzi, reveló 5 bandas inmunogénicas de 220, 120, 85, 50 y 32 kDa mientras que el revelado con diaminobenzidina permitió observar las bandas de 220, 120, 85, 50 32 y 20 kDa. Asimismo las bandas purificadas no fueron reconocidas en la inmunoelectrotransferencia por el pool de sueros confirmados como negativos. Estos resultados sugieren el potencial de estas proteínas purificadas de TESA para ser usadas como nueva herramienta para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas.

Trypanosoma cruzi excreted/secreted antigens (TESA) belong to the transialidase family, which are responsible for the transfer of exogenous sialic acid to accepting molecules at the trypomastigote surface. In the present study we purified several proteins from TESA antigens using affinity chromatography with sepharose B4-concanavalin A resin, with the purpose of using them for Chagas’ disease diagnosis. The elution buffer contained a mixture of α-D-manopiranosid and α-D-glucopiranosid. A unidimensional electrophoresis in polyacrilamide gel to identify the purified bands, and an immunoelectrotransference test with a pool of sera from T. cruzi infected individuals to visualize the reactive bands were carried out. The colloidal Coomassie blue stained gel allowed visualizing 3 bands of approximately 220, 170 and 20 kDa. The immunoelectrotransference using a pool of positive sera with confirmed T. cruzi infection showed 5 immunogenic 220, 120, 50 and 32 kDa bands, while a developing with diaminobenzidine showed 220, 120, 85, 50, 32 and 20 kDa bands. The purified bands were not recognized in an immunoelectrotransference test when a pool of confirmed negative sera was used. These results suggest the potential of these TESA purified proteins for using them as a new tool for Chagas’ disease diagnosis.

Seroprevalencia de la infección por Trypanosoma cruzi en la población rural de Miraflores, estado Monagas: Estabilidad y diferencia de reactividad de epimastigotes fijados / Seroprevalence of Trypanosoma cruzi infection in the rural population of Miraflores, Monagas State, Venezuela: Stability and reactivity differences of fixed epimastigotes

Se evaluó la seroprevalencia de anticuerpos IgG anti-Trypanosoma cruzi, en la población rural de Miraflores, estado Monagas. En el estudio participaron 106 individuos (edades: 4 a 79 años) de cualquier género. El diagnóstico serológico fue realizado mediante la prueba de ELISA utilizando antígenos fijados de las formas epimastigotes de T. cruzi. Se evaluó la estabilidad del antígeno utilizado y las diferencias en la reactividad de dos cepas distintas de T. cruzi (complejo Tulahuen-Brasil y cepa RG1). La seropositividad de anticuerpos de tipo IgG anti-T. cruzi, con la cepa RG1 y la mezcla de cepas Tulahuen-Brasil, fue 2,8%. Se observó una correlación positiva entre la edad de los pacientes y la densidad óptica de la determinación de anticuerpos tipo IgG anti-T. cruzi presentada por la prueba de ELISA, para las dos cepas. La cepa Tulahuen-Brasil mostró mayor reactividad que aquella obtenida con la cepa RG1. Los antígenos fijados (mezcla de cepas Tulahuen-Brasil) mantuvieron su estabilidad y reactividad por un período de 5 años, lo cual hace de este tipo de antígeno un excelente candidato para las pruebas de diagnóstico. En la zona de estudio estuvieron presentes las variables epidemiológicas de riesgo para la reactivación de la infección en esta región de Venezuela.

The seroprevalence of anti-Trypanosoma cruzi IgG was evaluated in the rural population of Miraflores, Monagas State. The study included 106 individuals (ages: 4 to 79 years) of any sex. The serologic diagnosis was done through the ELISA test using as antigen fixed T. cruzi epimastigote forms. The stability of the antigen used was evaluated, as well as the differences in reactivity of the two different T. cruzi strains used (the Tulahuen-Brasil complex, and the RG1 strains). Seropositivity of anti-T. cruzi IgG type antibodies with the RG1 strains and the mixture of Tulahuen-Brasil strains was 2.8%. There was a positive relationship between the age of patients and the optical density of the anti-T. cruzi IgG type antibody determination shown by the ELISA test for both strains. The Tulahuen-Brasil strains showed greater reactivity than the one seen with the RG1 strain. Fixed antigens (mixture of Tulahuen-Brasil strains) maintained their stability and reactivity during a five-year period, which means that this antigen is an excellent candidate for diagnostic tests. The epidemiological risk variables for the reactivation of this infection were present in this region of Venezuela.

Dog ( Canis familiaris) infectivity to Lutzomyia youngi in Trujillo, Venezuela / Infectividad del perro ( Canis familiaris) para Lutzomyia youngi en Trujillo, Venezuela

Introducción. En Trujillo, Venezuela, la prevalencia de leishmaniasis tegumentaria americana (LTA) es de 38 por 100.000 habitantes. Objetivo. En una localidad periurbana, rural, de la ciudad capital, estudiamos a los perros caseros ( Canis familiaris) para investigar mediante la técnica de xenodiagnóstico la eventual capacidad para infectar a Lutzomyia youngi, especie flebotomina con actividad vectorial intradomiciliaria comprobada y abundante en el área de estudio. Materiales y métodos. Los perros con lesiones sugestivas de LTA, parasitológicamente diagnosticados, fueron seleccionados para el xenodiagnóstico permitiendo a flebótomos silvestres de una zona libre de LTA alimentarse ad libitum sobre toda la superficie corporal de cada animal, y evidenciar, en disecciones efectuadas a los 5 días post-ingesta, la posible presencia de flagelados en sus tractos digestivos, en cuyo caso, fueron evaluados por la técnica PCR-Multiplex para determinar la identidad del parásito. Resultados. Un total de 455 flebótomos se ingurgitaron sobre dos perros en tres evaluaciones distintas; en una única ocasión, se observaron promastigotes en 4 (0,88 por ciento) insectos, cuya identificación molecular reveló pertenecían al subgénero Viannia. Conclusión. El perro casero constituye un potencial factor de riesgo intradomiciliario en el ciclo de la LTA.

Introduction. In Trujillo, Venezuela the prevalence for American tegumentary leishmaniasis (ATL) is 38 per 100.000 inhabitants. Objective. In a periurban, rural settlement of the capital city Trujillo, we studied the potential capability of the domestic dog (Canis familiaris) as a source of infection for Lutzomyia youngi, a phlebotomine sand fly species abundant in the study area and whose domestic vectorial activity has been proven. Materials and methods. Dogs with dermal lesions suggestive of ATL and parasitological confirmation of infection, were selected for xenodiagnosis by allowing sylvatic phlebotomines from a ATL free area, to feed ad libitum over each animal´s entire body surface. The insects´ intestinal tracts were dissected 5 days after the blood meal in order to look for flagellate forms. When these were found, parasitological identification was performed by the multiplex-PCR technique.Results. Four hundred and fifty five sand flies engorged over two dogs in three different assays; promastigotes were found in 4 (0.88%) of the specimens on only one occasion. PCR identified DNA of the Leishmania Viannia subgenus. Conclusion. The household dog has the potential of being a domestic risk factor in the ATL transmission cycle.

Multiplex-PCR for detection of natural Leishmania infection in Lutzomyia spp. captured in an endemic region for cutaneous leishmaniasis in state of Sucre, Venezuela

We studied the natural infection of Lutzomyia (Lutzomyia) sp. with Leishmania in endemic foci of cutaneous leishmaniasis in the Paria peninsula, state of Sucre, Venezuela. Sand flies were collected between March 2001 and June 2003, using Shannon light-traps and human bait. Of the 1291 insects captured, only two species of phlebotomines were identified: L. ovallesi (82.75 percent) and L. gomezi (17.42 percent). A sample of the collected sand flies (51 pools of 2-12 individuals) were analyzed by using a multiplex-PCR assay for simultaneous detection of New Word Leishmaniaand Viannia subgenera. The results showed a total of 8 pools (15.68 percent) infected; of these, 7 were L. ovallesi naturally infected with L. braziliensis (2 pools) and L. mexicana (5 pools) and 1 pool of L. gomezi infected by L. braziliensis.

Scorpion poisoning in the Acosta and Caripe Counties of Monagas State, Venezuela. Part 1: Characterization of some epidemiological aspects

Apresenta o perfil epidemiológico do escorpiäo nos municípios Acosta e Caripe, localizados na subregiäo geográfica do maciço montanhoso do Turimiquire do Estado de Monagas, Venezuela. Durante o período de 1987 a 1993, registrou-se um total de 298 acidentes causados por escorpiöes, correspondendo 212 ao município de Acosta e 86 ao de Caripe. Acosta apresentou um índice de incidência anual de 18,3 casos por 10.000 habitantes e 128 por cento para o período meio de estudo; o índice de escorpionismo foi 4,18 vezes maior que o apresentado em Caripe. Os dados indicam que o município de Acosta é hiperendêmico para este acidente, com um comportamento variável e uma tendência ao incremento ao longo dos anos. Os resultados obtidos evidenciam que estas regiöes do Estado de Monagas säo endêmicas para o acidente peçonhento causado por escorpiöes que assumem importância com problema de saúde pública, mais ainda quando säo de áreas de dispersäo do gênero Tityus.