Associação entre a homocisteína e os polimorfismos do gene da MTHFR em mulheres brasileiras obesas / Association between homocysteine and polymorphisms in MTHFR in Brazilian obese women

Fundamentos: Pesquisas nacionais brasileiras indicam aumento da obesidade e doenças cardiovasculares em mulheres. Objetivo: Determinar a frequência dos polimorfismos 677C>T e 1298A>C do gene da metilenotetra-hidrofolato redutase (MTHFR) em mulheres brasileiras obesas e avaliar sua associação com as concentrações séricas de homocisteína (Hcy),folato e cobalamina, no período após a fortificação das farinhas de trigo e milho com ácido fólico no Brasil. Métodos: Estudo transversal realizado no período de 2008 a 2009, com 133 mulheres obesas. Kits comerciais foramutilizados para realizar análises laboratoriais, incluindo mensuração de lipídeos e glicose por métodos enzimáticos; Hcy total e o folato plasmático, utilizando um imunoensaio competitivo; e cobalamina baseado em quimiluminescência. A genotipagem foi realizada por PCR, seguido por fragmento de restrição enzimática. Resultados: A média de idade dos participantes foi 39,0±4,4 anos e o índice de massa corporal, 32,5±2,1 kg/m². Distribuições dos genótipos encontradas: CC (47%), CT (44%) e TT (9%) para a posição 677 da MTHFR e AA (60%), AC (35%), e CC (5%) para a posição 1298. As concentrações de Hcy correlacionaram-se negativamente com a concentração de folato plasmático no grupo exibindo os genótipos 677CT, 1298AC ou 1298CC (r=0,554, p<0,01). Conclusão: Mulheres brasileiras obesas com genótipos 677TT estudadas apresentaram maiores concentrações de Hcy do que aquelas que apresentaram os genótipos 677CT e 677CC. Além disso, genótipos 1298CC mostraram associação com concentrações de Hcy maiores do que os genótipos 1298AC e 1298AA.

Background: Brazilian national surveys have indicated a rise in obesity and cardiovascular disease in women.Objective: To determine the frequency of 677C>T and 1298A>C polymorphisms in the methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene in obese Brazilian women and to assess the potential association of these polymorphisms with serum concentrations of homocysteine (Hcy), folate and cobalamin after fortification of wheat and corn flour with folic acid in Brazil. Methods: A cross-sectional study was conducted from 2008 to 2009 with 133 obese women. Commercial kits were employed to perform laboratory analyses including measurement of lipids and glucose using enzymatic methods, total Hcy and serum folate using a competitive immunoassay and cobalamin based on chemiluminescence. Genotyping was performed by PCR, followed by restriction fragment lengthpolymorphism analysis. Results: The average age of participants was 39.0±4.4 years and mean body mass index was 32.5±2.1kg/m². The distributions of the genotypeswere CC (47%), CT (44%), and TT (9%) for the position MTHFR 677 and AA (60%), AC (35%), and CC (5%) for the position 1298. Hcy levels correlated negatively with serum folate in the group displaying the 677CT, 1298AC, or 1298CC genotypes (r=-0.554, p<0.01). Conclusion: Our findings suggest that obese Brazilian women with genotypes 677TT have higher Hcy concentrations than those carrying the genotypes 677CT and 677CC. Additionally, genotypes 1298CC are associated with higher Hcy concentrations than genotypes 1298AC and 1298AA.

Aspectos bioéticos da reanimação neonatal: quando não iniciar x quando interromper / Bioethical Aspects of Neonatal Resuscitation - When Not to Initiate vs. When to Stop

Não iniciar ou interromper a reanimação para os recém-nascidos pré-termos extremos, para os recém-nascidos que apresentam graves malformações é um dos maiores dilemas para o neonatologista. A Bioética não faz distinção entre não iniciar e interromper as manobras de reanimação (interromper é moralmente o mesmo que não iniciar). Eticamente é mais aceitável retirar a terapia do que não iniciá-la, pois se a terapia não for iniciada, o paciente nunca se beneficiará dela. Para os recém-nascidos pré-termos extremos, a decisão de não iniciar a reanimação na sala de parto deve ser baseada no conhecimento do limite de viabilidade do serviço, assim como o grau de seqüelas presumíveis. Esforços devem ser continuamente buscados no sentido de melhorar a sobrevivência e, sobretudo, a qualidade de vida dos recém-nascidos pré-termos extremos. O envolvimento dos pais é importante para evitar conflitos na reanimação. A extensão contínua do suporte vai depender das condições e prognóstico do bebê, que devem ser discutidas de forma clara e exaustiva com a família e a decisão final deve ser obtida em conjunto.

Síndrome do X frágil: estudo caso-controle envolvendo pacientes pré e pós-puberais com diagnóstico confirmado por análise molecular / Fragile X syndrome confirmed by molecular analysis: a case-control study with pre and post-puberal patients

A síndrome do X frágil é a causa mais comum de retardo mental herdado; entretanto, é subdiagnosticada na populaçäo pediátrica. Objetivamos, neste estudo, determinar as características clínicas pré e pós-puberais mais significativas observadas entre indivíduos que apresentam a mutaçäo no gene FMR-1, e que possam ser utilizadas como método de triagem dos pacientes que devem ser submetidos à análise molecular. A partir de protocolo clínico-laboratorial, foram analisados 104 indivíduos (92 do gênero masculino e 12 do feminino) portadores de retardo mental idiopático. 17 pacientes (14 do gênero masculino) apresentaram a mutaçäo completa. História familiar de retardo mental e contato ocular pobre foram os achados que se mostraram associados, de forma estatisticamente significante (p<0,05), aos pacientes com a síndrome do X frágil em idade pré e pós-puberal. Os pacientes em idade pós-puberal também diferiram dos controles em relaçäo à presença de orelhas grandes, fronte proeminente e macroorquidismo

Sindrome do "X" frágil: diagnóstico molecular / Fragile \"X\" syndrome: molecular diagnosis

A sindrome do X frágil é a forma mais comum de retardo mental hereditário, associada a alteraçöes de comportamento e a dismorfismos faciais. A identificaçäo do mecanismo mutacional responsável pela síndrome, um aumento no número de repetiçöes de trinucleotídeos CGC localizados no primeiro exon do gene FMRI, possibilitou o desenvolvimento de testes para o diagnóstico molecular, por meio da análise direta do DNA, mais acurados e sensíveis, que têm substituido a análise do marcador citogenético (um sítio frágil em Xq27.3) como o procedimento de escolha para o diagnóstico da sindrome do X frágil. Esta doença é um dos primeiros exemplos de uma classe nova de desordens causadas por mutaçäo dinâmica. Devido à prevalência, ao subdiagnóstico e ao alto risco de recorrência desta síndrome, a análise molecular do gene FMRI é de grande importância para o diagnóstico preciso da doença e para o aconselhamento genético das famílias

Chromosome 6q deletion: report of a new case and review of the literature

Os autores descrevem um novo caso de monossomia parcial do braço longo do cromossomo 6[46,XY,del(6)(q22 qter)]. A ocorrência de retardo psicomotor severo é esperada em funçäo do paciente apresentar um dos maiores segmentos deletados além da banda 6q25.

Geleophysic dysplasia - Report on two sibs

Os autores descrevem dois novos casos de displasia Geleofísica em irmäos, uma doença autossômica recessiva rara do metabolismo de glicoproteínas cujo defeito básico ainda näo foi determinado.

Use of two multiplex (PCR) reactions as an initial delection screening method for DMD and BMD patients

O gene da distrofina, localizado em Xp21, é um loco gênico enorme, ocupando uma regiäo de mais de 2,3 Mb. Mutaçöes neste gene resultam na distrofia muscular Duchenne (DMD) ou distrofia muscular Becker (DMB). Cerca de 60% das mutaçöes säo deleçöes com um tamanho médio de 200 kb e säo detectáveis por análise de Southern blot usando sondas cDNA. Em 1988 Chamberlain et al. descreveram uma reaçäo multiplex para uma amplificaçäo simultânea de 9 exons do gene da distrofina, o que permitiu detectar cerca de 80% de todas as deleçöes. Recentemente Beggs et al. descreveram um conjunto adicional de primers para um teste multiplex de mais 9 exons. Usamos no Rio de Janeiro ambas as reaçöes multiplex no estudo de 27 pacientes DMD e 4 DMB. A síntese dos primers e o preparo dos kits foram realizados em Leiden. Com a reaçäo multiplex de Vhamberlain detectamos 10 deleçöes. A segunda reaçäo multiplex (Beggs) confirmou 7 dessas deleçöes e detectou mais 2 pacientes com deleçöes, uma para o exon 50 e outra para o exon 52. A análise Southern blot e a hibridizaçäo cDNA foram usadas para confirmar as deleçöes e determinar-lhes a extensäo. As sondas cDNA confirmaram as 12 deleçöes detectadas usando as duas reaçöes multiplex. Nossa experiência é a de que a abordagem multiplex para triagem inicial de deleçöes é um método bom e confiável

Screening for delections in Duchenne and Becker muscular dystrophy patients using the genomic probe P20 and the cDNA XJ10 (1-2b), 7b-8 and 44-1 (*) probes

Um estudo foi realizado com 20 pacientes com distrofia muscular Duchenne (DMD) e 4 com distrofia muscular Becker (BMD), com o objetivo de expor deleçöes e duplicaçöes na extremidade 5' do gene da distrofina com a sonda XJ10 (1-2b) e na regiäo central do gene com as sondas cDNA 7b-8 e 44-1 (8). Todas as 7 deleçöes e 1 duplicaçäo DMD da regiäo central do gene foram detectadas com a sonda 44-1 (8), enquanto as 2 deleçöes DMB foram melhor detectadas com a sonda 7b-8. A sonda genômica P20 serviu para delimitar proximalmente a extensäo destas deleçöes. A sonda XJ10 (1-2b) detectou 1 deleçäo e 1 duplicaçäo DMD. Deste modo, foram detectadas, por Southern, 12 alteraçöes genômicas num total de 24 pacientes (50%). Neste estudo o subsídio da PCR foi importante para confirmar a presença ou ausência de fragmentos de baixo peso molecular que se perderam em algumas corridas. Ficou confirmado que a sonda 8 (44-1) é ideal para detectar deleçöes DMD e a 7b-8 para detectar deleçöes DMD e DMB, já que a maioria das deleçöes DMB comprometem os exons 45 e 46, com ponto de quebra em P20, uma regiäo contida num imenso intron (44-45), de 170 kb. Um possível hotspot (XJ) foi observado nas duas unicas alteraçöes genômicas detectadas com a sonda XJ10 (intron 7-8)

Detection of carriers of Duchene muscular dystrophy gene using logistic discriminating analysis: creatine-kinase and pyruvate-kinase

Foram determinadas as atividades da creatino-cinase (CK) e da piruvato-cinase (PK) em 160 amostras de soro: 87 de mulheres normais e 73 de 30 portadoras certas do gene para a distrofia muscular Duchenne (DMD), da faixa etária de 19-54 anos. Todas as determinaçöes de CK e PK foram realizadas em alíquotas da mesma amostra de soro. Foi usada análise discriminante logística para determinar a eficácia de cada enzima isoladamente ou das duas em combinacäo na identificaçäo de portadoras do gene da DMD. A uma amostra de soro, com um certo nível de CK ou de PK, isoladamente ou em combinaçäo, é atribuída uma probabilidade de que, se tomada oa caso de um "pool" de soros de mulheres normais e portadoras, provenha de uma portadora. A CK e a PK, cada uma isoladamente, mostraram eficiências de detecçäo de 73 e 37% respectivamente. Quando as duas enzimas foram usadas em combinaçäo a eficácia foi também de 73%, mostrando, assim, que o uso combinado da CK com a PK näo melhora a detecçäo quando comparado com o uso da CK isoladamente. Quando os dois testes aplicados a 28 mäes de casos isolados, 13 foram detectadas pela CK isoladamente e foram as mesmas 13 mulheres detectadas pela combinaçäo da CK com a PK. A PK isoladamente detectou 4 mäes de casos isolados, das quais duas apenas foram detectadas pelo uso combinado da CK com a PK

Detection rates for Duchenne muscular dystrophy gene cariers using logistic discrimination: creatine-kinase and hemopexin

Foram determinados os níveis de creatino-cinase (CK) e de hemopexina ( H) em 117 amostras de soro: 59 de portadoras certas do gene da distrofia muscular Duchenne (DMD) e 58 de 30 mulheres adultas normais. Nosso objetivo foi determinar a eficácia de cada proteína isoladamente e das duas em combinaçäo na identificaçäo de portadoras do gene da DMD. Considerando as características de nossas duas amostras de mulheres quanto às medidas de CK e de YH, escolhemos o modelo logístico de análise discriminante como o mais adequado. A CK e a H, cada uma isoladamente, apresentaron 82 e 59%, respectivamente, de eficácia na detecçäo de heterozigotas para o gene da DMD, isto é houve 18 e 41% de erros de classificaçäo na identificaçäo de portadoras certas do gene da DMD quando estas duas proteínas foram consideradas separadamente. A combinaçäo da CK com a H mostrou uma eficácia de 88%, isto é, os erros de classificaçäo no grupo de heterozigotas para o gene da DMD foram reduzidos de 18 para 12%, mas esta diferença näo se mostrou estadisticamente significativa. Assim, a combinaçäo da CK com a H näo melhorou a detecçäo quando comparada com o uso da CK isoladamente