ABSTRACT
Abstract Tiliroside is a glycosidic flavonoid present in many plants species including Helicteres velutina K. Schum (Malvaceae sensu lato), commonly known in Brazil as "pitó". This molecule has been shown to have many biological activities, however no study has been carried out to investigate the toxicity of this substance. The present work aimed to evaluate the possible cellular toxicity in silico, in vitro and ex-vivo of the kaempferol-3-O-β-D-(6"-E-p-coumaroyl) glucopyranoside (tiliroside), through chemical structure analysis, toxicity assessment and predictive bioactive properties, using human samples for in vitro and ex-vivo tests. The in silico analysis suggests that tiliroside exhibited great absorption index when penetrating biological membranes. In addition, it also displayed considerable potential for cellular protection against free radicals, and anticarcinogenic, antioxidant, antineoplastic, anti-inflammatory, anti-hemorrhagic and antithrombotic activities. The assessment of the hemolytic and genotoxic effects of tiliroside showed low hemolysis rates in red blood cells and absence of cellular toxicity in the oral mucosa cells. The data obtained indicate that this molecule could be a promising therapeutic approach as a possible new drug with biotechnological potential.
Resumo O tilirosídeo é um flavonóide glicosídico presente em muitas espécies de plantas, incluindo Helicteres velutina K. Schum (Malvaceae sensu lato), conhecida no Brasil como "pitó". Esta molécula mostrou ter muitas atividades biológicas, porém nenhum estudo foi realizado para investigar a toxicidade dessa substância. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a possível toxicidade celular in silico, in vitro e ex-vivo do kaempferol-3-O-β-D- (6 "-Ep-coumaroil) glucopiranosídeo (tilirosídeo), por meio de análises de estrutura química, toxicidade avaliação e propriedades bioativas preditivas, utilizando amostras humanas para testes in vitro e ex-vivo. A análise in silico sugere que o tilirosídeo exibe bom índice de absorção para penetrar nas membranas biológicas. Além disso, apresentou considerável potencial de proteção celular contra os radicais livres e com atividades anticarcinogênica, antioxidante, antineoplásica, antiinflamatória, anti-hemorrágica e antitrombótica. A avaliação dos efeitos hemolíticos e genotóxicos do tilirosídeo mostrou baixas taxas de hemólise nas hemácias e ausência de toxicidade em células da mucosa oral. Os dados obtidos indicam que esta molécula pode possuir uma abordagem terapêutica promissora como uma possível nova droga com potencial biotecnológico.
Subject(s)
Humans , Plant Extracts , Kaempferols/toxicity , Flavonoids , Computer Simulation , BrazilABSTRACT
Tiliroside is a glycosidic flavonoid present in many plants species including Helicteres velutina K. Schum (Malvaceae sensu lato), commonly known in Brazil as "pitó". This molecule has been shown to have many biological activities, however no study has been carried out to investigate the toxicity of this substance. The present work aimed to evaluate the possible cellular toxicity in silico, in vitro and ex-vivo of the kaempferol-3-O-β-D-(6-E-p-coumaroyl) glucopyranoside (tiliroside), through chemical structure analysis, toxicity assessment and predictive bioactive properties, using human samples for in vitro and ex-vivo tests. The in silico analysis suggests that tiliroside exhibited great absorption index when penetrating biological membranes. In addition, it also displayed considerable potential for cellular protection against free radicals, and anticarcinogenic, antioxidant, antineoplastic, anti-inflammatory, anti-hemorrhagic and antithrombotic activities. The assessment of the hemolytic and genotoxic effects of tiliroside showed low hemolysis rates in red blood cells and absence of cellular toxicity in the oral mucosa cells. The data obtained indicate that this molecule could be a promising therapeutic approach as a possible new drug with biotechnological potential.
O tilirosídeo é um flavonóide glicosídico presente em muitas espécies de plantas, incluindo Helicteres velutina K. Schum (Malvaceae sensu lato), conhecida no Brasil como pitó. Esta molécula mostrou ter muitas atividades biológicas, porém nenhum estudo foi realizado para investigar a toxicidade dessa substância. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a possível toxicidade celular in silico, in vitro e ex-vivo do kaempferol-3-O-β-D- (6 -Ep-coumaroil) glucopiranosídeo (tilirosídeo), por meio de análises de estrutura química, toxicidade avaliação e propriedades bioativas preditivas, utilizando amostras humanas para testes in vitro e ex-vivo. A análise in silico sugere que o tilirosídeo exibe bom índice de absorção para penetrar nas membranas biológicas. Além disso, apresentou considerável potencial de proteção celular contra os radicais livres e com atividades anticarcinogênica, antioxidante, antineoplásica, antiinflamatória, anti-hemorrágica e antitrombótica. A avaliação dos efeitos hemolíticos e genotóxicos do tilirosídeo mostrou baixas taxas de hemólise nas hemácias e ausência de toxicidade em células da mucosa oral. Os dados obtidos indicam que esta molécula pode possuir uma abordagem terapêutica promissora como uma possível nova droga com potencial biotecnológico.
Subject(s)
Flavonoids/pharmacokinetics , Flavonoids/toxicity , Malvaceae , In Vitro TechniquesABSTRACT
Abstract Tiliroside is a glycosidic flavonoid present in many plants species including Helicteres velutina K. Schum (Malvaceae sensu lato), commonly known in Brazil as pitó. This molecule has been shown to have many biological activities, however no study has been carried out to investigate the toxicity of this substance. The present work aimed to evaluate the possible cellular toxicity in silico, in vitro and ex-vivo of the kaempferol-3-O--D-(6-E-p-coumaroyl) glucopyranoside (tiliroside), through chemical structure analysis, toxicity assessment and predictive bioactive properties, using human samples for in vitro and ex-vivo tests. The in silico analysis suggests that tiliroside exhibited great absorption index when penetrating biological membranes. In addition, it also displayed considerable potential for cellular protection against free radicals, and anticarcinogenic, antioxidant, antineoplastic, anti-inflammatory, anti-hemorrhagic and antithrombotic activities. The assessment of the hemolytic and genotoxic effects of tiliroside showed low hemolysis rates in red blood cells and absence of cellular toxicity in the oral mucosa cells. The data obtained indicate that this molecule could be a promising therapeutic approach as a possible new drug with biotechnological potential.
Resumo O tilirosídeo é um flavonóide glicosídico presente em muitas espécies de plantas, incluindo Helicteres velutina K. Schum (Malvaceae sensu lato), conhecida no Brasil como pitó. Esta molécula mostrou ter muitas atividades biológicas, porém nenhum estudo foi realizado para investigar a toxicidade dessa substância. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a possível toxicidade celular in silico, in vitro e ex-vivo do kaempferol-3-O--D- (6 -Ep-coumaroil) glucopiranosídeo (tilirosídeo), por meio de análises de estrutura química, toxicidade avaliação e propriedades bioativas preditivas, utilizando amostras humanas para testes in vitro e ex-vivo. A análise in silico sugere que o tilirosídeo exibe bom índice de absorção para penetrar nas membranas biológicas. Além disso, apresentou considerável potencial de proteção celular contra os radicais livres e com atividades anticarcinogênica, antioxidante, antineoplásica, antiinflamatória, anti-hemorrágica e antitrombótica. A avaliação dos efeitos hemolíticos e genotóxicos do tilirosídeo mostrou baixas taxas de hemólise nas hemácias e ausência de toxicidade em células da mucosa oral. Os dados obtidos indicam que esta molécula pode possuir uma abordagem terapêutica promissora como uma possível nova droga com potencial biotecnológico.
ABSTRACT
A hepatite E é uma zoonose emergente que afeta diversas espécies de mamíferos, inclusive o ser humano. É ocasionada por um vírus da espécie Orthohepevirus A que possui diversos genótipos e subgenótipos. No Brasil é descrito o genótipo HEV-3, cujo principal reservatório é o porco doméstico. Testes moleculares e sorológicos demonstram o HEV-3 em diferentes estados, tanto em animais quanto em humanos. No estado de São Paulo, existem diversos estudos sobre a epidemiologia da hepatite E em humanos, mas faltam informações sobre o HEV-3 em suínos. Assim, o objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência de HEV por meio da técnica de RT-PCR e posterior sequenciamento em um banco de amostras de fezes de suínos colhidas entre 2008 e 2009, na região metropolitana de Campinas. Das 89 amostras analisadas, foi possível detectar o HEV-3 em sete e, pela reconstrução filogenética, foram encontrados os subgenótipos HEV-3b, HEV-3h, e HEV-3j. Uma amostra disponível no GenBank, proveniente de São Paulo, que ainda não havia sido subgenotipada, foi agrupada ao HEV-3i. Os subgenótipos HEV-3j e HEV-3i ainda não tinham sido relatados no país. O estudo demonstra uma grande diversidade genética do HEV no estado de São Paulo e reforça o caráter zoonótico da HEV-3.(AU)
Subject(s)
Animals , Hepatitis E virus/genetics , Hepatitis E/epidemiology , Sus scrofa/virology , Phylogeny , Genetic Variation , Hepatitis E/veterinaryABSTRACT
Phytochemical studies of the species Pavonia glazioviana were performed. Quercetin, kaempferol, acacetin, and trimethoxylated flavonoid compounds (which present biological activity) were isolated. We aimed to evaluate the in silico, in vitro, and ex vivo toxicity of flavonoid 5,7-dihydroxy-3,8,4'-trimethoxy (Pg-1) obtained from P. glazioviana through chemical structure analyses, toxicity assessment, and predictive bioactive properties, using human samples in in vitro tests. In silico analysis suggested that Pg-1 presents a good absorption index for penetrating biological membranes (for oral bioavailability), while also suggesting potential antimutagenic, anticarcinogenic, antioxidant, antineoplastic, anti-inflammatory, anti-hemorrhagic, and apoptosis agonist bioactivities. Assessment of hemolytic and genotoxic effects revealed low hemolysis rates in red blood cells with no cellular toxicity in oral mucosa cells. The reduced cytotoxic activity suggested the safety of the concentrations used (500-1000 µg/mL), and demonstrated the varied interactions of Pg-1 with the analyzed cells. The data obtained in the present study suggested potential therapeutic application, and the non-toxic profile indicated viability for future studies.
Subject(s)
Humans , Flavonoids/pharmacology , Plant Extracts , Computer Simulation , Apoptosis , Antioxidants/pharmacologyABSTRACT
A febre maculosa brasileira (FMB), descrita inicialmente nos Estados Unidos como febre maculosa das Montanhas Rochosas, é uma antropozoonose relatada apenas no continente americano e causada pela bactéria Rickettsia rickettsii. No Brasil a transmissão ocorre sobretudo pela picada de carrapatos do gênero Amblyomma spp. A doença foi inicialmente descrita como de transmissão em áreas rurais e silvestres, no entanto áreas periurbanas e urbanas vêm apresentando casos, principalmente relacionados com a presença de humanos residindo em pequenos fragmentos de mata ciliar. O presente estudo teve por objetivo elucidar a dispersão da FMB nas proximidades dos reservatórios Guarapiranga e Billings, na cidade de São Paulo, SP. Para tanto, a presença de anticorpos anti-R. rickettsii, Rickettsia parkeri e Rickettsia bellii foi avaliada em cães atendidos nas campanhas de esterilização cirúrgica e residentes ao redor dos reservatórios. Foram coletadas amostras de 393 cães, e as amostras de soro foram analisadas pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), com ponto de corte de 1:64. Os títulos para R. rickettsii variaram de 256 a 4096, com positividade de 3,3% (13/393); para R. bellii, de 128 a 1024 e 4,1% (16/393) de positivos, e um único animal (0,25%) foi soropositivo para R. parkeri, com título de 128. Os achados permitem concluir que a região de estudo apresenta condições de se tornar uma possível área com casos de FMB, pois comporta fragmentação de Mata Atlântica, condições essas ideais para a manutenção do vetor do gênero Amblyomma já descrito na região, bem como para a presença da Rickettsia rickettsii circulante entre os cães, confirmada pela existência de anticorpos. Condutas referentes à conscientização da população por meio de trabalhos educacionais devem ser implantadas para a prevenção da doença na população da área.(AU)
Brazilian Spotted Fever (BSF), initially described in the United States as Rocky Mountain Spotted Fever, is an anthropozoonosis reported only in the Americas and caused by the bacterium Rickettsia rickettsii. In Brazil, transmission occurs mainly through tick bites of the genus Amblyomma spp. The disease was initially described as transmission of rural and wild areas; however, peri-urban and urban areas have been presenting cases, mainly related to the presence of humans residing in small fragments of riparian forest. The present study aimed to elucidate the dispersal of BSF near the Guarapiranga and Billings Reservoirs, in the city of São Paulo, SP. The presence of anti-R. rickettsii, Rickettsia parkeri and Rickettsia bellii antibodies were evaluated in dogs treated in surgical sterilization campaigns and residents around the Reservoirs. Samples were collected from 393 dogs and serum samples were analyzed by indirect immunofluorescence reaction (RIFI) with a cutoff of 1:64. The titles for R. rickettsii varied from 256 to 4096 with a positivity of 3.3% (13/393); for R. bellii from 128 to 1024 and 4.1% (16/393) of positive and a single animal (0.25%) was seropositive for R. parkeri with a titre of 128. The findings allow us to conclude that the study region has conditions to become a possible area with BSF cases, as it involves Atlantic Forest, ideal conditions for the maintenance of the vector of the genus Amblyomma already described in the region and the presence of circulating Rickettsia rickettsii among dogs, confirmed by the presence of antibodies. Conducts regarding the awareness of the population through educational work should be implemented to prevent the disease in the population of the area.(AU)
Subject(s)
Animals , Dogs , Rickettsia rickettsii/immunology , Rickettsia Infections/epidemiology , Amblyomma , Brazil/epidemiology , Fluorescent Antibody Technique, Indirect/veterinaryABSTRACT
Abstract Beauveria bassiana is a promising fungus for the biological control of insect pests. The growing costs of conidia production have raised the need to ascertain the efficiency of some low cost substrates. The aim of this study was to analyze the potential use of different raw substrates without nutritional supplement for B. bassiana conidiogenesis. Growth and sporulation were evaluated using 30 g of substrate and 0.3 μL of a conidia suspension (1 x 106 conidia/mL). After 10 days of incubation (70 ± 10% humidity and temperature (T) = 29 ± 1 °C), rice (2.00 x 106 conidia/g substrate), algaroba (2.36 x 106 conidia/g), malt A (1.22 x 106 conidia/g) and malt B (1.75 x 106 conidia/g) showed the highest levels of conidia production. The resulting conidia showed insecticidal activity higher than 80% on coconut termites. These new raw substrates may represent viable alternatives for the production of entomopathogenic fungi for use in the biological control of various insect pests.
Resumo Beauveria bassiana é um fungo promissor no controle biológico de insetos-praga. As crescentes despesas na produção de conídios levantam a necessidade de averiguar a eficiência de alguns substratos de baixo custo. O objetivo deste trabalho foi analisar o potencial de utilização de diferentes substratos brutos para a conidiogênese de B. bassiana. O crescimento e esporulação foram realizados utilizando 30 g do substrato e 0,3 µL da suspensão de conídios (1 x 106 conídios/mL). Após 10 dias de incubação (umidade 70 ± 10% e temperatura T = 29 ± 1° C), o arroz (2,00 x 106 conídios/g de substrato), algaroba (2,36 x 106 conídios/g), malte A (1,22 x 106 conídios/g) e B (1,75 x 106 conídios/g), apresentaram maior produção de conídios. Os conídios produzidos mostraram atividade inseticida sobre o cupim do coqueiro acima de 80% de mortalidade. Estes novos substratos brutos podem representar uma alternativa viável para produção de fungos entomopatogênicos para uso no controle biológico de vários insetos praga.
Subject(s)
Mitosporic Fungi , Beauveria , Spores, Fungal , Pest Control, Biological , HumidityABSTRACT
As águas do rio Tocantins têm sofrido descargas de dejetos tóxicos que ameaçam a biota aquática. Para tanto, a investigação das brânquias de peixes atua como biomonitoramento, visto que esses órgãos respondem por meio de adaptações a xenobióticos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a ocorrência de alterações morfológicas das espécies de Psectrogaster amazonica, Pimelodina flavipinnis e Pimelodus blochii. As coletas ocorreram nas estações chuvosa e seca. As brânquias de todos os espécimes coletados foram processadas de acordo com metodologia específica para protocolo de hematoxilina e eosina. As principais alterações histológicas observadas no período chuvoso foram: hiperplasia, destacamento do epitélio filamentar, fusão parcial e total das lamelas secundárias, congestão, aneurisma e encurtamento das lamelas respiratórias. Em relação ao período seco, as principais lesões observadas foram: ruptura do epitélio, aneurisma, hiperplasia e necrose. Considerando a diversidade ictiológica do rio Tocantins, o presente estudo propiciará o conhecimento da condição das brânquias, órgão imprescindível para a saúde do peixe, e consequentemente a compreensão das implicações sobre a qualidade das águas do rio Tocantins.(AU)
Subject(s)
Animals , Catfishes/anatomy & histology , Characiformes/anatomy & histology , Gills/anatomy & histology , Brazil , Fresh WaterABSTRACT
Abstract: Introduction: The objective of this study was to retrospectively compare imaging techniques with histopathological findings from bone biopsy. Material and methods: Imaging techniques such as X-Ray, CT scan and MRI where compared with the histopathological findings from bone biopsy, in a population of 64 patients with bone tumors, with 64.1% of males and an age range of 5 to 79 years. Results: Histologically, 39.1% were malignant bone tumors, while 60.9% were benign. The X-ray showed 90% of diagnostic accuracy, with sensitivity of 92.9%, specificity of 87.5%, positive predictive value of 86.7% and negative predictive value of 93.3%. CT scan presented 75.9% of diagnostic accuracy, with 84.6, 68.8, and 84.6% of sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value, respectively. The MRI documented a diagnostic accuracy of 95.1%, with 94.4% os sensitivity, 95.7% of specificity, 94.4% of positive predictive value and 95.7% for negative predictive value. This showed a great agreement between the histology findings and those within the X-Ray and MRI (K = 0.8 and 0.9, respectively), but doesn't depreciate the value of bone biopsy in diagnosis of bone tumors. Conclusion: This data showed good correlation between imagenological and histopatologic techniques.
Resumen: Introducción: El objetivo de este estudio fue comparar retrospectivamente las técnicas de imagen con los hallazgos histopatológicos de la biopsia ósea. Material y métodos: Las técnicas de diagnóstico por imágenes como rayos X, tomografía computarizada y resonancia magnética fueron comparadas con los hallazgos histopatológicos de la biopsia ósea, en una población de 64 pacientes con tumores óseos, con 64.1% de los varones y un rango de edad de cinco a 79 años. Resultados: Histológicamente, 39.1% eran tumores óseos malignos, mientras que 60.9% eran benignos. Los rayos X mostraron un 90% de precisión diagnóstica, con una sensibilidad de 92.9%, especificidad de 87.5%, valor predictivo positivo de 86.7% y un valor predictivo negativo de 93.3%. La tomografía computarizada presentó 75.9% de la precisión diagnóstica, con 84.6, 68.8, y 84.6% de sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y valor predictivo negativo, respectivamente. La resonancia magnética documentó una precisión diagnóstica de 95.1%, con 94.4% de sensibilidad, 95.7% de especificidad, 94.4% de valor predictivo positivo y 95.7% para valor predictivo negativo. Esto mostró un gran acuerdo entre los hallazgos de histología y los que están dentro de la radiografía y la RMN (K=0.8 y 0.9, respectivamente), pero no deprecia el valor de la biopsia ósea en el diagnóstico de tumores óseos. Conclusiones: Estos datos mostraron una buena correlación entre técnicas imagenológicas e histopatológicas.
Subject(s)
Humans , Male , Child, Preschool , Child , Adolescent , Adult , Aged , Young Adult , Bone Neoplasms , Magnetic Resonance Imaging , Tomography, X-Ray Computed , Retrospective Studies , Sensitivity and Specificity , Middle AgedABSTRACT
O presente relato descreve uma condição rara de intussuscepção uterina em uma cadela sem raça definida, quatro anos de idade, diagnosticada por meio de celiotomia exploratória e análise anatomopatológica. Foi realizada ovariossalpingo-histerectomia (OSH) como tratamento. Essa patologia geralmente requer manejo cirúrgico porque o diagnóstico inicial pode ser desafiador.(AU)
The present study describes a rare condition of uterine intussusception in a 4 year old crossbred female dog diagnosed by exploratory celiotomy and anatomopathological analysis. As treatment, a ovariohysterectomy (OH) was performed. This pathology usually requires surgical management because the initial diagnosis can be challenging.(AU)
Subject(s)
Animals , Female , Dogs , Uterus/surgery , Uterus/physiopathology , Intussusception/surgery , Intussusception/diagnosis , Intussusception/veterinaryABSTRACT
Klebsiella pneumoniae é um patógeno oportunista, responsável por diversos tipos de infecções nosocomiais, e é considerado um microrganismo multirresistente. Dados na literatura que forneçam informações a respeito da resistência desse microrganismo a antimicrobianos em amostras de animais são escassos. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil e o seu aumento das resistências a antimicrobianos dentro da medicina veterinária. Um total de 67 isolados de K. pneumoniae, provenientes de diferentes sítios de isolamento de animais domésticos (39/67) e silvestres (28/67), foi confirmado por sequenciamento do gene 16S rRNA. O maior percentual de isolamento de K. pneumoniae foi de amostras de urina, com 16% (11/67), fezes, com 15% (10/67), e pulmão, com 13,5% (09/67). No perfil de resistência, foram testadas 11 categorias de antibióticos, sendo a maior taxa de resistência ao metronidazol 97% (65/67), à ampicilina 94% (63/67), à amoxicilina 93% (62/67), às sulfonamidas 93% (62/67), à colistina 93% (62/67) e à nitrofurantoína 88% (59/67). Aqueles que apresentaram menor taxa de resistência foram: meropenem 3% (2/67), imipenem 6% (4/67) e amicacina 16% (11/67). Todos os isolados foram considerados bactérias multirresistentes (MRD), com o índice de resistência múltipla aos antibióticos (IRMA) variando de 0,15 a 0,85 e com 60 tipos de padrões de resistência. O resultado deste estudo reforça que os animais são reservatórios de K. pneumoniae multirresistentes.(AU)
Klebsiella pneumoniae is an opportunistic pathogen responsible for several types of nosocomial infections and is considered a multiresistant microorganism. Data in the literature that provide information regarding the resistance of this microorganism to antimicrobials in animal samples are scarce. Thus, the objective of this work was to evaluate the profile and its increase of antimicrobial resistance within Veterinary Medicine. A total of 67 K. pneumoniae isolates from different domestic (39/67) and wild (28/67) isolation sites were confirmed by sequencing the 16S rRNA gene. The highest percentage of K. pneumoniae isolation was from urine samples with 16% (11/67), faeces 15% (10/67) and lung 13.5% (09/67). In the resistance profile, 11 categories of antibiotics were tested, with the highest resistance to metronidazole being 97% (65/67), ampicillin 94% (63/67), amoxicillin 93% (62/67), sulfonamides 93% (62 / 67), 93% colistin (62/67), and 88% nitrofurantoin (59/67). The ones with the lowest resistance were: meropenem 3% (2/67), imipenem 6% (4/67) and amikacin 16% (11/67). All isolates were considered multiresistant bacteria (MDR), with the Multiple Resistance to Antibiotics Index (IRMA) ranging from 0.15 to 0.85 and with 60 types of resistance patterns. The result of this study reinforces that the animals are reservoirs of multiresistant K. pneumoniae.(AU)
Subject(s)
Animals , Drug Resistance, Bacterial , Klebsiella pneumoniae/isolation & purification , Animals, Domestic/microbiology , Animals, Wild/microbiologyABSTRACT
The aim of this study was to evaluate in vitro and in vivo the effect of sodium dodecyl sulfate (SDS) on the caprine lentivirus (CLV) in colostrum and milk. This was performed to develop a practical and efficient method of blocking the lactogenic transmission of the virus. In the in vitro experiment, colostrum and milk were treated with 0.25%; 0.50% and 1% SDS. Then, somatic cells of colostrum and milk were submitted to co-culture with caprine synovial membrane cells (CSM). In the in vivo test, goats were fed with colostrum and milk provided from CLV-positive goats treated with SDS in the same concentrations used in the in vitro experiment. Animals were tested by nested polymerase chain reaction (nPCR) and Western blot (WB) assays. In the in vitro experiment, inhibitory activity against CLV without inactivation occurred in colostrum with all SDS concentrations. However, concentrations of 0.25 and 0.5% SDS presented only inhibitory activity against CLV in milk cells, and 1% concentration provided inactivation of the virus. In the in vivo tests, none of the three concentrations of SDS was effective in inactivating LVC in colostrum or goat milk, which was confirmed by seroconversion and presence of proviral DNA in animals afterwards.(AU)
O objetivo da pesquisa foi avaliar in vitro e in vivo o efeito do dodecil sulfato de sódio (SDS) sobre o lentivírus caprino (LVC) no colostro e no leite, a fim de desenvolver um método prático e eficiente no bloqueio da via de transmissão lactogênica do vírus. No experimento in vitro, o colostro e o leite de cabras positivas foram tratados com SDS a 0,25%, 0,50% e 1,0%. Em seguida, as células somáticas do colostro e do leite foram obtidas e direcionadas ao cocultivo com células de membrana sinovial caprina (MSC). No teste in vivo, os cabritos foram alimentados com colostro e leite providos de cabras positivas para LVC, tratados com SDS nas mesmas concentrações usadas no teste in vitro. Os animais foram acompanhados pelos testes de reação em cadeia da polimerase nested (nPCR) e western blot (WB). Nos resultados in vitro, no colostro, observou-se que, em todas as concentrações de SDS, ocorreu uma atividade inibitória contra o LVC, sem a inativação. Em relação às células do leite, o SDS apresentou, nas concentrações de 0,25 e 0,5%, atividade inibitória contra o LVC, e na concentração de 1%, houve inativação viral. Nos testes in vivo, as três concentrações de SDS testadas não foram efetivas na inativação do LVC no colostro e no leite caprino, o que se comprovou pela soroconversão e pela presença de DNA proviral nos animais.(AU)
Subject(s)
Animals , Female , Pregnancy , Colostrum/chemistry , Lentiviruses, Ovine-Caprine , Sodium Dodecyl Sulfate/analysisABSTRACT
With the objective of detecting the presence of caprine lentivirus (CLV) in ewe milk and in ram semen, ten matrixes and four reproducers experimentally infected with CLV were used. Samples of ewe milk were collected during the four months of lactation, five collections per animal, totaling 50 samples. Regarding the rams, eight semen collections were made per animal, during one year of experimentation, totaling 32 samples. The milk and semen samples were submitted to DNA extraction and the nested polymerase chain reaction test (nPCR) to detect CLV proviral DNA. Eight (16%) of the milk samples were positive in nPCR originating from two ewes. Only one (3.12%) semen sample was positive. The amplification products were sequenced, and were confirmed to be a CLV genomic sequence. Thus, the presence of CLV proviral DNA in sheep milk and semen was demonstrated, confirming the feasibility of infection between species, and alerting to the risk of spreading infections.(AU)
Com o objetivo de detectar a presença do lentivírus caprino (LVC) no leite de ovelhas e no sêmen de carneiros, utilizaram-se 10 matrizes e quatro reprodutores infectados experimentalmente com o LVC. Foram coletadas amostras de leite das ovelhas durante os quatro meses de lactação, ocorrendo cinco coletas por animal, totalizando 50 amostras. Quanto aos carneiros, realizaram-se oito coletas de sêmen por animal, durante um ano de experimentação, totalizando 32 amostras. As amostras de leite e de sêmen foram submetidas à extração de DNA e à prova de reação em cadeia da polimerase do tipo nested (nPCR) visando à detecção de DNA proviral do LVC. Oito (16%) amostras de leite foram positivas na nPCR oriundas de duas ovelhas. Apenas uma (3,12%) amostra de sêmen apresentou positividade. Produtos da amplificação foram sequenciados, confirmando-se tratar de sequência genômica do LVC. Dessa forma, demonstrou-se a presença do DNA proviral do LVC em leite e sêmen de ovinos, confirmando a viabilidade da infecção entre espécies e, assim, alertando sobre o risco de que a infecção seja disseminada.(AU)
Subject(s)
Animals , Male , Female , Lentivirus/isolation & purification , Milk/virology , Ruminants/virology , Semen/virology , Disease Transmission, Infectious/veterinary , Polymerase Chain Reaction/veterinaryABSTRACT
Abstract Beauveria bassiana is a promising fungus for the biological control of insect pests. The growing costs of conidia production have raised the need to ascertain the efficiency of some low cost substrates. The aim of this study was to analyze the potential use of different raw substrates without nutritional supplement for B. bassiana conidiogenesis. Growth and sporulation were evaluated using 30 g of substrate and 0.3 L of a conidia suspension (1 x 106 conidia/mL). After 10 days of incubation (70 ± 10% humidity and temperature (T) = 29 ± 1 °C), rice (2.00 x 106 conidia/g substrate), algaroba (2.36 x 106 conidia/g), malt A (1.22 x 106 conidia/g) and malt B (1.75 x 106 conidia/g) showed the highest levels of conidia production. The resulting conidia showed insecticidal activity higher than 80% on coconut termites. These new raw substrates may represent viable alternatives for the production of entomopathogenic fungi for use in the biological control of various insect pests.
Resumo Beauveria bassiana é um fungo promissor no controle biológico de insetos-praga. As crescentes despesas na produção de conídios levantam a necessidade de averiguar a eficiência de alguns substratos de baixo custo. O objetivo deste trabalho foi analisar o potencial de utilização de diferentes substratos brutos para a conidiogênese de B. bassiana. O crescimento e esporulação foram realizados utilizando 30 g do substrato e 0,3 µL da suspensão de conídios (1 x 106 conídios/mL). Após 10 dias de incubação (umidade 70 ± 10% e temperatura T = 29 ± 1° C), o arroz (2,00 x 106 conídios/g de substrato), algaroba (2,36 x 106 conídios/g), malte A (1,22 x 106 conídios/g) e B (1,75 x 106 conídios/g), apresentaram maior produção de conídios. Os conídios produzidos mostraram atividade inseticida sobre o cupim do coqueiro acima de 80% de mortalidade. Estes novos substratos brutos podem representar uma alternativa viável para produção de fungos entomopatogênicos para uso no controle biológico de vários insetos praga.
ABSTRACT
This study aimed to isolate cells from the Wharton's jelly of umbilical cord (WJUC) of sheep collected during natural parturition using different culture media, in addition to reporting for the first time the permissiveness of these cells to in vitro infection by small ruminant lentiviruses. Ten umbilical cords were collected from healthy sheep. Each cord explants were grown in different media consisting of MEM, low glucose DMEM, M199, and RPMI-1640. The permissiveness of infection of sheep cells from WJUC was tested with CAEV-Cork and MVV-K1514 strains, inoculating 0.1 MOI of each viral strain. Four supernatants from each strain were obtained from WJUC sheep cell cultures infected in different media. The results demonstrated the presence of cytopathic effect after the in vitro infection by CAEV-Cork and MVV-K1514 with all of the tested culture media. Nested-PCR detected proviral DNA in all supernatants. Supernatants containing CAEV-Cork viruses had TCID 50/ml titres of 10 5.5 in MEM, 10 4.0 in low glucose DMEM, 105.0 in M199, and 10 5.7 in RPMI-1640. Supernatants containing the MVV-K1514 virus had TCID 50/ml titres of 10 4.3 in MEM, 10 3.5 in low-glucose DMEM, 10 4.7 in M199, and 10 3.5 in RPMI-1640. Sheep cells from WJUC are permissive to in vitro infection by small ruminant lentivirus.(AU)
O objetivo deste estudo foi isolar células da geleia de Wharton do cordão umbilical (GWCU) ovino coletado por ocasião do parto natural, utilizando-se diferentes meios de cultivo, além de relatar, pela primeira vez, sua permissividade à infecção in vitro por lentivírus de pequenos ruminantes (LVPRs). Dez cordões umbilicais foram coletados de ovelhas hígidas e soronegativas para LVPRs pelo teste de imunodifusão em gel de agarose (IDGA). De cada cordão, explantes foram cultivados em quatro meios distintos que consistiram em MEM, DMEM baixa glicose, meio 199 e RPMI-1640, todos acrescidos de 10% de soro fetal bovino em estufa com atmosfera úmida e 5% de CO2 a 37ºC. A permissividade de infecção das células GWCU ovino foi testada frente às cepas CAEV-Cork e MVV-K1514, inoculando-se 0,1 MOI de cada cepa viral e corando as monocamadas com May Grunwald Giemsa para visualização do efeito citopático. Foram obtidos quatro sobrenadantes CAEV-Cork e quatro MVV-K1514, provenientes do cultivo de células GWCU ovino infectadas por 21 dias em meios distintos, dos quais foram realizadas titulação em membrana sinovial caprina e extração do DNA pró-viral para realização de nested-PCR e eletroforese em gel de agarose a 2%. Os resultados demonstraram a presença de efeito citopático na infecção in vitro tanto por CAEV-Cork como por MVV-K1514 em todos os meios de cultivo, sendo visualizados sincícios e lise celular em microscópio invertido. A nested-PCR detectou o DNA pró-viral tanto do CAEV-Cork como do MVV-K1514 em todos os sobrenadantes. Os sobrenadantes contendo o vírus CAEV-Cork apresentaram títulos em TCID50/mL de 10 5,5 em MEM, 10 4,0 em DMEM baixa glicose, 10 5,0 em meio 199 e 10 5,7 em RPMI-1640. Os sobrenadantes contendo o vírus MVV-K1514 apresentaram título em TCID 50/mL de 10 4,3 em MEM, 10 3,5 em DMEM baixa glicose, 10 4,7 em meio 199 e 10 3,5 em RPMI-1640. Células GWCU ovino são permissivas à infecção in vitro pelos lentivírus de pequenos ruminantes CAEV-Cork e MVV-K1514.(AU)
Subject(s)
Animals , Arthritis-Encephalitis Virus, Caprine , In Vitro Techniques/veterinary , Mesenchymal Stem Cells/pathology , Ruminants , Infections/veterinary , Lentiviruses, Ovine-Caprine , Polymerase Chain Reaction/veterinaryABSTRACT
The semipalmated sandpiper Calidris pusilla and the spotted sandpiper Actitis macularia are long- and short-distance migrants, respectively. C. pusilla breeds in the sub-arctic and mid-arctic tundra of Canada and Alaska and winters on the north and east coasts of South America. A. macularia breeds in a broad distribution across most of North America from the treeline to the southern United States. It winters in the southern United States, and Central and South America. The autumn migration route of C. pusilla includes a non-stop flight over the Atlantic Ocean, whereas autumn route of A. macularia is largely over land. Because of this difference in their migratory paths and the visuo-spatial recognition tasks involved, we hypothesized that hippocampal volume and neuronal and glial numbers would differ between these two species. A. macularia did not differ from C. pusilla in the total number of hippocampal neurons, but the species had a larger hippocampal formation and more hippocampal microglia. It remains to be investigated whether these differences indicate interspecies differences or neural specializations associated with different strategies of orientation and navigation.
Subject(s)
Animals , Animal Migration , Charadriiformes/anatomy & histology , Hippocampus/anatomy & histology , Microglia/cytology , Neurons/cytology , Breeding , Charadriiformes/physiology , Hippocampus/cytology , Immunohistochemistry , Organ Size , Orientation , Photomicrography , Phylogeny , Species Specificity , Spatial Navigation/physiology , Telencephalon/anatomy & histologyABSTRACT
Local anesthetic efficacy of tramadol has been reported following intradermal application. Our aim was to investigate the effect of perineural tramadol as the sole analgesic in two pain models. Male Wistar rats (280-380 g; N = 5/group) were used in these experiments. A neurostimulation-guided sciatic nerve block was performed and 2 percent lidocaine or tramadol (1.25 and 5 mg) was perineurally injected in two different animal pain models. In the flinching behavior test, the number of flinches was evaluated and in the plantar incision model, mechanical and heat thresholds were measured. Motor effects of lidocaine and tramadol were quantified and a motor block score elaborated. Tramadol, 1.25 mg, completely blocked the first and reduced the second phase of the flinching behavior test. In the plantar incision model, tramadol (1.25 mg) increased both paw withdrawal latency in response to radiant heat (8.3 ± 1.1, 12.7 ± 1.8, 8.4 ± 0.8, and 11.1 ± 3.3 s) and mechanical threshold in response to von Frey filaments (459 ± 82.8, 447.5 ± 91.7, 320.1 ± 120, 126.43 ± 92.8 mN) at 5, 15, 30, and 60 min, respectively. Sham block or contralateral sciatic nerve block did not differ from perineural saline injection throughout the study in either model. The effect of tramadol was not antagonized by intraperitoneal naloxone. High dose tramadol (5 mg) blocked motor function as well as 2 percent lidocaine. In conclusion, tramadol blocks nociception and motor function in vivo similar to local anesthetics.
Subject(s)
Animals , Male , Rats , Analgesics, Opioid/administration & dosage , Nerve Block/methods , Pain Measurement/drug effects , Sciatic Nerve , Tramadol/administration & dosage , Behavior, Animal/drug effects , Disease Models, Animal , Dose-Response Relationship, Drug , Rats, WistarABSTRACT
A study was conducted to determine: the most appropriate proportion (1% or 10% v/v) of a phosphate solution (PS), containing 39mg/mL phosphorus, to be added to pasteurized human milk (HM) or commercial premature formula (FM); the final osmolality of such products, and whether precipitation occurs between calcium (Ca) and phosphorus (P) when commercial fortifier (FOR) or PS is added. A significant increase was observed in the concentrations of Ca in the samples of HM and FM containing FOR and a decrease in the samples of HM containing 10% (v/v) PS. The phosphorus levels increased significantly, in both HM and FM, when FOR or PS (1 and 10%) were added. Osmolality showed a significant increase in the solutions of HM with FOR or 10% PS added, and in the solution of FM containing 10% PS. Qualitative analysis of the precipitate formed on addition of 10% PS to FM revealed that it consisted of dicalcium phosphate. It was concluded that the addition of 10% PS to FM causes a fall in the Ca content, due to its precipitation with phosphate, promoting a reduction in the availability of both ions. On the other hand, the addition of 1% PS was demonstrated to cause no alteration in the Ca concentration, but a significant increase in P. These results suggest that the use of 1% PS is a potential means of supplementation of P after these patients are discharged.
Foi realizado um estudo para verificar: a concentração, 1 ou 10% (v/v), mais apropriada de solução de fósforo (SP), para ser adicionada nos produtos lácteos; a osmolalidade final de tais produtos suplementados; a ocorrência de precipitação entre o cálcio (Ca) e o fósfforo (P) com a adição de um fortificante comercial (FOR) ou SP. Verificou-se aumento significante nas concentrações de Ca nas amostras de leite materno pasteurizado (LM) e fórmula comercial (FL) contendo FOR e diminuição nas amostras de FL contendo 10% (v/v) de SP. Quanto aos níveis de fósforo, houve aumento significante tanto no LM quanto na FL, adicionados de FOR ou SP a 1 e 10%. Em relação à osmolalidade, houve aumento significante nas soluções de LM contendo FOR e de SP a 10% e na solução de FL a 10% de SP. A análise qualitativa do precipitado formado pela adição de 10% SP na FL revelou que o mesmo é constituído de fosfato bicálcico. Concluiu-se que a adição de SP na concentração de 10% em FL acarreta diminuição do Ca devido à precipitação do mesmo com o P, promovendo uma baixa na oferta de ambos os íons para o prematuro. Por outro lado, a adição de SP a 1% demonstrou que não houve diminuição dos níveis de Ca, mas aumento significante nos níveis de P. Estes resultados sugerem que o uso da SP a 1% é uma alternativa de suplementação de fósforo na alta hospitalar destes pacientes.
Subject(s)
Calcium , Infant, Premature , Milk, Human , PhosphorusABSTRACT
Foram caracterizados geneticamente, utilizando-se cinco locos de microssatélites, 235 indivíduos de seis plantéis de tilápia (Ceará, Chitralada, Israel, Nilótica, Taiwan e Vermelha) da região Sudeste do Brasil. Verificou-se diferença genética entre os seis plantéis, obtida pelo cálculo do índice de fixação de alelos (Fst=0,3263). De modo geral, está ocorrendo perda de heterozigose nos plantéis, segundo mostrou a estimativa do coeficiente de endogamia intrapopulacional (Fis=0,0486). Os plantéis Israel e Nilótica foram os mais semelhantes geneticamente (Ig=0,6663). Os plantéis Chitralada e Taiwan foram os que menos apresentaram genes em comum (Ig=0,2463). O plantel denominado Vermelha foi o mais distinto entre todos.
Two hundred and thirty five individuals from six commercial stocks of tilapias (Ceará, Chitralada, Israel, Nilótica, Taiwan and Red) from the Southeastern region of the country were genetically characterized using five microsatellite loci. The results suggest large genetic difference among the stocks, estimated through the fixation allele index (Fst = 0.3263), and a considerable loss of heterozigosity accurs in most of the stocks, according to the population inbreeding coefficient (Fis=0.0486). The Israel and Nilótica stocks were genetically similar (Ig=0.6663), while Chitralada and Taiwan showed less genes in common (Ig=0.2463). The Red stock was the most distinct stock.