Evaluation of Strongyloides stercoralis infection in patients with HTLV-1 / Evaluación de la infestación por Strongyloides stercoralis en pacientes con HTLV-1

Introduction: Individuals infected with the human T-lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) may present severe and disseminated forms of Strongyloides stercoralis infection with low therapeutic response. Objective: To investigate the S. stercoralis infection and the seroprevalence of IgG anti-S. stercoralis antibodies in individuals infected with HTLV-1 attending the Reference Center for HTLV-1 (CHTLV) in Salvador, Bahia, Brazil. Materials and methods: We conducted a cross-sectional study in 178 HTLV-1-infected individuals treated at the HTLV specialized center between January, 2014, and December, 2018. The parasitological diagnosis of S. stercoralis was performed using the Hoffman, Pons and Janer, agar plate culture, and Baermann-Morais methods. The IgG anti-S. stercoralis detection was performed using an in house enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The HTLV-1 infection was diagnosed using a commercial ELISA and confirmed by Western blot. Results: The frequency of S. stercoralis infection was 3.4% (6/178). Individuals infected with S . stercoralis from rural areas (50.0%; 3/6) also showed S. stercoralis hyperinfection (>3,000 larvae/gram of feces). The frequency of circulating anti-S. stercoralis IgG antibodies was 20.8% (37/178). Conclusions: HTLV-1-infected people living in precarious sanitary conditions are more prone to develop severe forms of S. stercoralis infection. Considering the high susceptibility and unfavorable outcome of the infection in these individuals, the serological diagnosis for S. stercoralis should be considered when providing treatment.

Introducción. Los individuos infectados por el virus linfotrópico T humano tipo 1 (HTLV-1) pueden presentar formas graves y diseminadas de infestación por Strongyloides stercoralis con poca mejoría terapéutica. Objetivo. Investigar la infestación por S. stercoralis y la seroprevalencia de IgG anti-S. stercoralis en individuos infectados por HTLV-1 atendidos en el Centro de Referencia para HTLV-1 (CHTLV), en Salvador, Bahía, Brasil. Materiales y métodos. Se hizo un estudio transversal con 178 individuos infectados por HTLV-1 atendidos en el centro especializado de HTLV entre enero de 2014 y diciembre de 2018. El diagnóstico parasitológico de S. stercoralis se hizo mediante los métodos de Hoffman, Pons y Janer, cultivo en placa de agar y Baermann-Morais. Para la detección de IgG anti-S. stercoralis, se utilizó una prueba casera de inmunoabsorción ligada a enzimas (ELISA). La infección por HTLV-1 se diagnosticó usando un ELISA comercial y se confirmó mediante Western blot. Resultados. La frecuencia de infestación por S. stercoralis fue del 3,4 % (6/178). Además, los individuos infestados por S. stercoralis provenientes de la zona rural (50,0 %; 3/6) también mostraron hiperinfestación por S. stercoralis (>3.000 larvas/gramo de heces). La frecuencia de anticuerpos IgG anti-S. stercoralis fue del 20,8 % (37/178). Conclusiones. Las personas infectadas por HTLV-1 que viven en condiciones sanitarias precarias son más propensas a desarrollar formas graves de infestación por S. stercoralis. Teniendo en cuenta la gran vulnerabilidad y el resultado desfavorable de la infección en estos individuos, se debe considerar el diagnóstico serológico de S. stercoralis para administrar el tratamiento

Cryptosporidium diagnosis in different groups of children and characterization of parasite species

ABSTRACT Background: Microscopy and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) are routinely used for Cryptosporidium diagnosis, without differentiating the parasite species. Methods: Children's feces were analyzed by modified Ziehl-Neelsen (mZN) and ELISA for Cryptosporidium diagnosis and by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism for species identification. Results: Cryptosporidium frequency was 2.6%. The sensitivity and specificity of ELISA were 85.7% and 99.7%, respectively, with excellent concordance with mZN (kappa=0.854). Parasite species were characterized as Cryptosporidium hominis (78.3%), Cryptosporidium felis (17.4%), and Cryptosporidium parvum (4.3%). Conclusions: Coproantigen ELISA is as efficient as mZN for Cryptosporidium diagnosis. Cryptosporidium genotyping suggests anthroponotic and zoonotic transmission to children.

Perfil epidemiológico das parasitoses intestinais em moradores de uma comunidade da Ilha de Boipeba, Bahia, Brasil / Epidemiological profile of intestinal parasites in residents of a community on the island of Boipeba, Bahia, Brazil

Introdução: as parasitoses intestinais constituem-se um importante problema de saúde pública mundial. Estas infecções são mais prevalentes em regiões tropicais impactando na morbimortalidade e aumento nos custos para o sistema de saúde. Objetivo: avaliar a prevalência das enteroparasitoses e sua associação com as condições socioeconômicas, sanitárias, ambientais e hábitos de vida em uma comunidade costeira do Nordeste brasileiro. Metodologia: estudo epidemiológico, descritivo e transversal, realizado de modo não probabilístico entre março a junho de 2017, com 105 moradores da Ilha de Boipeba, localizada no Sul da Bahia. O exame parasitológico de fezes foi realizado pelos métodos de sedimentação espontânea, Baermann-Moraes e FAUST. Um questionário foi aplicado para avaliar o perfil sociodemográfico da população. Resultados: do total de indivíduos avaliados, 52,4% eram do sexo feminino e 57,1% tinham entre 15 a 59 anos. Todos os indivíduos possuíam água encanada, porém não tratada, enquanto 91,4% referiu ingerir vegetais crus e 45,7% não higienizavam as mãos antes as refeições. Sintomas gastrointestinais foram relatados em 82,8% dos indivíduos e infecções enteroparasitárias foram diagnosticadas em 69,6%. Os parasitos mais frequentemente encontrados foram Ancilostomídeo (18,1%) e Entamoeba coli (43,8%). O principal fator de risco potencial para contrair a infecção por ancilostomídeos foi a não existência de poço artesiano na residência (RP=4,35), enquanto para Trichuris trichiura foi não dispor de pia no banheiro (RP=3,82). Conclusão: a comunidade analisada apresentou elevada prevalência de enteroparasitoses. Os hábitos precários de higiene e de acesso à água tratada, associados às condições ambientais e climáticas do local, podem ter contribuído para a elevada transmissão de geohelmintos observada.

Introduction: Intestinal parasitic infections are an important public health problem worldwide. They are more prevalent in tropical regions impacting in morbidity and mortality and costs for the health system. Objective: To evaluate the prevalence of enteroparasitosis and its association with socioeconomic, sanitary and environmental conditions and lifestyle habits in a coastal community in the Northeast Brazil. Methodology: This is an epidemiological, descriptive and cross-sectional study, carried out in a non-probabilistic manner between March and June 2017, with 105 residents of Boipeba Island in the Southern Bahia. The parasitological examination of feces was carried out by the methods of spontaneous sedimentation, Baermann-Moraes and FAUST. A questionnaire was applied to assess the sociodemographic profile of the population. Results: Of the total of individuals evaluated, 52.4% were female and 57.1% were between 15 and 59 years old. All individuals had piped, but untreated water, while 91.4% reported eating raw vegetables and 45.7% did not wash their hands before meals. Gastrointestinal symptoms were observed in 82.8% individuals and 69.6% were diagnosed with enteroparasitic infections. The most frequent parasites were the hookworm (18.1%) and Entamoeba coli (43.8%). The main potential risk factor for hookworm infection was the non-existence of an artesian well in the residence (PR=4.35) and Trichuris trichiura it was not having a sink in the toilet (PR=3.82). Conclusion: The analyzed community has a high prevalence of enteroparasitosis, in addition to environmental and climatic conditions that contribute to the transmission of these infections.

Predominance of Giardia duodenalis AII sub-assemblage in young children from Salvador, Bahia, Brazil / Predominio del subconjunto AII de Giardia duodenalis en niños pequeños de Salvador, Bahía, Brasil

Introduction. Giardia duodenalis is an intestinal protozoan with a high prevalence in children of developing countries. Molecular studies revealed a great genetic diversity of G. duodenalis, with assemblages A and B found mainly in humans. Despite its importance, the information on the molecular epidemiology of human giardiasis is still limited in Brazil. Objective. To characterize G. duodenalis molecular isolates in children from Salvador, Bahia, Brazil. Materials and methods. Giardia duodenalis positive fecal samples were obtained from 71 children from two day care centers and 39 users of a clinical analysis laboratory. Samples were analyzed by PCR-RFLP of the glutamate dehydrogenase (gdh) and beta-giardin genes and by the sequencing of beta-giardin. Results. Of the 110 G. duodenalis samples, 80 (72.7%) amplified one or both target genes. Of these, 62 (77.5 %) were identified as assemblage A and 18 (22.5%) as assemblage B. The subassemblage AII was identified in 58.8% (n=47) of isolates followed by the sub-assemblage AI (18.8%, n=15), BIV (11.2%, n=9), and BIII (5.0%, n=4). The AII sub-assemblage was the most frequent in children of both day care centers whereas AI was found only in the group attended at the clinical laboratory. Sub-assemblage AII predominated in children under two years. Conclusions. The higher frequency of AII sub-assemblage suggests that anthroponotic transmission is more common in Salvador, but that zoonotic transmission pathways are also present and a change in susceptibility to different molecular patterns of Giardia may occur during child growth.

Introducción. Giardia duodenalis es un protozoo intestinal de gran prevalencia en los niños de los países en desarrollo. En estudios moleculares se ha evidenciado la gran diversidad genética de G. duodenalis y se han identificado los conjuntos A y B, principalmente en humanos. A pesar de su importancia, el conocimiento de la epidemiología molecular de la giardiasis humana aún es limitado en Brasil. Objetivo. Caracterizar los aislamientos moleculares de G. duodenalis de muestras tomadas a niños de Salvador, Bahía, Brasil. Materiales y métodos. Las muestras fecales positivas para G. duodenalis se obtuvieron de 71 niños de dos guarderías y de 39 usuarios de un laboratorio de análisis clínicos. Las muestras se analizaron mediante PCR-RFLP de los genes gdh y beta-giardin, y secuenciación de beta-giardin. Resultados. De las 110 muestras de G. duodenalis, en 80 (72,7 %) se amplificaron uno o ambos genes. De estos, 62 (77,5 %) se identificaron como pertenecientes al conjunto A y 18 (22,5 %) al B. El subconjunto AII se identificó en el 58,8 % (n=47) de los aislamientos, seguido del AI en el 18,8% (n=15), el BIV en el 11,2% (n=9) y el BIII en el 5,0% (n=4). El subconjunto AII fue el más frecuente en los niños de ambas guarderías, en tanto que el AI solo se encontró en el grupo atendido en el laboratorio clínico. El subconjunto AII predominó en los niños menores de dos años. Conclusiones. La mayor frecuencia del subconjunto AII sugiere que la transmisión antroponótica es más común en Salvador, pero también existen vías de transmisión zoonóticas, y que pueden ocurrir cambios en la sensibilidad frente a diferentes patrones moleculares de Giardia durante el crecimiento infantil.

Relação entre genótipo e insuficiência pancreática em crianças e adolescentes com fibrose cística de um centro de referência no Brasil / Relationship between genotype and pancreatic insufficiency in children and adolescents with cystic fibrosis in a referral center in Brazil

Introdução: fibrose cística (FC) é uma doença genética que culmina em alterações na proteína transmembrana CFTR, resultando na produção de muco mais espesso em diversos órgãos, destacando-se os tratos respiratório e digestório. A insuficiência pancreática (IP) acomete até 95% dos pacientes com FC. Objetivos: determinar a frequência de IP através da dosagem de elastase fecal-1 (EF-1) e compará-la com o genótipo de pacientes com FC assistidos em um centro de referência. Metodologia: foi realizado um estudo transversal, incluindo-se pacientes com FC de 0 a 20 anos. Após a inclusão dos sujeitos à pesquisa, foi realizada consulta ao prontuário para a obtenção de dados clinicos e demograficos e amostras de fezes foram obtidas para dosagem da (EF-1). Os pacientes foram submetidos à análise molecular das mutações por métodos convencionais, através da extração do DNA em sangue periférico. Quando duas mutações patológicas não foram identificadas, o sequenciamento de nova geração com utilização da plataforma Illumina HiSeq foi realizado em amostras da mucosa oral. Resultados: foram incluídos 31 pacientes, 17 (54,8%) do sexo feminino, mediana de idade de 10 anos, e apenas um paciente foi classificado como branco. Vinte e dois (70,9%) pacientes apresentaram dosagem de EF-1 inferior a 200 µg/g, compatível com o diagnóstico de IP. Destes, 21 (95,4%) apresentaram dosagem de EF-1 menor ou igual a 15µg/g, caracteristica de IP grave. Todos os pacientes com IP apresentavam duas mutações de classes I a III. Conclusão: a IP foi identificada em 70% dos pacientes, ocorrendo em todos os pacientes com duas mutações de classe I-III.

Introduction: cystic fibrosis (CF) is a genetic disease that culminates in alterations in the CFTR transmembrane protein, resulting in the production of thicker mucus in various organs, especially the respiratory and digestive tract. Pancreatic insufficiency (PI) affects up to 95% of CF patients. Objectives: To determine the frequency of PI by measuring fecal elastase-1 (FE-1) and comparing it with the genotype of CF patients assisted at a referral Center. Methodology: a cross-sectional study was conducted, including patients with CF from 0 to 20 years. After the inclusion of the subjects to the research, medical records were consulted to obtain clinical and demographic data and stool samples were obtained for the measurement of (FE-1). Patients were submitted to molecular analysis of mutations by conventional methods by DNA extraction in peripheral blood. When two pathological mutations were not identified, next-generation sequencing using the Illumina HiSeq platform was performed on oral mucosa samples. Results: thirty one patients were included, 17 (54.8%) female, median age 10 years, and only one patient was classified as white. Twenty-two (70.9%) patients had an FE-1 dosage of less than 200 µg / g, compatible with the diagnosis of pancreatic insufficiency (PI). Of these, 21 (95,4%) had an EF-1 dosage less than or equal to 15µg / g, characteristic of severe PI. All patients with two mutations class I to III were PI. Conclusion: PI was identified in 70% of patients, occurring in all patients with class I-III mutations.

Enteroparasitoses e aspectos socioeconômicos em pacientes alcoolistas / Intestinal parasites and socioeconomic aspects of alcoholic patients

Introdução: as enteroparasitoses constituem um problema de saúde pública que atinge as populações mais vulneráveis. O alcoolismo é um problema que afeta milhões de pessoas em todo o mundo, apresenta efeitos nocivos à saúde dos indivíduos e predispõe à infecção por S. stercoralis e às formas mais graves da estrongiloidíase. Objetivo: avaliar a prevalência da infecção das enteroparasitoses, bem como fatores socioeconômicos e sanitários de pacientes alcoolistas atendidos em um centro de tratamento especializado em Salvador, Bahia. Metodologia: trata-se de um estudo transversal, realizado com pacientes alcoolistas (n=277), do sexo masculino, atendidos em um centro de tratamento entre julho de 2014 e junho de 2017. O estudo foi realizado através da aplicação de um questionário estruturado para obtenção de dados socioeconômicos, demográficos e sanitários, sendo solicitadas, ainda, pelo menos duas amostras de fezes em dias alternados. O diagnóstico parasitológico foi realizado pelos métodos de sedimentação espontânea, Baermann-Moraes e cultura em placa de ágar. Resultados: a média de idade dos pacientes inclusos foi de 44,8 ± 9,5 anos. Verificouse que 35,7% dos pacientes estavam infectados com algum enteroparasito e, desses, 30,3% eram monoparasitados. Os parasitos mais frequentes foram S. stercoralis, Endolimax nana e ancilostomídeos, correspondendo 16,6%, 11,2% e 5,8%, respectivamente. Conclusão: dessa forma, S. stercoralis foi o parasito mais frequente, e a associação entre a infecção por esse parasito e o alcoolismo pode levar à estrongiloidíase grave. A elevada frequência de enteroparasitoses nesses pacientes, principalmente por protozoários, deve-se à ausência de higiene pessoal, pois esses indivíduos são suscetíveis à infecção oral fecal. A implementação de medidas de saneamento básico e de campanhas de conscientização para prevenção de infecções parasitárias é imprescindível para a saúde das populações mais vulneráveis.

Introduction: intestinal parasitoses are a public health issue that notably affects vulnerable populations. Alcoholism is a problem that affects millions worldwide by causing damaging effects to the health of individuals as it predisposes them to that infection through stercralisàs and more evolved forms of strongyloidiasis. Objective: evaluate the prevalence of intestinal parasite infections as well as socioeconomic and sanitation factors in a population of alcoholic patients at a specialized treatment facility in Salvador, Bahia. Methodology: this cross-sectional study was carried out with male alcoholic patients (n=277) at a treatment facility from July/2014 to June/2017. The research data were collected through a structured questionnaire aimed to obtain socioeconomic, demographic and sanitation information. Stool tests were ordered in alternate days. The parasitological diagnosis was based on methods of spontaneous sedimentation, Baermann-Moraes and Agar plate growth medium. Results: the patients' average age was 44,8 ± 9,5 years. A total of 35% of the patients was infected with a type of enteroparasite, of whom 30,3% was mono-infected. The most commonly found parasites were S. stercoralis, Endolimax nana and hookworm, corresponding to 16,6%, 11,2% e 5,8%, respectively. Conclusion: as such, S. Stercoralis was the most frequent parasite in this population and the association between the infection by this parasite and alcoholism may lead to severe strongyloidiasis. The high rates of enteroparasitism in those patients, particularly protozoa, are due to the lack of adequate personal hygiene, given those individuals are prone to acquire infections transmitted through the oral fecal route. An implementation of public health sanitation measures and the launch of public awareness campaigns in order to prevent parasite infections are vital to the health of vulnerable populations.

Ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em caprinos do semiárido baiano / Occurrence of antibodies to Toxoplasma gondii in the Bahia semi-arid goats

Este trabalho teve como objetivo avaliar a frequência de anticorpos IgG específicos contra Toxoplasma gondii em caprinos pertencentes a algumas cidades do semiárido baiano, através do ELISA (ensaio imunoadsorvente ligado à enzima) indireto. Primeiramente, foi realizado um estudo piloto com 49 caprinos para comparar os resultados do ELISA com a RIFI (reação de imunofluorescência indireta) para detecção de anticorpos séricos contra T. gondii. Foram observados 30,6% (15/49) de soropositivos pelo ELISA, enquanto pela RIFI houve 40,8% (20/49) de caprinos reagentes. Desta maneira, o ELISA apresentou 70% de sensibilidade e 96,5% de especificidade. Em seguida, foram analisadas amostras de soros de caprinos provenientes das cidades de Casa Nova, Curaçá, Jaguarari, Juazeiro, Sento Sé e Uauá. Dentre os 375 animais avaliados, 25,1% apresentaram títulos de IgG positivos no ELISA para T. gondii. As fêmeas tiveram um risco 1,236 vezes maior de serem soropositivas em relação aos machos. Não houve relação entre idade e presença de anticorpos anti-T. gondii nestes animais. A cidade com maior número de caprinos soropositivos foi Sento Sé, com 46,4% (39/84) e a menor frequência foi observada em Juazeiro, com 3,6% (2/55). Os resultados deste estudo confirmam que a infecção pelo T. gondii é comum em caprinos brasileiros do estado da Bahia, inclusive na região de clima semiárido, considerada mais desfavorável à transmissão

The objective of this study was to evaluate the frequency of specific IgG antibodies against Toxoplasma gondii in goats belonging to some cities of Semi-Arid region of Bahia, by indirect ELISA (enzyme linked immunonosorbent assay). First, a pilot study was conducted with 49 goats to compare results from ELISA with those obtained by IFAT (indirect fluorescent antibody test) to detect serum antibodies against T. gondii. It was observed 30.6% (15/49) of seropositive by ELISA, while the IFAT showed 40.8% (20/49) reagents goats. Thus, ELISA showed 70% sensitivity and 96.5% specificity. Then, sera samples of goats from the cities Casa Nova, Curaçá, Jaguarari, Juazeiro, Sento Sé and Uauá were analyzed. Among the 375 evaluated animals, 25.1% had positive IgG titers in ELISA for T. gondii. Females have a 1.236 times higher risk of being seropositive compared to males. There was no correlation between age and the presence of anti-T. gondii antibodies in these animals. The city with the biggest number of seropositive goats was Sento Sé, with 46.4% (39/84) and the lowest rate was observed in Juazeiro, with 3.6% (2/55). The results of this study confirm that T. gondii infection is common in goats from the semi-arid climate region of Bahia, which is considered adverse for transmission

Human infection by Trichostrongylus spp. in residents of urban areas of Salvador city, Bahia, Brazil / Infección humana por Trichostrongylus spp. en residentes de zonas urbanas de la ciudad de Salvador, Bahia, Brasil

Introduction: Nematodes of Trichostrongylus genus are mainly parasites of herbivores, although sporadic human infections have been reported in many countries. Objective: To describe the frequency and seasonality of Trichostrongylus spp. infection in individuals attended at a public clinical laboratory. Materials and methods: Fecal samples of 9,283 individuals were evaluated by spontaneous sedimentation (Lutz) in the Parasitology Laboratory of the Pharmacy College, Federal University of Bahia, Brazil, from January of 2006 to May of 2008. The positive samples for either Trichostrongylus spp. or hookworms were further examined to evaluate the morphometry of nematode eggs. Results: One-hundred and ten patients (1.2%) were confirmed to be infected by Trichostrongylus spp. The positive cases were significantly more frequent in females (1.6%; p <0.05), with higher distribution in the age group between 11-20 years (1.9%), compared to those aged 51-60 (0.8%) and older than 60 years (0.9%)( p <0.05), independent of gender. Trichostrongylus spp. infections were more common from March to May (40 cases) and showed a homogeneous distribution over the other periods of the year (21-25 cases). The hematological analyses of 60 Trichostrongylus -infected patients showed normal levels of eosinophils in most of the positive cases. Conclusions: The data reveal that the occurrence of infection by Trichostrongylus spp. in residents of Salvador is more frequent than those reported in other urban regions and that it is essential to distinguish the parasite from other nematodes in routine parasitological examination.

Introducción. Los nematodos del género Trichostrongylus son parásitos principalmente herbívoros, aunque se hayan descrito en muchos países infecciones humanas esporádicas. Objetivo. Describir la frecuencia y estacionalidad de la infección por Trichostrongylus spp. en individuos atendidos en un laboratorio clínico público. Materiales y métodos. Las muestras fecales de 9.283 individuos fueron analizadas mediante sedimentación espontánea (Lutz) en el Laboratorio de Parasitología de la Facultad de Farmacia de la Universidad Federal de Bahía, Brasil, desde enero de 2006 a mayo de 2008. Las muestras positivas para Trichostrongylus o Ancylostoma fueron reexaminadas para evaluar la morfometría de los huevos de nematodos. Resultados. La infección por Trichostrongylus spp. se confirmó en 110 pacientes (1,2 %), con mayor frecuencia en el sexo femenino (1,6 %; p<0,05). La frecuencia fue mayor en el grupo de edad de 11 a 20 años (1,9 %), independientemente del sexo, en comparación con las personas de 51 a 60 (0,8 %) y con los mayores de 60 años (0,9 %) (p < 0,05). Las infecciones por Trichostrongylus spp. fueron más frecuentes entre marzo y mayo (40 casos) con una distribución homogénea en otros periodos del año (21 a 25 casos). Los análisis hematológicos de 60 pacientes infectados con Trichostrongylus spp. presentaron niveles normales de eosinófilos en la mayoría de los casos positivos. Conclusiones. Los datos revelan que la incidencia de la infección por Trichostrongylus spp. en individuos residentes en Salvador es más frecuente que las descritas en otras áreas urbanas y, por ello, es esencial distinguir dicho parásito de otros nematodos en los exámenes parasitológicos de rutina.

Occurrence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in cats with outdoor access in São Luís, Maranhão, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum em gatos com acesso à rua em São Luís, Maranhão, Brasil

The present study aimed to investigate the frequency of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in cats with outdoor access in São Luís, Maranhão, Brazil. The presence of IgG anti-T. gondii and anti-N. caninum antibodies was tested using the Indirect Immunofluorescent Antibody Test (IFAT). IgG anti-T. gondii and anti-N. caninum antibodies were detected in 101 (50.5%) and 54 (27%) sampled cats, respectively. The titers of anti-T. gondii antibodies ranged from 40 (cut-off) to 2560. On the other hand, the titers of anti-N. caninum antibodies ranged from 25 (cut-off) to 400. Twenty-seven cats (13.5%) were shown to be seropositive for both parasites. Seventy-four cats (34%) were seropositive only for T. gondii. Twenty-two cats (11%) were seropositive only for N. caninum. The present study showed that cats with outdoor access in São Luís, Maranhão, are exposed to T. gondii and N. caninum.

O presente estudo objetivou verificar a frequência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum em gatos com acesso à rua em São Luís, Maranhão, Brasil. A presença de anticorpos IgG anti-T. gondii e anti-N. caninum foi verificado pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Anticorpos IgG anti-T. gondii e anti-N. caninum foram detectados em 101 (50,5%) e 54 (27%) gatos amostrados, respectivamente. Os títulos de anticorpos anti-T. gondii variaram de 40 (ponto de corte) a 2560. Por outro lado, anticorpos anti-N. caninum variaram de 25 (ponto de corte) a 400. Vinte e sete gatos (13,5%) mostraram-se soropositivos para ambos os parasitas. Setenta e quatro gatos (34%) foram soropositivos somente para T. gondii. Vinte e dois gatos (11%) foram soropositivos somente para N. caninum. O presente estudo demonstrou que gatos com acesso à rua em São Luís, Maranhão, são expostos ao T. gondii e N. caninum.

First report of Trypanosoma vivax outbreak in dairy cattle in São Paulo state, Brazil / Primeiro relato de surto por Trypanosoma vivax em vacas leiteiras no estado de São Paulo, Brasil

This is the first description of a Trypanosoma vivax outbreak in the state of São Paulo (municipality of Lins). Fever, jaundice, decreased milk production, weight loss, profuse diarrhea, abortion, anemia, leukocytosis and hyperfibrinogenemia were observed in the affected animals. Thirty-one cows and calves died out of a total of 1080 in the herd. Three cows showed neurological symptoms like dysmetria, ataxia, muscle weakness, ptyalism, lymph node enlargement and submandibular edema. Flagellated hemoparasites were observed in blood smears. The species was diagnosed as T. vivax by means of PCR. This T.vivax strain showed resistance to diaminazene aceturate and the infection spread quickly at the herd. From the ELISA test, 599 serum samples (98.36%) were positive for anti-T.vivax IgG antibodies. This outbreak occurred during a very dry period, which indicates that other factors were involved in the outbreak, such as absence of tabanids and large populations of Haematobia irritans and Stomoxys calcitrans. The increases in these populations may have been due to the use of biosolid waste from sugar and ethanol plants in the sugarcane plantations surrounding the dairy farm.

Esta é a primeira descrição de um surto de Trypanosomavivax ocorrido no Estado de São Paulo, no município de Lins. Animais acometidos apresentaram febre, icterícia, diminuição da produção de leite, perda de peso, diarreia profusa, abortos, anemia, leucocitose e hiperfibrigenemia. Foram registrados 31 óbitos de vacas e bezerros em 1.080 bovinos no total. Três vacas apresentaram sintomatologia nervosa, como dismetria, ataxia e fraqueza muscular, além de ptialismo, aumento de linfonodos e edema submandibular. Hemoparasitas flagelados foram observados em esfregaços sanguíneos, e a espécie de tripanossomo foi diagnosticada como T.vivax por PCR. A cepa de T. vivax mostrou ser resistente ao tratamento com aceturato de diaminozeno e a infecção disseminou rapidamente no rebanho. Pelo ELISA, observou-se que 98,36% (599) das amostras de soro colhidas apresentaram títulos positivos para IgG anti-T.vivax. O surto ocorreu em condições de baixa precipitação pluviométrica, fato que indica que outros fatores estavam envolvidos na ocorrência desse surto, como a ausência de tabanídeos e a grande presença de Haematobia irritans e Stomoxys calcitrans, cujo aumento populacional pode ser devido ao uso de resíduos de usinas de açúcar e álcool nos canaviais que circundavam a granja leiteira.

Molecular and serological detection of Ehrlichia spp. in cats on São Luís Island, Maranhão, Brazil / Detecção molecular e sorológica de Ehrlichia spp. em gatos da ilha de São Luís, Maranhão, Brasil

Ehrlichiosis is a tick-borne disease that affects both humans and animals. The few existing reports on ehrlichiosis in Brazilian cats have been based on observation of morulae in leukocytes and, more recently, on molecular detection of Ehrlichia sp. In this study, we assessed occurrences of Ehrlichia sp. in the blood of 200 domestic cats in São Luís, Maranhão. Of the 200 animals tested, 11 (5.5%) were seropositive for Ehrlichia sp. and two (1%) were positive for Ehrlichia sp. in PCR. We also performed DNA sequence alignment to establish the identity of the parasite species infecting these animals, using the gene 16S rRNA. One cat presented infection with Ehrlichia sp. with 98% identity with E. canis, and another cat infected with Ehrlichia sp. showed 97% identity with E. chaffeensis. This is the first study on molecular detection of Ehrlichia sp. among domestic cats in São Luís, Maranhão.

Erliquiose é uma enfermidade transmitida por carrapatos que afeta seres humanos e animais. Os poucos relatos de erliquiose em gatos, no Brasil, são baseados na observação de mórulas em leucócitos e, mais recentemente, na detecção molecular de Ehrlichia sp. Neste estudo, foi avaliada a ocorrência de Ehrlichia sp. no sangue de 200 gatos de São Luís, Maranhão. Dos 200 animais testados, 11 (5,5%) foram soropositivos para Ehrlichia sp. e dois (1%) foram positivos na PCR para Ehrlichia spp. O alinhamento de sequências de DNA baseado no gene 16S rRNA foi conduzido para estabelecer a identidade da espécie de parasito que infectou estes animais. Um gato apresentou infecção por uma espécie de Ehrlichia sp. com 98% de identidade com E. canis; e outro mostrou-se infectado por Ehrlichia sp. com 97% de identidade com E. chaffeensis. Este estudo traz a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gatos de São Luís, Maranhão.

Avaliação da frequência de parasitos intestinais e do estado nutricional em escolares de uma area periurbana de Salvador, Bahia, Brasil / Evaluation of intestinal parasitic infections prevalence and nutritional status of school children from a peri-urban area of Salvador, Bahia, Brazil

A elevada prevalência de parasitos intestinais nos países subdesenvolvidos se deve, principalmente, às precárias condições de saneamento básico e ao baixo nível de escolaridade da população. Este trabalho avaliou a associação entre frequência dos parasitos intestinais e estado nutricional e também o perfil socioeconômico dos alunos da primeira à quarta série de uma escola municipal do bairro Jardim Valéria, subúrbio de Salvador, Bahia, Brasil. A análise parasitológica foi realizada em 200 estudantes pelo método de Hoffman-Pons-Janer. O estado nutricional foi avaliado segundo a classificação de Waterlow, utilizando-se a curva padrão adotada pelo National Center of Health Statistic. Os resultados demonstraram uma prevalência de 94por cento (188/200) de infecção porenteroparasitos, sendo a faixa etária mais atingida a de 6 a 9 anos. Os parasitos com frequência mais elevada foram: Entamoeba coli (43,5por cento), Ascaris lumbricoides (25por cento), Endolimax nana (22por cento) eEntamoeba histolytica/E. dispar (21,5por cento). Em relação à diversidade de parasitos, 39por cento das crianças infectadas apresentavam monoparasitismo; 33por cento, biparasitismo e 22por cento, multiparasitismo. A análise do estado nutricional de 147 alunos na faixa etária de 6 a 10 anos mostrou que 15por cento tinham déficit nutricional. No entanto, não foi demonstrada uma correlação positiva entre crianças parasitadas edéficit nutricional, em razão da elevada frequência de crianças parasitadas (78,9por cento) classificadas como eutróficas. Os dados deste estudo confirmam a elevada prevalência de parasitos intestinais e má nutrição entre os escolares de populações de baixa renda. Em consequência, destaca-se aimportância de programas de educação em saúde para prevenção de infecções parasitárias e da adoção de medidas que melhorem o estado nutricional das crianças.

An experimental protocol for the establishment of dogs with long-term cellular immune reactions to Leishmania antigens

Domestic dogs are considered to be the main reservoirs of zoonotic visceral leishmaniasis. In this work, we evaluated a protocol to induce Leishmania infantum/Leishmania chagasi-specific cellular and humoral immune responses in dogs, which consisted of two injections of Leishmania promastigote lysate followed by a subcutaneous inoculation of viable promastigotes. The primary objective was to establish a canine experimental model to provide positive controls for testing immune responses to Leishmania in laboratory conditions. After inoculation of viable promastigotes, specific proliferative responses of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) to either Leishmania lysate or recombinant proteins, the in vitro production of interferon-γ by antigen-stimulated PBMCs and a significant increase in circulating levels of anti-Leishmania antibodies were observed. The immunized dogs also displayed positive delayed-type hypersensitivity reactions to Leishmania crude antigens and to purified recombinant proteins. An important finding that supports the suitability of the dogs as positive controls is that they remained healthy for the entire observation period, i.e., more than seven years after infection. Following the Leishmania antigen lysate injections, the infection of dogs by the subcutaneous route appears to induce a sustained cellular immune response, leading to an asymptomatic infection. This provides a useful model for both the selection of immunogenic Leishmania antigens and for immunobiological studies on their possible immunoprotective activities.

Detection of antibodies against Babesia bovis and Babesia bigemina in calves from the region of Araguaína, State of Tocantins, Brazil / Detecção de anticorpos anti-Babesia bovis e anti-Babesia bigemina em bezerros na região de Araguaína, Estado do Tocantins, Brasil

The aim of this study was to determine the seroprevalence of antibodies against B. bovis and B. bigemina in calves from the region of Araguaína, State of Tocantins, Brazil. In this research we used sera obtained from 506 calves, from both genders and of 8 to 24 months old, to detect antibodies by indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA-test). Statistical analysis of the data was performed using the Chi-square (χ2) test with Yates correction. The seroprevalence obtained was 90.5 and 91.7 percent for B. bigemina and B. bovis, respectively, characterizing the region as an area of enzootic stability for the species analyzed. The seroprevalence to B. bovis showed higher positivity among calves 19-24 months old.

O objetivo desse estudo foi determinar a soroprevalência de anticorpos anti-B. bovis e anti-B. bigemina em bezerros da região de Araguaína, Estado do Tocantins, Brasil. Nesta pesquisa foram coletadas 506 amostras de soros de bezerros com faixa etária entre 8 e 24 meses, fêmeas e machos, as quais foram processadas pelo ensaio imunoenzimático indireto (ELISA-teste). Como análise estatística utilizou-se o Qui-Quadrado (χ2) com correção de Yates. As prevalências obtidas em bezerros foram de 90,5 e 91,7 por cento para B. bigemina e B. bovis, respectivamente, caracterizando esta região como de estabilidade enzoótica para as espécies analisadas. A soroprevalência para B. bovis apresentou maior positividade entre os bezerros com faixa etária de 19-24 meses.

Comparison between a soluble antigen-based ELISA and IFAT in detecting antibodies against Babesia canis in dogs / Comparação entre ELISA feito com antígeno solúvel e imunofluorescência na detecção de anticorpos anti-Babesia canis em cães

An available enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was studied for the detection of anti-B. canis antibodies in the sera of dogs using, indirect fluorescent antibody test (IFAT) as a reference test. ELISA uses a soluble antigenic preparation of B. canis and the optimal dilutions of the antigen, serum and conjugate were determined by check board titration, using positive and negative reference serum. The soluble antigen preparation of B. canis merozoites was 10 µg.mL-1, with reference sera from positive and negative in a single dilution of 1:100, and conjugated to 1:4.000. A total of 246 serum samples were collected from dogs during the rabies vaccination campaign in Jaboticabal, São Paulo, Brazil and examined for the presence of antibodies against B. canis by ELISA and IFAT. Under these conditions, the average absorbance of negative serum was 0.129 ± 0.025, resulting in a cut-off value of 0.323 (ELISA level 3) and the average absorbance of positive reference serum was 2.156 ± 1.187. The serological positive samples tested for B. canis by ELISA and IFAT were 67.89 percent (n = 167) and 59.35 percent (n = 146), respectively. These results suggest that ELISA described may prove to be an effective serological test to diagnose canine babesiosis.

O presente trabalho estudou um ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto para a detecção de anticorpos anti-Babesia canis no soro de cães, tendo a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), como teste de referência O antígeno utilizado no ELISA do presente estudo consistiu em uma preparação antigênica solúvel de merozoítas B. canis e as diluições ótimas do antígeno, soros e conjugado foram determinadas por titulação em bloco, utilizando soros de referência positivos e negativos. A preparação antigênica solúvel de B. canis ótima foi de 10 µg.mL-1, com soros de referência positivos e negativos em uma única diluição de 1:100, e conjugado a 1:4.000. Um total de 246 amostras séricas foram colhidas em cães, durante a campanha de vacinação anti-rábica em Jaboticabal, São Paulo, Brasil e a presença de anticorpos anti-B. canis foi avaliada pelo ELISA e RIFI. Nestas condições, a média de absorbância dos soros de referência negativos foi de 0,129 ± 0,025, resultando em um ponto de corte de 0,323 (Nível de ELISA 3) e a média da absorbância dos soros de referência positivos foi de 2,156 ± 1,187. As amostras com sorologia positiva para B. canis por ELISA e RIFI foram 67,89 por cento (n = 167) e 59,35 por cento (n = 146), respectivamente. Os resultados obtidos sugerem que o ELISA descrito revelou-se um teste sorológico eficaz no diagnóstico da babesiose canina.

Proteínas recombinantes de amastigotas de Leishmania infantum/chagasi. Desenvolvimento/otimização de metodologias de obtenção e avaliação de antigenicidade / Recombinant proteins of amastigotes of Leishmania infantun/chagasi. Development/optimization of attainment methodologies and evaluation of antigenecity

O programa de controle da leishmaniose visceral no Brasil, através da eliminação de cães infectados com Leishmania, não produziu resultados satisfatórios. Além da baixa sensibilidade dos métodos diagnósticos empregados e a demora entre detecção e a eliminação de cães soropositivos, este tipo de medida enfrenta a pouca aceitação por médicos veterinários e donos dos cães. Apesar do encontro de cães na área endêmica com perfil de resistência à infecção por Leishmania, sugerindo que uma vacina é possível, até o presente momento não estão disponíveis vacinas humanas ou para uso veterinário, com eficácia comprovada. Este estudo teve como objetivo a padronização ou desenvolvimento de metodologias para a obtenção e avaliação de proteínas recombinantes de amastigotas de Leishmania infantum/chagasi, potencialmente candidatas a componentes de ensaios sorológicos para diagnóstico da LV humana e/ou canina ou de uma vacina para cães contra a infecção por L. infantum/chagasi. Inicialmente foi estabelecida a melhor condição de cultivo axênico para obtenção de amastigotas extracelulares de três espécies distintas de Leishmania. Apesar de morfologicamente semelhantes às formas amastigotas intracelulares, as formas axênicas de L. infantum/chagasi não apresentaram homogeneidade quanto à viabilidade e infectividade, contrastando com o observado com as espécies L. braziliensis e L. amazonensis. Dessa forma, amastigotas purificados de baço de hamsters infectados foram utilizados para purificação do RNA e produção de uma biblioteca de cDNA de L. infantum/chagasi. Cinco antígenos recombinantes diferentes foram selecionados da biblioteca de cDNA através do uso de uma mistura de soros de cães ou de pacientes com leishmaniose visceral. Soros humanos não reativos a esses antígenos foram utilizados para identificar novos clones recombinantes, constituindo uma nova abordagem para obtenção de antígenos com potencial de aumentar a especificidade de um ensaio imunodiagnóstico. A adição dos novos antígenos elevou significativamente a sensibilidade de um ensaio “dipstick” utilizado para o diagnóstico da leishmaniose visceral humana em relação a um painel limitado de soros...

Fatores de risco para infecçäo urinária no pós-operatório imediato da cirurgia por via vaginal para correçäo da incontinência urinária de esforço / Risk factors for urinary infection in the immediate postoperative period of vaginal surgery for urinary stress incontinence correction

O objetivo do presente trabalho é verificar quais os fatores de risco que possam influenciar no surgimento da infecçäo urinária como complicaçäo no pós-operatório imediato da cirurgia por via vaginal para correçäo da incontinência urinária de esforço (IUE), bem como conhecer quais os agentes etiopatogênicos comumente responsáveis por esse tipo de complicaçäo. Foram avaliadas 368 pacientes submetidas a correçäo cirúrgica da (IUE) pela técnica de Kelly-Kennedy. Sendo que 46 pacientes que apresentaram infecçäo urinária, todas confirmadas com uroculturas positivas, foram denominadas de grupo I (G1), e 40 pacientes foram escolhidas ao acaso das 322 restantes, para compor o grupo controle (G2), todas com urocultura negativa. O tempo de internamento no pós-operatório maior que 5 dias ocorreu em 73,91 por cento no grupo 1 e 40 por cento no grupo 2, essa diferença foi estatisticamente significativa para p<0,05. O tempo de sonda vesical de 72 h ocorreu em 60,87 por cento no G1 e 32,5 por cento no G2, sendo um fator estatisticamente significativo para p<0,05, como fator participante no surgimento da infecçäo urinária. O tempo de sonda vesical transuretral superior a 48 horas é um fator de risco para o aparecimento da infecçäo urinária. O agente etiopatogênico mais comum foi Escherichia coli em 71,7 por cento, vindo a seguir Klebsiella em 10,9 por cento. Foram testados onze antibióticos in vitro quando da realizaçäo dos antibiogramas. Os antibióticos que apresentaram melhor taxa de sensibilidade foram: norfloxacin (100 por cento); amicacina (100 por cento); gentamicina (95,2 por cento); cido nalidíxico (89,5 por cento) e cefalosporinas de 1( geraçao (83,3 por cento). A menor incidência de infecçäo urinária pós-cirurgia para correçäo da incontinência urin ria de esforço por via vaginal está nos cuidados pré-operatórios e nao submeter a cirurgia pacientes sem apresentarem urocultura negativa. Durante o ato cirúrgico utilizar boa técnica, hemostasia rigorosa, evitar usar sonda durante o ato cirúrgico e lançar mäo de técnica rigorosa de assepsia na colocaçäo de sonda no pós-operatório imediato, utilizando bolsa coletora de urina descartável, com sistema fechado. O teste estatístico utilizado foi o Qui-quadrado.