Experimental infection of Leishmania L. chagasi in a cell line derived from Lutzomyia longipalpis (Diptera: Psychodidae)

The present work describes the in vitro infection of a cell line Lulo, derived from Lutzomyia longipalpis embryonic tissue, by Leishmania chagasi promastigotes. This infection process is compared with a parallel one developed using the J774 cell line. The L. chagasi MH/CO/84/CI-044B strain was used for experimental infection in two cell lines. The cells were seeded on glass coverslips in 24-well plates to reach a final number of 2 x 10(5) cells/well. Parasites were added to the adhered Lulo and J774 cells in a 10:1 ratio and were incubated at 28 and 37ºC respectively. After 2, 4, 6, 8, and 10 days post-infection, the cells were extensively washed with PBS, fixed with methanol, and stained with Giemsa. The number of internalized parasites was determined by counting at least 400 cultured cells on each coverslip. The results showed continuous interaction between L. chagasi promastigotes with the cell lines. Some ultrastructural characteristics of the amastigote forms were observed using transmission electron microscopy. The highest percentage of infection in Lulo cells was registered on day 6 post-infection (29.6 percent) and on day 4 in the J774 cells (51 percent). This work shows similarities and differences in the L. chagasi experimental infection process in the two cell lines. However, Lulo cells emerge as a new model to study the life-cycle of this parasite.

Sexo del hospedero y dosis infectante de parásitos como factores en el desarrollo de la infección con Trypanosoma cruzi en un modelo murino / Sex of host and initial dose of inoculum like factors in the development of infection with Trypanosoma cruzi in a murine model

Se infectaron ratones de la cepa ACA, machos y hembras, con 200 y 2.000 tripomastigotes sanguíneos del clon Dm 28c de Trypanosoma cruzi. Todos los animales se comportaron como susceptibles a la infección, en forma independiente del sexo y la dosis de inóculo inicial. Los animales, tanto machos como hembras, infectados con 2.000 parásitos presentaron niveles de parasitemia significativamente más altos que los ratones infectados con la dosis menor. A su vez, los machos desarrollaron niveles de parasitemia más altos que las hembras, tanto al infectar con 200 como con 2.000 parásitos. A pesar de comportarse todos los animales experimentales como susceptibles, el período de supervivencia fue significativamente más prolongado en los machos infectados con 200 comparado con lo ocurrido con los machos infectados con 2.000 parásitos. Las hembras infectadas con 2.000 parásitos sobreviven más tiempo que los machos infectados con la misma dosis. No se observaron diferencias significativas en el tiempo de supervivencia, al comparar hembras infectadas con ambas dosis ni tampoco al comparar machos y hembras infectados con 200 parásitos. Al parecer, en nuestro caso, la principal característica afectada por las variables sexo y dosis de inóculo inicial es el nivel de parasitemia.

Protein Profiles of Trypanosoma cruzi and Trypanosoma rangeli

Trypanosoma cruzi, is a protozoan parasite, which has a close phylogenetic relationship with Trypanosoma rangeli that is not pathogenic for the vertebrate host. Both parasites have antigenic similarity, they have different and complex total protein profiles according to their morphological and physiological stage epimastigotes or trypomastigotes, showing a differential gene expression during the life cycle. There are also differences according to T. cruzi populations used, which were isolated from different geographical areas and were harvested from different sources. This study clearly showed the Colombian SA strain that is highly virulent, has differences in its protein profile when as compared with Dm28c clone, Tulahuen strain and Colombian Astec strain which is not virulent. The proteins were separated by polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Specie-specific proteins were found which allow us to identify them, just as it occurs with T. rangeli (Choachí-2V strain), which has three protein bands. However, two of them are not only present in epimastigotes but also in trypomastigotes, but the other is exclusive of epimastigote forms.

Estudio histopatológico en ratones infectados experimentalmente con trypanosoma cruzi / Histopathological study in mice experimentally infected with tripanosoma cruzi

Se infectaron cuatro cepas de ratones, machos y hembras, con 2000 trypomastigotes sanguíneos de la cepa Tulahuen de trypanosoma cruzi. Los animales de las cepas A.Sw y HTI se comportaron como resistentes y los de las cepas A/Sn y HTG como susceptibles, independiente del sexo de los animales infectados. En los casos de las cepas A.Sw, HTG y HTI se observó niveles significativamente más altos de parasitemia en los machos. A nivel histopatológico el daño tisular no presenta inicialmente diferencias significativas entre cepas resistentes y susceptibles, sin embargo, con el tiempo se puede ver que en los animales resistentes se inducen fenómenos de reparación del daño, en cambio en los ratones susceptibles las lesiones parecen aumentar a pesar de no observarse parásitos intracelulares o circunlantes

Enfermedad de Whipple: caso clínico y revisión bibliográfica / Whipple's disease: case report and bibliographic review

Se presenta un caso de enfermedad de Whipple confirmado, en una mujer de 61 años, por estudio histológico de biopsias escalonadas de duodeno y yeyuno.Se señala la etiología bacteriana y el carácter sistémico de la afección, que es producida por la Tropheryma whippelii, que es un bacilo Gram positivo con forma de hoz. Se describe el cuadro clínico que es esencialmente polimorfo pero dentro del cual destacan la diarrea crónica de tipo alto, con caracteres de síndrome de malabsorción y marcado compromiso progresivo del estado general; las artralgias y poliartritis y la fiebre. La enfermedad responde favorablemente a diversos antibióticos que deben administrarse en forma prolongada para intentar reducir las recurrencias que son muy frecuentes y que comprometen muchas veces al sistema nervioso central

Mayores niveles séricos de IgM en mujeres en relación a hombres usando un modelo de heteroaglutinina humana anti raton / Higher women IgM levels compared with men in a model of human anti mouse heteroagglutinins

Se probaron 68 muestras de hombres y 67 mujeres de sueros anti ABO con glóbulos rojos de ratones silvestres. Sesenta y cinco muestras en ambos casos aglutinaron los glóbulos rojos de ratón. Considerando o no el grupo sanguíneo ABO de los donantes, en los dos casos se obtuvo un promedio de título de esta heteroaglutinina mucho mayor en mujeres que en hombres. Las diferencias fueron estadísticamente significativas (p < 0,001). Los eritrocitos de ratón fueron aglutinados por la fracción IgM del suero y no por la fracción IgG. Nuestros resultados están de acuerdo con la hipótesis que relaciona la concentración sérica de IgM y el número de cromosomas X que posea un individuo, postulándose una mayor concentración, en mamíferos, de IgM en hembras en relación a los machos

Anticuerpos monoclonales en laboratorio y en clínica / Monoclonal antibodies in laboratory and clinic

Los anticuerpos producidos por un clon celular único se denominan anticuerpos monoclonales. Estos anticuerpos son específicos para un antígeno único. La técnica del hibridoma creada por Kohler y Milstein en 1975, por la que ganaron el Premio Nobel de Medicina, ha permitido la producción de cantidades industriales de anticuerpos monoclonales con especificidad seleccionada. Se ha abierto un enorme campo debido al uso de estos anticuerpos en las pruebas diagnósticas y terapéuticas. Existe una muy activa investigación para desarrollar anticuerpos específicos para el tratamiento del cáncer y para la depuración de la médula de células malignas

H-2 and complexes in wild mice

Quatro haplotipos-t (tMO, tRA, tLA e tQU) foram isolados independentemente de populaçöes separadas de camundongos selvagens do chile. Estes haplotipos-t estäo sendo mantidos no laboratório dos autores como diferentes linhagens sem rabo em combinaçäo com o cromossomo "brachyury" (T). Todos os haplotipos estäo associados a uma forte supressäo de recombinaçäo genética, entretanto eles mostram diferentes graus de distorçäo na razäo de transmissäo. Quando testados sorologicamente para presença de determinantes antigênicos de H-2 encontrados em linhagens endocruzadas, os camundongos com t näo reagiram com a maioria dos antisoros H-2, entretanto a combinaçäo de antígenos H-2 encontrada foi suficiente para diferenciar cada haplotipo. Ohaplotipo letal tRA foi caracterizado antigenicamente através da presença do determinante particular H-2D.2 e o haplotipo viável tMO foi caracterizado pela presença dos determinantes particulares H-2D.2 e H-2K.19. Estes resultados de caracterizaçäo do tipo H-2 estäo de acordo com resultados previamente encontrdos de parentesco forte entre MHC dos haplotipos-t e pelo menos alguns dos genes clássicos MHC encontrados em linhagens endocruzadas

Consecuencias biológicas de la alteración en la expresión de moléculas CMH en células tumorales / The biological consequences of altered MHC expression on tumours

El complejo mayor de histocompatibilidad (CMH) codifica para una serie de antígenos de superficie que están involucrados en la respuesta inmune. Los linfocitos T citotóxicos pueden reconocer células infectadas por virus o alteradas por transformaciones neoplásicas, sólo en asociación con determinadas moléculas CMH. Pareciera ser, entonces, que el control del desarrrollo tumoral por el sistema inmune no sólo depende de antígenos tumorales sino también de la expresión de moléculas CMH por parte de la célula tumoral. Las células neoplásicas frecuentemente muestran alteraciones cuantitativas y cualitativas en cuanto a la expresión de estas moléculas CMH comparadas con células normales del mismo tejido. Es, por lo tanto, esencial establecer los mecanismos moleculares que llevan a la pérdida o expresión de nuevas especificidades CMH en las células alteradas, para determinar cuál es la función que este hecho cumple durante el orígen y desarrollo de los procesos neoplásicos

Inmunoglobulina M y cromosoma X / Immoglobulin M and X chromosome

Se probaron 54 muestras de hombres y 54 de mujeres de sueros anti ABO con sus correspondientes antígenos. La concentración de isoanticuerpos contra los antígenos A y B fue significativamente mayor en mujeres que en hombres. Los anticuerpos anti ABO son del tipo Inmunoglobulina M (IgM). Estos resultados apoyan la sugestión que los niveles de IgM son influenciados por el número de cromosomas X Aunque en mamíferos, es generalmente aceptado que en presencia de varios cromosomas X sólo uno permanece activo, hay varias situaciones en que esta hipótesis ha sido modificada. Debido a que las inmunoglobulinas M son anticuerpos importantes en la protección inmediata para muchos agentes patógenos, su mayor concentración en hembras puede tener una importancia evolutiva en especies con un largo período de gestación

El complejo T/t en el ratón: evidencias de un posible equivalente homólogo en el humano y su relación con las malformaciones del tubo neural / T-complex in the mice: evidences of an homologous possible equivalent in the human and its relation with malformation of the neural tube

El cromosoma 17 del ratón posee dos de los más misteriosos sistemas genéticos en el mamífero, son el T/t y el H-2. La pregunta si es que la presencia de estos dos sistemas tan altamente sofisticados en el mismo cromosoma es fortuita o bien, que los sistemas pueden estar genéticamente interrelacionados, se ha propuesto repetidamente. El locus T/t contiene claramente un set de genes de importancia crítica en los estadios iniciales del desarrollo embriológico. Sabemos que los alelos normales son esenciales para el desarrollo normal, puesto que los homozigotos para los diferentes alelos mutantes letales, mueren en estadios característicos durante la embriogénesis, usualmente cuando un tipo particular de células comprueba ser incapaz de mantenerse por sí solo o progresar a la siguiente etapa de diferenciación. Estudios morfológicos de embriones homozigotos afectados, provee un cuadro dramático del fracaso de las interacciones célula-célula y sugiere fuertemente que el defecto inicial puede ser asociado con los componentes especificados de la superficie celular por el complejo T/t. El sistema T/t es ampliamente conocido en el ratón, sistemas homólogos en otras especies no se han encontrado. En el hombre, la espina bífida y el síndrome de agenesia sacra, han sido considerados como las copias más parecidas del sistema murino T/t. Aunque es probable que los genes homólogos de los genes t murino existan en otros mamíferos el sistema t podría ser único en el ratón. Sin mbargo, no se debiera detractar el valor del sistema para nuestra comprensión de ciertos principios básicos y mecanismos en las biología del desarrollo