Comparación de las tinciones con hematoxilina y eosina versus azul de toluidina en la evaluación de los carcinomas cutáneos durante la cirugía micrográfica de Mohs / Comparative study of toluidine blue and hematoxylin and eosin staining in evaluating skin-carcinoma during Mohs micrographic surgery / Comparação da coloração de hematoxilina e eosina versus azul de toluidina na avaliação de carcinomas cutâneos durante a cirurgia micrográfica de Mohs

Resumen: Introducción: la cirugía micrográfica de Mohs es una técnica quirúrgica especializada para el tratamiento del cáncer de piel no melanoma. La histopatología cumple un rol fundamental, y la elección de la tinción es un punto de controversia. Objetivos: comparar el rendimiento de las tinciones de hematoxilina y eosina (HyE) versus azul de toluidina (AT) durante la cirugía. Método: estudio observacional, descriptivo y transversal a partir de noviembre de 2017 hasta mayo de 2018. Se incluyeron las láminas empleadas durante la cirugía en el período mencionado. Estas fueron analizadas por el cirujano de Mohs, tres residentes y una dermopatóloga. Se valoró el rendimiento de ambas tinciones, teniendo en cuenta las características celulares y los elementos del estroma. Resultados: se estudiaron 23 tumores (16 carcinomas basocelulares y 7 carcinomas espinocelulares). Al observarse al microscopio óptico tanto con la tinción de AT como con HyE no se encontraron diferencias significativas entre ambos grupos en lo global, sólo en algunas características, especialmente con la HyE. Conclusiones: es el primer trabajo en Uruguay que compara la eficacia de las dos tinciones durante la cirugía micrográfica de Mohs. Como conclusión tanto la tinción de HyE como el AT son muy buenas técnicas para el diagnóstico de carcinomas cutáneos.

Abstract: Introduction: Mohs micrographic surgery is a specialized surgical technique used to treat nonmelanoma carcinoma. Histopathology plays a vital role in the diagnosis of this condition, and the choice staining method is controversial. Objective: to compare results in the use of hematoxylin and eosin (H&E) versus Toluidine blue (TB) staining during surgery. Method: observational, descriptive and transversal study conducted from November, 2017 until May, 2018 of the slides used during surgeries in the selected period. Slides were analysed by the Mohs surgeon, 3 residents and a dermopathologist to evaluate the results of both staining methods, in consideration of cell features and stromal elements. Results: 23 tumors were analysed (16 Basal Cell carcinomas and 7 Squamous Cell Carcinoma). Microscopic observation of slides prepared with Toluidine blue and hematoxylin and eosin stains did not show significant global differences between both groups, except in terms of a few characteristics, in particular with hematoxylin and eosin stains. Conclusions: this was the first study in Uruguay to evaluate the effectiveness of both staining methods during Mohs micrographic surgery, and it concluded that both Toluidine blue and hematoxylin and eosin stains are very good techniques in evaluating skin-cancer.

Resumo: Introdução: a cirurgia micrográfica de Mohs é uma técnica cirúrgica especializada para o tratamento do câncer de pele não melanoma. A histopatologia desempenha um papel fundamental, onde a escolha da coloração é um ponto de controvérsia. Objetivos: comparar o desempenho das colorações de hematoxilina e eosina versus azul de toluidina durante a cirurgia. Método: estudo observacional, descritivo e transversal de novembro de 2017 a maio de 2018. Foram incluídas as lâminas utilizadas durante as cirurgias no referido período. Estas foram analisadas pelo cirurgião especializado na técnica de Mohs, 3 residentes e um dermatopatologista onde foi avaliado o desempenho de ambas as colorações, levando em consideração as características celulares e os elementos do estroma. Resultados: foram estudados 23 tumores (16 carcinomas basocelulares e 7 carcinomas espinocelulares). Quando observados ao microscópio de luz para coloração AT e H&E, não foram encontradas diferenças significativas entre os dois grupos em geral, apenas em algumas características, especialmente com o H&E. Conclusões: é o primeiro estudo no Uruguai que compara a eficácia dos 2 corantes durante a cirurgia micrográfica de Mohs. Em conclusão, tanto a coloração com hematoxilina e eosina quanto com azul de toluidina são técnicas muito boas para o diagnóstico de carcinomas de pele.

Comparación de métodos histoquímicos para el análisis histológico de muestras de encía humana / Comparison of histochemical methods for the histological analysis of human gingival samples

Introducción: Las técnicas de coloración histológica son útiles en el análisis ultraestructural de muestras tisulares, incluyendo el tejido gingival. Objetivo: Comparar la utilidad de tres métodos histoquímicos (hematoxilina-eosina, Masson Goldner y rojo sirio) en la identificación de elementos celulares y otros constituyentes del tejido gingival. Métodos: Estudio experimental in vitro que comprendió el análisis de tejidos gingivales de donantes sanos sin signos de inflamación gingival y con indicación de cirugía periodontal. Las muestras de encía se obtuvieron mediante gingivectomía, se procesaron e incluyeron en parafina, posteriormente se realizaron cortes con un micrótomo y se depositaron en portaobjetos de adhesión con polisina. Las muestras se agruparon y fueron teñidas con hematoxilina-eosina, Masson Goldner y rojo sirio, finalmente fueron visualizadas en un microscopio óptico Leica DM 750®. La lectura de los hallazgos fue realizada por patólogos orales. Resultados: La coloración hematoxilina-eosina evidencia elementos celulares y extracelulares del tejido epitelial y conectivo. Núcleos de color azul violeta, citoplasmas rosados, fibras de colágeno de matiz rosa claro, arteriolas y vénulas con túnica adventicia, media e íntima diferenciadas. La coloración Masson Goldner diferencia núcleos de coloración púrpura y citoplasma fucsia, presenta especificidad en identificar fibras de colágeno con tonalidad verde, distribuidas densa, homogénea y paralelamente en el tejido conectivo gingival. La tinción rojo sirio, permitió identificar las fibras de colágeno de color rosa brillante, mientras que el tejido epitelial y los vasos sanguíneos fueron de color amarillo. Conclusión: Cada coloración histológica evaluada en el presente trabajo tiene cierta afinidad y sensibilidad por estructuras celulares y componentes de la matriz extracelular específica. Su empleo es útil en el estudio de tejidos gingivales y podrían contribuir en el análisis de biopsias gingivales(AU)

Introduction: Histological staining techniques are useful in the ultrastructural analysis of tissue samples, including gingival tissue. Objective: Compare the usefulness of three histochemical methods (hematoxylin-eosin, Masson-Goldner and sirius red) for identification of cellular elements and other constituents of gingival tissue. Methods: An in vitro experimental study was conducted which included the analysis of gingival tissue from healthy donors without gingival inflammation signs and indication of periodontal surgery. The gum samples were obtained by gingivectomy, processed with paraffin, cut with a microtome and placed on Polysine adhesion slides. The samples were grouped, stained with hematoxylin-eosin, Masson Goldner and sirius red, and visualized under a Leica DM 750® microscope. Reading of the findings was performed by oral pathologists. Results: Hematoxylin-eosin staining found cellular and extracellular elements of the epithelial and connective tissue: violet-blue nuclei, pink cytoplasms, light rose collagen fibers, and arterioles and venules with differentiated tunica adventitia, media and intima. Masson-Goldner staining differentiated purple nuclei and fuchsia cytoplasm. It displayed specificity identifying green collagen fibers with dense, homogeneous and parallel distribution in the gingival connective tissue. Sirius red staining allowed identification of bright rose collagen fibers, whereas epithelial tissue and blood vessels were yellow. Conclusion: Each of the histological staining methods evaluated in the study shows a certain affinity with and sensitivity to cellular structures and components of the specific extracellular matrix. All three are useful for the study of gingival tissue and could contribute to the analysis of gingival biopsies(AU)

Histopathological alterations in gills, liver, kidney and muscles of Ictalurus punctatus collected from pollutes areas of River / Alterações histopatológicas em brânquias, fígado, rim e músculos de Ictalurus punctatus coletados em áreas poluídas do rio

Abstract Untreated sewage and industrial wastes from Faisalabad city are disposed to River Chenab through Chakbandi Main Drain (CMD). The present project is planned to investigate the effects of this freshwater pollution on the body of fish Ictalurus punctatus. The specimens of this fish species were collected upstream and downstream of the entrance of CMD into River Chenab. Fish gills, liver, kidney and muscles from dorsolateral regions of fish were subjected to histopathology. Farmed fish and fish from upstream areas were used as control. Fish collected from polluted experimental sites showed significant damage in selected organs. Gill tissues showed an abnormality in the form of an uplifting of the primary epithelium, fusion, vacuolation, hypertrophy, and necrosis. While liver tissues subjected to hepatocytes degeneration, necrosis, mitochondrial granular hepatocyte, and sinusoids dilation. Kidney tissues indicated increased bowmen space and constricted glomerulus and degenerated nephrons. Edema, necrosis, and atrophy were observed in muscle tissues of fish from polluted areas. Fish from the upstream area showed fused gill lamellae, inflammatory cell infiltration, hypertrophy and vacuolation in hepatocytes. Kidney tissues indicated the presence of nuclear tubular cells, destructive renal tubules, hemorrhage, and necrosis at tubular epithelium. Intra myofibril spaces were also observed in muscles. Specimens of control fish indicated no variation in gills, liver, kidney, and muscles. The present study revealed a strong correlation between the degree of tissue damage and environmental contamination. Present findings also compel global warnings to protect our water bodies and fish to rescue the human population.

Resumo O esgoto não tratado e os resíduos industriais da cidade de Faisalabad, no Paquistão, são descartados no Rio Chenab através do dreno principal de Chakbandi (CMD). O presente projeto busca investigar os efeitos dessa poluição de água doce no corpo de peixes Ictalurus punctatus. Os espécimes deste peixe foram coletados a montante e a jusante da entrada do CMD no Rio Chenab. Brânquias, fígado, rim e músculos das regiões dorsolaterais dos peixes foram submetidos à histopatologia. Peixes de criação e peixes de áreas a montante foram utilizados como controle. Peixes coletados em locais experimentais poluídos mostraram danos significativos em órgãos selecionados. Os tecidos branquiais mostraram uma anormalidade na forma de elevação do epitélio primário, fusão, vacuolação, hipertrofia e necrose. Observou-se que os tecidos hepáticos estão sujeitos a degeneração de hepatócitos, necrose, hepatócitos mitocondriais granulares e dilatação de sinusoides. Os tecidos renais indicaram aumento do espaço dos arqueiros, glomérulos contraídos e néfrons degenerados. Edema, necrose e atrofia foram observados nos tecidos musculares de peixes de áreas poluídas. Peixes da área a montante apresentaram lamelas branquiais fundidas, infiltração de células inflamatórias, hipertrofia e vacuolização em hepatócitos. Os tecidos renais indicaram a presença de células tubulares nucleares, túbulos renais destrutivos, hemorragia e necrose no epitélio tubular. Os espaços intramiofibrilas também foram observados nos músculos. Amostras de peixes controle não indicaram variação em brânquias, fígado, rim e músculos. O presente estudo revelou uma forte correlação entre o grau de dano tecidual e a contaminação ambiental. As descobertas atuais também constituem avisos globais para proteger nossos corpos d'água e peixes para resguardar a população humana.

Identificación de Helicobacter pylori por medio de la coloración especial de Warthin-Starry en biopsias de pacientes con gastritis crónica folicular, previamente negativas en la tinción de hematoxilina-eosina / Warthin-Starry stain identification of Helicobacter pylori in biopsies of patients who previously tested negative in hematoxylin-eosin staining for follicular gastritis

Resumen Las técnicas empleadas para la detección del Helicobacter pylori (H. pylori) son no invasivas e invasivas. En estas últimas, la presencia del H. pylori se determina a partir de la tinción de hematoxilina-eosina (HE), prueba rutinaria, mientras que en pocas ocasiones se aplica la tinción de Warthin-Starry (WS) como coloración especial. Objetivo: identificar la presencia de H. pylori por medio de la coloración especial de la WS en biopsias de pacientes con gastritis crónica folicular, previamente negativas en la tinción HE. Materiales y métodos: se desarrolló un estudio de tipo descriptivo transversal, en un período de 12 meses. Se tomaron los bloques de parafina de las muestras de la mucosa gástrica de pacientes con diagnóstico de gastritis crónica e hiperplasia folicular. Además, se extrajo un corte histológico del mismo bloque, al cual se le aplicó HE y se determinó la presencia o ausencia de H. pylori. Así, de estar ausente, se tomó del mismo bloque un corte adicional y se aplicó WS. Esto se evaluó con el fin de identificar la existencia o no del bacilo. Resultados: se recolectaron 314 muestras; 209 fueron negativas y 105 fueron positivas para HE. El 45 % (94) de estas muestras fueron positivas respecto a la presencia del bacilo, al aplicar la segunda coloración, y el 55 % (115) de las muestras persistieron negativas. Conclusión: el hallazgo de H. pylori es significativamente alto al aplicar la coloración de WS a muestras cuyo estudio histológico evidenció la ausencia del bacilo en biopsias de la mucosa gástrica, especialmente en muestras con escasa cantidad de bacterias.

Abstract Non-invasive and invasive techniques can be used for detection of Helicobacter pylori. An invasive technique identifies the bacteria through routine hematoxylin-eosin staining. Warthin-Starry stain is rarely used. Objective: Our objective was to identify H. pylori by Warthin-Starry staining of patient's biopsies with chronic follicular gastritis who had previously tested negative in hematoxylin-eosin staining. Materials and methods: This is a descriptive, cross-sectional descriptive study that was carried out over a period of 12 months. The study examined paraffin blocks of samples taken from the gastric mucosa of patients diagnosed with chronic gastritis and follicular hyperplasia. A histological section was extracted from a block and tested with hematoxylin-eosin staining for the presence or absence of H. pylori. If absent, an additional cut was taken from the same block and Warthin-Starry staining was used to retest for the presence of the bacteria. Results: Of the 314 samples collected, 209 tested negative, and 105 tested positive for H. pylori when hematoxylin-eosin staining was used. Of the 209 negative samples, 45% (94) tested positive when Warthin Starry stain was used, and 55% (115) still tested negative. Conclusion: Findings of H. pylori are significantly higher when Warthin Starry stain was used to test samples whose previous histological study had evidenced an absence of the bacillus, especially in samples with a small amount of bacteria.

Oral Administrations of Hancornia speciosa Gomes Latex Do Not Increase Bone Neoformation / Administrações Orais do Látex da Hancornia speciosa Gomes não aumentam a neoformação óssea

Abstract Objective The present work aimed to evaluate the systemic effect of H. speciosa latex on bone neoformation. Methods For this, the latex was collected and diluted to 3% and 50%. A total of 28 Wistar rats were submitted to surgery to create a 5 mm diameter defect in the parietal bone. This experiment was conducted in 2 different periods: 1 and 2. For each period, the rats were divided into 3 groups: Control Group, Latex3 Group, and Latex50 Group, which received, respectively, daily administrations of 0.5 mL of distilled water, latex to 3% and latex to 50% by gavage, orally. The rats of periods 1 and 2 were euthanized, respectively, 15 and 30 days after the surgery, and the calvaria was collected. The results were analyzed using the ANOVA and Tukey tests; the significance level was 0.05. Results We show that, in each analyzed period, the experimental groups had the same amount of newly formed bone in the calvaria defect. Conclusion We conclude that daily and oral administrations of H. speciosa latex to 3% and to 50% over a period of 15 and 30 days does not contribute to the increase of the area of the newly formed bone in the calvaria defect.

Resumo Objetivo Este trabalho objetivou avaliar o efeito sistêmico do látex de H. speciosas obre a neoformação óssea. Métodos Para isso, o látex foi coletado e diluído a 3% e a 50%. Um total de 28 ratos Wistar foi submetido a cirurgia para a criação de um defeito de 5 mm de diâmetro no osso parietal. Esse experimento foi conduzido em dois períodos distintos: 1 e 2. Para cada período, os ratos foram divididos em 3 grupos: Grupo Controle, Grupo Látex3 e Grupo Látex50 que receberam, respectivamente, administrações diárias de 0,5 mL de água destilada, látex a 3% e látex a 50% por gavagem, via oral. Os ratos dos períodos 1 e 2 foram eutanasiados, respectivamente, 15 e 30 dias após a cirurgia e a calvária foi coletada. Os resultados foram analisados utilizando os testes ANOVA e Tukey; o nível de significância estabelecido foi 0,05. Resultados Mostramos que, em cada período analisado, os grupos experimentais tiveram a mesma quantidade de osso neoformado no defeito da calvária. Conclusão Portanto, concluímos que administrações diárias e orais do látex de H. speciosa a 3% e a 50% durante um período de 15 e 30 dias não contribui para o aumento da área do osso neoformado no defeito da calvária.

Correlación entre el grado de neoplasia intraepitelial cervical y la expresión dual de p16 Y ki67, en biopsia de cuello uterino en el Hospital Santa Rosa de Lima-Perú año 2016 / Correlation between the degree of cervical intraepitelial neoplasis (nic) and the dual expression of p16 and ki67, in uterine neck biopsy in Santa Rosa Hospital of Lima-Peru year 2016

Objetivo: Determinar la frecuencia de coexpresión dual del p16 (INK4a) y ki67 en los diferentes grados de las neoplasias intraepiteliales cervicales (NIC) y su contribución molecular para diagnóstico y pronóstico. Material y Metodos: El diseño es descriptivo, prospectivo transversal. Se revisaron 20 biopsias de cérvix embebidas en parafina, que se encontraban en el archivo de Anatomía Patológica de un Hospital tercer nivel de Perú entre Enero y Diciembre del 2016, cuyas láminas portaobjeto fueron coloreadas con hematoxilina-eosina y reportadas como neoplasia intraepitelial (NIC) I, II, III. Se realizaron nuevos cortes histológicos de 3 micras para estudios complementarios usando la técnica de inmunohistoquímica dual. Las células con positividad para p16 mostraron tinción citoplasmática y/o nuclear de color rojizo y aquellas con positividad para ki67 mostraron coloración nuclear marrón. Resultados: Los 20 casos de neoplasia intraepitelial se dividen en: 06 casos de NIC I; 11 casos de NIC II y 03 casos de NIC III. La tinción dual para el Ki67 y p16 se realizó a los 20 casos, esto mostró una coexpresión en el 85% y ausencia de expresión dual en 15%. Se observó tinción en los diversos grados de NIC predominando el grado 1+ en un 50%. En el grado 2+ y 3+ la expresión fuerte en NIC II y NIC III respectivamente. La expresión del Ki67 se dio en todos los diferentes grados de NIC. Conclusiones: La coexpresión del Ki67 y p16 es de 85% en los diversos grados de NIC, siendo frecuente en el grupo de NIC II. (AU)

Objetive: To determine the frequency of dual coexpression of p16 (INK4a) and ki67 in the different degrees of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and its molecular contribution for diagnosis and prognosis. Material And Methods: the design is descriptive, prospective and cross-sectional. 20 cervix biopsies embedded in paraffin have been reviewed. These slides gathered from January 2016 to December 2016 were located in the records of Anatomical Pathology Department of a third level Hospital in Peru. The slides were stained with hematoxylin-eosin and reported as intraepithelial neoplasia (CIN) I, II, III. New histological sections of 3 microns were made for complementary studies by using dual immunohistochemistry technique. The cells with positivity for p16 showed cytoplasmic and / or nuclear reddish staining and those with positivity for ki67 showed brown nuclear coloration. Results: The 20 cases of intraepithelial neoplasia are divided into: 06 cases of CIN I; 11 cases of CIN II and 03 cases of CIN III. Dual staining for Ki67 and p16 was performed in all 20 cases. This showed coexpression in 85% and absence of dual expression in 15%. Staining was observed in the different grades of CIN, with predominance in grade 1+ ( 50%). In grade 2+ and 3+ the expression was strong in CIN II and CIN III respectively. The expression of Ki67 occurred in all the different grades of NIC. Conclusions: The coexpression of Ki67 and p16 is 85% in the different grades of CIN, being frequent in the group of CIN II. (AU)

Histopathological alterations in gills, liver, kidney and muscles of Ictalurus punctatus collected from pollutes areas of River

Abstract Untreated sewage and industrial wastes from Faisalabad city are disposed to River Chenab through Chakbandi Main Drain (CMD). The present project is planned to investigate the effects of this freshwater pollution on the body of fish Ictalurus punctatus. The specimens of this fish species were collected upstream and downstream of the entrance of CMD into River Chenab. Fish gills, liver, kidney and muscles from dorsolateral regions of fish were subjected to histopathology. Farmed fish and fish from upstream areas were used as control. Fish collected from polluted experimental sites showed significant damage in selected organs. Gill tissues showed an abnormality in the form of an uplifting of the primary epithelium, fusion, vacuolation, hypertrophy, and necrosis. While liver tissues subjected to hepatocytes degeneration, necrosis, mitochondrial granular hepatocyte, and sinusoids dilation. Kidney tissues indicated increased bowmen space and constricted glomerulus and degenerated nephrons. Edema, necrosis, and atrophy were observed in muscle tissues of fish from polluted areas. Fish from the upstream area showed fused gill lamellae, inflammatory cell infiltration, hypertrophy and vacuolation in hepatocytes. Kidney tissues indicated the presence of nuclear tubular cells, destructive renal tubules, hemorrhage, and necrosis at tubular epithelium. Intra myofibril spaces were also observed in muscles. Specimens of control fish indicated no variation in gills, liver, kidney, and muscles. The present study revealed a strong correlation between the degree of tissue damage and environmental contamination. Present findings also compel global warnings to protect our water bodies and fish to rescue the human population.

Resumo O esgoto não tratado e os resíduos industriais da cidade de Faisalabad, no Paquistão, são descartados no Rio Chenab através do dreno principal de Chakbandi (CMD). O presente projeto busca investigar os efeitos dessa poluição de água doce no corpo de peixes Ictalurus punctatus. Os espécimes deste peixe foram coletados a montante e a jusante da entrada do CMD no Rio Chenab. Brânquias, fígado, rim e músculos das regiões dorsolaterais dos peixes foram submetidos à histopatologia. Peixes de criação e peixes de áreas a montante foram utilizados como controle. Peixes coletados em locais experimentais poluídos mostraram danos significativos em órgãos selecionados. Os tecidos branquiais mostraram uma anormalidade na forma de elevação do epitélio primário, fusão, vacuolação, hipertrofia e necrose. Observou-se que os tecidos hepáticos estão sujeitos a degeneração de hepatócitos, necrose, hepatócitos mitocondriais granulares e dilatação de sinusoides. Os tecidos renais indicaram aumento do espaço dos arqueiros, glomérulos contraídos e néfrons degenerados. Edema, necrose e atrofia foram observados nos tecidos musculares de peixes de áreas poluídas. Peixes da área a montante apresentaram lamelas branquiais fundidas, infiltração de células inflamatórias, hipertrofia e vacuolização em hepatócitos. Os tecidos renais indicaram a presença de células tubulares nucleares, túbulos renais destrutivos, hemorragia e necrose no epitélio tubular. Os espaços intramiofibrilas também foram observados nos músculos. Amostras de peixes controle não indicaram variação em brânquias, fígado, rim e músculos. O presente estudo revelou uma forte correlação entre o grau de dano tecidual e a contaminação ambiental. As descobertas atuais também constituem avisos globais para proteger nossos corpos d'água e peixes para resguardar a população humana.

Caracterização de colágenos tipos I e III no estroma do carcinoma de células escamosas cutâneo em cães / Characterization of types I and III collagen in the stroma of cutaneous squamous cell carcinoma in dogs

O carcinoma de células escamosas (CCE) é uma neoplasia epitelial maligna que acomete cães e diversas outras espécies, incluindo a humana. O CCE afeta vários sítios anatômicos e pode desenvolver metástase. O objetivo deste estudo foi a caracterização das fibras de colágenos tipos I e III no estroma do CCE cutâneo de cães. Para este trabalho, utilizaram-se 44 amostras de pele incluídas em parafina e que tiveram prévio diagnóstico de CCE. As amostras foram processadas histologicamente e coradas com hematoxilina/eosina para confirmação do diagnóstico e classificação do grau de diferenciação tumoral e com a coloração histoquímica de picrosirius para observação dos colágenos tipos I e III. O colágeno tipo III mostrou maior expressão nos CCEs cutâneos bem diferenciados. O papel do colágeno do tipo III nas neoplasias não está bem esclarecido, e outros fatores além do grau de diferenciação celular podem estar envolvidos em sua expressão e determinar sua importância na biologia tumoral.

Squamous cell carcinoma (SCC) is a malignant epithelial tumor that affects dogs and several other species, including humans. The SCC occurs in various anatomical sites and can develop metastasis. The aim of this study was to characterize types I and III collagen fibers in the stroma of cutaneous SCC in dogs. For this work 44 paraffin-embedded samples with previous diagnostic of SCC were used. Samples were processed and evaluated histologically with hematoxylin/eosin to confirm the diagnosis and classification of cell differentiation degree and with Picrosirius for observation of types I and III collagen. Type III collagen expression was higher in well-differentiated SCC. The role of type III collagen in cancer is not very clear and factors other than cell differentiation degree may be involved in its expression and determine its importance in tumor biology.

Histological identification of H. pylori stained by hematoxylin-eosin and Giemsa: review for quality control / Identificação histológica do H. pylori corado por hematoxilina-eosina e Giemsa: revisão para controle de qualidade

Introduction: Several special staining methods are available for H. pylori (Hp) identification in histological sections of chronic gastritis (CG), including the routine hematoxylin-eosin (HE) method. Some reports suggest that ancillary stains are not always needed to establish the diagnosis of Hp infection. In addition, the benefit of using them, when biopsies show minimal inflammation, is not clear. Objective: We performed a retrospective study to compare the usefulness of HE with Giemsa method for the histopathological diagnosis of Hp in tissue sections. Methods: Histological sections from 390 consecutive patients were reviewed. The patients were registered in the histopathology laboratory of Instituto Alfa de Gastroenterologia, Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, Brasil. They were divided in 4 groups according to the gastric inflammatory changes as follows: Group I, gastric mucosa with normal morphology or minimal inflammatory changes (n = 146); Group II, chronic gastritis (CG) with mild inflammatory activity (n = 101); Group III, CG with patent inflammatory activity (n = 123); Group IV, patients with atrophic body gastritis (n = 20). All histological sections were carefully evaluated by 2 examiners at the oil immersion objective (1000×). Results: The identification of Hp was positive by Giemsa and HE, respectively at: Group III, 111 (90.2%) and 93 (75.6%) patients (p < 0.01); Group II, 43 (42.6%) and 29 (28.7%) patients (p < 0.05). Hp was negative in Groups I and IV. Conclusion: The results show that Giemsa stain is superior to HE for histological identification of Hp in CG. Although Hp could be identified by HE stain in the majority of CG cases, a significant number of infected patients may be neglected, regardless the intensity of the inflammatory response. .

Introdução: Diversos métodos de coloração especial estão disponíveis para a identificação da bactéria H. pylori (Hp) em cortes histológicos. Entretanto, questiona-se a utilidade desses métodos na rotina diária dos laboratórios de patologia diagnóstica. Objetivos: Comparar a utilidade da coloração por hematoxilina-eosina (HE) com a do Giemsa para diagnóstico histopatológico do Hp. Materiais e métodos: Foram revistos os cortes histológicos de 390 pacientes consecutivos cadastrados no Laboratório de Histopatologia do Instituto Alfa de Gastroenterologia, Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, Brasil. Os pacientes foram divididos em quatro grupos: Grupo I - mucosa gástrica apresentando morfologia normal (n = 146); Grupo II - gastrite crônica (GC) com atividade inflamatória discreta (n = 101); Grupo III - CG com atividade inflamatória patente (n = 123); Grupo IV - pacientes com gastrite atrófica corpo (n = 20). Todos os cortes histológicos foram cuidadosamente avaliados por dois examinadores no aumento microscópico de imersão (1000×). Resultados: A identificação do Hp foi positiva pelo Giemsa e pela HE em, respectivamente, 111 (90,2%) e 93 (75,6%) pacientes do Grupo III (p < 0,01) e em 43 (42,6%) e 29 (28,7%) pacientes (p < 0,05) do Grupo II, e negativa nos grupos I e IV. Conclusão: Os resultados mostram que a coloração pelo Giemsa é superior à pelo HE para identificação do Hp em cortes histológicos. Conclui-se que o Hp pode ser visualizado pelo HE na maioria dos casos de GC, contudo, um número significativo de pacientes infectados pode ser negligenciado, independentemente da intensidade da resposta inflamatória. .

Laser terapêutico e células inflamatórias - parte 2: neutrófilos* / Therapeutic laser and inflammatory cells - part 2: neutrophils

O objetivo deste trabalho foi estudar a intensidade do infiltrado inflamatório agudo, presente em tecido conjuntivo perilesional do dorso de ratos submetidos à irradiação laser de baixa potência (λ 685 nm) após uma única aplicação. Foram utilizados dezoito ratos machos, linhagem Wistar, de 250 a 300 gramas, nos quais foram realizadas feridas cirúrgicas padronizadas. A amostra foi constituída de seis grupos, três experimentais e três controles, compostos por quatro e dois ratos, cada grupo, respectivamente. Os grupos experimentais foram irradiados em quatro pontos perilesionais equidistantes, com uma única dose de 0,5J/cm² por ponto, com potência de 35 mW, frequência de 35 pulsos por segundo e tempo de aplicação por ponto de 17 s. Os grupos-controles não foram irradiados. Os animais foram mortos 6, 12 e 24 horas após a irradiação, sendo obtidas peças que seguiram para processamento laboratorial de rotina. O estudo das lâminas foi realizado através da descrição e contagem absoluta dos granulócitos pelo método esteriológico. Os resultados obtidos demonstraram que há uma diminuição no número total de granulócitos, não significante estatisticamente (p≥0,05), quando comparados aos grupos controles. Concluiu-se que a luz laser é capaz de diminuir a intensidade do infiltrado inflamatório após uma única irradiação.

The aim of this work was study the intensity of acute inflammatory infiltrate inconnective tissue after low level laser therapy (λ = 685 nm) irradiation. Eighteen maleWistar rats (250 to 300 grams) with standardized surgical wounds were randomlydistributed into 6 groups - 3 study groups with 4 rats each, and 3 control groups with2 rats each. In the study groups, four equidistant spots around the standardizedwound were irradiated (0.5 J/ cm², 35 mW, 35 Hz, 17 seconds). The control groupswere not irradiated. The animals were killed at 6, 12 and 24 hours after laser therapy.Biological specimens were harvested and routinely processed. The total number of granulocyteswascounted using the stereological method. A non-statistically significant decrease in thetotal number granulocytes was observed in the all study groups. Our results showedthat one single irradiation with laser light reduced the total number of graunulocytesin the animal model used in this study.

Histopathological kidney alterations in rats naturally infected with Leptospira / Alteraciones histopatológicas en ratas naturalmente infectadas con Leptospira

Introduction: Histopathological changes by Leptospira in naturally infected rodent reservoirs have been poorly described. Objective: The aim of the current study is to describe renal histopathology associated with leptospirosis infection of naturally infected rodents captured in the urban area of the city of Medellin, Colombia. Materials and methods: We performed hematoxilin-eosin (H-E) on kidney samples collected from 254 captured rodents. The positive samples were processed by Warthin Starry (W-S) staining and PCR- LipL 32. Results: Fifty one rodent kidneys showed H-E histopathological changes that consisted of inflammatory infiltrate with lympho-plasmocitary cells and histiocytes. We performed W-S staining and PCR- LipL 32 to 67 kidney samples, including the 51 that had shown detectable changes by H-E and 16 (8%) of 203 rodents with negative results. Eight of the samples that tested positive for H-E (15.7%) were also positive for W-S staining. All negative for H-E were also negative for W-S staining. Of the W-S positive samples also tested for culture only three tested positive for both. Additionally, 47 (92.1%) samples positive for H-E were positive for PCR; while eleven of the 16 (68.8%) negative for H-E were positive for PCR. The samples positive for PCR were subsequently tested for culture and 11 (23.4%) were positive. Seven samples were positive for PCR and W-S and three were positive for PCR, W-S and culture. All of the PCR- LipL 32 fragments were sequenced and showed specific amplicons for L. interrogans . Conclusions: The Leptospira infection was confirmed in all of the animals tested. The only histological kidney lesion attributable to leptospiral infection in the reservoir was interstitial nephritis.

Introducción. Los hallazgos histopatológicos ocasionados por Leptospira spp. han sido poco estudiados en poblaciones de roedores naturalmente infectados. Objetivo. Describir la histopatología renal asociada con las infecciones naturalmente adquiridas en un grupo de roedores capturados en el área urbana de Medellín, Colombia. Materiales y métodos. Se llevaron a cabo coloraciones de hematoxilina y eosina de los riñones de 254 roedores recolectados en el área de estudio. Las muestras positivas se procesaron con la coloración de Warthin-Starry y mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR)-LipL32. Results. Se observaron cambios histopatológicos con hematoxilina y eosina en 51 riñones de roedores, que consistieron en infiltrado inflamatorio con linfoplasmocitos e histiocitos. Se utilizó coloración de Warthin-Starry y PCR-LipL32 en 67 muestras de riñón que incluyeron las 51 muestras que tuvieron cambios detectables por hematoxilina y eosina y 16 de 203 (8 %) muestras con resultados negativos. Ocho de las muestras positivas por hematoxilina y eosina (15,7 %) también fueron positivas por la coloración de Warthin-Starry. Las muestras negativas por hematoxilina y eosina (8 %) también fueron negativas con la coloración de Warthin-Starry. Tres de las ocho muestras positivas por esta última, también lo fueron por cultivo. Además, 47 (92,1 %) muestras positivas por hematoxilina y eosina fueron positivas por PCR. Del grupo de 16 negativos por hematoxilina y eosina, 11 (68,8 %) fueron positivos por PCR. De las muestras positivas por PCR, 11 también lo fueron por cultivo (23,4 %). Siete muestras fueron positivas por PCR y Warthin-Starry y tres lo fueron por PCR, Warthin-Starry y cultivo. Todos los fragmentos de la PCR-LipL32 fueron secuenciados y mostraron secuencias específicas de L. interrogans . Conclusiones. Se confirmó la infección por Leptospira y la única lesión presente en el reservorio atribuible fue la nefritis intersticial.

Estudio histológico del sistema digestivo en diferentes estadios de desarrollo de la cachama blanca (Piaractus brachypomus) / Histological Study of the Digestive System in Different Stages of Development of Pacu (Piaractus brachypomus) / Estudo histológico do sistema digestivo em diferentes estágios de desenvolvimento do pacu branco (Piaractus brachypomus)

La cachama blanca (Piaractus brachypomus) es la segunda fuente de producción piscícola en Colombia, después de la tilapia roja (Oreochomi ssp.) y antes de la trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss). Se destaca, además, como una de las especies con mayor potencial productivo en el país. Se realizó el estudio histológico del sistema digestivo de la Piaractus brachypomus a fin determinar la morfología normal en diferentes estadios de desarrollo. Para ello se clasificaron los animales según la edad, el tamaño y el peso en ovas embrionadas, larvas con saco vitelino, alevinos después de reabsorción de saco vitelino, juveniles (3-5 cm, 5-7 cm, 10 cm, 15 cm) y adultos (300 g). La fijación de los tejidos se realizó en formaldehído al 3,7 % y se describió microscópicamente cavidad bucal, faringe, esófago, estómago, ciegos pilóricos, intestinos y las glándulas anexas, hígado y páncreas. Por último, se describió macroscópicamente la organización anatómica de este sistema.

Pacu (Piaractus brachypomus) is the second source of fish production in Colombia after the red tilapia (Oreochomi ssp.) and before the rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). It also stands out as one of the species with the most productive potential in the country. A histological examination was performed on the digestive system of the Piaractu sbrachypomus in order to determine normal morphology at different stages of development. For that purpose, the animals were classified according to age, size and weight in fertilized eggs, yolk-sac larvae, fingerlings after yolk-sac reabsorption, young (3-5 cm, 5-7 cm, 10 cm, 15 cm) and adults (300 g). Tissue fixation took place in formaldehyde at 3.7 % and the oral cavity, pharynx, esophagus, stomach, pyloric caeca, intestines and related glands, liver and pancreas were microscopically described. Finally, the anatomical organization of this system was macroscopically described.

O pacu branco (Piaractus brachypomus) é a segunda fonte de produção originária da piscicultura na Colômbia, depois da tilápia vermelha (Oreochomi ssp.) e antes da truta arco-íris (Oncorhynchus mykiss). Destaca-se, também, como uma das espécies com maior potencial produtivo no país. Realizou-se estudo histológico do sistema digestivo da Piaractus brachypomus a fim determinar a morfologia normal em diferentes estágios de desenvolvimento. Para isso se classificaram os animais de acordo à idade o tamanho e o peso em ovas embrionadas, larvas com saco vitelino, alevinos depois de reabsorção de saco vitelino, juvenis (3-5 cm, 5-7 cm, 10 cm, 15 cm) e adultos ( 300 g). A fixação dos tecidos se realizou em formaldeído ao 3,7 % e se descreveu microscopicamente cavidade bucal, faringe, esôfago, estômago, cegos pilóricos, intestinos e as glândulas anexas, fígado e pâncreas. Finalmente, descreveu-se macroscopicamente a organização anatômica deste sistema.

Detection of Dientamoeba fragilis in patients with HIV/AIDS by using a simplified iron hematoxylin technique / Detecção de Dientamoeba fragilis em pacientes com HIV/AIDS utilizando a técnica de hematoxilina férrica simplificada

INTRODUCTION: Studies strongly indicate Dientamoeba fragilis as one of the causes of diarrhea in human immunodeficiency virus (HIV) patients. METHODS: The objective of the present study was to evaluate the prevalence of D. fragilis associated with the causes of diarrhea in 82 HIV/ AIDS patients hospitalized at the Instituto de Infectologia Emílio Ribas from September 2006 to November 2008. RESULTS: In total, 105 samples were collected from 82 patients. Unprotected sex was the most frequent cause of HIV infection (46.3%), followed by the use of injectable or non-injectable drugs (14.6%). Patients presented with viral loads of 49-750,000 copies/ mL (average: 73,849 ± 124,850 copies/mL) and CD4 counts ranging of 2-1,306 cells/mm³ (average: 159 ± 250 cells/mm³). On an average, the odds of obtaining a positive result by using the other techniques (Hoffman, Pons and Janer or Lutz; Ritchie) were 2.7 times higher than the chance of obtaining a positive result by using the simplified iron hematoxylin method. Significant differences were found between the methods (p = 0.003). CONCLUSIONS: The other techniques can detect a significantly greater amount of parasites than the simplified iron hematoxylin method, especially with respect to Isospora belli, Cryptosporidium sp., Schistosoma mansoni, and Strongyloides stercoralis, which were not detected using hematoxylin. Endolimax nana and D. fragilis were detected more frequently on using hematoxylin, and the only parasite not found by the other methods was D. fragilis.

INTRODUÇÃO: Estudos indicam a Dientamoeba fragilis como uma das causas de diarréia em pacientes com HIV/AIDS. MÉTODOS: Os objetivos deste estudo foram avaliar a prevalência de D. fragilis associadas com as causas de diarréia em pacientes com HIV/AIDS internados no Instituto de Infectologia Emílio Ribas (IIER). Oitenta e dois pacientes internados no IIER fizeram parte deste estudo de setembro de 2006 a novembro de 2008. RESULTADOS: No total, 105 amostras foram coletadas a partir de 82 pacientes neste estudo. Sexo desprotegido foi à causa mais frequente para a aquisição do HIV (46,3%), seguido pelo uso de drogas injetáveis ou não injetáveis (14,6%). Relações heterossexuais foram os mais citados (19,5%). Pacientes apresentaram carga viral entre 49 e 750.000 (média de 7.849 ± 124.850) e CD4 variando de 2 a 1.306 (média de 159 ± 250). Em média, as chances de um resultado ser positivo com outras técnicas foram 2,7 vezes maiores do que a chance de um resultado positivo com hematoxilina férrica simplificada. Foram encontradas diferenças significativas entre os métodos (p=0,003). CONCLUSÕES: As outras técnicas são capazes de detectar uma quantidade significativa maior de parasitas em comparação com a hematoxilina férrica simplificada, especialmente em relação à Isospora belli, Cryptosporidium sp., Schistossoma mansoni e Strongyloides stercoralis que não foram encontrados utilizando a hematoxilina e a Endolimax nana e D. fragilis foram mais detectados pela hematoxilina férrica simplificada, principalmente a D. fragilis que não foi detectada pelos outros métodos.

Neoplasias sólidas de células redondas en edad pediátrica: correlación entre diagnóstico morfológico e inmunohistoquímica / Solid neoplasm of circle celis in the pediatric age: correlation between morphological and immunohistochemistry diagnóstic

Precisar la importancia de realizar el estudio de inmunohistoquímica y su correlación con el diagnóstico anatomopatológico de rutina para el diagnóstico de los tumores sólidos malignos de células redondas en pacientes pediátricos. Se realizó un estudio transversal, descriptivo, retrospectivo no experimental. Se estudiaron 147 pacientes con diagnóstico de neoplasia de células redondas, de los cuales 96 cumplieron con criterios de inclusión. La mayor frecuencia de casos la obtuvo el linfoma No Hodgkin (20,8%), seguido del linfoma de Hodgkin (15,6%) y tumor de Wilms (17,7%). El grupo etario mayormente afectado fue el escolar (37,5%). El género predominante fue el masculino (60,4%). Las manifestaciones clínicas más frecuentes fueron masa palpable (76,04%), fiebre(44,79%), anemia (41,67%), dolor (41,30%) y pérdida de peso (33,33%). Se evidenció la mayor correlación diagnóstica en el tumor de Wilms (100%), seguido del linfoma No Hodgkin (80%) y el linfoma de Hodgkin (75%); la menor correlación la presentaron el sarcoma de Ewingy el neuroblastoma (41,7%, ambos). La correlación total resultó “considerable” según la fuerza de concordancia del coeficiente de Kappa (k: 0,601. P=0,000). Se requiere la integración del examen histopatológico de rutina como método diagnóstico de pesquisa y del estudio de inmunohistoquímica como método auxiliar diagnóstico, para determinar la histogénesis de las neoplasias, descartar diagnósticos diferenciales, realizar un diseño terapéutico apropiado y precisar el pronóstico.

To precise the state and the importance o fthe study of immunohistochemistry and its correlation with the routine pathological diagnosis to use in diagnosis of malignant solid tumors of round cells in pediatric patients. We was performed a transversal, descriptive and retrospective non-experimental study. We studied 147 patients diagnosed with round cell tumor, 96 of them weremet in inclusion criteria. The highest frequency of the cases was Non-Hodgkin lymphoma (20.8%), followed by the Hodgkin lymphoma (15.6%) and the Wilms tumor(17.7%). The age group most affected was the school(37.5%). The male gender was the predominant (60.4%).The most frequent clinical manifestations were a palpablemass (76.04%), the fever (44.79%), the anemia (41.67%),the pain (41.30%) and the weight loss (33.33%). Evidencedthe highest correlation in the diagnosis of Wilms tumor(100%), followed by Non-Hodgkin lymphoma (80%) and Hodgkin lymphoma (75%); showed the lowest correlation between the Ewing sarcoma and neuroblastoma (41.7%, both). The total correlation is “considerable” accordingto strength of agreement the Kappa coefficient (k: 0.601.P=0.000). It requires the integration of routine histopathological examination as diagnostic method of research and study of immunohistochemistry as an auxiliary diagnostic method to determine the histogenesis of neoplasm and exclude the differential diagnoses, make anappropriate therapeutic design and the determine prognosis of this group of patients.

Programando o software Imagej para a seleção automática de áreas marcadas por imuno-histoquímica e coradas com o cromógeno dab e contra-coradas pela hematoxilina / Programming Imagej software for automatic selection of immunohistochemistry marked areas stained by dab chromogen and counter-stained by hematoxylin

Introdução: A quantificação dos parâmetros de imunomarcação na análise de imagens de imuno-histoquímica depende da adequada delimitação das regiões marcadas, sendo a seleção destas regiões realizada manualmente ou através de métodos computacionais automáticos ou semi-automáticos. Objetivos: Viabilizar um método de seleção automática de áreas marcadas por imuno-histoquímica por meio do software ImageJ, apresentando a programação envolvida e analisando quantitativamente as imagens. Métodos: Para a aplicação e avaliação da programação proposta neste trabalho foram utilizadas imagens de imuno-histoquímica para localização de alfa-actina de músculo liso (α-SMA) provenientes de estudo de modelo animal experimental de fibrose renal em ratos Wistar machos. Foram capturadas imagens de áreas distintas da região do córtex renal contendo regiões positivas coradas pelo 3,3'-Diaminobenzidina (DAB) em uma lâmina com imunomarcação extensa (n=10) e em outra lâmina com Imunomarcação focal (n=10), provenientes de dois animais. A contra-coloração foi feita com hematoxilina. Resultados: A diferença da extensão da imunomarcação foi qualitativamente evidente entre os dois grupos de imagens. As áreas reveladas pelo DAB nas lâminas dos animais I e II foram selecionadas automaticamente pelo programa, ajustadas pelo operador, e quantificadas, apresentando fração de área ocupada de 23,48 ± 6,52% e de 0,10 ± 0,04% respectivamente, valores expressos em média ± desvio padrão com diferença estatística significativa (p < 0,0001).Conclusões: O software ImageJ mostrou-se adequado para a aplicação da seleção automática de áreas marcadas por imuno-histoquímica, embora a intervenção do operador tenha sido necessária para a correta identificação dos pontos de corte do "threshold", supervisionando a correta delimitação das áreas.

Introduction: The immunostaining quantitative parameters of immunohistochemistry image analysis depend on the proper delimitation of marked regions. The selection of those marked regions is carried out manually, or by computed semi-automatic or automatic methods.Objectives: to carry out a feasible automatic method on selection of immunohistochemistry stained areas applying the Image J software (NIH), presenting the computed program and the quantitative analysis of some images.Methods: For application and evaluation of the proposed program of the study, we used immunehistochemistry images of alpha-smooth muscle actin (α-SMA), a marker of epithelial dedifferentiation, coming from an experimental study of renal fibrosis in Wistar male rats. The images have been captured from non-overlapping regions of the renal cortex, comprising positive 3,3'-Diaminobenzidine (DAB)-stained fields of a strong immunostained slide (N=10, animal I) and another slide with focal immune pattern (N=10, animal II), obtained from two different animals. The slides were counter-stained by Hematoxylin.Results: The difference by immunostaning between the two specimens was qualitatively evident. The areas revealed as DAB-positive in animals I and II slides were automatically selected by the proposed program, visually adjusted by the operator, and finally, quantified, resulting in an occupied area fraction of 23.48 ± 6.52% and 0.10 ± 0.04%, respectively, p<0.0001. Conclusion: The software Image J was able to perform a feasible automatic selection of immunohistochemistry DAB stained areas, although the operator intervention has been necessary to identify the correct threshold cut-off points, supervising if the delimitation of marked areas was precise.

Pesquisa de Dientamoeba fragilis em pacientes com HIV/Aids utilizando a técnica de hematoxilina férrica simplificada / Search Dientamoeba fragilis in patients with HIV/Aids using the simple technique of iron hematoxylin

A diarreia, manifestação clínica comum em pacientes acometidos pela AIDS, pode levar a óbito em decorrência do diagnóstico tardio e da falta de tratamento adequado. Uma das causas de diarréia em pacientes com AIDS é atribuída ao Dientamoeba fragilis, cuja etiologia envolve diversos fatores, com a prevalência de patógenos emergentes e oportunistas, como: vírus da imunodeficiência adquirida (HIV) e outros agentes virais, bacterianos e fúngicos. Este estudo avaliou a eficiência da coloração de hematoxilina férrica simplificada na identificação da Dientamoeba fragilis, bem como verificou a prevalência do protozoário associada a causas de diarreia em pacientes com HIV/AIDS. A pesquisa contemplou 82 pacientes com idade compreendida entre 18 e 61 anos (idade média de 38 anos), com predominância do gênero masculino (75,6%), acompanhados no Instituto de Infectologia “Emílio Ribas”, de setembro de 2006 a novembro de 2008. Das amostras coletadas, com emprego de técnicas especiais de coloração (Hematoxilina Férrica), comparando-se a outros métodos com solução conservante Schaudinn, métodos coproparasitológicos (Hoffman, Pons e Janer, 1934; Richie, 1948). A técnica de hematoxicilina férrica simplificada detectou a Dientamoeba fragilis em 1,2% das amostras, sendo que as outras técnicas não foram capazes de detectar o protozoário. Concluiu-se que a coloração de hematoxilina férrica simplificada mostrou-se eficaz na detecção da Dientamoeba fragilis, é uma técnica rápida e prática para diagnóstico em laboratório de rotina, quando comparada com outros métodos de coloração. A Dientamoeba fragilis foi associada a uma das causas de diarreia em pacientes aidéticos.

Pesquisa de Dientamoeba fragilis em pacientes com HIV/Aids utilizando a técnica de hematoxilina férrica simplificada / Search Dientamoeba fragilis in patients with HIV/Aids using the simple technique of iron hematoxylin

A diarreia, manifestação clínica comum em pacientes acometidos pela AIDS, pode levar a óbito em decorrência do diagnóstico tardio e da falta de tratamento adequado. Uma das causas de diarréia em pacientes com AIDS é atribuída ao Dientamoeba fragilis, cuja etiologia envolve diversos fatores, com a prevalência de patógenos emergentes e oportunistas, como: vírus da imunodeficiência adquirida (HIV) e outros agentes virais, bacterianos e fúngicos. Este estudo avaliou a eficiência da coloração de hematoxilina férrica simplificada na identificação da Dientamoeba fragilis, bem como verificou a prevalência do protozoário associada a causas de diarreia em pacientes com HIV/AIDS. A pesquisa contemplou 82 pacientes com idade compreendida entre 18 e 61 anos (idade média de 38 anos), com predominância do gênero masculino (75,6%), acompanhados no Instituto de Infectologia “Emílio Ribas”, de setembro de 2006 a novembro de 2008. Das amostras coletadas, com emprego de técnicas especiais de coloração (Hematoxilina Férrica), comparando-se a outros métodos com solução conservante Schaudinn, métodos coproparasitológicos (Hoffman, Pons e Janer, 1934; Richie, 1948). A técnica de hematoxicilina férrica simplificada detectou a Dientamoeba fragilis em 1,2% das amostras, sendo que as outras técnicas não foram capazes de detectar o protozoário. Concluiu-se que a coloração de hematoxilina férrica simplificada mostrou-se eficaz na detecção da Dientamoeba fragilis, é uma técnica rápida e prática para diagnóstico em laboratório de rotina, quando comparada com outros métodos de coloração. A Dientamoeba fragilis foi associada a uma das causas de diarreia em pacientes aidéticos.

Marcadores moleculares em câncer de mama preditivos de metástases axilares / Molecular features of breast cancer predictive of lymph node metastases

OBJETIVO: Avaliar e relacionar fatores morfológicos e moleculares de câncer de mama preditivos de metástases em linfonodos axilares. MÉTODOS: Selecionamos 123 casos de carcinomas mamários invasores subdivididos em três grupos de acordo com o status axilar (pacientes com macrometástases, com micrometástases e linfonodo-negativas). Avaliamos e correlacionamos a presença de metástases axilares com fatores morfológicos (tamanho do tumor, tipo e grau histológicos, invasão linfática e sangüínea em lâminas coradas pela hematoxilina e eosina) e moleculares do tumor primário (receptores de estrógeno e progesterona, Ki67, p53, E-caderina, Her2, e invasão linfática e sangüínea em lâminas coradas pela imunoistoquímica, para D2-40 e CD31). RESULTADOS: A ocorrência de metástases axilares esteve positivamente relacionada à embolização neoplásica em vasos linfáticos em lâminas coradas pela hematoxilina e eosina (HE), quando analisamos os casos com metástases e sem metástases (p=0,04), e, quando eles eram analisados em três subgrupos (p=0,002). Também identificamos relação positiva e estatisticamente significativa entre a presença de metástases axilares e invasão de vasos sangüíneos em lâminas coradas pelo CD31 (p=0,02). As demais variáveis moleculares e morfológicas não mostraram relação estatisticamente significativa com a presença de metástases. CONCLUSÃO: A invasão neoplásica em vasos linfáticos e sangüíneos identificadas em cortes histológicos corados pela HE e por marcadores imunoistoquímicos relaciona-se positivamente com a ocorrência de metástases, e é preditivo de metástases em linfonodos axilares em câncer de mama.

OBJECTIVE: The aim of our study was to analyze morphologic and molecular markers of breast cancer relating them to the presence of metastases in axillary lymph nodes. METHODS: We selected 123 cases of invasive mammary carcinomas stratified into three subgroups: with macrometastases, with micrometastases, and lymph node negative. Presence of metastases was evaluated relating them with morphologic factors (size of primary tumor, type and grade, presence of lymphatic and blood vessel invasion in hematoxylin and eosin-stained slides) and molecular factors of primary tumor (estrogen and progesterone receptors, E-cadherin, Ki67, p53, Her2 expression, and the presence of lymphatic and blood vessel invasion in immunostained sections for D2-40 and CD31). RESULTS: Axillary lymph node metastases were positively related to the presence of lymphatic vessel invasion in hematoxylin and eosin (H&E)-stained slides, when analyzed with or without metastases (p=0.04) and when analyzed in the three subgroups (p=0.002). Lymph node metastases were also positively related to presence of blood vessel invasion identified by immunohistochemistry (IHC) for CD31 (p=0.02). However other morphologic and molecular factors were not related to the presence of axillary node metastases. CONCLUSION: Lymphatic and blood vessel invasion identified in H&E and IHC-stained slides are positively related to the rmetastatic status of axillary lymph nodes and are predictive of axillary lymph node metastases in breast cancer.