Mastitis, somatic cell count, and its impact on the quality of dairy-products … An omission in Colombia?: A review / Mastitis, conteo de células somáticas y su impacto en la calidad de los productos lácteos … ¿Una omisión en Colombia?: Revisión de literatura / Mastite e seu impacto na qualidade dos laticínios ... ¿Uma omissão na Colômbia?: Revisão de literatura

Abstract Mastitis is the most common disease in dairy herds and the main cause of economic losses in milk production worldwide. This inflammatory reaction of the mammary gland affects the quantity, composition and quality of milk produced and its suitability for the dairy industry. Despite of its importance, Colombia has no regulations on somatic cell count (SCC); that is, no official upper limits have been established for the dairy industry. The current quality-based payment system for raw milk does not encourage local producers to reduce the level of somatic cells. Consequently, Colombia is at a disadvantage compared to countries that include this parameter in their payment schemes and subscribe to international free trade agreements, affecting the competitiveness of the Colombian dairy sector. This article reviews the types of somatic cells, the microbiology of mastitis, its etiology and diagnosis, the changes that generate the composition of milk, and the impact of high SCCs on the quality of dairy products, such as yogurt, cheese, and milk powder. The final section offers a reflection on the problem of high SCCs in Colombia and the lack of regulations in this regard.

Resumen La mastitis es la enfermedad más frecuente en los hatos lecheros y es la principal causa de pérdidas económicas en la producción de leche alrededor del mundo. Esta reacción inflamatoria de la glándula mamaria afecta la cantidad, composición, calidad y aptitud de la leche para procesamiento por la industria. Sin embargo, en Colombia no existe normatividad sobre el recuento de células somáticas, principal indicador de mastitis; es decir, no existen límites oficiales que sirvan de referencia para la industria lechera. El sistema de pago basado en calidad no incentiva al productor a disminuir el nivel de células somáticas. Esto coloca al país en desventaja frente a otros países que exigen este parámetro en su esquema de pago y con los cuales Colombia tiene tratados de libre comercio, afectando negativamente la competitividad del sector lechero colombiano. En este artículo se hace una revisión sobre los tipos de células somáticas, la microbiología de la mastitis, su etiología, el diagnóstico, los cambios que generan la composición de la leche y el impacto que tienen los altos recuentos de células somáticas sobre la calidad de algunos derivados lácteos como yogures, quesos y leche en polvo. En la parte final se presenta una reflexión sobre la problemática de los altos recuentos de células somáticas en Colombia y la falta de normatividad al respecto.

Resumo A mastite é a doença mais frequente nos rebanhos leiteiros e é a principal causa de perdas econômicas na produção de leite em todo o mundo. Essa reação inflamatória da glândula mamária causa efeitos na quantidade, composição, qualidade e aptidão de leite processado pela indústria. No entanto, na Colômbia, não há regulamentação sobre a contagem de células somáticas até o momento, o principal indicador de mastite, ou seja, não há limites oficiais que sejam referência para a indústria leiteira. O sistema de pagamento baseado na qualidade não incentiva o produtor a diminuir o nível de células somáticas. Isso coloca o país em desvantagem em comparação com outros países que exigem esse parâmetro em seu esquema de pagamento e com quem a Colômbia possui acordos de livre comércio, afetando negativamente a competitividade do setor. Este documento analisa os tipos de células somáticas, a microbiologia da mastite, sua etiologia, diagnóstico, alterações na composição do leite e o impacto da alta contagem de células somáticas na qualidade do leite. Alguns derivados de leite, como iogurtes, queijos e leite em pó. Na parte final, é feita uma reflexão sobre o problema da alta contagem de células somáticas na Colômbia e a falta de regulamentação nesse sentido.

Validation of a method employing liquid chromatography to identify and quantify glycomacropeptide of casein in raw milk / Validación de un método mediante cromatografía líquida para identificar y cuantificar glicomacropéptido de caseína en la leche cruda

Background: The information on official testing methods, or regulatory methods in Colombia to test whey in milk is limited; this restriction of information goes against the possibility of mitigating the risk of food fraud. Objectives: The validation of an HPLC method to determine casein glycomacropeptide (c-GMP), a protein that countries such as Brazil, Spain, and Ecuador have used as an indicator of raw milk adulteration with whey, was carried out. Methods: A 10mL sample of raw milk is precipitated with 24% TCA using ultrasound, a process followed by filtration. The collected fraction ensured the separation of c-GMP and then injected into the liquid chromatography. Results: A 30 minutes analysis allowed the determination of c-GMP with a retention time of 12.9 ± 0.5 minutes. The performance characteristics method in the validation exercise were: recovery percentage 99.97%, linearity R2> 0.95; % RSD accuracy <5.3%. Conclusion, the method exhibits desirable attributes for the intended purpose

Antecedentes: En Colombia la información de dominio público en metodologías de análisis de lactosuero en leche es limitada, restringiendo la posibilidad de acceder a ellas para mitigar el riesgo de fraude alimentario. Objetivos: Se realizó validación de un método por HPLC para determinar en leche cruda c-GMP, proteína usada como indicador de adulteración en países como Brasil y Ecuador. Metodos: Una muestra de 10mL de leche cruda es precipitada con TCA al 24% empleando ultrasonido, proceso seguido por filtración. La fracción recolectada aseguró la separación del c-GMP para luego inyectar al cromatógrafo líquido. Resultados: La determinación de c-GMP permitió el análisis en 30 minutos con tiempo de retención de 12,9 ± 0,5 minutos. Las características de desempeño del método en el ejercicio de validación fueron: porcentaje de recuperación 99,97%, linealidad R2>0,95; precisión %RSD< 5,3%. Conclusión: el método al final del ejercicio exhibe atributos para el fin previsto

Clasificación de empresas ganaderas doble propósito por calidad y canales de comercialización de la leche en el Caribe colombiano / Dual purpose farms classify according quality and milk marketing channels on the colombian Caribbean

RESUMEN Una leche de excelente calidad debe presentar altos porcentajes de proteína, grasa y sólidos totales, bajos recuentos de mesófilos y de células somáticas y estar libres de inhibidores y sustancias extrañas, para asegurar su inocuidad. El objetivo del presente estudio fue realizar una clasificación de empresas ganaderas de doble propósito, con base a la calidad de la leche y sus canales de comercialización, en una subregión del medio Sinú, en el Caribe colombiano. El tipo de estudio fue descriptivo transversal. Se determinaron variables fisicoquímicas, microbiológicas de la leche y de la sanidad de la ubre, y, por medio de una encuesta, se analizaron parámetros zootécnicos, para establecer factores de manejo. Igualmente, mediante un análisis de componentes principales y correspondencias múltiples, se categorizó la productividad y la competitividad, de acuerdo con los parámetros de calidad de la leche cruda. La mayoría de las empresas ganaderas fueron consideradas de mediana extensión con ordeño manual y almacenamiento de la leche en cantinas. El porcentaje de vacas en ordeño no fue alto y una tercera parte de los productores manifestaron mayores ingresos, por ventas diferentes a la leche. Se determinó que la mayor competitividad, se presentó en las empresas ganaderas que realizan excelentes prácticas de manejo y se asoció con altos índices de calidad y productivos. En consecuencia, es necesario implementar las buenas prácticas ganaderas, para aumentar la competitividad.

ABSTRACT An excellent quality milk must have high protein, fat and total solids percentages, low mesophilic and somatic cells counts, and to be free of inhibitor and foreign substances in order to ensure its safety. The objective of this study was to classify the dual-purpose farms based on its milk quality and its marketing channels in a subregion of the middle Sinu in the colombian Caribbean. The study type was descriptive cross sectional. Physicochemical, microbiological variables and udder health were analyzed. Zootechnical parameters were evaluated in order to stablish the manage factors. Equally, through an analysis of mayor compounds and multiple matches the productivity and competitiveness of the farms was categorized based on row milk quality parameters. Most livestock companies were considered as medium length with manual milking and milk storage in canteens. The percentage of cows in milking are not high and a third part of the producer manifested higher income by sales other than milk. It was determined that the higher competitiveness associated with higher quality and productivity indexes occurred in farms where best management practices were implemented. It is necessary to implement good livestock practices to increase the competitiveness.

Calidad higiénico-sanitaria de dos sistemas de ordeño en fincas bovinas ubicadas en el sector Vuelta Larga, municipio Maturín, estado Monagas (Venezuela) / Hygienic-sanitary quality of two milking systems in bovine farms located in sector Vuelta Larga, Maturín municipal state, Monagas state (Venezuela)

RESUMEN El objetivo de la presente investigación fue evaluar la calidad higiénico-sanitaria de dos sistemas de ordeño en fincas bovinas del municipio Maturín estado Monagas (Venezuela). El ensayo tuvo una duración de seis semanas, se calculó la eficiencia higiénica (%EH) de las instalaciones, el personal, la rutina de ordeño, la limpieza-desinfección y el almacenamiento-transporte de dos unidades de producción. Adicionalmente, se determinó la población de bacterias aerobias mesófilas (BAM) que se cuantificaron en un experimento en bloques al azar, con arreglo factorial de los tratamientos (2x2) donde el factor A, correspondió al sistema de ordeño manual y mecánico y el factor B, a la aplicación y omisión de secado de los pezones de cada animal previo al ordeño. La variable se examinó por análisis de varianza y sus valores promedios comparados por Tukey al 5% de probabilidad. El %EH de las fincas evaluadas fue de 66,66% para la finca 2 y de 54,84% para la finca 1, considerados no satisfactorios. Los resultados obtenidos para la variable BAM indican que el factor sistema de ordeño mostró diferencia altamente significativa (p ≤ 0,01); el sistema manual presentó el menor conteo con 5,24 Log10 UFC/ mL; mientras que para el factor condición de secado se constató diferencia significativa (p ≤ 0,05), ya que la aplicación de secado presentó la menor población de bacterias aerobias mesófilas con 5,25 Log10 UFC/mL. Las medidas higiénicas y sanitarias implementadas en la rutina de ordeño influyeron directamente en la calidad de la leche cruda.

ABSTRACT The objective of the present investigation, was to evaluate the 'Hygienic-Sanitary Quality of two Milking Systems in Bovine Farms' in Vuelta Larga Sector, Maturín City, Monagas State (Venezuela). The trial lasted six weeks, in which the Hygienic Efficiency (% EH) of the facilities, the workers, the milking routine, the cleaning and disinfection measures and the storage and transport of both milking systems, were calculated. Furthermore, the population of Mesophilic Aerobic Bacteria (BAM) was determined ; The data were processed following a distribution in random blocks with factorial arrangement (2x2) whose factor A represented the milking system: manual and mechanical, and the factor B was the application and omission of manual drying of teats for each animal prior to milking. The percentage of Hygienic Efficiency (% EH) of the farms evaluated was not satisfactory, corresponding to 66.66% in the farm 2 and 54.84% in the farm 1. The variable was examined by analysis of variance and its mean values compared by Tukey test at 5% of probability. Factor A achieved a highly significant difference (p ≤0.01), with the manual system obtaining the lowest count with 5.24 Log10 CFU / mL. In factor B significant difference was found (p≤0.05), the drying application decreased the BAM population with 5.25 Log10 CFU / mL. The Hygienic and Sanitary measures implemented in the milking routine directly influence the quality of raw milk.

Presence of mycotic microorganisms in raw milk from cooling tanks in the Boyacense highlands (Colombia) / Presencia de microorganismos micóticos en leche cruda de tanques de enfriamiento en el Altiplano Boyacense (Colombia) / Presença de microrganismos micóticos no leite cru de tanques de resfriamento no Altiplano Boyacense (Colômbia)

Abstract Yeasts and molds are germs that should not be found in milk samples because they are potentially pathogenic for both animals and humans. Due to its high handling during collection, storage, and transport, milk is susceptible to contamination with these microorganisms, so its detection in this food in these phases is relevant in order to prevent possible situations that compromise public health. The objective of the present work was to determine the presence of molds and yeasts in samples of milk cooling tanks in the Boyacense highlands. Samples were taken from 20 raw milk cooling tanks located in 20 different dairy municipalities of the department of Boyacá in order to determine the presence of molds and yeasts through Compact Dry YM®. 35% of the samples of milk did not present growth of molds or yeasts, meanwhile, in 25% yellow colony growth and its tonalities were found, which would correspond with mold colonies, in 5% determined the growth only of blue colonies, corresponding to yeast growth. In the remaining 35% growth of blue and yellow colonies was detailed. This shows that there is a high percentage of molds and yeasts in samples of refrigerated raw milk, a situation that could trigger a public health problem.

Resumen Las levaduras y los mohos son gérmenes que no se deben encontrar en muestras de leche porque son potencialmente patógenos tanto para los animales como para el ser humano. Debido a su alta manipulación durante la recolección, almacenamiento y transporte, la leche es susceptible de contaminación con estos microorganismos, por lo cual su detección en este alimento en estas fases, es relevante con el fin de prevenir posibles situaciones que comprometan la salud pública. El objetivo del presente trabajo fue determinar la presencia de mohos y levaduras en muestras de tanques de enfriamiento de leche en el Altiplano Boyacense. Se tomaron muestras de 20 tanques de enfriamiento de leche cruda ubicados en 20 diferentes municipios lecheros del departamento de Boyacá con el fin de determinar la presencia de mohos y levaduras a través de Compact Dry YM®. El 35% de las muestras de leche no presentó crecimiento de mohos ni de levaduras, por su parte, en el 25% se encontró crecimiento de colonias de color amarillo y sus tonalidades, lo que correspondería con colonias de mohos, en el 5% se determinó el crecimiento únicamente de colonias azules, correspondiente a crecimiento de levaduras. En el 35% restante se detalló un crecimiento de colonias azules y amarillas. Esto demuestra que existe un alto porcentaje mohos y levaduras en muestras de leche cruda refrigerada, situación que podría desencadenar un problema de salud pública.

Resumo Leveduras e fungos são germes que não devem ser encontrados em amostras de leite, pois são potencialmente patogênicos tanto para animais como para humanos. Devido ao seu alto manuseio durante a coleta, armazenamento e transporte, o leite é suscetível à contaminação com esses microrganismos, por isso sua detecção neste alimento nestas fases, é relevante para prevenir possíveis situações que comprometam a saúde pública. O objetivo do presente trabalho foi determinar a presença de bolores e leveduras em amostras de tanques de resfriamento de leite no Altiplano de Boyacense. Foram coletadas amostras de 20 tanques de resfriamento de leite cru, localizados em 20 diferentes municípios leiteiros do departamento de Boyacá, a fim de determinar a presença de bolores e leveduras através do Compact Dry YM®. 35% das amostras de leite não apresentaram crescimento de bolores ou leveduras, entretanto, em 25% de crescimento de colônia amarela e suas tonalidades foram encontradas, o que corresponderia às colônias de bolores, em 5% determinou o crescimento apenas das colônias azuis, correspondendo ao crescimento das leveduras. Isso mostra que há uma alta porcentagem de bolores e leveduras em amostras de leite cru refrigerado, situação que pode desencadear um problema de saúde pública.

Producción de biofilm y presencia de genes icaABCD en cepas de Staphylococcus aureus aisladas de leche cruda / Biofilm production and presence of genes icaABCD in Staphylococcus aureus strains isolated from raw milk

En la patogénesis de la mastitis estafilocócica, el biofilm se considera un marcador de virulencia que permite la adherencia del microorganismo al epitelio mamario. Con la finalidad de determinar la producción de biofilm y detectar la presencia de genes icaABCD, se analizaron 30 cepas de S. aureus aisladas de leche cruda obtenida de vacas con mastitis subclínica. El biofilm se determinó por el método cuantitativo sobre microplacas de cultivo celular y los genes icaABCD por reacción en cadena de la polimerasa. En 96,67% de las cepas de S. aureus se observó producción de biofilm. De éstas 43,34% fueron fuertes productoras, 30,00% moderadas productoras, 23,33% débiles productoras y 3,33% no productoras de biofilm. La totalidad de los genes icaADCD se obtuvo en 6,66% de los aislamientos. Todas las cepas, excepto una, presentaron icaA o icaD. En 56,66% de los aislamientos se identificaron genes icaA/icaD. En todas las cepas productoras de biofilm se identificaron genes del operón icaABCD, lo cual evidencia que poseen un factor de virulencia que facilita su persistencia en el tejido mamario. Además, el biofilm constituye una fuente de contaminación microbiana que puede conducir a fallas en los procesos de producción que generen problemas de inocuidad de los alimentos.

In the pathogenesis of staphylococcal mastitis the biofilm is considered a marker of virulence that allows the adhesion of the microorganism to the mammary epithelium. In order to determine the production of biofilm and the presence of icaABCD gene, 30 S. aureus strains isolated from raw milk obtained from cows with subclinical mastitis were analyzed. Biofilm production was determined by the quantitative method on microplates for cell culture and the presence of genes icaABCD by polymerase chain reaction. Biofilm production was observed in 96.67% of strains of S. aureus. These 43.34% were strong producers, 30.00% producing moderate, 23.33% weak producers and 3.33% non producing biofilm. All of the icaABCD genes was obtained at 6.66% of the isolates. All strains, except one, presented icaA or icaD. 56,66% of isolates identified genes icaA/icaD. The icaABCD operon genes were identified in all biofilm-producing strains, which demonstrates that they possess a virulence factor that facilitates its persistence in the breast tissue. In addition, the biofilm is a source of microbial contamination which can lead to failures in production processes that generate problems of food safety.

Presence of extended-spectrum beta-lactamase (ESBL)- producing Enterobacteriaceae in bulk-tank milk of bovine dairy farms in Antioquia, Colombia / Presencia de Enterobacteriaceae productoras de betalactamasas de espectro extendido (BLEE) en tanques de leche de fincas lecheras de Antioquia, Colombia / Presença de Enterobacteriaceae produtoras de beta-lactamase de espectro estendido (BLEE) em amostras de leite de tanque de rebanhos de bovinos leiteiros em Antioquia, Colômbia

Abstract Background: antibiotic resistance is spreading worldwide. It is important to evaluate whether foods of animal origin constitute a reservoir of resistance genes. Objective: the aim of the present study was to assess the occurrence and characterize extended-spectrum beta-lactamase (ESBL)-producing Enterobacteriaceae from bulk-tank milk samples of dairy farms located in Entrerríos, Antioquia (Colombia). Methods: a total of 120 randomly selected raw milk samples (one bulk-tank milk sample per dairy farm) were collected between September and October, 2013. A commercial chromogenic agar was used for screening presumptive ESBL-E. Identification of genus and species of isolates was performed with a commercial biochemical identification kit. The ESBL production was confirmed using the double disc synergy test. An antimicrobial susceptibility test was performed by the agar disc diffusion method and the automatized broth microdilution method. The ESBL-positive isolates were analyzed for the presence of bla genes by polymerase chain reaction (PCR) and sequencing. For the exploration of risk factors, information on dairy farm management practices was recorded using a questionnaire and the associations of predictors and results were tested with a logistic regression analysis. Results: the ESBL-E were isolated from 3.3% (4/120; CI 95%: 3-3.5%) of the samples. Farm size was the only factor associated with the presence of ESBL-E (OR = 11.5; CI 95%: 1.14-115.54; p = 0.038). All isolates were resistant to several antibiotics and harbored blaCTX-M-96 (alternate name CTX-M-12a) enzymes. Conclusion: although apparent frequency of ESBL-E was low, the presence of these resistant bacteria in milk may constitute a public health risk and should be further investigated.

Resumen Antecedentes: la resistencia a antibióticos se está diseminando en el mundo. Es importante evaluar si los alimentos de origen animal constituyen un reservorio de genes de resistencia. Objetivo: evaluar la presentación y caracterizar las Enterobacteriaceae productoras de betalactamasas de espectro extendido (BLEE) a partir de muestras de leche de tanque de hatos lecheros localizados en Entrerríos, Antioquia (Colombia). Métodos: ciento veinte muestras de leche cruda (una muestra por tanque) de hatos seleccionados al azar fueron colectadas entre septiembre y octubre de 2013. Para el tamizaje de presuntiva BLEE se utilizó un agar cromogénico comercial. La identificación de los aislamientos se realizó utilizando un kit de identificación bioquímica comercial. La confirmación de la producción de BLEE fue confirmada con la prueba de sinergia de doble disco. La susceptibilidad antimicrobiana fue evaluada por el método de difusión de disco en agar y por el método de microdilución en caldo automatizado. Aislamientos positivos para BLEE fueron analizados para presencia de genes bla por PCR y secuenciación. Para la exploración de los factores de riesgo se registró la información sobre las prácticas de manejo del hato mediante cuestionario y se probó la asociación entre predictores y resultados mediante análisis de regresión logística. Resultados: las BLEE fueron aisladas de 3,3% (4/120; IC 95%: 3-3,5%) de las muestras de leche de tanque y el tamaño del hato fue el único factor que se encontró asociado con un incremento en su presencia (OR = 11,5; IC 95%: 1,14-115,54; p = 0.038). Todos los aislamientos fueron resistentes a varios antibióticos y albergaban enzimas blaCTX-M-96 (nombre alternativo CTX-M-12a) Conclusión: aunque se observó una baja frecuencia aparente de BLEE, la presencia de estas bacterias resistentes en los alimentos de origen animal puede constituir un riesgo para la salud pública y debe seguir siendo investigada.

Resumo Antecedentes: a resistência aos antibióticos está se espalhando rapidamente no mundo inteiro. É importante avaliar se os alimentos de origem animal constituem um reservatório de genes de resistência. Objetivo: avaliar a ocorrência e caracterizar Enterobacteriaceae produtoras de betalactamases de espectro estendido (BLEE) de amostras de leite de tanques de rebanhos leiteiros. Métodos: um total de 120 amostras leite crua (uma amostra por leite do tanque) de explorações leiteiras selecionadas aleatoriamente no município de Entrerríos, Antioquia (Colombia), foram coletados emtre setembro e outubro de 2013. Para o rastreio das presumíveis BLEE foi utilizado um meio de ágar cromogénico comercial. A identificação das espécies isoladas foi realizada utilizando um kit comercial da identificação bioquímica. A produção de BLEE foi confirmada pelo teste de sinergia de duplo disco. Um teste de susceptibilidade antimicrobiana foi realizado pelo método de difusão em disco de ágar e método de microdiluição em caldo automatizado. Isolados BLEE positivos foram analisados para a presença dos genes bla por PCR e sequenciação. Para a exploração dos fatores de risco, as informações sobre as práticas de gestão do rebanho foram gravadas utilizando um questionário. As associações de preditores e os resultados foram testados por uma análise de regressão logística. Resultados: o BLEE foram isoladas de 3,3% (4/120; IC 95%: 3-3,5%) das amostras de leite do tanque. O tamanho do rebanho foi o único fator encontrado associado com um aumento na sua presença (OR = 11,5; IC 95%: 1,14-115,54; p = 0,038). Todos os isolados foram resistentes a vários antibióticos e albergava enzimas blaCTX-M-96 (nome alternativo CTX-H-12a). Conclusão: embora tenha sido observada uma baixa frequência aparente de BLEE, a presença dessas bactérias resistentes nos alimentos de origem animal pode constituir um risco para a saúde pública e deve permanecer sob pesquisa.

Parámetros cuantitativos de los glóbulos grasos lácteos por microscopía convencional: potencial tratamiento de leche cruda bovina con rayos Ultravioleta en los puntos de producción primaria de la cadena láctea del Cesar / Quantitative parameters of milky fatty globules by conventional microscopy: potential treatment of bovine raw milk with UV rays at the point of primary production in the dairy chain of Cesar

The high bacterial / ml registration of raw milk, over 400 thousand in the Cesar forced to seek technological alternatives for reducing it at the origen. International institutes have made significant progress in conservation of maternal milk with UV rays without altering its nutritional properties. Additionally, the amount and diameters of MFG could be optically quantified in cow's raw milk and breast milk by obtaining and digital image processing, finding an average of 5.1 microns in average size of milk fat globules. This is a first determinant to potentiate the use of ultraviolet rays on the site of origin of bovine milk to lower microbial load of pathogen.

El alto registro bacteriano / ml de leche cruda, más de 400 mil en el Cesar obliga a buscar alternativas tecnológicas para su reducción en origen, institutos internacionales han logrado avances significativos en conservación de leches maternas con rayos UV sin alterar sus propiedades nutritivas. Se pudo cuantificar ópticamente la cantidad y diámetros de los GGL en leche cruda de vaca y leche materna mediante la obtención y procesamiento digital de imágenes, encontrándose un promedio de 5,1 micrómetros en el tamaño promedio de los glóbulos grasos lácteos. Este es un primer parámetro determinante para potencializar el uso de los rayos ultravioleta en el sitio de origen de leche bovina para bajar carga microbiana de patógenos.

Serotipos de Listeria Monocytogenes aislados de alimentos producidos en la provincia de Cautín, Chile / Serotypes of Listeria monocytogenes Isolated on Food Produced in Cautin Province, Chile

En Chile se ha aislado Listeria monocytogenes en diversos alimentos. El objetivo de este estudio fue aportar información sobre la presencia de la bacteria en longanizas artesanales (embutidos madurados), leche cruda y hortalizas producidos en la Provincia de Cautín y determinar los serotipos. Las muestras correspondieron a longaniza común artesanal, leche cruda y hortalizas, colectadas durante 2003. Para el aislamiento e identificación de L. monocytogenes se usó la metodología aprobada por el Food and Drug Administration (FDA) con incubación en caldo selectivo preenrriquecimiento para Listeria (35°C), y posterior siembra en medios selectivos Oxford y Palcam (35-37°C). Las colonias típicas fueron replicadas en caldo tripticasa de soya (TSB) y sometidas a pruebas bioquímicas de identificación. La serotipificación se realizó sobre 53 cepas, utilizando un set de antisuero comercial. L. monocytogenes se presentó en el 61,1% de las longanizas, en el 0,0% de las muestras de leche cruda y en el 16,6% de las de hortalizas. Estos resultados podrían indicar fallas en la higiene de la manipulación, en el lavado y sanitización de superficies de contacto con los alimentos. Se determinó la presencia del serotipo 4e en 3 cepas provenientes de longanizas fabricadas en la ciudad de Temuco, y 1 cepa de cada uno de los serotipos virulentos 1/2a, 1/2b y 4b, los dos primeros provenientes de longanizas y el último desde hortalizas. La presencia de estos serotipos 1/2a, 1/2b y 4b, plantean una clara amenaza de un eventual brote, particularmente en consumidores susceptibles. Estos resultados representan un importante desafío de prevención y control para las autoridades sanitarias chilenas.

It has been reported in Chile that L. monocytogenes is present in differents kind of foods. The aim of this study was to obtain information of the occurrence of the bacteria in sausages, raw milk and vegetables produced in Cautín Province, and to know the L. monocytogenes serotypes involved. For this purpose sausages, raw milk and several vegetables samples, were collected on 2003. For the isolation and identification of L. monocytogenes, the samples were grown in tripticase soy broth (TSB) inoculated into a preenrichment broth for Listeria (35°C followed by an inoculation on selectives medias Oxford and Palcam (35-37°C). Biochemical test were performed to all the typical Listeria colonies according to the methodology recommended by Bacteriological Analytical Manual (FDA). Serotyping was carried out using commercial specific antisera on 53 bacterial strains. Results of the analysis indicated the presence of L. monocytogenes in 61.1% of sausages samples, 0.0% in raw milk samples and in 16.6% of vegetables samples. These results could indicate failure in the hygiene practices, like cleaning and sanitizing the surface in contact with the food. The presence of serotipe 4e in 3 strains were found in some sausages. There was a strain of virulent serotype 1/2a, 1/2b and 4b, the first and second resulted isolated from sausages and the third one resulted from vegetables. The presence of serotypes 1/2a, 1/2b and 4b, is a threat of an eventual out-break, especially in persons quite susceptive, that is why, there is a huge risk for pubic health in customers from this region. These results represent for chilean public´s health authorities an enormous challenge for controlling and prevention procedures.

Susceptibilidad a los agentes antimicrobianos en cepas de Staphylococcus Aureus aisladas en leche de bovinos con mastitis subclínica y leche de tanque / Antimicrobial Susceptibility of Staphylococcus aureus Strains Isolated from Subclinical Bovine Mastitis Milk and Bulk Tank Milk

Staphylococcus aureus es uno de los principales patógenos bacterianos de mastitis bovina en el estado Zulia - Venezuela. El objetivo del presente estudio fue determinar la susceptibilidad a los agentes antimicrobianos de cepas de S. aureus aisladas de muestras de leche de cuartos mamarios con mastitis subclínica y leche de tanque en tres fincas del estado Zulia. Un total de 88 cepas fueron analizadas, de estos aislamientos 81 fueron aislados de leche de cuartos mamarios y 7 de leche de tanque. A las cepas se le determinó la sensibilidad a los agentes antimicrobianos por el método de difusión del disco en agar, correspondientes a: vancomicina (Va), estreptomicina (S), clindamicina (Cc), eritromicina (E), tetraciclina (Te), penicilina (Pe), ciprofloxacina (Cip), cefoxitina (Fox), cloranfenicol (C), enrofloxacina (Enr), rifampicina (Rif), trimetoprim/sulfametoxazol (SXT), oxacilina (Ox) y gentamicina (G). La concentración inhibitoria mínima (CIM) se determinó a Pe, Va, Ox, y E. Las cepas de S. aureus aisladas de leche de cuartos mamarios fueron resistentes a Pe (12,3%), Enr (8,6%), Cip, S (4,9%, respectivamente), E (3,7%), Cc, y Rif (2,5%, respectivamente). Las cepas aisladas de leche de tanque fueron resistentes a Pe y Te (28,6%) y Cc (14, 3%). Los resultados indican que los aislamientos de S. aureus provenientes de leche de cuartos mamarios con mastitis subclínica fueron más susceptibles a todos los agentes antimicrobianos (70%) en comparación con las cepas procedentes de la leche de tanque (57%).

Staphylococcus aureus is one of the main bacterial pathogens involved in bovine mastitis in Zulia State-Venezuela. The objective of this research was to determine the susceptibility to antimicrobial agents of Staphylococcus aureus isolated from the mammary quarter milk of subclinical mastitis cows and from bulk tank milk in three dairy farms of Zulia State. A total of 88 strains were analyzed, of these isolates 81 were isolated from quarter milk and 7 from bulk tank milk. The susceptibility to antimicrobial agents of those strains was determined by agar disk diffusion test. The antibiotics tested were: vancomycin (Va), streptomycin (S), clindamycin (Cc), erithromycin (E), tetracycline (Te), penicillin (Pe), ciprofloxacin (Cip), cefoxitin (Fox), chloramfenicol (C), enrofloxacin (Enr), rifampicin (Rif), trimethoprim/sulfametoxazole (SXT), oxacillin (Ox) and gentamicin. (G). Minimum Inhibitory Concentration (MIC) for Pe, Va, Ox and E was determined. S. aureus strains isolated from quarter milk were resistant to Pe (12.3%), Enr (8.6%), Cip, S (4.9%, respectively), E (3.7%), Cc, and Rif (2.5%, respectively). Strains isolated from bulk tank milk were resistant to Pe and Te (28.6%, respectively) and Cc (14.3%). The results indicate that isolates of S. aureus from mammary quarter milk of subclinical mastitis were more susceptible to all antimicrobial agents (70%) compared with strains from the bulk tank milk (57%).

Determinación de la calidad composicional y de residuos antibióticos betalactámicos en leche cruda expendida en el sector urbano del municipio de ipiales

El estudio se realizó con el fin de determinar la calidad composicional e higiénica de la leche cruda que consumen los habitantes de la zona urbana del municipio de Ipiales. Se determinó el porcentaje de muestras que no cumplen con las características óptimas para su comercialización y el porcentaje de muestras positivas a residuos de antibióticos betalactámicos. En la zona urbana del municipio de Ipiales, existen 180 expendedores ambulantes reportados, de leche cruda, Para calcular el tamaño de la muestra se aplicó la fórmula estadística de Blaha, con un nivel de confianza del 95%, con un error máximo admitido del 10% lo cual dio un total de 96 muestras, las cuales se procesaron en el laboratorio de análisis lácteo de la empresa Alquería de la ciudad de Ipiales. Los resultados que se obtuvieron en este estudio determinaron que ninguna de las muestras tomadas a los diferentes expendedores, cumplen totalmente con los requisitos en calidad composicional (decreto 616 de 2006 del Ministerio de la protección Social) e higiénica (decreto 2838 del 2006 sobre las características óptimas de la leche cruda) necesarios para asegurar un consumo inocuo de este producto. Para la presencia de antibióticos betalactámicos con SNAP test, el 5,2% de las muestras resultaron positivas y el 94,8% fueron negativas. La adición de neutralizantes en este estudio fue del 0%. En cuanto a la detección de adulterantes se encontró un 2% que corresponde a la adición de harinas.

The study was conducted to determine the compositional and hygienic quality of raw milk consumed by inhabitants of the urban area in the town of Ipiales. The percentage of samples that do not meet the optimal characteristics for marketing and the percentage of positive samples for beta-lactam antibiotic residues were determined. There are 180 reported raw milk sellers in the urban area of the municipality of Ipiales. To calculate the size of the sample the statistical formula Blaha was applied with a 95% of reliability and a maximum error of 10%. 96 not homogenized samples of raw milk, sold in the area were collected and later processed in the milk laboratory of “Alqueria” in Ipiales. The results obtained in this study determined that none of the samples of raw collected from different vendors complies with all quality (decree 616 of 2006 from the Ministry of Social protection) and hygienic requirements (decree 2838, 2006 concerned with the best characteristics of raw milk) necessary to ensure that the human consumption of this product is harmless. 5, 2% of the samples were positive for the presence of beta-lactam antibiotics with Snap test, while 94, 8% tested negative. The addition of neutralizers in this study was 0%. Additionally, it was found that regarding the detection of adulterants 2% corresponded to the addition of flour.

Listeria spp., y L. monocytogenes en leche cruda de cabra / Listeria spp. and L. monocytogenes in raw goat’s milk

Objetivo. Detectar Listeria spp. y Listeria monocytogenes en leches crudas de cabras, provenientes del corregimiento de la Garita, Norte de Santander. Materiales y métodos. Se tomaron 90 muestras de leche cruda de cabra, mediante muestreo estratificado, en un período de 4 meses; durante el muestreo se tomó la temperatura de las leches. Para el aislamiento de L. monocytogenes se utilizó la técnica sugerida por el INVIMA y se confirmó la especie por PCR. Resultados. Se encontraron ocho productores de leches de cabra en esta zona, ninguno refrigera, ni pasteuriza la leche. Se encontró una ocurrencia de 3% de L. monocytogenes y 15% de otras especies. Se demostró que la leches obtenidas en esta zona contienen este patógeno que puede llegar a causar Listeriosis en los grupos de riesgo como niños menores de 5 años, mujeres en etapa de gestación, adultos mayores y pacientes inmunocomprometidos. Conclusiones. Se demostró la circulación de este patógeno en la leche de cabra y al ser un producto que se consume directamente por las personas pone en riesgo su salud.

Utilización de microoganismos marcadores para la evaluación de las condiciones higiénico-sanitarias en la producción primaria de leche / Use of indicator microorganisms for the hygienic-sanitary conditions evaluation in the milk primary production

Los microorganismos marcadores presentes en los alimentos advierten sobre la manipulación inadecuada de la materia prima o el alimento, la presencia de un peligro para el consumidor o una deficiencia de los procesos destinados a su saneamiento. Estos marcadores son herramientas importantes para poder desarrollar registros microbiológicos históricos, a partir de los cuales se pueden establecer valores propios de referencia alcanzables con la metodología de trabajo desarrollada en cada empresa. Dichos valores permitirán, además, implementar los sistemas que garantizan la inocuidad de los alimentos, como es el caso del Análisis de Peligros y Control de Puntos Críticos (HACCP, por su sigla en inglés). El objetivo del trabajo fue estudiar los principales microorganismos marcadores de higiene en leche cruda como herramienta para evaluar las condiciones higiénico-sanitarias en la producción primaria, de tal forma que permitan elaborar un diagnóstico de la situación inicial como paso previo a la implementación de un sistema HACCP. Para el estudio, y a manera de experiencia piloto, se utilizó leche cruda proveniente de un establecimiento productor de la provincia de Santa Fe (Argentina). Las muestras se recolectaron directamente de la ubre, luego del prefrío (intercambiador a placas con agua a temperatura ambiente), tanque de enfriamiento, manos del ordeñador, pezoneras y agua empleada en el establecimiento. Se realizó 1 muestreo por semana hasta completar 44 muestreos distribuidos a lo largo del año. Los marcadores estudiados fueron: recuento total de microorganismos psicrotrofos, mesófilos, termodúricos, mohos y levaduras, enterobacterias y Staphylococcus aureus. Se determinó, además, la presencia de clostridios sulfito reductores y Salmonella spp. El análisis de correlación entre los microorganismos marcadores no permitió establecer predicciones sobre el comportamiento de un grupo microbiano con base en el proceder de otro...

The indicator microorganisms present in the food notify on the inadequate manipulation of the commodity or the food, the presence of a hazard for the consumer or a processes deficiency. These indicator microorganisms are important tools to develop historic microbiologic records, from which own values of compassable reference with the methodology of work developed in each business can be established. These values will permit, besides, to implement the systems that guarantee the food safety, as is the case of the Hazard Analysis of Critical Control Points (HACCP). The objective of this work was to study the main hygiene indicator microorganisms in raw milk as tool to evaluate the sanitary conditions in the primary production, in such a way that they permit to devise a diagnosis of the initial situation like prior step to the implementation of a HACCP system. For the study, and to way of pilot experience, raw milk originating from a producing establishment of the Santa Fe Province, Argentina, was utilized. The samples were collected directly from the udder, after the first cooling, bulk tank, milker hands, teat cup and water employed in the dairy farm. One sampling was carried out for week until completing 44 samplings distributed along the year. The indicator microorganisms studied were: psychrotrophic count, mesophilic count, thermoduric, molds and yeasts, coliforms and Staphylococcus aureus. It was determined, besides, the presence of sulphite-reducting clostridia and Salmonella spp. The correlation analysis among the indicator microorganisms did not permit to establish predictions on the behavior of a microbe group based on the behavior of another. Nevertheless, the information that each one of the indicator microorganisms turned out to be adequate to evaluate the sanitary conditions in the milk primary production and to generate records that will be useful for the HACCP system implementation.

Recuento de bacterias totales en leche cruda de tambos que caracterizan la zona noroeste de Santa Fe y sur de Santiago del Estero / Total bacterial count in raw milk of dairy farms that characterize the northwest zone of Santa Fe and south of Santiago del Estero

Un total de 6.998 muestras de leche cruda de pool de tanque, correspondientes a 55 establecimientos lecheros asociados a la Cooperativa Tambera Nueva Alpina Ltda., fueron recolectadas entre los años 1993 y 2002. Se realizó el Recuento de Microorganismos Aerobios Mesófilos Totales, obteniéndose como resultado un valor medio de 1,2 x 105± 2,4 x 105UFC/ml que caracteriza la zona. El año de finalización de la experiencia, se observó un 97% de los tambos evaluados con promedios £ 1,0 x 105UFC/ml. Solamente un 3% sobrepasa este límite, no encontrándose establecimientos con niveles superiores a 1,5 x 105UFC/ml. Al relacionar este indicador con parámetros composicionales, las correlaciones más significativas resultaron para: Recuento de Bacterias Totales vs Acidez (r = 0,292; P < 0,001) y Recuento de Bacterias Totales vs Descenso Crioscópico (r = 0,157; P < 0,001). La calidad microbiológica en leche cruda de tambos que pertenecen a la zona noroeste de Santa Fe y sur de Santiago del Estero, presentó un mejoramiento significativo.

A total of 6.998 raw milk samples of bulk tank, belonging to 55 dairy farms associated to the Cooperativa Tambera Nueva Alpina Ltda., were collected between the years 1993 and 2002. The Total Mesophilic Aerobic Microorganisms Count was analyzed, obtaining a medium value of 1.2 x 105± 2.4 x 105CFU/ml that characterizes the zone. The final year of experience, observed a 97% of dairy farms evaluated with averages £ 1,0 x 105CFU/ml. Only a 3% it surpasses this limit, not being found establishments with levels over 1.5 x 105CFU/ml. Relating this indicators with compositionals parameters, the most significant correlation resulted for: Total Bacterial Count vs Acidity (r = 0.292; P < 0.001) and Total Bacterial Count vs Freezing Point (r = 0.157; P < 0.001. The microbiological quality in raw milk of dairy farms belonging to the northwest zone of Santa Fe and south of Santiago del Estero showed a significant improvement during this time.