Conteo de bacterias y levaduras en imágenes digitales

RESUMEN Fundamento: en los laboratorios de microbiología, la identificación y conteo de microorganismos es un procedimiento habitual. Aunque existen en el mercado equipos que posibilitan su realización de manera automática o semiautomática, son muy costosos, por lo cual esta tarea, difícil e irritante para los ojos, la siguen realizando los expertos de manera tradicional mediante la observación de las muestras en los microscopios, con la consiguiente variabilidad entre ellos. Objetivo: proponer un nuevo método para el conteo de bacterias y levaduras en imágenes digitales, bajo diferentes magnificaciones, tomadas a bioproductos de origen microbiano obtenidos por fermentación. Métodos: el sensor empleado para la toma de imágenes de las muestras fue una cámara digital modelo HDCE-X, con un sensor CMOS de ½", con una resolución de 2592 píxeles por 1944 píxeles (5 Mp). Se emplearon dos tipos de magnificaciones: magnificación 40x (PL40, 0.65 apertura numérica and 0.17 de distancia de trabajo) y magnificación 100x (HI plan 100/1.25 con inmersión de aceite). El método propuesto se basa en técnicas de procesamiento digital de imágenes, utilizando herramientas como la detección de contornos, operaciones morfológicas y análisis estadístico, y fue desarrollado en lenguaje Python con empleo de la biblioteca OpenCV. Resultados: la detección y conteo de bacterias se logró con una exactitud y precisión aceptable, en ambos casos por encima de 0,95; no en el caso de las levaduras cuya exactitud y precisión fueron menores, alrededor de 0,78 y 0,86 respectivamente. Se proponen flujos de trabajo basados en técnicas de procesamiento digital de imágenes, fundamentalmente en detección de contornos, operaciones morfológicas y análisis estadístico. Conclusiones: el método posee una efectividad aceptable para el contexto y depende de las características que presenten las imágenes.

ABSTRACT Background: In microbiology laboratories, the identification and counting of microorganisms is a common procedure; and although there is a variety of equipment on the market that possibility to carry out these processes automatically or semi-automatically, it is usually expensive to many laboratories. These are some of the reasons why this arduous and difficult task is still performed in many laboratories by experts in the traditional way, through the observation of samples in microscope, consuming a great time and having variations in the results between experts. Objective: The present work aims to propose a new method for counting bacteria and yeasts in digital images, taken under different magnifications, of microbial bioproducts obtained by fermentation. Methods: The sensor used to take images of the samples was a digital camera model HDCE-X, with a ½" CMOS sensor, with a resolution of 2592 pixels by 1944 pixels (5 Mp). Two types of magnifications were used: 40x magnification (PL40, 0.65 numerical aperture and 0.17 working distance) and 100x magnification (HI plan 100/1.25 with oil immersion). The proposed method is based on digital image processing technics, using tools as contour detection, morphological operations and statistical analysis, and was developed in Python language using the OpenCV library. The work also presents a comparison with the results obtained using ImageJ software for the same purpose. Results: the detection and count of bacteria was achieved with an acceptable accuracy and precision, in both cases above 0.95; not in the case of yeasts whose accuracy and precision was lower, around 0.78 for accuracy and 0.86 for precision. Workflows based on digital image processing techniques are proposed, using tools as contour detection, morphological operations and statistical analysis. Conclusions: the method has an acceptable effectiveness for the context and depends on the characteristics presented by the images.

Qualidade microbiológica do leite humano pasteurizado de um Banco de Leite Paulista / Calidad microbiológica de la leche humana pasteurizada de un banco de leche paulista / Microbiological quality of pasteurized human milk from a Milk Bank of São Paulo

Resumo Objetivo Avaliar a qualidade microbiológica do leite humano pasteurizado proveniente de um Banco de Leite Humano do Estado de São Paulo. Métodos Estudo descritivo conduzido com 29 amostras de leite humano ordenhado pasteurizado (LHOP) obtidas entre julho de 2015 a março de 2016 por meio da avaliação dos registros da acidez titulável bem como da quantificação da microbiota heterotrófica (mesófilos, psicrófilos, termófilos), coliformes totais e termotolerantes, fungos filamentosos e leveduriformes e Staphylococcus spp. Realizou-se a avaliação dos parâmetros físico-químicos por meio do potencial hidrogeniônico-pH, teor energético-K e acidez Dornic-ºD. Análises estatísticas descritivas e bivariadas foram conduzidas. Resultados Evidenciou-se nas amostras a presença de psicrófilos (17,24%), termófilos (27,59%), mesófilos (55,17%), fungos filamentosos e leveduriformes (41,38%) e ausência de Staphylococcus spp. Detectou-se a presença de 82,76% de coliformes no teste presuntivo. Já no teste confirmativo VB constatou-se a presença de 54,16% de coliformes totais e no teste EC 33,33% de coliformes termotolerantes. Os valores de pH e de K não apresentaram oscilações, enquanto que, na expressão da acidez entre 3º a 15°D detectou-se crescimento microbiano. O microrganismo mesófilo, apresentou correlação positiva com variável da acidez Dornic (r=0.44;p=0.01). Conclusão A partir da avaliação da qualidade microbiológica das amostras de LHOP descartado e consideradas impróprias para consumo no referido BLH, especificamente com relação aos indicadores microbiológicos das condições de higiene, sugere que a inviabilidade das amostras possam estar associadas às boas práticas de manipulação do alimento.

Resumen Objetivo Evaluar la calidad microbiológica de la leche humana pasteurizada proveniente de un banco de leche humana del estado de São Paulo. Métodos Estudio descriptivo realizado con 29 muestras de leche humana ordeñada pasteurizada (LHOP) obtenidas entre julio de 2015 y marzo de 2016 por medio de la evaluación de los registros de acidez titulable, así como de la cuantificación de la microbiota heterótrofa (mesófilos, psicrófilos, termófilos), coliformes totales y termotolerantes, hongos filamentosos y levaduriformes y Staphylococcus spp. Se realizó la evaluación de los parámetros físico-químicos mediante el potencial de hidrógeno (pH), valor energético (K) y acidez Dornic-ºD. Se llevaron a cabo análisis descriptivos y bivariados. Resultados Se observó en las muestras la presencia de psicrófilos (17,24 %), termófilos (27,59 %), mesófilos (55,17 %), hongos filamentosos y levaduriformes (41,38 %) y ausencia de Staphylococcus spp. Se detectó la presencia del 82,76 % de coliformes en la prueba presuntiva. Por otro lado, en la prueba confirmativa VB se confirmó la presencia del 54,16 % de coliformes totales, y en la prueba EC se verificó el 33,33 % de coliformes termotolerantes. Los valores de pH y de K no presentaron oscilaciones, mientras que se detectó crecimiento microbiano en la expresión de la acidez entre 3 y 15°D. El microrganismo mesófilo presentó correlación positiva con variable de la acidez Dornic (r=0.44; p=0.01). Conclusión A partir de la evaluación de calidad microbiológica de las muestras de LHOP descartadas y consideradas inapropiadas para consumo en el BLH mencionado, especialmente respecto a los indicadores microbiológicos de las condiciones de higiene, se sugiere que la inviabilidad de las muestras pueda estar asociada con las buenas prácticas de manipulación del alimento.

Abstract Objective To assess the microbiological quality of pasteurized human milk from a Human Milk Bank in the State of São Paulo. Methods This is a descriptive study conducted with 29 pasteurized expressed human milk (PEHM) samples obtained between July 2015 and March 2016 by assessing titratable acidity records as well as quantifying heterotrophic microbiota (mesophiles, psychrophiles, thermophiles), total and thermotolerant coliforms, filamentous and yeast-like fungi and Staphylococcus spp. The physical-chemical parameters were assessed via hydrogen-pH potential, K-energy content and Dornic-ºD acidity. Descriptive and bivariate statistical analyzes were conducted. Results The presence of psychrophiles (17.24%), thermophiles (27.59%), mesophiles (55.17%), filamentous and yeast-like fungi (41.38%) and absence of Staphylococcus spp were evidenced in the sample. The presence of 82.76% of coliforms was detected in the presumptive test. In the confirmatory VB test, the presence of 54.16% of total coliforms was found and, in the EC test, we verified 33.33% of thermotolerant coliforms. The pH and K values did not show oscillations, whereas, in the expression of acidity between 3º and 15°D, microbial growth was detected. The mesophilic microorganism showed a positive correlation with the Dornic acidity variable (r=0.44; p=0.01). Conclusion Based on the microbiological quality assessment of the HMB samples discarded and considered unfit for consumption in the HMB, specifically regarding the microbiological indicators of hygiene conditions, it suggests that the infeasibility of the samples may be associated with good food handling practices.

Nutritional and quality changes in piglet concentrate affected by formulation and storage / Mudanças nutricionais e de qualidade no concentrado de leitões afetadas pela formulação e pelo armazenamento

The aim of this study was to evaluate the variations in the stability and nutrient concentration in concentrates for piglet feeding. Five treatments were established: T1 - Control, standard concentrate formulation (SCF); T2 - PXMore5, SCF with more 5% vitamin-mineral premix (VMP); T3 - PXLess5, SCF with less 5% VMP. All these three treatments used 400kg batches in an INTECNIAL mixer; T4 - FeedMixer, SCF using a 4,000kg batch in an IMOTO mixer; T5 - PremixMixer, SCF using a 1,200kg batch in an MUYANG mixer. For each treatment, bags of 20kg were stored in three storage places for four months where room temperature and relative humidity was recorded daily. The concentration of nutrients was evaluated through centesimal and mineral analysis. The water activity of concentrate was affected by temperature and relative air humidity in different storage places. The greatest variation in concentration of crude protein, mineral residue, copper, zinc, and selenium was due to the PremixMixer treatment. Regarding the guaranteed levels, the critical value was verified only for the chrome concentration.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar as variações na estabilidade e na concentração de nutrientes em concentrados para alimentação de leitões. Foram estabelecidos cinco tratamentos: T1 - controle, concentrado com formulação padrão (CFP); T2 - PXMais5, CFP com 5% a mais de vitaminas e minerais da pré-mistura (PVM); T3 - PXMenos5, CFP com 5% a menos de PVM (todos os três tratamentos utilizaram lotes de 400kg em um misturador INTECNIAL); T4 - FeedMixer, CFP usando um lote de 4.000kg em um misturador IMOTO; T5 - PremixMixer, CFP usando um lote de 1.200kg em um misturador MUYANG. Para cada tratamento, sacos de 20kg foram armazenados em três ambientes distintos por quatro meses, onde a temperatura ambiente e a umidade relativa do ar foram registradas diariamente. A concentração de nutrientes foi avaliada por meio de análises centesimal e mineral. A atividade de água do concentrado foi afetada pela temperatura e a umidade relativa do ar nos diferentes locais de armazenamento. A maior variação na concentração de proteína bruta, resíduo mineral, cobre, zinco e selênio foi devido ao tratamento "MistPremix". Em relação aos níveis de garantia, foi verificado valor crítico apenas para a concentração de cromo.(AU)

Diagnóstico microbiológico de artritis séptica en niños usando botellas de hemocultivos como un método alternativo / Microbiological diagnosis of septic arthritis in children using blood culture bottles as an alternative method

Introducción: La artritis séptica (AS) se define como la infección del espacio articular que afecta cualquier articulación, es más frecuente en niños menores de 5 años y su principal causa es la diseminación hematógena. El diagnóstico etiológico es difícil en niños, logrando aislamiento en menos de la mitad de los casos. Se evaluó el rendimiento diagnóstico de la botella de hemocultivo (BHC) como medio alternativo para la siembra del líquido sinovial comparado con los medios convencionales (MC). Metodología: Estudio de cohorte prospectivo realizado en centro de tercer nivel de 2011-2016, niños de 0 a 12 años con diagnóstico clínico de artritis séptica y disponibilidad de las dos muestras tomadas en cirugía. Resultados: Ingresaron 60 pacientes, masculinos 56%, mediana de edad 48 meses y tiempo de síntomas 58 horas (48-192); 33,3% con antecedente de trauma; 30% recibieron antibióticos previos. Articulaciones afectadas: cadera 44%, rodilla 28% y tobillo 18%. En 39 pacientes (65%) se tomaron hemocultivos; de estos 19 (49%) fueron positivos, todos para S. aureus. Se obtuvo confirmación en líquido sinovial por cualquier método en 27 pacientes (45%), positivos en ambos 21,6%, en MC 13,3% y en BHC 10%, los microorganismos más frecuentes SAMS 21,6%, SAMR 8,3%, S. pyogenes 3,3%, SEMR 3,3%, S. pneumoniae 1,6%, N. meningitidis 1,6%, no se aisló K. kingae. El tratamiento antibiótico más utilizado fueron los betalactamicos, mediana de estancia 18(12-25,5) días, mortalidad del 3,3%. Conclusión: Las BHC son un complemento al medio sólido convencional y aumentaron la confirmación etiológica de artritis séptica del 35% al 45%.

Introduction: Septic arthritis (SA) is defined as the infection of any joint space; it is more common in children under 5 years and its main cause is hematogenous dissemination. The etiological diagnosis is difficult in children, achieving isolation in less than half of the cases. The diagnostic performance of the blood culture bottle (BCB) was evaluated as an alternative medium for seeding synovial fluid compared to conventional media (CM). Methods: A prospective cohort survey was conducted in a third-level center from 2011-2016, in children aged 0 to 12 years with a clinical diagnosis of septic arthritis and availability of the two samples taken in surgery. Results: 60 patients were admitted, being 56% male, with a median age of 48 months and symptom time of 58 hours (48-192); 33.3% had a history of trauma; 30% received previous antibiotics. Affected joints: hip (44%), knee (28%), and ankle (18%). Blood cultures were taken in 39 patients (65%); of these, 19 (49%) were positive, all for S. aureus. Confirmation in synovial fluid was obtained by any method in 27 subjects (45%), positive in both: 21.6%, 13.3% in CM, and 10% in BCB. The most frequent microorganisms were: MSSA (21.6%), MRSA (8.3%), S. pyogenes (3.3%), MRSE (3.3%), S. pneumoniae (1.6%), N. meningitidis (1.6%). K. kingae was not isolated. The most commonly used antibiotic treatment was beta-lactams. The median of stay was 18 days (12-25.5), with a mortality of 3.3%. Conclusion: BCB are a complement to the conventional solid medium and increased the etiological confirmation of septic arthritis from 35 to 45%.

Análise microbiológica de escovas de dente usadas por adultos do município de Sumaré-SP / Muicrobiological analysis of toothbrushes used by adults of Sumaré-SP

Objetivo ­ Realizar análise microbiológica de escovas dentais utilizadas por moradores da cidade de Sumaré e ainda analisar seus hábitos de higiene e cuidados com a escova de dente. Métodos ­ Foram selecionados 100 voluntários aleatoriamente, com idade a partir de 18 anos para responder um questionário sobre hábitos de higiene e cuidados com as suas escovas dentais e desses voluntários 20 escovas foram coletadas de forma aleatória para análise microbiológica e de desgaste das cerdas, no laboratório de análises clínicas da Universidade Paulista. Resultados ­ Verificou-se que a maioria (56%) escovam os dentes duas vezes ao dia, que 44% (44/100) trocam as escovas no período de 2 a 3 meses, porém a maior parte não apresentava conhecimento em relação aos métodos de desinfecção para escova de dentes. Com relação a análise de desgastes das cerdas, 50% apresentavam a maioria dos tufos das cerdas divergentes, com tufos cobrindo outros tufos. Quanto a análise microbiológica 85% (17/20) das escovas de dentes apresentou crescimento microbiano, no qual a maior parte (75%) compreendia em Staphylococcus spp., seguido por 30% de enterobactérias, 5% de bacilo gram-positivo,15% Streptococcus spp. e 10% diplococos gram-negativo. Conclusão ­ Nesta perspectiva percebe-se que existe uma necessidade de conscientizar a população em relação à manutenção adequada das escovas de dentes. Quanto a contaminação nas escovas, observamos que não está necessariamente relacionada ao tempo de uso e desgaste das cerdas da escova dental.

Objective ­ The objective of this study is to verify the presence of bacteria in the toothbrush and to evaluate the knowledge of the residents of the Sumaré city about toothbrush care. Methods ­ Were selected 100 volunteers randomly, aged 18 years and older to answer a questionnaire, and of theses 20 brushes were randomly collected for microbiological and bristle wear analyzes in the toothbrush at the clinical analyzes laboratory of Universidade Paulista. Results ­ Most (56%) brush their teeth twice a day, 44% (44/100) changes their brushes within 2 to 3 months, but most respondents do not know disinfection methods for toothbrush. In relation the toothbrush bristle wear analysis, 50% presented the majority of divergent bristle, with tufts, covering other tufts. Regarding the microbiological analysis, 85% (17/20) of the toothbrushes showed a microbial growth, where the most (75%) comprised of Staphylococcus spp., followed by 30% enterobacteria, 5% bacilli gram positive, 15% Streptococcus spp. and 10% diplococci gram negative. Conclusion ­ In this perspective, it is observed that there is a need to make the population aware of the maintenance of toothbrushes. About contamination in the brushes, we observed that not necessarily it is associate to time of use and wear of toothbrush bristles.

Avaliação da qualidade microbiológica das manteigas a granel e manteigas de garrafa vendidas em estabelecimentos comerciais e feiras livres na cidade de União dos Palmares-Alagoas / Evaluation of the microbiological quality of bulk butters and bottle butters sold in commercial establishments and free trade fairs in the Palmares-Alagoas Union

A manteiga é um produto gorduroso obtido pela batenção do creme de leite derivado do leite da vaca, formando uma emulsão do tipo água/óleo. Durante o processo de fabricação, se não houver aplicação de boas práticas, os microrganismos têm grande oportunidade de contaminar a manteiga. Por isso, as práticas higiênico-sanitárias devem ser adotadas com intuito de prevenir eventuais contaminações ou recontaminações do creme. Em Alagoas é comum a comercialização e o consumo de manteiga artesanal, ou seja, manteigas produzidas manualmente, por pequenos produtores/ou pequenos laticínios, bem como manteigas de garrafas ou manteiga da terra que são frequentemente comercializadas diretamente por eles em feiras livres e/ou em pequenos estabelecimentos comerciais. Esta pesquisa objetivou-se avaliar a qualidade microbiológica das manteigas vendidas a granel e manteigas de garrafa vendidas no município de União dos Palmares/AL. Foram coletadas amostras de cada tipo de manteiga em três coletas diferentes em meses seguidos. As análises microbiológicas foram realizadas no Laboratório de Análises Microbiológicas do Instituto Federal de Alagoas-IFAL campus Murici/AL, usando-se a metodologia APHA e como parâmetro de qualidade usou-se o Regulamento técnico de identidade e qualidade. Observou-se com os resultados das análises, que as manteigas vendidas nas feiras e comércios de União dos Palmares/AL, encontravam-se dentro do estabelecido pela legislação vigente.

Resultados das conformidades e não conformidades dos parâmetros microbiológicos de queijo Minas Artesanal Canastra / Conformity and non-conformity results of the microbiological parameters of Minas Artesanal Canastra cheese

O objetivo do trabalho foi analisar a qualidade microbiológica do Queijo Minas Artesanal produzido por queijarias certificadas da microrregião Canastra durante os anos de 2016 e 2017, utilizando os resultados das análises microbiológicas do queijo nestes anos. Foram encontradas não conformidades nos queijos estudados em 7,84% das amostras para Coliformes totais, 3,92% para coliformes termotolerantes e 9,8% para Staphylococcus coagulase positivo, porém nenhuma análise apresentou presença de Listeria spp. ou Salmonella spp. Apesar das principais bactérias patogênicas não terem sido encontradas, as não conformidades indicam a necessidade da orientação do produtor sobre as Boas Práticas de Fabricação e de Ordenha. Além disto, é imprescindível a orientação sobre as exigências do órgão fiscalizador e a realização da análise do queijo periodicamente, tornando possível o acompanhamento da qualidade do queijo produzido na região e a correção das não conformidades encontradas.

Qualidade microscópica e microbiológica de polpas de açaí congeladas comercializadas em supermercados de Teresina-PI / Microscopic and microbiological quality of frozen açai poles, marketed in Teresina-PI supermarkets

Falhas nas etapas do processamento do açaí afetam a qualidade da polpa. Desta forma, objetivou-se analisar a qualidade microscópica e microbiológica de polpas de açaí congeladas, comercializadas em supermercados de Teresina-PI. As amostras de açaí foram adquiridas em cincos supermercados e em seguidas foram submetidas às análises de sujidades e microbiológicas (Coliformes e Salmonella spp.). Os resultados microbiológicos indicaram que houve ausência de coliformes termotolerantes e Salmonella ssp. nas polpas de açaí analisadas. Todas as polpas analisadas apresentaram matérias estranhas tais como, fragmentos de insetos, pelo animal, filamentos de fungos, fibra sintética, fragmentos de caroço e casca e adulteração por adição de amido. Portanto, as polpas de açaí congeladas necessitam de atenção pelos órgãos fiscalizadores.

Elaboração de linguiça toscana com redução do teor de sódio e gordura adicionados / Elaboration of pork sausage with reduction of the sodium and fat content added

Buscando por alimentos mais saudáveis, os consumidores têm dado preferência à produtos com baixo ou reduzido teor de sódio e gordura. Neste sentido, o presente trabalho teve como objetivo desenvolver, através de delineamento composto central (DCC) 22, diferentes formulações de linguiça toscana com concentrações variadas de sódio e gordura, e avaliá-las quanto as suas características físico-químicas, microbiológicas e sensoriais. Os resultados mostraram que todos os tratamentos estavam de acordo com os padrões microbiológicos exigidos pela legislação. Quanto à caracterização físico-química, todas as linguiças desenvolvidas apresentaram resultados satisfatórios, de acordo com a legislação. Os tratamentos 1, 3, 4, 5, 6 e 7 foram considerados como produto light, sendo os tratamentos com teores médios de gordura e sódio os mais aceitos sensorialmente.

Parte III. Apoyo del laboratorio de microbiología y anatomía patológica en el diagnóstico y manejo de infecciones en el paciente con cáncer y trasplante de precursores hematopoyéticos / Support of the laboratory of microbiology and pathological anatomy in the diagnosis and management of infections in cancer patients and transplantation of hematopoietic stem cell transplant receptors

Resumen El enfrentamiento del diagnóstico diferencial y etiológico de las enfermedades infecciosas de los pacientes con cáncer, incluyendo los receptores de trasplante de precursores hematopoyéticos (TPH), debe corresponder a una decisión informada, oportuna y que repercuta directamente en una conducta médica que determine una mejor sobrevida y calidad de vida de los pacientes. El objetivo de este trabajo fue aportar en el manejo de estos pacientes desarrollando una herramienta útil al médico clínico para tomar estas decisiones. Para ello se agruparon las infecciones por sistemas comprometidos diferenciando los posibles agentes etiológicos en bacterias, virus, hongos y parásitos, explicitando los exámenes diagnósticos más relevantes, mencionando la o las técnicas recomendadas, junto con el tipo de muestra óptima para su adecuado procesamiento. De manera adicional, se incorporó el ítem "nivel de requerimiento" para sugerir lo que, a juicio de los autores y la evidencia existente, debe estar presente obligatoriamente en el centro o puede ser derivable a otro laboratorio.

The confrontation of the differential and etiological diagnosis of the infectious diseases of cancer patients, including hematopoietic stem cells transplant (HSCT) recipients, must correspond to an informed, timely decision that directly affects medical behavior that determines a better survival and quality of life for patients. The main goal of this work was to contribute to the management of these patients developing a useful tool for the clinician to make these decisions. For that, infections were grouped by compromised systems, differentiating the possible etiological agents in bacteria, viruses, fungi and parasites, highlighting the relevant diagnostic tests, mentioning the recommended techniques together with the optimal sample type for proper processing. In addition, under each group of techniques we added the item "level of requirement" to suggest what, in the opinion of the authors and the existing evidence, must be mandatory to have at local level or can be derivable to another laboratory.

Análises Microbiológicas e Físico-Químicas de Queijos Minas Frescal comercializados em feiras livres / Microbiological analysis of "Minas frescal" cheese commercialized in free fairs

Objective: to assess the Minas Frescal Cheese comercialized in open air markets, in Gama- the surining area of Brasilia, Federal District, in order to verify the microbilogical and physical-quimical limits according to the patterns and governantal organisms. Method: We assessed 2 samples of Minas Frescal Cheese comercialized in Gama- DF. Theses samples were saved in isotemric boxes. Micrioboligical and physical-quimical analusis were performed in microbiology and brmotology laboratories. We analysed total and fecal coliforms or thermotolerants, mesophilos and pshycotrophics aerobious counting, and the physical-quimical assessment of acidity, PH, umidity and asshes. Results: findidng attest that the microbiological contmaination index, and the disagrement with physical- quimical paramenters, such as presence of inorganic substances evidenced for the ashes determination analysis and acidity variation. Conclusion: we confirm the lack of pattern and quality control for the raw material in cheese production.

Objetivo: avaliar o Queijo Minas Frescal comercializados em feiras livres, na cidade satélite do Gama no estado do Distrito Federal, a fim de verificar os limites microbiológicos e físico-químicos de acordo com os padrões e órgãos competentes. Método: Foram analisadas 2 amostras de Queijo Minas Frescal comercializados na cidade Gama-DF. As amostras foram acondicionadas em caixa isotérmica Foram realizadas as análises microbiológicas e físico-químicas em laboratórios de microbiologia e bromatologia. Avaliaram-se coliformes totais e fecais ou termotolerantes, contagem de aeróbios mesófilos e psicotróficos, além das análises físico-químicas avaliando acidez, pH, umidade e cinzas. Resultados: as análises comprovam o índice de contaminação microbiológica, bem como a não conformidade aos parâmetros físico-químicos essenciais como, por exemplo, a presença de substâncias inorgânicas apontadas pelas análises de determinação de cinzas e a variação na acidez. Conclusão: evidencia-se a falta de padrão e controle da qualidade da matéria-prima na produção de queijos.

Microbiological and physical-chemical characteristics of honeys from the bee Melipona fasciculata produced in two regions of Brazil / Características microbiológicas e físico-químicas de méis de abelha Melipona fasciculata produzidos em duas regiões do Brasil

ABSTRACT: The honey from Tiúba bees (Melipona fasciculata) is commercially important in the Brazilian state of Maranhão. However, the absence of any specific legislation for this kind of honey is an obstacle to its increased production and commercialization. Determining the microbiological and physical-chemical characteristics of different Tiúba honey can inform the elaboration of specific legislation. Thus, honey samples from two Water Catchment Areas in Maranhão (Munim and Pericumã, sample size 20 for each) were collected and submitted for microbiological analysis (total coliforms, thermotolerant coliforms, molds and yeasts, Clostridium sulfite reducers and Salmonella sp.) and physical-chemical analysis (moisture content, reducing and non-reducing sugars, insoluble and soluble solids, ash content, acidity and pH). Most of honeys sampled were suitable for human consumption, except for one sample from Pericumã. Honeys from the two water catchment areas presented differences in some physicochemical characteristics, which can be attributed to the botanic, soil and climatic diversity of the two areas. Still, these Tiúba honey samples did not fall within the Brazilian legislation for Apis mellifera honey for some of the physical-chemical characteristics, and so is not properly regulated, thus reinforcing the need for specific legislation for this type of honey.

RESUMO: O mel de Tiúba (Melipona fasciculata) tem importância comercial na região do estado do Maranhão, no entanto a ausência de uma legislação específica para este mel entrava a ampliação de sua produção e comercialização. Dessa forma, faz-se necessário determinar as características microbiológicas e físico-químicas de méis de Tiúba, com o objetivo de fornecer subsídios para a elaboração de uma legislação específica. Assim, amostras de méis provenientes de duas bacias hidrográficas do Maranhão (Munim n = 20, e Pericumã n = 20) foram coletadas e submetidas às análises microbiológicas (coliformes totais, coliformes termotolerantes, bolores e leveduras, Clostridium sulfito redutores e Salmonella sp.) e físico-químicas (umidade, açúcares redutores e não redutores, sólidos insolúveis e solúveis, cinzas, acidez e pH). A maioria dos méis apresentou-se adequado microbiologicamente ao consumo humano, exceto uma amostra de mel proveniente de Pericumã. Os méis provenientes das duas bacias hidrográficas apresentaram diferenças em algumas características físico-químicas, o que pode ser atribuído à diversidade botânica, edáfica (solo) e climática das duas bacias. Ainda, os méis de Tiúba não se adequaram à legislação brasileira de Apis mellifera para algumas características físico-químicas, o que não permite sua regulamentação e, assim, reforça a necessidade de legislação específica para este tipo de mel.

Avaliação da qualidade físico-química e microbiológica de méis comercializados em Natal, RN / Evaluation of the phycal-chemical and microbiological qualities of honeys sold in Natal, RN

Este trabalho avaliou a presença de fraudes e as condições higiênicossanitárias de méiscomercializados em Natal-RN. Foram analisadas 20 amostras de méis, a maioria sem rótulo,coletadas em pequenos comércios. Foram realizadas análises físico-químicas qualitativas (reaçãode Fiehe, enzimas diastásicas, reação de Lund e de Lugol); quantitativas [umidade, cinzas, pH,acidez e 5-hidroximetilfurfural (5-HMF)]; e microbiológicas (contagem de bolores e leveduras,coliformes a 45 °C e presença de Salmonella sp). Na reação de Fiehe, 40% das amostras indicaramaquecimento excessivo e em 60% houve ausência de enzimas diastásicas. Na reação de Lund,35% mostraram adulteração, e 30% na reação de Lugol. Os teores de umidade variaram de 15,80a 20,53%, e uma amostra (5%) esteve acima do permitido. Os valores de cinzas (0,02 a 0,36%)estavam dentro do limite determinado. O pH foi de 3,08 a 4,31; para acidez (21,99 a 78,88 mEq/kg)40% dos valores estavam superiores ao permitido, e 20% dos obtidos para 5-HMF (9,60 a88,70 mg/kg) não estavam em conformidade. Não houve crescimento de microrganismos nasanálises microbiológicas. A maior parte dos méis estava em desacordo com a legislação porsuperaquecimento, e/ou más condições de armazenamento ou fraude. As amostras de méis estavamem boas condições higienicossanitárias.

This study aimed at evaluating the occurrence of fraud, and the sanitary conditions of honeyssold in Natal, Brazil. Twenty samples of honey were analyzed, being the majority without labels,and obtained in small trades. The samples were subjected to qualitative physical-chemical analysis(Fiehe reaction, diastases enzymes, Lund and Lugol reaction); quantitative evaluation (moisture,ash, pH, acidity and 5-Hidroximetilfurfural (5-HMF); and microbiological (molds and yeasts,coliforms at 45 °C and Salmonella sp). In the Fiehe reaction, 40% of samples indicated excessiveheating; diastase enzymes were absent in 60%. In the Lund reaction, 35% indicated adulteration,and 30% by the Lugol reaction. The humidity values varied from 15.80 to 20.53%, and one sample(5%) showed higher rate. The ash values (0.02 to 0.36%) were within the limit; pH values werefrom 3.08 to 4.31. For acidity (21.99 to 78.88 mEq/kg) 40% of the values were higher than thoseallowed, and 20% of the 5-HMF (9.60 to 88.70 mg/kg) did not comply with the legislation.No microorganism growth was observed. The majority of the honey samples were in disagreementwith the legislation, indicating overheating, and/or poor storage conditions or some form of fraud.Honey samples were in good hygienic-sanitary conditions.

Avaliação da qualidade físico-química e microbiológica de méis comercializados em Natal, RN / Evaluation of the physical-chemical and microbiological qualities of honeys sold in Natal, RN

Este trabalho avaliou a presença de fraudes e as condições higiênicossanitárias de méis comercializados em Natal-RN. Foram analisadas 20 amostras de méis, a maioria sem rótulo, coletadas em pequenos comércios. Foram realizadas análises físico-químicas qualitativas (reação de Fiehe, enzimas diastásicas, reação de Lund e de Lugol); quantitativas [umidade, cinzas, pH, acidez e 5-hidroximetilfurfural (5-HMF)]; e microbiológicas (contagem de bolores e leveduras, coliformes a 45 °C e presença de Salmonella sp). Na reação de Fiehe, 40% das amostras indicaram aquecimento excessivo e em 60% houve ausência de enzimas diastásicas. Na reação de Lund, 35% mostraram adulteração, e 30% na reação de Lugol. Os teores de umidade variaram de 15,80 a 20,53%, e uma amostra (5%) esteve acima do permitido. Os valores de cinzas (0,02 a 0,36%) estavam dentro do limite determinado. O pH foi de 3,08 a 4,31; para acidez (21,99 a 78,88 mEq/kg) 40% dos valores estavam superiores ao permitido, e 20% dos obtidos para 5-HMF (9,60 a88,70 mg/kg) não estavam em conformidade. Não houve crescimento de microrganismos nas análises microbiológicas. A maior parte dos méis estava em desacordo com a legislação por superaquecimento, e/ou más condições de armazenamento ou fraude. As amostras de méis estavam em boas condições higienicossanitárias.

This study aimed at evaluating the occurrence of fraud, and the sanitary conditions of honeys sold in Natal, Brazil. Twenty samples of honey were analyzed, being the majority without labels, and obtained in small trades. The samples were subjected to qualitative physical-chemical analysis(Fiehe reaction, diastases enzymes, Lund and Lugol reaction); quantitative evaluation (moisture, ash, pH, acidity and 5-Hidroximetilfurfural (5-HMF); and microbiological (molds and yeasts, coliforms at 45 °C and Salmonella sp). In the Fiehe reaction, 40% of samples indicated excessive heating; diastase enzymes were absent in 60%. In the Lund reaction, 35% indicated adulteration, and 30% by the Lugol reaction. The humidity values varied from 15.80 to 20.53%, and one sample (5%) showed higher rate. The ash values (0.02 to 0.36%) were within the limit; pH values were from 3.08 to 4.31. For acidity (21.99 to 78.88 mEq/kg) 40% of the values were higher than those allowed, and 20% of the 5-HMF (9.60 to 88.70 mg/kg) did not comply with the legislation. No microorganism growth was observed. The majority of the honey samples were in disagreement with the legislation, indicating overheating, and/or poor storage conditions or some form of fraud. Honey samples were in good hygienic-sanitary conditions.

Análises dos recursos hídricos do parque municipal dos xetás, umuarama-PR / Analysis of water resources of the municipal park xetás, umuarama-PR

O objetivo deste trabalho foi avaliar os padrões qualitativos dos recursos hídricos localizadas no Parque Municipal dos Xetás na cidade de Umuarama (PR), o local é considerado Área de Proteção Ambiental, onde possui algumas fontes de poluição gerando conhecimento das condições físico-químicas e bacteriológicas para os habitantes da cidade ou para outros indivíduos. Foram analisados os parâmetros como demanda química de oxigênio (DQO), cor aparente, óleos e graxas, nitrato, surfactantes, turbidez, pH, chumbo e mercúrio em amostras coletadas de pontos específicos. As análises foram realizadas segundo as especificações do Standard Methods for Examination of Water and Wastewather e obtiveram-se teor mínimo e máximo que variou no resultado do DBO de 2,40 e 25,50 mg de O2/L, cor aparente variou entre 36,00 e 146 mg Pt-Co/L e óleos e graxas variou entre 8 e 28,5 mg/L de acordo com especificações vigentes todas as análises deveriam estar ausentes. Não foram detectados DQO, nitrato, surfactantes, turbidez, pH e mercúrio nas amostras analisadas. No microbiológico os coliformes totais foram de 3,0 x104 e 6,0 x105 e coliformes termotolerantes entre 1,0 x104 e 1,6 x107 nas amostras analisadas. A análise de mercúrio foi realizada pelo laboratório de análises toxicológicas e ambientais (LATAM) de Curitiba-PR, as análises microbiológicas de coliformes termotolerantes e coliformes totais analisadas pelo laboratório da SANEPAR conveniada com a UNIPAR e as demais análises foram realizadas no laboratório da Universidade Paranaense ­ UNIPAR. Concluiu-se que os efeitos causados pelas emissões de esgotos clandestinos de alguns pontos da cidade sendo estes, despejados nas nascentes do Parque Municipal dos Xetás, foram significativos de acordo com os parâmetros da portaria 518 do ministério da saúde e pela resolução 357 do CONAMA.

The purpose of this study was to evaluate the quality standards of water resources located in the Xetás municipal park in the city of Umuarama (PR). The site is considered an Environmental Protection Area. The study area has some pollution sources generating knowledge of the physical-chemical and bacteriological conditions for the inhabitants of the city or to other individuals. Parameters such as chemical oxygen demand (COD), apparent color, oils and grease, nitrate, surfactants, turbidity, pH, lead and mercury were analyzed in samples collected at specific points. Analyses were carried out according to the specifications set forth in the Standard Methods for Examination of Water and Wastewater, presenting minimum and maximum content BOD results that varied from 2.40 and 25.50 mg O2/L, apparent color ranged from 36.00 and 146 mg Pt-Co/L, and oils and grease ranged between 8 and 28.5 mg/L. According to existing specifications, all analyzes should be absent. No results for COD, nitrate, surfactants, turbidity, pH and mercury were found in the samples analyzed. In microbiological examinations, total coliforms were 3.0 x104 and 6.0 x105 and thermotolerant coliforms ranged between 1.0 x104 and 1.6 x107 in the analyzed samples. The analyses were carried out in the laboratory of the Universidade Paranaense ­ UNIPAR; mercury analyzes were carried out by the laboratory toxicological and environmental (LATAM) of Curitiba-PR, and the microbiological analysis of thermotolerant coliforms and total coliforms were analyzed by SANEPAR laboratory outsourced by UNIPAR, and the remaining analyzes were performed in the laboratory of the Universidade Paranaense - UNIPAR. It can be concluded that the effects caused by the emissions of clandestine sewage from some points of the city being dumped at the water sources of the Xetás Municipal Park were significant according to the parameters set forth in Ordinance 518 of the Ministry of Health and Resolution 357 by CONAMA.

À margem do rio e da sociedade: a qualidade da água em uma comunidade quilombola no estado de Mato Grosso / At the edge of the river and society: water quality in a quilombola community in the state of Mato Grosso

Resumo O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade da água consumida pelas famílias das comunidades Baixio e Morro Redondo, situadas no Assentamento Vão Grande, inserido no município de Barra do Bugres, a 150 quilômetros da capital do estado, por meio de parâmetros microbiológicos. Inicialmente, foi realizado contato prévio com a comunidade para a realização da apresentação do projeto e seus objetivos. Para a determinação dos pontos de coleta da água, levantou-se os tipos de fontes de recursos hídricos utilizadas pelos moradores para o consumo. Após a coleta da água, as amostras foram destinadas ao Laboratório de Microbiologia da Universidade do Estado de Mato Grosso, Campus Barra do Bugres, onde se realizou a determinação pelo método rápido-Colilert. A contaminação detectada nas amostras analisadas, em todo o período, foi consideravelmente preocupante. O índice de contaminação predominou em quase 100% das amostras. Fatores como a falta de saneamento básico, que pode ser evidenciada pelo destino inapropriado dos resíduos sólidos e ausência de tratamento da água para o consumo, influenciaram diretamente nos resultados obtidos. Ao final do projeto, a equipe responsável elaborou um relatório dos resultados obtidos com a pesquisa, o qual foi apresentado aos moradores das comunidades Baixio e Morro Redondo, acompanhado de orientações sobre práticas acessíveis para a redução da contaminação microbiológica da água. Observou-se que a contaminação dos recursos hídricos, por falta de saneamento básico e ausência do tratamento da água utilizada pelos moradores para consumo, evidencia riscos à saúde coletiva dessas comunidades. Portanto, a implementação de políticas públicas pelas autoridades locais competentes torna-se primordial para reverter esse quadro. Ações interdisciplinares conjuntas, nos setores de gestão de recursos hídricos, saneamento básico, habitação e saúde são ações necessárias para melhoria da qualidade de vida dessa comunidade quilombola.

Abstract This study aimed to evaluate the quality of water consumed by families of Baixio and Morro Redondo communities, located in Vão Grande settlement, in Barra do Bugres, 150 km from the state of Mato Grossos' capital (Brazil) through microbiological parameters. Initially, previous contact was made with the community to present the project and its objectives. For determining what water points we should collect from, a survey was made about the types of water sources used by residents for consumption. After the collection, samples were sent to the laboratory of Microbiology of the State University of Mato Grosso, Barra do Bugres campus, where they were determined by the fast-Colilert method. Contamination detected in analyzed samples, throughout the period, caused considerable concern, filth index predominated in almost 100% of the samples. Factors such as lack of basic sanitation, which can be evidenced by the inappropriate destination of solid waste and the absence of water treatment for consumption, directly influenced the results obtained. In the end of the project, the responsible team prepared a report of the results obtained by the research, which was presented to Baixio and Morro Redondo communities' residents, along with information on accessible practices for reduction of microbiological contamination of water. We observed that contamination of hydric resources, due to lack of basic sanitation and lack of water treatment for consumption, evidences risks to collective health of these communities. Therefore, the implementation of public policies by the competent local authorities becomes a matter of paramount importance to reverse this framework. Joint interdisciplinary actions in areas of water resources management, basic sanitation, housing, and health are necessary actions to improve the quality of life of this 'quilombola' community.

Gram y ureasa para el diagnóstico de helicobacter pylori en muestras gastroduodenales / Gram and urease for the diagnosis of helicobacter pylori in gastroduodenal samples

Fundamento: la afección gastroduodenal y el cáncer gástrico, son enfermedades cada día más frecuentes, donde el helicobacter pylori es el microorganismo responsable del número mayor de casos. Objetivo: determinar la presencia del helicobacter pylori en muestras de biopsias gastroduodenales a partir de la aplicación de las técnicas microbiológicas, prueba de ureasa y coloración de Gram. Métodos: se realizó un estudio descriptivo, transversal para determinar la presencia del helicobacter pylori en muestras de biopsias gastroduodenales, mediante técnicas microbiológicas en el Laboratorio de Microbiología del Hospital Clínico Quirúrgico Docente Saturnino Lora en la Provincia de Santiago de Cuba, en el año 2012. Resultados: del total de pacientes estudiados se encontró un predominio de 98 mujeres para un 66,6 %, dentro de los hábitos tóxicos evaluados el de mayor porcentaje fue el consumo de café 132 casos, 89,8 %, el síntoma más relevante encontrado fue la epigastralgia. Al aplicar las pruebas referidas en el estudio (prueba de ureasa y técnica coloración de Gram), se obtuvo un 66,7 % de muestras positivas con la prueba de ureasa y un 79,6 % por la coloración de Gram. Conclusiones: la morbilidad predominó en el sexo femenino en las edades comprendidas de 31 a 45 años, la coloración de Gram es más sensible que la prueba de ureasa, los pacientes con gastritis crónicas mostraron mayor positividad a helicobacter pylori.

Background: gastroduodenal affection and gastric cancer are diseases which are more frequent every day. Helicobacter pylori is the responsible microorganism for the largest number of cases. Objective: to determine the presence of helicobacter pylori in grastroduodenal biopsy samples from the application of microbiological techniques: urease test and Gram staining. Methods: in 2012 a cross-sectional descriptive study was conducted to determine the presence of helicobacter pylori in gastroduodenal biopsy samples through microbiological techniques in the microbiology laboratory of Saturnino Lora hospital in Santiago de Cuba. Results: from the whole group of patients studied a predominance of 98 women that account for 66,6 % was found. From the bad habits assessed the one with the highest percentage was coffee consumption, with 132 cases which represent 89.8 %. The most notable symptom found was epigastralgia. After undergoing the referred tests of the study (urease test and Gram staining), 66,7 % of positive samples with urease test and 79,6 % with Gram staining were obtained. Conclusions: morbidity prevailed in female sex in the 31 to 45 age group. Gram staining is more sensitive than urease test. Patients with chronic gastritis showed gram-positive results to helicobacter pylori.

Aspectos microbiológicos en el diagnóstico de infecciones del tracto urinario / Microbiological aspects in the diagnosis of urinary tract infections

Introducción: Las infecciones del tracto urinario (ITU) se encuentran entre las causas de consulta ambulatoria y de urgencias más frecuentes. La ausencia de pautas y consenso para el diagnóstico dadas por el laboratorio de microbiología puede dificultar la obtención de datos relevantes y confiables sobre los hallazgos microbiológicos y retrasar la toma de conductas clínicas apropiadas. Objetivo: Elaborar un algoritmo de decisión en ITU basado en la evidencia actual para el procesamiento de la muestra de orina, que incluye desde la recolección, el transporte y almacenamiento hasta su cultivo, con el fin de generar una directriz desde el laboratorio para la correcta toma de decisiones del médico. Metodología: Se lleva a cabo una búsqueda en la literatura y el concepto de expertos en Microbiología e Infectología basada en la revisión de las referencias bibliográficas disponibles en los términos de búsqueda relacionados, haciendo énfasis en estudios locales. Resultados: Se generaron recomendaciones para el diagnóstico por el laboratorio de las ITU en Colombia, que incluyen recolección, almacenamiento y transporte, siembra y pruebas de susceptibilidad antimicrobiana.

Background: Urinary tract infections (UTI) are one of the most frequent reasons for consultation in outpatient and emergency settings. The absence of guidelines and consensus from the microbiology laboratory for the diagnosis of UTI may affect the relevance and reliability of the results and delay the physician's treatment determination. Objective: To creat e an algorithm for the laboratory diagnosis of UTI in Colombia based on current evidence, in order to provide recommendations regarding sample collection, storage, transport and processing and to provide guidance for physicians' decision making. Methods: We reviewed the current standards and guidelines for the diagnosis of UTI and considered comments from microbiology and infectious disease experts based on a literature search using relevant search terms and emphasizing local studies. Results: We generated recommendations for collecting samples, storage, transport, culture and susceptibility testing for the reliable diagnosis of UTI in patients in Colombia.