Direct identification of bovine mastitis pathogens by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry in pre-incubated milk

ABSTRACT The present study aimed to compare two MALDI-TOF identification methods [(a) direct sample identification after pre-incubation; or (b) use of bacteria isolated on pre-culture)] to standard, traditional bench microbiology. A total of 120 quarter milk samples from 40 Holstein lactating cows were screened based on culture-positive results obtained by microbiological culture (reference method) with the following numbers of quarters positive per cow: 4 cows with 1, 8 cows with 2, 12 cows with 3 and 16 cows with 4 infected quarters per cow. For direct identification method, quarter milk samples (n = 120) were skimmed by centrifugation (10,000 × g/10 min) and pre-incubated at 37 ºC for 12 h. After pre-incubation, quarter milk samples were submitted to total bacterial count by flow cytometry and for a preparation protocol for bacterial ribosomal protein extraction followed by MALDI-TOF MS analysis. The direct MALDI-TOF MS identification method compared to microbiological culture correctly identified isolates of coagulase-negative Staphylococci (27.2%), Streptococcus agalactiae (21.8%), Staphylococcus aureus (14.2%), and Streptococcus uberis (5.2%). The pre-incubation protocol of milk samples, associated to the direct identification method by MALDI-TOF MS, did not increase the identification at species level (score >2.0) of pathogens causing subclinical mastitis in comparison to the method without previous incubation.

Aspectos de la respuesta inmune innata en las infecciones intramamarias causadas por Staphylococcus aureus en bovinos / Aspects of the innate immune response to intramammary Staphylococcus aureus infections in cattle

Staphylococcus aureus es el principal agente causante de mastitis bovina en Argentina y en el mundo. Esta bacteria ocasiona infecciones crónicas que generan importantes pérdidas a los productores y la industria lechera. El objetivo de este artículo es caracterizar los mecanismos que intervienen en la infección causada por S. aureus en la glándula mamaria bovina, evaluando dos aspectos diferentes del proceso infeccioso: por un lado, lo vinculado con la respuesta inmune innata por parte del hospedador, y por otro, la capacidad de la bacteria para evadir el sistema inmune e interactuar con diferentes tipos celulares. La exploración de la interacción de S. aureus con el sistema inmune de la glándula mamaria bovina permitirá identificar blancos para delinear nuevas alternativas preventivas o curativas, que contribuyan a evitar o eliminar las infecciones causadas por este organismo

Staphylococcus aureus is the pathogen most frequently isolated from bovine mastitis worldwide, causing chronic intramammary infections that limit profitable dairying. The objective of this article is to characterize the mechanisms involved in S. aureus mammary gland infections considering two different aspects of the infectious process; on the one hand, the aspects involved in the host innate immune response and on the other hand, the capacity of this organism to evade the immune system and interact with different cell types. The exploration of S. aureus interactions with the immune response of bovine mammary gland will help identify targets to outline new preventive or curative alternatives for intramammary infections caused by this organism

Contagem de células somáticas em amostras de leite cru na região de Catalão, GO / Counting of somatic cells in raw milk samples in the region of Catalão, GO

O presente trabalho teve como objetivo, identificar a contagem celular somática (CCS) nas amostras obtidas de propriedades rurais com diferentes tipos de ordenha do município de Catalão-GO. A pesquisa desenvolveu-se em 15 fazendas, sendo cinco com ordenha manual, cinco com ordenha mecânica em circuito fechado e cinco com ordenha mecânica com balde ao pé. As vacas estavam no meio da lactação e todas foram escolhidas aleatoriamente. O número de amostras em cada fazenda foi em torno de 30, sendo uma amostra por vaca, totalizando 150 amostras por tipo de ordenha. O leite foi colhido com o auxílio de um copo coletor e posteriormente identificado e enviado para análise. O diagnóstico da qualidade do leite foi realizado através da contagem eletrônica de células somáticas (CCS), pelo aparelho Fossomatic 5000 Basic e os teores dos componentes foram analisados utilizando-se o Milkscan 4000. Entre as variáveis tipo de ordenha e mastite subclínica, houve relação signfiicativa (p=0,07). A ordenha manual obteve 21 por cento (32) das amostras com CCS acima de 300.000 células/mL, enquanto a ordenha mecância circuito fechado a presentou 23 por cento (34) da amostras e a ordenha mecânica balde ao pé obteve 32 por cento (48) das amostras com CCS >300.000 células/mL. Entre as variáveis tipo de ordenha e CCS preconizada pelo PNMQL, não houve relação significativa (p>0,05). De acordo com a análise estatística, não existiu correlação entre os componentes do leite (gordura, proteína, lactose e EST)e CCS.

Caracterizaçäo fenotípica e genotípica de cepas de Staphylococcus aureus isoladas de leite de vacas com mastite subclínica e de outras fontes em propriedades produtoras de leite / Phenotipical and genotipical caracterization of isolated Staphylococcus aureus strains of cow milk with sub-clinical mastitis and of other sources in milk productional properties

Vários relatos têm sido feitos indicando que a ocorrência de mastite subclínica em vacas é elevada. É a doença mais importante que acomete a pecuária leiteira em todo o mundo, gerando grandes perdas econômicas, tanto em nível de propriedade quanto de indústria. Staphylococcus aureus é o microrganismo isolado com maior freqüência em leite de animais mastíticos e, sendo suas toxinas termoestáveis, poderäo permanecer no leite após o processamento térmico e causar intoxicaçöes alimentares. Além disso, o consumo de leite cru e de derivados fabricados com ele, é elevado. Com a finalidade de avaliar a ocorrência de S. aureus em leite de animais com reaçäo positiva ao teste de CMT (indicativo de mastite), nas mäos dos ordenhadores e em equipamentos...

Ocurrencia de desórdenes derivados del parto y mastitis en vacas Holstein, en función del número de partos y meses del año / Association of periparturient disorders and mastitis with parity in Hostein, cows and month of maximum ocurrence of these disorders

Se evaluó el número de lactancias como factor de riesgo de algunos desórdenes asociados al parto y mastitis, y se determinó el mes de mayor ocurrencia de las enfermedades estudiadas. Se utilzaron los datos de sanidad registrada durante 6565 lactancias de vaca Holstein en el suroeste de NUevo León. Comparadas con el resto de las compañeras de establo, las vacas más jóvenes fueron 1.53 veces más propensas a presentar metritis (P< 0.05). Por otro lado, las vacas con más de 7 partos fueron las menos susceptibles a presentar infecciones uterinas. Las vacas con más de 2 partos fueron significativamente más propensas a presentar retención de placenta y matitis (P< 0.05). En el caso de los quistes ováricos, las vacas jóvenes presentaron un mayor riesgo de ocurrencia de este problema, en comparación con las vacas de más de 3 partos. Las vacas con menos de 4 partos tuvieron menos del 50 por ciento de riesgo de presentar hipocalcemia, en comparación con el resto de las compañeras de establo. En contraste, las vacas de más de 5 partos fueron de 2 a 5 veces más susceptibles de presentar este desorden del metabolismo del calcio. Se detectó una mayor ocurrencia de retención de placenta, metritis, quistes ováricos o mastitis en marzo, agosto, septiembre y julio, respectivamente (P< 0.05)