Caracterización del polirribosilribitol fosfato por cromatografía de exclusión molecular de alta eficacia con detección ultravioleta / Characterization of polyribosylribitol phosphate by high efficiency size exclusion chromatography with ultraviolet detection

Haemophilus influenzae tipo b es un importante patógeno del hombre causante de varias de las enfermedades invasivas en niños menores de cinco años, contra el cual fueron autorizadas las vacunas glicoconjugadas a partir del polirribosilribitol fosfato. Quimi-Hib® es la primera y única vacuna contra este patógeno que utiliza el polisacárido obtenido por síntesis química. El Ingrediente Farmacéutico Activo es producido por el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología y se obtiene a partir de su conjugación al toxoide tetánico. En el presente reporte se hizo una caracterización del polirribosilribitol fosfato mediante la técnica de cromatografía de exclusión molecular de alta eficacia con detección ultravioleta a 215 nm. En el estudio se evaluaron tres lotes y se determinó el perfil de elución en una columna SuperdexTM 75 10/300 GL Increase con un porciento de pureza de 77,42 ± 8,97 y una masa molar promedio de 7.381 Da ± 210,93. La principal impureza presente en el polirribosilribitol fosfato es el dimetilsulfóxido, disolvente utilizado en la reacción de activación con el éster N-hidroxisuccinimidilo del ácido β-maleimidopropiónico. El polirribosilribitol fosfato se purificó por filtración con un Amicon Ultra-15 de 2.000 Da hasta una pureza de 99,1 por ciento y se conjugó al toxoide tetánico. El rendimiento de la reacción de conjugación con el polisacárido purificado fue de 30,0 por ciento 1,77 el cual no muestra diferencias significativas con el control que fue 33,7 por ciento ± 3,57 demostrándose que el dimetilsulfóxido no afecta el desempeño de la reacción de conjugación(AU)

Haemophilus influenzae type b is an important human pathogen causing some invasive diseases in children less than five years of age. Glycoconjugate vaccines based on polyribosylribitol phosphate have been licensed against this bacterium. Quimi-Hib® is the first and only vaccine against this pathogen using the chemically synthesized polysaccharide. The Active Pharmaceutical Ingredient is produced by the Center for Genetic Engineering and Biotechnology and is obtained from its conjugation to tetanus toxoid. In the present report a characterization of polyribosylribitol phosphate was performed by high performance molecular exclusion chromatography with ultraviolet detection at 215 nm. Three batches were evaluated in the study and the elution profile was determined on a SuperdexTM 75 10/300 GL Increase column with a purity percentage of 77.42 ± 8.97 and an average molecular weight of 7,381 Da ± 210.93. The main impurity present in polyribosylribitol phosphate was dimethylsulfoxide, the solvent used in the activation reaction with N-hydroxysuccinimidyl ester of β-maleimidopropionic acid. Polyribosylribitol phosphate was purified by filtration using a 2,000 Da cut-off Amicon Ultra-15 to a purity of 99.1 percent and conjugated to tetanus toxoid. The yield of the conjugation reaction with the purified polysaccharide was 30.0 percent ± 1.77 which shows no significant difference with the control which was 33.7 percent ± 3.57 demonstrating that dimethylsulfoxide does not affect the performance of the conjugation reaction(AU)

Effects of supplemental xylanase on in vitro disappearance of dry matter in feed ingredients for swine / Efectos de la suplementación con xilanasa sobre la desaparición in vitro de materia seca en ingredientes de piensos para cerdos / Efeitos da xilanase suplementar no desaparecimento in vitro de matéria seca em ingredientes de rações para suínos

Abstract Background: Alternative feed ingredients are widely used in swine diets to lower feed costs, but these ingredients contain a large quantity of non-starch polysaccharides. Supplemental xylanase is known to break down non-starch polysaccharides. However, the effects of exogenous xylanase from Bacillus subtilis on various feed ingredients have rarely been compared. Objective: To evaluate the effects of supplemental xylanase on in vitro disappearance of dry matter (DM) in various feed ingredients for pigs. Methods: Nine feed ingredients were used to measure in vitro ileal disappearance and in vitro total tract disappearance of DM. Each ground ingredient was supplemented with either supplemental xylanase (9,000 U/g) or cornstarch at 1.0%. Results: Supplemental xylanase increased in vitro ileal disappearance of DM in wheat, barley, wheat flour, and wheat bran (p<0.05). The in vitro total tract disappearance of DM for barley and wheat bran increased with xylanase addition (p<0.05). Conclusion: Exogenous xylanase could increase in vitro ileal DM disappearance in barley, wheat, wheat flour, and wheat bran, but did not affect in vitro total tract DM disappearance in wheat and wheat flour.

Resumen Antecedentes: Los ingredientes alternativos se utilizan ampliamente en las dietas porcinas para reducir los costos del pienso, pero estos ingredientes contienen una gran cantidad de polisacáridos no-amiláceos. Se sabe que la xilanasa suplementaria descompone los polisacáridos diferentes al almidón. Sin embargo, rara vez se han comparado los efectos de la xilanasa exógena de Bacillus subtilis en algunos ingredientes del alimento. Objetivo: Evaluar los efectos de la xilanasa suplementaria sobre la desaparición in vitro de la materia seca (MS) en varios ingredientes alimentarios para cerdos. Métodos: Se utilizaron nueve ingredientes del alimento para medir la desaparición ileal in vitro y la desaparición del tracto total in vitro de MS. Cada ingrediente molido se complementó con xilanasa suplementaria (9,000 U/g) o almidón de maíz al 1,0%. Resultados: La xilanasa suplementaria aumentó la desaparición ileal in vitro de MS en trigo, cebada, harina de trigo y salvado de trigo (p<0,05). La desaparición de tracto total de MS in vitro para la cebada y el salvado de trigo aumentó con la adición de xilanasa (p<0,05). Conclusión: La xilanasa exógena podría aumentar la desaparición de la MS ileal in vitro en cebada, trigo, harina de trigo y salvado de trigo, pero no afecta la desaparición de la MS en tracto total in vitro del trigo y la harina de trigo.

Resumo Antecedentes: Ingredientes alternativos para rações são amplamente usados em dietas para suínos para reduzir os custos da alimentação, mas esses ingredientes contêm uma grande quantidade de polissacarídeos não amiláceos. A xilanase suplementar é conhecida por quebrar polissacarídeos não amiláceos. No entanto, os efeitos da xilanase exógena de Bacillus subtilis em vários ingredientes da ração raramente foram comparados. Objetivo: Avaliar os efeitos da xilanase suplementar no desaparecimento in vitro da matéria seca (MS) em vários ingredientesde rações para suínos. Métodos: Nove ingredientes da ração foram usados para medir o desaparecimento ileal in vitro e o desaparecimento de MS in vitro do trato total. Cada ingrediente moído foi suplementado com xilanase suplementar (9.000 U/g) ou amido de milhoa 1,0%. Resultados: A xilanase suplementar aumentou o desaparecimento ileal in vitro de MS em trigo, cevada, farinha de trigo e farelo de trigo (p<0,05). O desaparecimento in vitro de MS do trato total para cevada e farelo de trigo aumentou com a adição de xilanase (p<0,05). Conclusão: A xilanase exógena pode aumentar o desaparecimento in vitro da MS ileal em cevada, trigo, farinha de trigo e farelo de trigo, mas não afetou o desaparecimento in vitro do trato total da MS no trigo e na farinha de trigo.

Bases inmunológicas de la enfermedad neumocócica y el candidato vacunal PVC7-TT / Immunological bases of pneumococcal disease and vaccine candidate PVC7-TT

Introducción: Las enfermedades infecciosas del tracto respiratorio se encuentran entre las primeras causas de entidades respiratorias en edades extremas de la vida. Objetivo: Describir las bases inmunológicas de la enfermedad y el nuevo candidato vacunal conjugado antineumocócico PCV7-TT desarrollado en Cuba. Métodos: Se realizó una búsqueda en las bases de datos Medline, Pubmed, SciELO, LILACS, Cochrane Library y Web of Science, de documentos publicados entre mayo del 2018 y marzo del 2020. Se seleccionaron los 64 artículos de mayor relevancia y novedad. Resultados: Streptococcus pneumoniae es el agente etiológico de la enfermedad neumocócica; se le atribuye alrededor de un millón de defunciones anuales, principalmente en países en vías de desarrollo. Es un coco Gram-positivo, anaerobio facultativo y encapsulado que se encuentra dividido en 48 serogrupos y 97 serotipos tipificados. Presenta varios factores de virulencia que garantizan su mecanismo de patogenicidad; uno de los más importantes es el polisacárido capsular que constituye la diana de las vacunas antineumocócicas conjugadas y no conjugadas existentes. En el presente artículo se consideró la proteína de superficie C del neumococo como un posible candidato en la investigación y desarrollo de vacunas preventivas. Asimismo, las vesículas extracelulares podría ser un posible candidato para adyuvante vacunal con fines preventivos y terapéuticos. Conclusiones: El neumococo es un problema de salud a nivel global y el uso de vacunas conjugadas antineumocócicas constituye la herramienta más eficaz para su prevención. El candidato vacunal PCV7-TT desarrollado en Cuba es seguro, bien tolerado, inmunogénico y no inferior a las vacunas actualmente registradas(AU)

Introduction: Infectious diseases of the respiratory tract are among the leading causes of respiratory conditions in patients at extreme ages. Objective: Describe the immunological bases of the disease and the new conjugate pneumococcal vaccine candidate PCV7-TT developed in Cuba. Methods: A search was conducted in the databases Medline, Pubmed, SciELO, LILACS, Cochrane Library and Web of Science for documents published from May 2018 to March 2020. The 64 most relevant and novel papers were selected. Results: Streptococcus pneumoniae is the causative agent of pneumococcal disease, a condition causing about one million deaths a year worldwide, mainly in developing countries. It is a Gram-positive facultative anaerobic encapsulated coccus divided into 48 serogroups and 97 typified serotypes. Several virulence factors ensure its pathogenicity mechanism. One of the most important of these is the capsular polysaccharide constituting the target of the existing conjugate and non-conjugate pneumococcal vaccines. The study considered pneumococcal surface protein C as a possible candidate for the research and development of preventive vaccines. On the other hand, extracellular vesicles could be a possible vaccine adjuvant candidate for preventive and therapeutic use. Conclusions: Pneumococcus is a global health problem, and the use of conjugate pneumococcal vaccines is the most effective tool for its prevention. The vaccine candidate PCV7-TT developed in Cuba is safe, well-tolerated, immunogenic and not inferior to the vaccines so far registered(AU)

Características nutricionales y efecto citotóxico de polisacáridos extraídos de los digüeñes Cyttaria berteroi y Cyttaria hariotii presentes en Chile / Nutritional characteristics and cytotoxic effect of polysaccharides extracted from the digüeñes Cyttaria berteroi and Cyttaria hariotii present in Chile

RESUMEN El género Cyttaria pertenece a la familia Cyttariaceae, existen 11 especies descritas a nivel mundial. En Chile y Argentina podemos encontrar sólo siete de ellas, conocidas como "Digüeñes" del Mapudungun "diweñ", hongos parásitos obligados de árboles de Nothofagus. Este género, se distribuye naturalmente en el hemisferio sur y tiene gran importancia desde el punto de vista alimenticio. A pesar del extenso conocimiento sobre la taxonomía, ecología y composición químico-nutricional de algunas especies de Cyttaria, su potencial nutracéutico ha recobrado interés recientemente. En esta investigación, se determinó la composición químicaproximal y actividad citotóxica de los polisacáridos de C. berteroi y C. hariotii. Para caracterizar la composición nutricional de las especies de Cyttaria, se utilizó la metodología de AOAC y se avaluó el potencial citotóxico de sus polisacáridos mediante el ensayo MTT (bromuro de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazolio) frente a las líneas celulares de cáncer de colon humano (HCT-116), leucemia humana (U-937) y cáncer de mama (MCF-7). Los resultados evidenciaron que C. berteroi presentó un alto contenido de proteínas y lípidos en comparación con C. hariotii. Además, los polisacáridos de C. hariotii tienen un mayor efecto citotóxico frente a la línea celular de leucemia (IC50= 2100 µg/mL), cáncer de colon (IC50= 3700 µg/mL) y cáncer de mama (IC50=9470 µg/mL). En consecuencia, se concluye que los metabolitos de C. berteroi y la actividad citotóxica en líneas tumorales de los polisacáridos de C. hariotii podrían representar una oportunidad para la obtención de un potencial producto nutracéutico.

ABSTRACT The Cyttaria genus belongs to the Cyttariaceae family, with 11 species described worldwide. In Chile and Argentina, seven of them are found. They are known as "Digüeñes", from the Mapudungun "diweñ", and are parasitic fungi of Nothofagus trees. They are naturally distributed in the southern hemisphere and are of great importance from a nutritional point of view. Despite extensive knowledge about the taxonomy, ecology, and chemical-nutritional composition of some Cyttaria species, their nutraceutical potential has recently gained interest. In this investigation, the chemical-proximal composition and cytotoxic activity of the C. berteroi and C. hariotii polysaccharides were determined. To identify the nutritional composition of the Cyttaria species, the AOAC methodology was used and the cytotoxic potential of their polysaccharides was evaluated by means of the MTT test (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5 bromide-diphenyltetrazolium) against the cell lines of human colon cancer (HCT-116), human leukemia (U-937) and breast cancer (MCF-7). The results showed that C. berteroi had a high protein and lipid content compared to C. hariotii. Also, C. hariotii polysaccharides had a greater cytotoxic effect against the colon cancer cell line (IC50= 3700 µg/mL), leukemia (IC50= 2100 µg/mL) and breast cancer (IC50= 9470 µg/mL). Therefore, it is concluded that C. berteroi metabolites and cytotoxic activity in C. hariotii polysaccharide tumor lines could represent an opportunity to obtain a potential nutraceutical product.

Oligosacáridos y polisacáridos no digeribles: una fuente de salud para los adultos mayores / Non-digestible oligosaccharides and polysaccharides: a source of health for older people

RESUMEN Los adultos mayores son especialmente vulnerables a sufrir enfermedades asociadas al tracto gastrointestinal, ya que el envejecimiento conlleva naturalmente a un desbalance en la diversidad y cantidad de los microorganismos presentes en el intestino. Por ello, la suplementación de su dieta con oligosacáridos y polisacáridos no digestibles (OPND) ha cobrado gran relevancia científica. Esto, con el propósito de prevenir y revertir, en parte, los cambios negativos en la microbiota intestinal derivados del envejecimiento. Se ha observado que la suplementación de OPND en adultos mayores genera variados beneficios, entre los que destacan una mejora en el sistema inmune, una mayor absorción de calcio, reducción en la incidencia de alergias, reducción de la constipación y una disminución en los niveles de glicemia y colesterol sanguíneos. Debido a que, los efectos del consumo de OPND en adultos mayores han sido escasamente discutidos en la literatura científica en idioma castellano, el propósito de esta revisión es abordar el tema haciendo énfasis en la realidad chilena y latinoamericana. Ello, con miras a fomentar la incorporación de OPND en alimentos y programas de alimentación dirigidos específicamente a personas de la tercera edad.

ABSTRACT Since aging naturally leads to an imbalance in the diversity and quantity of microorganisms present in the intestine, older people are particularly vulnerable to diseases associated with the gastrointestinal tract. Thus, supplementing the diet of elderly persons with non-digestible oligosaccharides and polysaccharides (OPND) has gained scientific relevance. Supplementation aims to prevent and (partially) revert the negative changes in intestinal microbiota due to aging. It has been observed that OPND supplementation in older adults provides several benefits, including an improvement in the immune system, increased calcium absorption, a reduction in the incidence of allergies, a reduction in constipation and a decrease in blood levels of cholesterol and glucose. Because the effects of OPND supplementation in older adults has been scarcely discussed in the scientific literature in the Spanish language, the purpose of this review is to address the issue with emphasis on the Chilean and Latin-American reality. The article promotes the incorporation of OPND in processed food and feeding programs specifically designed for older people in Latin America.

A peep into the transcriptome studies of the industrially important brown algae with special focus on Macrocystis genus / Una mirada a los estudios de transcriptoma en algas pardas de importancia industrial, en especial del género Macrocystis

Abstract Brown algae are a commercial source of different polysaccharides/hydrocolloids that has been used to produce food, pharmaceutical, and several other useful biotechnological stuff. Nevertheless, transcriptomics has become a tool that not only provides valuable information for the understanding of the physiological processes of a species but also allows the identification of industrially important candidate genes. This study describes the transcriptome of brown algae and their industrial application with a special focus on Macrocystis integrifolia.

Resumen Las algas pardas son una fuente comercial de diferentes polisacáridos / hidrocoloides utilizados para producir alimentos, productos farmacéuticos y otros productos biotecnológicos útiles. Por otra parte, la transcriptómica se ha convertido en una herramienta que no solo proporciona información valiosa para la comprensión de los procesos fisiológicos de una especie, sino que también permite la identificación de genes candidatos industrialmente importantes. Este estudio describe el transcriptoma de algas pardas y su aplicación industrial con un enfoque especial en Macrocystis integrifolia.

Efecto prebiótico de los Arabinoxilanos y los Arabinoxilo-Oligosacáridos y su relación con la promoción de la buena salud / Prebiotic effect of Arabinoxylans and Arabinoxylan-Oligosaccharides and the relationship with good health promotion

RESUMEN Los arabinoxilanos son polisacáridos presentes en los granos de los cereales, y como tales, forman parte de la fibra dietética consumida por humanos y animales. La hidrólisis química o enzimática de los arabinoxilanos produce arabinoxilo-oligosacáridos, los cuales pueden estar ramificados o no, con arabinosa. El objetivo de este trabajo fue exponer el uso potencial de los arabinoxilanos y arabinoxilo-oligosacáridos, como prebióticos, y el efecto de su consumo en la promoción de la buena salud, al estimular selectivamente el crecimiento y actividad metabólica de la microbiótica colónica benéfica. La información generada indica que los arabinoxilanos y arabinoxilo-oligosacáridos actúan modificando la microbiota de manera selectiva, y estimulan la respuesta biológica, favoreciendo la buena salud del hospedero, por su efecto antiobesogénico, regulador de la glucosa, antioxidante, anticancerígeno e inmunomodulador, con resultados similares o mejores en relación a prebióticos reconocidos. No obstante, es necesario ampliar el conocimiento que se tiene de ellos para sustentar su aplicación en la industria alimentaria, farmacéutica o biomédica.

ABSTRACT Arabinoxylans are polysaccharides present in grains and as such, are part of dietary fiber intake in humans and animals. Enzymatic or chemical hydrolysis of arabinoxylans produces arabinoxilo-oligosaccharides, which can be branched or unbranched with arabinose. The objective of this work was to describe the potential use of arabinoxylans and arabinoxylan-oligosaccharides as prebiotics to promote good health, by selective enhancement of beneficial colonic microbiota growth and metabolic activity. The information generated indicates that arabinoxylans and arabinoxylan-oligosaccharides act by modifying the microbiota selectively and stimulate the biological response favoring good health in the host, by antio-obesity effect, glucose regulator, antioxidant, anticancer, immunomodulator, with similar or better results than recognized prebiotics. However, it is necessary to expand the knowledge we have about arabinoxylans in order to support their application in the food, pharmaceutical, and biomedical industry.

Sucrose induced dentin demineralization in a microcosm biofilm model / Desmineralización de la dentina inducida por sacarosa en un modelo de biofilm microcosmo

The aim of this in vitro study was to assess the root dentin demineralization caused by a microcosm biofilm model that has been exposed to sucrose in different ways. Materials and Methods: Saliva of two volunteers was inoculated into an artificial medium for biofilm growth and dentin blocks were immersed into these media. Dentin specimens were randomly exposed to one of the five experimental conditions: C (control group - no saliva inoculum or sucrose), 0S (saliva inoculum without sucrose, negative control), 3S (three daily one-minute immersions in 20 % sucrose), 6S (six daily one-minute immersions in 20 % sucrose), and CS (continuously immersed in 5 % sucrose). After five days, biofilm was collected to determine the concentration of intracellular and extracellular polysaccharides and the dentin surface hardness loss (SHL) was measured. The experiment was carried out in triplicate. Results: The dentin SHL was higher in groups that were exposed to sucrose (3S, 6S and CS) and there was a statistically significant difference between all groups (p<0.001). CS had higher concentrations of polysaccharides (p>0.001) and there was no statistically significant difference between the other groups (0S, 3S and 6S) (p>0.005). Conclusion: The microcosm biofilm model developed has the potential to produce root dentin demineralization at different exposures to sucrose.

El objetivo de esta investigación in vitro fue evaluar la desmineralización de la dentina radicular causada por un modelo de biofilm microcosmo que fue expuesto de diferentes maneras a la sacarosa. La saliva de dos voluntarios fue colocada en un medio artificial para crecimiento del biofilm y los bloques de dentina fueron sumergidos en estos medios. Al aza rlos bloques fueron expuestos a una de las cinco condiciones experimentales: C (grupo control ­ sin inoculación de saliva o sacarosa), 0S (inoculación de saliva sin sacarosa, control negativo), 3S (tres inmersiones diarias de un minuto en sacarosa a 20 %), 6S (seis inmersiones diarias de un minuto en sacarosa a 20 %), y CS (sumergidos continuamente en 5 % de sacarosa). Después de cinco días, el biofilm fue recogido para determinar la concentración de polisacáridos intracelulares y extracelulares y fue medida la pérdida de dureza superficial de la dentina (SHL). El experimento se repitió en tres ocasiones. La dentina SHL era mayor en los grupos que fueron expuestos a la sacarosa (3S, 6S E CS) y hubo diferencia estadísticamente significativa entre todos los grupos (P<0,001). CS presentó mayor concentración de polisacáridos (p<0,001) y no hubo diferencia estadísticamente significativa entre los demás grupos (0S, 3S E 6S) (p>0,005). El modelo del biofilm desarrollado tiene potencial para producir desmineralización de la dentina radicular en diferentes exposiciones a la sacarosa.

Actividad antiinflamatoria in vitro de los polisacáridos sulfatados de Patallus mollis extraídos mediante digestión enzimática / In vitro anti-inflammatory effect of Patallus mollis sulphated polysaccharides extracted by enzymatic digestion

Objetivo: Evaluar la actividad antiinflamatoria in vitro de los polisacáridos (PCs) del tegumento de Patallus mollis mediante la prueba de la estabilidad de la membrana celular del glóbulo rojo y la desnaturalización de la albumina. Materiales y métodos: Los especímenes fueron recolectados en la bahía de Pucusana, se identificaron y los PCs se extrajeron mediante digestión enzimática con bromelina (PBr), papaína (PPa) y pepsina (PPe). Se cuantifico el contenido de azucares, sulfatos y proteínas totales mediante métodos colorimétricos. Para la prueba de estabilidad de la membrana, se preparó una solución de glóbulos rojos [10 % v/v], la cual se mezcló con PBS, NaCl [0,36%], y PCs [2000 ­ 62.5 µg/mL]. Para la prueba de la desnaturalización de la albúmina, la mezcla consistió en suero de albúmina bovina [0,5%] con PCs [2000 ­ 62.5 µg/mL]. Como controles se utilizó diclofenaco sódico y agua destilada. El análisis de resultados fue en base a la absorbancia medida en un espectrofotómetro de placas a 420 y 660 nm, según las pruebas respectivamente. Resultados: Los PCs presentaron niveles elevados de azúcares y proteínas totales, así como presencia de sulfatos totales. Además los PCs exhibieron una capacidad estabilizadora de la membrana, siendo la máxima presentada por PBr a una concentración de 62.5 µg/mL. Solo el PPa presentó inhibición de la desnaturalización de albúmina inducida por calor a una dosis de 2000 µg/mL. Conclusión: Nuestros resultados sugieren que los PCs tiene actividades antiinflamatorias y son candidatos potenciales para la formulación de un ingrediente alimentario funcional y / o fármaco para tratar enfermedades inflamatorias.

Producción de polisacáridos a partir de Ganoderma sp., aislado en la región andina / Polysaccharides production by Ganoderma sp., isolated from andina region

Los hongos de la podredumbre blanca de la madera, como Ganoderma sp., han sido utilizados alrededor del mundo por sus propiedades medicinales, ya que poseen compuestos bioactivos como los triterpenos y los polisacáridos. Esta investigación se centra en la producción de polisacáridos a escala de laboratorio y de biorreactor, a partir de Ganoderma sp., aislado en la región andina, utilizando como sustrato un residuo ligninocelulósico de la industria agrícola suplementado con glucosa y lactosa. Se encontró que las condiciones más adecuadas y viables para la producción de biomasa y polisacáridos de Ganoderma sp., son: medio Bio 3%, 10 días de incubación, lactosa 10%, pH= 4,0, T= 30°C, 300 rpm y 1 vvm. Los ensayos espectrofotométricos (fenol ácido sulfúrico y escaneo en UV entre 200 y 400 nm), enzimáticos y de infrarrojo permitieron identificar y cuantificar glucanos y algunas proteínas en los extractos, sugiriendo que los hongos endógenos de la región Andina poseen características propias de metabolitos importantes a nivel medicinal. Adicionalmente se demostró el efecto antiproliferativo en células J774, especialmente del extracto GIPSi (IC50= 86%) similar al efecto generado por estándares comerciales.

The white rot wood fungi like Ganoderma has been used worldwide because it has triterpenoids and polysaccharides with medicinal properties. This research focuses on determining the polysaccharide production conditions and laboratory and bioreactor scale, from the aforementioned fungi, isolated in the Andean region. It was used agricultural lignin-residue supplemented with glucose and lactose. We found that the most appropriate and feasible production conditions for biomass and Ganoderma polysaccharides are: Bio medium 3%, t = 10 days, 10% lactose, pH= 4,0, T= 30°C, 300 rpm and 1 vvm. The spectrophotometric, enzymatic and IR tests; allowed us to identify the presence of polysaccharides and proteins in some extracts, suggesting that the endogenous mushrooms in the Andean region also have characteristics similar to those of metabolites that are important in medicine. Additionally, the antiproliferative effect was observed in J774 sarcoma cells, particularly GIPSi extract (IC50= 86%) similar to the effect generated by commercial standards.

Falla de respuesta anticorpórea frente a antígenos polisacáridos: serie de casos / Specific antibody deficiency: cases serie

La falla de respuesta anticorpórea frente a antígenos polisacáridos es una inmunodeficiencia primaria humoral definida como una pobre respuesta frente a antígenos polisacáridos contenidos en la vacuna antineumocócica de 23 serotipos, con inmunoglobulinas normales y respuesta adecuada frente a antígenos proteicos. Las manifestaciones clínicas reportadas incluyen infecciones sinopulmonares recurrentes, infecciones sistémicas y asma. El objetivo de esta presentación es describir las manifestaciones clínicas y la evolución en una cohorte de pacientes con falla de respuesta anticorpórea frente a antígenos polisacáridos diagnosticados y seguidos en nuestro centro entre 1998 y 2012.

Specific antibody deficiency is a common antibody immunodeficiency defined as a poor antibody response to pneumococcal polysaccharides antigens present in the 23-valent pneumococcal vaccine, with normal immunoglobulins and normal response to protein antigens. Clinical manifestations include recurrent sinopulmonary infections, severe infections and asthma. The aim of this presentation is to describe clinical manifestations and evolution of a cohort of children with specific antibody deficiency diagnosed and followed in our center between 1998 and 2012.

Estandarización en Colombia de una prueba ELISA para la evaluación de los niveles séricos de anticuerpos IgG contra diez serotipos de Streptococcus pneumoniae / An immunoenzymatic test for IgG antibody levels against 10 serotypes of Streptococcus pneumoniae

Introducción. Streptococcus pneumoniae es causante de gran morbimortalidad en niños pequeños y ancianos. Sin embargo, en Colombia no está disponible una prueba que evalúe la respuesta humoral a la vacunación específica contra este microorganismo Objetivo. Estandarizar en Colombia un ensayo inmunoenzimático para evaluar los niveles séricos de anticuerpos IgG contra diez serotipos de S. pneumoniae en respuesta a la vacunación específica y caracterizar esta respuesta en individuos sanos de nuestra población. Materiales y métodos. Se hizo un ELISA en fase sólida utilizando como antígenos los polisacáridos capsulares 1, 3, 4, 5, 6B, 9V, 14, 18, 19F y 23F de S. pneumoniae. Resultados. Los sueros de referencia y control reaccionaron fuertemente contra los polisacáridos evaluados, especialmente contra 14 y 19F. En los cinco niños sanos evaluados, los polisacáridos 5 y 19F presentaron los mayores títulos antes de la vacunación. Antes de la vacunación en los niños, y antes y después de la vacunación en los adultos, los polisacáridos 14 y 19F reaccionaron fuertemente. Para todos los polisacáridos, excepto para el 5, existe una relación inversa entre títulos altos de anticuerpos IgG antes de la vacunación y la razón de incremento de los títulos después de la misma. Conclusión. Esta prueba ELISA cuantifica de forma confiable los niveles de IgG sérica contra diez serotipos de S. pneumoniae y, de acuerdo con los resultados obtenidos en individuos sanos de nuestra población, en este trabajo se validan los parámetros internacionales para considerar adecuada la respuesta a la vacuna 23-valente contra este microorganismo.

Introduction. Streptococcus pneumoniae is a major cause of morbi-mortality in early childhood and elderly. However, a test to measure the antibody responses after specific vaccination is not available in Colombia. Objective. An immunoenzymatic test was standardized for the measurement of serum IgG levels against 10 serotypes of S. pneumoniae in response to the specific vaccination. Material and methods. Capsular polysaccharides 1, 3, 4, 5, 6B, 9V, 14, 18, 19F, 23F of S. pneumoniae were used as antigens in a solid-phase ELISA. These responses were characterized in a randomized selected healthy individuals from a Colombian population. Results. The reference and control sera showed great reactivity against all the polysaccharides evaluated, especially against polysaccharide 14 and 19F. The lowest reactivity in these two sera was observed against polysaccharide 3 and 4. Among the children evaluated, polysaccharide 5/19F showed the highes pre-vaccination reactivity, and polysaccharide 14/19F showed the highest post-vaccination reactivity. Among the adults, polysaccharides 14 and 19F showed the greatest reactivity pre- and post-vaccination. For all the polysaccharides (excepting polysaccharide 5), an inverse association among high polysaccharide-specific pre-vaccination- and the increase of post-vaccination-IgG levels was observed. Conclusion. This ELISA test reliably quantifies the serum levels of specific IgG against 10 serotypes of S. pneumoniae. According to the responses by healthy individuals, the current study validates parameters used internationally as an adequate the response to the 23-valent pneumococcal vaccine.

Prebióticos y su efecto en la biod sponibilidad del calcio / Prebiotics and their effect on calcium bioavailability

En la búsqueda de medidas de prevención de enfermedades crónicas no trasmisibles, se piensa en los prebióticos como una forma efectiva, saludable y relativamente barata para la optimización de la absorción de Ca. El aumento de la expectativa de vida de la población y el incremento de enfermedades como la osteoporosis traen graves consecuencias a la salud del individuo, acarreando importantes desembolsos económicos. En esta revisión se condensa el conocimiento presente sobre el efecto fisiológico del consumo de carbohidratos prebióticos y su posible interferencia en la biodisponibilidad del Ca, como también las posibilidades de su empleo en estrategias para combatir las deficiencias del mineral. Se elaboró una recopilación de los estudios originales realizados con mayor impacto en el tema, dando preferencia a los publicados en los últimos 6 años. Utilizamos las bases de datos PubMed, Lilacs e SciELO, usando las palabras claves calcio, prebióticos e probióticos.

The increased life expectancy and prevalence of non-communicable chronic diseases have serious health and economic consequences on the population. Among the useful tools for preventing osteoporosis, prebiotics are thought to be an effective, healthy and relatively cheap way of optimizing calcium absorption. The objective of this review was to summarize the present knowledge on the physiological effects of prebiotic carbohydrate consumption and its possible interference with calcium bioavailability. The possibility of using prebiotics to fight calcium deficiency was also assessed. The keywords calcium, prebiotics and probiotics were used to search the PubMed, Lilacs and SciELO databases for the most significant original studies on the subject published in the last 6 years.

Immunorestorative in immunosuppressed Balb/c mice and cytotoxic activity of water extract from Trichilia hirta root / Actividad inmunorestauradora en ratones Balb/c inmunodeprimidos y citotóxica del extracto acuoso de raíz de Trichilia hirta

Patients receiving chemotherapy treatment in Santiago de Cuba traditionally use water extracts from Trichilia hirta roots. The study aim was to evaluate the immunorestorative and cytotoxic activity of water extracts from Trichilia hirta root. Administration of root water extract increased the total and differential leukocyte counts in inmunosupressed Balb/c mice. Thymus weight recovered significantly as well as bone marrow cellularity. Moreover, water extract (125 ug/mL) showed selective cytotoxicity against cancer cells T-47D and SK-mel-3 in comparison with non-cancer cells (Vero). The results indicate that Trichilia hirta has significant immunorestorative effects in vivo and selective cytotoxicity in vitro. Therefore, it might be a promising alternative for cancer therapy.

Pacientes bajo tratamiento quimioterapéutico tradicionalmente usan extractos acuosos de raíz de Trichilia hirta en Santiago de Cuba. El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad inmunorestauradora y citotóxica de extractos acuosos de raíz de Trichilia hirta. La administración del extracto acuoso de raíz incrementó los conteos globales y diferenciales de leucocitos en ratones inmunodeprimidos. El peso del timo, así como, la celularidad de la médula ósea se recuperaron significativamente. Además, el extracto acuoso (125 ug/mL) mostró citotoxicidad selectiva contra las células tumorales T-47D y SK-mel-3 en comparación con la línea no tumoral (Vero). Los resultados indican que Trichilia hirta posee significativos efectos inmunorestauradores in vivo y citotoxicidad selectiva, por lo cual podría ser una promisoria alternativa para la terapia del cáncer.

Hacia una definición de fibra alimentaria / Alimentary fiber definition

La fibra alimentaria (FA) ha sido un tópico de considerable interés para los nutricionistas y médicos en estos últimos 35 años. Este artículo presenta un análisis sobre la definición de fibra alimentaria y la controversia que existe al respecto, así como las nuevas propuestas que han surgido para incluir en su definición. La FA fue definida como: todos los polisacáridos no almidones más la lignina, que no pueden ser digeridos o absorbidos en el intestino delgado humano. Esta definición no incluye otros componentes vegetales tales como: polifenoles, proteínas resistentes y almidones resistente, los cuales son también resistentes a la digestión. Para muchos investigadores, la definición de FA aun no esta concluida o completa. Las investigaciones epidemiológicas han indicado, la posible relación entre las enfermedades más comunes en las modernas sociedades occidentales y la fibra alimentaria.

Dietary fiber (DF) has been a topic of considerable interest among nutritionists and physicians for the last 35 years. This work was basically focused on an analysis of the dietary fiber definition, the currently existing controversy and the new proposal to be included in such a definition. DF was defined as all nonstarch polysaccharides plus lignin, which are not digested or absorbed in the human digestive tract. This definition does not include other vegetable substances, such as, polyphenols, resistant protein or resistant starch, which are also resistant to digestion. For most researchers this definition is not yet complete. Epidemiological investigations, have suggested the possible relationship between the most common diseases in the modern Western societies and the dietary fiber.

Polissacarídeos não amiláceos na nutrição de peixes - revisão / Non-starchpolysaccharides in fish nutrition - A Review

Os polissacarídeos não amiláceos são componentes das paredes celulares presentes em alimentos de origem vegetal comumente encontrados em rações para peixes. Estes elementos são geralmente a celulose, hemicelulose e pectinas, os quais podem diminuir o desempenho animal, dependendo de sua concentração. Não podem ser degradados por enzimas endógenas, porém o são, numa extensão variável, por microorganismos presentes em seu trato digestivo. Estes elementos afetam a digestibilidade dos nutrientes e modificação no tempo de permanência do alimento no trato digestivo. O maior problema apresentado por esta categoria de componentes é a sua ampla variabilidade e conseqüentes efeitos sobre o desempenho animal. A utilização de enzimas exógenas e técnicas de processamento dos alimentos têm sido adotadas para reduzir os efeitos negativos dos polissacarídeos não amilásceos.

Cuantificación de IGG contra los componentes inmunogénicos de VA-ENGOC-BC en plasma de lactantes vacunados

Debido a las características particulares de la respuesta inmune en lactantes, así como a la eficacia mostrada por la vacuna cubana antimeningocóccica VA-MENGOC-BC, nos propusimos cuantificar la respuesta de la inmunoglobulina G contra los componentes inmunogénicos de los meningococos B y C presentes en la vacuna, en lactantes vacunados. Se tomó muestra por punción capilar a 109 lactantes entre 3 y 6 meses de edad antes de la vacunación a los 31,4 ± 2 días después de la primera y 32,3 ± días después de la segunda dosis vacunal. Se determinaron las concentraciones de inmunoglobulina G contra cada inmunógeno de la vacuna. Los niveles de inmunoglobulina G específica prevacunación, fueron elevadas contra el meningococo C. Se produjo un incremento estadísticamente significativo de anticuerpos para ambos inmunógenos después de la primera y segunda dosis, más marcado contra el meningococo C en la primera y para el meningococo B en la segunda, lo que apoya la presencia de memoria inmunológica.

Due to the particular characteristics of the immune response in infants and to the efficacy shown by the Cuban antimeningococcal vaccine denominated VA-MENGOC-BC, we propose ourselves to quantify the response of immunoglobulin G against the immunogenic components of the meningococci B and C present in the vaccine among the vaccinated infants. The sample was taken by capillary puncture from 109 infants between 3 and 6 months before vaccination, at 31.4±2 days after the first dose and at 32.3± days after the second one. The concentrations of immunoglobulin G against each immunogen of the vaccine were determined. The levels of prevaccination specific immunoglobulin G were elevated against meningococcus C. There was a statistically significant increase of atibodies for both immunogens after the first and second dose. It was more marked against meningococcus C in the first, and for meningococcus B in the secons one, which supports the presence of immunological memory.