Análises macroscópica e histopatológica do alotransplante parcial de vesícula urinária com células-tronco mesenquimais alogênicas derivadas do tecido adiposo em coelhos / Macroscopic and histopathological analysis of partial urinary bladder allograft using allogenic adipose tissue derived mesenchymal stem cells in rabbits

O número de transplantes de órgãos e tecidos em humanos e animais tem crescido significativamente nos últimos anos, principalmente após o advento de técnicas modernas e mais seguras indutoras de imunossupressão. Objetiva-se com o presente estudo avaliar macro e microscopicamente o alotransplante parcial de bexiga a fresco em coelhos, utilizando como agente imunomodulador células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo (ADSC) alogênicas. Foram utilizados 25 coelhos, sendo um deles macho e doador das ADSCs, e os outros 24 eram fêmeas, submetidas a alotransplante parcial de bexiga, tratadas com ciclosporina (GCi) ou células-tronco mesenquimais (GCe). Conclui-se que o GCe teve melhor aceitação histológica do implante em relação ao GCi aos 30 dias de avaliação.(AU)

The number of organ and tissue transplantation in humans and animals has grown significantly recently, especially after the advent of modern and safer techniques of immunosuppression. The objective of this study was to evaluate macro and microscopically partial urinary bladder fresh allograft in rabbits, using as immunomodulatory agent cyclosporine or allogenic adipose tissue derived mesenchymal stem cells (ADSCs). For this purpose, 25 rabbits were used. One male was the donor of ADSCs; 24 females received a partial urinary bladder allograft and were treated with cyclosporine (GCi) or mesenchymal stem cells (GCe). We conclude that the GCe group had better histological acceptance of the implant than GCi group at 30 days evaluation.(AU)

TRAP-silver staining, a highly sensitive assay for measuring telomerase activity in tumor tissue and cell lines

Measurement of telomerase activity in clinically obtained tumor samples may provide important information for use as both a diagnostic marker and a prognostic indicator for patient outcome. In order to evaluate telomerase activity in tumor tissue without radiolabeling the product, we developed a simple telomeric repeat amplification protocol-silver-staining assay that is less time-consuming, is safe and requires minimal equipment. In addition, we determined the sensitivity of the silver-staining method by using extracts of telomerase-positive thyroid carcinoma cell lines which were serially diluted from 5,000 to 10 cells. Telomerase activity was also assayed in 19 thyroid tumors, 2 normal controls and 27 bone marrow aspirates. The results indicate that the technique permits the detection of telomerase activity from 5000 to as few as 10 cells. We propose that it could be immediately applicable in many laboratories due to the minimal amount of equipment required

Estradiol decreases iodide uptake by rat thyroid follicular FRTL-5 cells

Estradiol has well-known indirect effects on the thyroid. A direct effect of estradiol on thyroid follicular cells, increasing cell growth and reducing the expression of the sodium-iodide symporter gene, has been recently reported. The aim of the present investigation was to study the effect of estradiol on iodide uptake by thyroid follicular cells, using FRTL-5 cells as a model. Estradiol decreased basal iodide uptake by FRTL-5 cells from control levels of 2.490 0.370 to 2.085 0.364 pmol I-/æg DNA at 1 ng/ml (P<0.02), to 1.970 0.302 pmol I-/æg DNA at 10 ng/ml (P<0.003), and to 2.038 0.389 pmol I-/æg DNA at 100 ng/ml (P<0.02). In addition, 4 ng/ml estradiol decreased iodide uptake induced by 0.02 mIU/ml thyrotropin from 8.678 0.408 to 7.312 0.506 pmol I-/æg DNA (P<0.02). A decrease in iodide uptake by thyroid cells caused by estradiol has not been described previously and may have a role in goiter pathogenesis

Comparaçäo entre duas estratégias para a detecçäo precoce do hipotireoidismo congênito / Comparison between two strategies for the precocious detection of congenital hypothyroidism

Objetivo. Comparar em recém-nascidos (RN) duas estratégias diferentes para o rastreamento do hipotiroidismo congênito (HC), a dosagem primária de TSH no sangue colhido do cordao umbilical (método 1) e a dosagem primária de T4 no sangue colhido por punçao de calcanhar no 2 dia de internaçao (método 2). Métodos. Os autores compararam as duas estratégias em 10.000 RN. Dosaram o TSH por método imunofluorimétrico sensível em papel de filtro e o T4 por radioimunoensaio em papel de filtro. A coleta de sangue do calcanhar foi realizada no 2 dia de vida. Resultados. Os dois programas diagnosticaram todos os casos de HC nos RN (4 casos, 1/2.500 RN). O índice de rechamada por coleta inadequada foi nulo no método 1 e de 8,5 por cento (850RN) no método 2. O índice de reconvocaçao para confirmaçao de resultados foi de 0,06 por cento (6RN) no método 1 e 2,25 por cento (225 RN) no método 2; quando este método incluía também a dosagem suplementar de TSH, o índice baixou para 1,63 por cento (163 RN). Conclusao. Os dados dos autores evidenciam a superioridade técnica da coleta de sangue a partir do cordao umbilical em relaçao à punçao de calcanhar, assim como da dosagem primária de TSH em relaçao à de T4, uma vez que apresentam índices muito menores de reconvocaçao.

Valor preditivo da dosagem das iodotironinas na avaliaçäo prognóstica de doentes graves / Predictiove value of the measurement of iodotironines on the prognosis of patients with severe nonthyroidal illness

Os valores das dosagens de T3 e de T4 diferenciaram os pacientes com boa e ma evoluçao durante a internaçao em unidade de terapia intensiva. Objetivo. Procurar indicadores para o prognóstico de doentes graves por meio do estudo seqüencial dos níveis séricos dos hormonios tiroidianos. Métodos. Os autores mediram as iodotironinas (T3, T4 e rT3) por ocasiao da entrada e da alta de 42 pacientes internados em unidade de terapia intensiva. Verificaram, também, os dados referentes à última coleta de outros 17 doentes, transferidos para a UTI após o início do quadro clínico. Resultados. Comparando pacientes que evoluíram bem com aqueles que foram a óbito, observaram, nos primeiros, níveis iniciais normais de T4 em 76 por cento dos casos, valores que se mantiveram estaveis ou se elevaram em 65 por cento dos pacientes durante a internaçao, de tal forma que níveis normais de T4 estavam presentes em 70 por cento dos casos por ocasiao de sua alta. Ao contrario, 56 por cento dos pacientes que evoluíram mal ja apresentavam T4 inicial baixo, que diminuiu ainda mais de 95 por cento dos pacientes durante a internaçao, notando-se valores baixos em 81 por cento dos casos por ocasiao da ultima amostra. Os valores de T3 e T4 em conjunto também diferenciaram os pacientes com boa e m evoluçao. Conclusao. Os autores sugerem que a observaçao dos níveis séricos das iodotironinas pode oferecer importante subsídio na avaliaçao prognóstica de doentes em estado grave.

Enzyme-linked thyroglobulin immunoassay

A one-step enzyme linked sandwich immunoassay using Silicone rods coated with rabbit anti-human thyroglobulin anti-Tg) immunoglobulin G (Fab') conjugated with beta-D-galactosidase was established for the measurement of thyroglobulin in human sera. The volume of serum needed for the assay was 2 mul The sensitivity of the assay was 1.52 amol/tube, corresponding to O.5 ng/ml. The precision was proven by coefficients of variation: intra-assay, 7.0 to 9.1 per cent: inter-assay, 5.3 to 7.4 per cent. The correlation between this EIA and RIA was O.91, p < O.O1.

An enzymeimmunoassay for the determination of thyrotropin (TSH) in drieb blood on filter paper: application to a screening program for detection of congenital hypothyroidism

An enzymeimmunoassay (EIA) for H-TSH (human thyrotropin) in dried blood on filter paper using an anti-H-TSH conjugate with ß-D-galactosidase and tubes coated with an anti-H-TSH was performed fo the screening program for detection of congenital hypothyroidism. The blood volume needed in this assay was 8.7 µl. The precision was evaluated by coefficients of variance within and between assays: 11.86 percent and 14.36 percent for H-TSH levels of 18.5 µU/ml and 35 µU/ml. A good correlation was observed between H-TSH concentration measured by EIA and RIA (r=0.91)

Ensaio do cortisol na saliva como um metodo para a avaliacao da fracao livre serica. / Measurement of saliva cortisol as a method for the evaluation of free serum fraction

A dosagem de hormonios esteroides na saliva seria representativa da fracao livre do soro que passaria para o liquido salivar atraves da membrana basal das celulas das glandulas salivares. Desenvolvemos um metodo para a dosagem de cortisol na saliva e o aplicamos numa populacao normal e em alguns pacientes com patologias adrenais.Foi observada boa correlacao, com valores de cortisol livre plasmatico em amostras colhidas concomitantemente (r = 0,95). Os valores encontrados em individuos normais foram: as 8:00h = 350 +/- 34ng/dl (media +/- erro padrao), as 17:00h = 133 +/- 13 ng/dl e apos 1mg de dexametasona: 19 +/- 2ng/dl. Concluimos ser a dosagem de cortisol na saliva de utilidade no diagnostico de patologias adrenocorticais

Estriol plasmatico total em gestantes normais. / Total plama estriol in normal pregnancies

Os autores descrevem detalhadamente metodo de radioimunoensaio para a determinacao do estriol plasmatico total em gestantes.Concluem ser o mesmo, altamente especifico de boa reprodutibilidade, simples e rapido na execucao. Determinaram as medias e as variacoes das concentracoes de estriol nas diferentes idades gestacionais, atraves da analise de 123 amostras de sangue obtidas de 90 gravidas normais. Fazem extensa revisao sobre os aspectos fisiologicos e tecnicos deste tipo de abordagem das condicoes fetais

Estudo do valor diagnostico da glicemia de jejum, da curva glicemica e da hemoglobina glicosilada (HbA1) no "diabetes mellitus". / Diagnostic value of fasting glycemia, blood glucose curve and glycosylated hemoglobin (HbA1) in diabetes mellitus

Os autores compararam a dosagem da hemoglobina glicosilada (HbA1) e o teste oral de tolerancia a glicose em 437 individuos com suspeita de diabetes mellitus. Analisaram a sensibilidade, especificidade e o valor preditivo positivo de cada teste, e sugerem um protocolo para o diagnostico de diabetes mellitus. Neste esquema diagnostico recomendam, inicialmente, a realizacao da dosagem da glicemia de jejum, afastando nos pacientes com valores inferiores a 100mg/dl e estabelecendo o diagnostico quando a glicemia for maior ou igual a 125mg/dl. Em pacientes com valores intermediarios recomendam uma sobrecarga de glicose e dosagem de glicemia 2 horas apos, afastando diabetes nos valores de glicemia inferiores a 140mg/dl e estabelecendo o diagnostico com valores maiores ou iguais a 200mg/dl. A HbA1 esta indicada nos valores intermediarios

Desenvolvimento de um radioimunoensaio homologo carboxi-terminal especifico para a dosagem de paratormonio humano (hPTH) no soro. / Development of an homologus carboxy-terminal specific radioimmunoassay to determine human parathormone in serum

Os autores descrevem o desenvolvimento de um radioimunoensaio homologo carboxi-terminal especifico para a dosagem de paratormonio humano no soro. O anticorpo utilizado foi produzido em galinha imunizada contra a sequencia 53-84 sintetica humana sendo extraido das gemas de ovos. Como peptida marcado foi empregada a sequencia Tyr 43-68 e como padrao a sequencia 53-84.A sensibilidade do metodo e da ordem de 40 pmol/L e os resultados obtidos em 69 individuos normais mostraram um valor maximo de 146 pmol/L, sendo em 33% deles indetectavel. Entre 13 pacientes com hiperparatiroidismo primario 8 apresentaram niveis elevados de paratormonio em relacao aos normais; relacionando-se o nivel de paratormonio mais a calcemia, a discriminacao entre os dois grupos foi total. Em 18 pacientes com diferentes graus de insuficiencia renal os niveis hormonais mostraram-se elevados na maioria com uma correlacao significativa entre os niveis de creatinina serica e os de paratormonio (rs = 0,543)

Testes da funcao tiroidiana em pacientes eutiroidianos com doenca sistemica grave. / Thyroid function tests in euthyroid patients with severe systemic disease

Foram comparados os niveis encontrados de T4 total, T3 total, T3 retencao (T3U), ETR (Mallinckrodt), T3 reverso, TSH e T4 livre (Clinical Assays) em 34 pacientes eutiroidianos com doenca sistemica grave com os niveis obtidos em 20 pacientes hipotiroidianos primarios.Os pacientes graves apresentaram niveis de T4 total, T3 total e T4 livre diminuidos, com T3U e T3 reverso aumentados mas com ETR e TSH normais.Enquanto que os pacientes hipotiroidianos primarios apresentaram, alem do T4 total, T3 total e T4 livre, tambem o T3 (U), T3 reverso e ETR diminuidos, e, como era esperado, o TSH foi elevado. O melhor parametro para diferenciar os dois grupos foi a dosagem de TSH foi elevado. O T3 reverso, ETR e T3 (U) podem tambem auxiliar na diferenciacao diagnostica. A dosagem de T4 livre por RIE utilizando o kit da Clinical Assays de um estagio nao auxilia na diferenciacao destes dois grupos de pacientes

Paralisia periodica tirotoxica. Relato de um caso e comentarios etiopatogenicos. / Periodic thyrotoxic paralysis. Report of a case and etiopathogenic comments

Relata-se um caso de paralisia periodica tirotoxica internado no Hospital Sao Paulo por crises de paralisia que desapareceram com o tratamento de hipertiroidismo.Comenta-se a situacao nosografica da doenca enfocando-se alguns aspectos clinicos e etiopatogenicos (geneticos e alimentares) que poderiam ser relacionados com a raridade de casos em nosso meio

Sindrome do T3 baixo com eutiroidismo em doenca sistemica severa. / Low T3 syndrome with euthyroidism in severe systemic diseases

Os autores analisam os testes de funcao tiroidiana num grupo de 50 pacientes eutiroidianos portadores de doencas sistemicas graves. Verificaram uma alta incidencia de T3 diminuido e T3 reverso elevado (56 e 50% respectivamente) e uma moderada casuitica de T4 baixo (20%). Todavia, todos os pacientes apresentavam-se clinicamente em eutiroidismo, alem de possuirem os valores de TSH dentro da normalidade.Em consequencia, demonstrou-se a dificuldade da analise do estado tiroidiano em pacientes portadores de doencas sistemicas e evidenciou-se que o encontro de T3 e T4 diminuidos, nesse grupo de doentes, nao significa obrigatoriamente hipotiroidismo

Radioimunoensaio de 3,3',5'-triiodotironina (T3 reverso, rT3) no soro.Metodologia e aplicacoes clinicas. / A radioimmunoassay for 3,3',5'-triiodothyronine (reverse T3, rT3) in serum.Methodology and clinical applications

O presente trabalho descreve um metodo de radioimunoensaio, por duplo anticorpo especifico, sensivel e simples, para a dosagem direta no soro da 3, 3', 5' - triiodotironina total (T3 reverso, rT3). O anticorpo escolhido apresentou uma reatividade cruzada com T4 de 0,055%, T3 de 0,0016%, 3,5 T2 de 0,0016%, 3,3' T2 de 0,048% e com 3'T1 de 0,12%. Foram comparados os efeitos do acido-8-anilino 1-naftaleno sulfonico (ANSA), salicilato de sodio e do thimerosal no bloqueio da proteina ligadora da tiroxina (TBG) no RIE. Os niveis de rT3 nos individuos normais foram de 18 +/- 8 ng/dl (X +/- DP), em gestantes eutiroidianas de 26 +/- 5 ng/dl, em hipertiroidianos de 118 +/- 56 ng/dl, em hipotiroidianos de 5 +/- 4 ng/dl e em pacientes eutiroidianos com doenca sistemica grave de 105 +/- 107 ng/dl. Sao discutidas as possiveis utilidades da dosagem de rT3 no diagnostico clinico

Tirotoxicose por T4: entidade nosologica independente ou efeito de alteracao na conversao periferica de T4? / T4 thyrotoxicosis: an independent disease or the effect of a change in the peripheral conversion of T4?

Em 250 pacientes com diagnostico de hipertiroidismo, observamos 6 casos de tirotoxicose por T4, doenca caracterizada por tirotoxicose acompanhada de valores elevados de T4 e niveis normais de T3. Em 5 episodios, o hipertiroidismo estava associado a doenca sistemica grave (insuficiencia respiratoria por doenca pulmonar obstrutiva cronica, arteriosclerose obliterante, politraumatismo com perfuracoes intestinais, carcinomatose generalizada e arritmia cardiaca), enquanto que o paciente restante estava sendo medicado com propranolol, droga bloqueadora da conversao periferica de T4 a T3. Esses dados indicam que a tirotoxicose por T4 nao e uma forma especial de hipertiroidismo, mas reflete apenas uma alteracao do metabolismo periferico do T4 induzido pelas doencas sistemicas associadas ou por drogas