Investigation of Tritrichomonas foetus in cryopreserved bovine semen by culture and polymerase chain reaction / Pesquisa por Tritrichomonas foetus em sêmen bovino criopreservado mediante isolamento e reação em cadeia da polimerase

Bovine Trichomoniasis (BT) is an infectious disease caused by Tritrichomonas foetus that can be transmitted either sexually or by fomites. In males, the disease is asymptomatic and permanent. T. foetus has been detected in semen samples where it is able to remain viable even when frozen. The objective of this study was to investigate the presence of T. foetus in 27 samples of commercial frozen bovine semen by culture and Polymerase Chain Reaction (PCR). Samples were thawed in water at 37°C. Part of the samples was inoculated in a test tube containing Diamond's medium and incubated at 35°C. Growth was evaluated every 24 hours via direct examination under a microscope. The other part was placed in an Eppendorf tube and frozen for later molecular analysis. After 10 days of culture, all samples were negative for T. foetus. The Quick-DNA Miniprep Kit (Zymo Research) without proteinase K was used for DNA extraction. The primers used in PCR were TRF3 and TRF4. PCR results were negative for all samples. In conclusion, bovine semen samples were negative for T. foetus in both diagnostic methods, according to the adopted methodology.(AU)

A tricomonose genital bovina (TGB), uma doença infectocontagiosa causada pelo Tritrichomonas foetus, é transmitida por via venérea e fômites contaminados. Em machos a doença é assintomática e permanente. O agente já foi encontrado em amostras de sêmen e é capaz de permanecer viável quando congelado. Este trabalho teve por objetivo investigar a presença de T. foetus em 27 amostras de sêmen bovino comercial congelado, por meio de cultivo e reação em cadeia da polimerase (PCR). As amostras foram descongeladas em água a 37ºC; parte foi inoculada em tubo de ensaio contendo meio Diamond, incubada a 35ºC com consequente avaliação de crescimento e avaliada a cada 24 horas, via exame direto em microscópio, e a outra parte foi diluída em PBS para análise molecular. Após 10 dias de cultivo, todas as amostras foram negativas. Para a detecção molecular foi utilizado o kit Quick-DNA Miniprep (Zymo Research) sem proteinase K para extração do DNA. Os iniciadores utilizados na PCR foram TRF3 e TRF4. O resultado da PCR foi negativo para todas as amostras. Conclui-se que as amostras utilizadas foram realmente negativas para a presença do patógeno em ambos os métodos diagnósticos, o que comprovou a inocuidade do sêmen testado.(AU)

Pre-analytical parameters associated with unsuccessful karyotyping in myeloid neoplasm: a study of 421 samples

Cytogenetics is essential in myeloid neoplasms (MN) and pre-analytical variables are important for karyotyping. We assessed the relationship between pre-analytical variables (time from collection to sample processing, material type, sample cellularity, and diagnosis) and failures of karyotyping. Bone marrow (BM, n=352) and peripheral blood (PB, n=69) samples were analyzed from acute myeloid leukemia (n=113), myelodysplastic syndromes (n=73), myelodysplastic syndromes/myeloproliferative neoplasms (n=17), myeloproliferative neoplasms (n=137), and other with conclusive diagnosis (n=6), and reactive disorders/no conclusive diagnosis (n=75). The rate of unsuccessful karyotyping was 18.5% and was associated with the use of PB and a low number of nucleated cells (≤7×103/µL) in the sample. High and low cellularity in BM and high and low cellularity in PB samples showed no metaphases in 3.9, 39.7, 41.9, and 84.6% of cases, respectively. Collecting a good BM sample is the key for the success of karyotyping in MN and avoids the use of expensive molecular techniques.

Study of major genetic factors involved in pituitary tumorigenesis and their impact on clinical and biological characteristics of sporadic somatotropinomas and non-functioning pituitary adenomas

Genetic and functional aberrations of guanine nucleotide-binding protein, alpha stimulating (GNAS), aryl hydrocarbon receptor interacting protein (AIP), and pituitary tumor transforming gene (PTTG) are among the most prominent events in pituitary tumorigenesis. A cohort of Brazilian patients with somatotropinomas (n=41) and non-functioning pituitary adenomas (NFPA, n=21) from a single tertiary-referral center were evaluated for GNAS and AIP mutations and gene expression of AIP and PTTG. Results were compared to the clinical and biological (Ki67 and p53 expression) characteristics of tumors and their response to therapy, if applicable. Genetic analysis revealed that 27% of somatotropinomas and 4.8% of NFPA harbored GNAS mutations (P=0.05). However, no differences were observed in clinical characteristics, tumor extension, response to somatostatin analog therapy, hormonal/surgical remission rates, Ki67 index, and p53 expression between mutated and non-mutated somatotropinomas patients. PTTG overexpression (RQ mean=10.6, min=4.39, max=11.9) and AIP underexpression (RQ mean=0.56, min=0.46-max=0.92) were found in virtually all cases without a statistically significant relationship with clinical and biological tumor features. No patients exhibited somatic or germline pathogenic AIP mutations. In conclusion, mutations in GNAS and abnormal PTTG and AIP expression had no impact on tumor features and treatment outcomes in this cohort. Our data support some previous studies and point to the need for further investigations, probably involving epigenetic and transcriptome analysis, to improve our understanding of pituitary tumor behavior.

Efeito da inclusão de diferentes fontes lipídicas em dietas para frangos de corte sobre o desempenho, rendimento e composição da carcaça / Effect of lipid sources in diets for broiler chicken on performance and yield and composition of carcass

Avaliou-se o efeito da inclusão de sebo bovino (SB), óleo de vísceras de aves (OVA), óleo de soja degomado (OSD) e de misturas de SB + OSD e SB + OVA em diferentes proporções, em dietas para frangos de corte. Os tratamentos, definidos de acordo com as fontes lipídicas (FL) e suas misturas adicionadas às rações, também foram definidos de acordo com a proporção de energia metabolizável (EM) originada de cada FL (25, 50 e 75 por cento de EM de cada FL adicionada à ração). O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso. Não foram encontradas diferenças (P>0,05) entre os tratamentos para peso vivo e consumo de ração. As aves que receberam rações contendo OVA e SB (50 e 50 por cento da EM) apresentaram melhor conversão alimentar que as alimentadas com rações contendo OSD e OSD + SB (75 e 25 por cento da EM), porém apresentaram conversão alimentar semelhante (P>0,05) às aves dos outros tratamentos. Os valores encontrados para gordura abdominal, rendimento e composição da carcaça não foram influenciados pelas fontes lipídicas (P>0,05). Foi concluído que a utilização de diferentes fontes lipídicas em dietas para frangos de corte não tem efeito sobre o desempenho, o rendimento e a composição da carcaça.

The effects of adding tallow (T), poultry visceral oil (PVO), degummed soybean oil (DSO), and a mixture of T + PVO and T + DSO in different proportions in diets for broiler chickens were evaluated. The treatments were defined according to the lipid sources (LS) and their mixtures added to the diets and also according to the proportion of metabolizable energy (ME) originated from each LS (25, 50, and 75 percent of ME for each LS added to the feed). The experimental design was completely randomized. There were no differences (P>0.05) between treatments for body weight and food intake. Feed conversion (CA) of birds fed diets containing DSO and DSO + T (75 and 25 percent of ME) were lower than those chickens that were fed the diets with PVO and T (50 and 50 percent of ME); but showed similar results (P>0.05) to chickens of other treatments. The values found for abdominal fat and yield and composition of carcass were not affected by LS (P>0.05). It was concluded that the use of different lipid sources in diets for broiler chickens has no effect on performance and yield and carcass composition.

Avaliação funcional e histológica da tireoide de ovinos suplementados com fluoreto de sódio por um período de 150 dias / Functional and histological evaluations of thyroid of sheep submitted to sodium fluoride administration

Avaliou-se o efeito da administração de fluoreto de sódio sobre a tireoide de 12 ovinos, distribuídos em dois grupos: o grupo controle (n=6) recebeu somente sal iodado (5g de NaCl/animal + 0,2ppm I/kg MS) e o grupo tratado (n=6), sal iodado (5g de NaCl/animal + 0,2ppm I/kg MS) adicionado de fluoreto de sódio (4,7mg F/kg de peso corporal), durante 150 dias. Amostras de sangue foram coletadas para análise sérica de I e F, triiodotironina (T3) e tetraiodotironina (T4) nos dias zero, 60, 90 e 150 de tratamento. Também se coletou urina, correspondente às 24 horas, para análise da excreção urinária de I e F. Após a eutanásia dos animais, a tireoide foi removida para posterior exame. Quanto ao I urinário, não foi observada diferença estatística entre os grupos controle e tratado e dentro de cada grupo, entre os tempos. As concentrações de T3 e T4 não diferiram entre os grupos e dentro de cada grupo nos diferentes tempos. Quanto à avaliação histopatológica da tireoide, não foram observadas alterações na integridade estrutural. Conclui-se que a administração crônica de fluoreto de sódio não interfere na função e na integridade histológica da glândula tireoide de ovinos com dieta não restritiva de iodo.

The effect of sodium fluoride administration on thyroid function and morphology in sheep was evaluated using 12 lambs. Animals were allotted in two groups: control that received 5g NaCl + 0.2ppm I/kg DM and treated which received the same treatment plus sodium fluoride (4.7mg F/kg BW), daily, for 150 days. Blood samples were collected for determination of F, I, T3, and T4. Urine production was collected for measurement of F and I. After euthanasia at 150 days of treatment, thyroid glands were removed for analysis. No differences were found between or within groups for urinary I. Also, no differences were found for T3 and T4 on serum I between groups or among time points. No histological alterations were found in the thyroids. In conclusion, chronic sodium fluoride treatment did not affect thyroid function and morphology in lambs.

An alternative method for Staphylococcus aureus DNA isolation / Metodologia alternativa para extração de DNA genômico de Staphylococcus aureus

This study describes a rapid procedure for the isolation of genomic DNA from Staphylococcus aureus that yielded a good amount of high quality DNA for the amplification of staphylococcal enterotoxins genes (A, B, C, D, and E) and the TSST-1 gene as well as enzymatic restriction (HaeIII) from environmental isolates. With this method, it was possible to detect these genes in a sample containing as little as 10(5) cells with positive PCR reactions obtained from approximately 10pg of DNA in a final reaction volume of 25µl.

Descreve-se um procedimento rápido para extração de DNA genômico de isolados de Staphylococcus aureus capaz de produzir DNA estafilocócico em qualidade e quantidade suficiente para a amplificação de genes que codificam enterotoxinas estafilocócicas (A - E) e para TSST-1 e restrição enzimática (HaeIII) de isolados ambientais. O método proposto foi capaz de detectar esses genes em um produto de extração contendo tanto quanto 10(5) células, e reações positivas de PCR foram obtidas de aproximadamente 10pg de DNA.

Occurrence Angiostrongylus vasorum (Baillet, 1866) (Nematoda, Angiostrongylidae) in Cerdocyon thous Linnaeus, 1766 (Carnivora, Canidae) in Minas Gerais State Brazil

Registrou-se a ocorrência de A. vasorum em C. thous no Estado de Minas Gerais, e estudaram-se aspectos de sua ecologia nessa população de hospedeiros. A partir da necropsia de seis espécimes, observou-se a presença de A. vasorum nos pulmões e átrio direito de C. thous. No total foram coletados 24 espécimes de A. vasorum, com prevalência de 50 por cento, abundância média de 4±4,47, intensidade média de 8±3,00 e razão sexual (machos/fêmeas) de 1:1,19. As infrapopulações de A. vasorum apresentaram padrão de distribuição espacial agregado (ID=5,70 e K=0,355). Este é o primeiro registro de A. vasorum em C. thous no estado, descrito no município de Juiz de Fora

Avaliação do equilibrio estatico em individuos amputados de membros inferiores atraves da biofotogrametria computadorizada / Evaluation of the static balance lower limb amputers by means of computerized biophotogrammetry

Para que sejam realizadas atividades funcionais da vida diaria e primordial a manutencao do equilibrio estatico, possibilitando posturas, movimentos e respostas adequadas. Objetivos O presente trabalho teve como finalidade avaliar e comparar, atraves do teste de Romberg adaptado, as oscilacoes do equilibrio estatico de amputados protetizados de membros inferiores com individuos nao amputados. metodos Foram avaliados 33 individuoes do sexo masculino com idade media de 33,38 anos, divididos em tres diferentes grupos. O grupo A foi composto por 12 individuos amputados que utilizavam protese transfemural. O grupo B foi formado por 9 individuos amputados transtibias. O grupo C continua 12 individuos nao amputados. cada individuo foi filmado nos planos frontal e sagital, avaliado quadro a quadro para a selecao de momentos de maiores oscilacoes. As imagens selecionadas foram quantificadas atraves da Biofotogrametria computadorizada, utilizando-se o programa AL Cimage 2.1. Resultados Os resultados mostram diferencas significativas entre as oscilacoes anteriores para o grupo A (transfemural) e entre as oscilacoes para o lado esquerdo no grupo B. Conclusao A partir destes resultados, conclui-se que amputados de membros inferiores apresentam uma tendencia de oscilacao mais significativa em direcao anterior e para o lado contra-lateral a protese. com o avanco da idade, nota-se uma menor tendencia a oscilacao posterior

Influência do peso inicial sobre o desempenho e o rendimento de carcaça e cortes de frangos de corte / Effect of chick weight on performance and carcass yield of broilers

Estudou-se a influência do peso de pintos da linhagem Ross sobre o desempenho de 1 a 43 dias de idade e sobre os rendimentos de carcaça e de cortes nobres. Pintos das categorias de peso leve, média e pesada foram aleatoriamente distribuídos em seis repetições de 30 machos e 30 fêmeas cada. As rações utilizadas foram as mesmas para todos os tratamentos. Avaliaram-se o peso vivo, o consumo de ração, a conversão alimentar, a viabilidade, os rendimentos de carcaça e de cortes (peito, coxa, asa e dorso) e a porcentagem de vísceras (moela, coração, fígado e intestinos). As aves da categoria pesada apresentaram maior peso (P<0,05) que as da categoria leve durante todo o período de criação. As da categoria pesada consumiram mais ração (P<0,05) que as das categorias leve e média. Não houve diferença entre os tratamentos quanto à conversão alimentar e à viabilidade. Não foram encontradas diferenças entre categorias de peso em relação ao rendimento de carcaça e as porcentagens de coração, moela e fígado (P>0,05). Quanto ao rendimento de carcaça, os machos foram superiores às fêmeas nas categorias média e pesada. O rendimento de coxa mais sobrecoxa na categoria pesada foi maior do que na categoria média (P<0,05). Os tratamentos influenciaram o peso corporal, o consumo de ração, os rendimentos de carcaça e coxa mais sobrecoxa e não influenciaram a conversão alimentar, a viabilidade, o rendimento de peito e a porcentagem de vísceras.

DNA repair in Chromobacterium violaceum

Chromobacterium violaceum is a Gram-negative beta-proteobacterium that inhabits a variety of ecosystems in tropical and subtropical regions, including the water and banks of the Negro River in the Brazilian Amazon. This bacterium has been the subject of extensive study over the last three decades, due to its biotechnological properties, including the characteristic violacein pigment, which has antimicrobial and anti-tumoral activities. C. violaceum promotes the solubilization of gold in a mercury-free process, and has been used in the synthesis of homopolyesters suitable for the production of biodegradable polymers. The complete genome sequence of this organism has been completed by the Brazilian National Genome Project Consortium. The aim of our group was to study the DNA repair genes in this organism, due to their importance in the maintenance of genomic integrity. We identified DNA repair genes involved in different pathways in C. violaceum through a similarity search against known sequences deposited in databases. The phylogenetic analyses were done using programs of the PHILYP package. This analysis revealed various metabolic pathways, including photoreactivation, base excision repair, nucleotide excision repair, mismatch repair, recombinational repair, and the SOS system. The similarity between the C. violaceum sequences and those of Neisserie miningitidis and Ralstonia solanacearum was greater than that between the C. violaceum and Escherichia coli sequences. The peculiarities found in the C. violaceum genome were the absence of LexA, some horizontal transfer events and a large number of repair genes involved with alkyl and oxidative DNA damage

O exercicio de final de semana contribui para o controle das dislipidemias em ratos adultos machos alimentados com dieta rica em gorduras / The weekend exercise contribute to the control in the hiperlipidaemias in adults male rates feeding with lipids diet

Sabe-se que o sedentarismo, associado a uma dieta nao balanceada tem grande importancia para o desenvolvimento de doencas cronico degenerativas. Por outro lado, o exercicio fisico tem sido um meio utilizado para o controle dessas doencas. Entretanto, pouco foi relatado sobre efeitos do exercicio de final de semana nocontrole das dislipidemias. Assim, o objetivo deste estudo foi observar respostas adaptativas ao exercicio de final de semana sobre o metabolismo das lipoproteinas em ratos machos alimentados com dieta hiperlipidica. Foram divididos em grupos 96 ratos machos adultos: dieta normocalorica (N) e hipercalorica (H), sedentario (S), treinado continuo (TC) e treinado de fim de semana (TFS), 5 e 2 sessoes semanais/90minutos/dia, respectivamente, por natacao. Durante todo o periodo experimental foram controlados: o peso e o consumo alimentar em gramas. Foram coletados, pesados e congelados o plasma (P), os tecidos adiposos barncos retropeitoneal (RET) e epididimal (EPI), tecido adiposo marron (TAM), musculo gastrocnemio (GAST), figado (FIG) e coracao (COR), para posteriores analises. Foram considerados significativos os valores de p<-0,05 a partir da analise de variancia `Anova Tree Way`. O treinamento de final de semana promoveu diminuicao significativa nos triglicerideos plasmaticos em animais hipercaloricos (SH 180,7+-13,9 vs TFSH97,2+-8,3). Os dois tipos de treinamento foram importantes no controle das dislipidemias em ratos alimentados com dieta hipercalorica, sendo observado aumento na concentracao de HDL colesterol em relacao aos respectivos animais sedentarios (SH 26,5+-2,0 vs TCH 35,7+-6,2 e TFSH 37,1+-1,2)

Multiple lymphoid nodules in bone marrow biopsy in immunocompetent patient with cytomegalovirus infection: an immunohistochemical analysis

In Brazil, a high prevalence of cytomegalovirus (CMV) infection has been documented. In immunocompetent adults CMV infection is usually asymptomatic and therefore morphologic and immunophenotypic bone marrow changes have rarely been described. The authors report the case of a previously healthy patient who developed fever of undetermined origin. The diagnosis of acute CMV infection was based on serological testing. A computed tomographic scan showed mediastinal lymphadenopathy. A bone marrow biopsy revealed a hypercellular haematopoiesis with eosinophilia and large mixed T- and B-cell lymphoid aggregates. In spite of bcl-2 positivity, their reactive nature was demonstrated. Polymerase chain reaction (PCR) and immunohistochemistry were unable to detect CMV-DNA in paraffin-embedded bone marrow sections. Much like in other systemic disorders, the lymphoid nodules in this case seemed to be caused by immunological mechanisms, possibly due to cytokines released in response to the systemic infectious process.

Uma elevada prevalência de infecção pelo citomegalovírus (CMV) está documentada no Brasil. Em adultos imunocompetentes a infecção pelo CMV é, em geral, assintomática e, portanto, as alterações morfológicas e imunohistoquímicas na medula óssea têm sido raramente descritas. Relatamos o caso de um paciente previamente assintomático que desenvolveu febre de origem obscura. O diagnóstico de infecção aguda pelo CMV foi baseado em estudo sorológico. A tomografia computadorizada do tórax mostrou linfadenopatia mediastinal. A biópsia óssea revelou medula hipercelular com eosinofilia e grandes agregados linfóides mistos de células B e T. Apesar da positividade para bcl-2, a sua natureza reacional foi demostrada. A reação em cadeia da polimerase (PCR) e a imunohistoquímica não detectaram DNA viral nos cortes de medula óssea em parafina. Assim como em outros distúrbios sistêmicos, os nódulos linfóides no nosso caso parecem ser causados por mecanismos imunológicos, possivelmente relacionados a citoquinas liberadas em resposta ao processo infeccioso sistêmico.

Localization of genes modulating the predisposition to schizophrenia: a revision

A genética da esquizofrenia (como também do distúrbio bipolar) teve grande avanço a partir da descoberta, a nível de genética molecular, da técnica de localização de genes com uso de sondas de DNA (Botstein et al., 1980). Os estudos que procuram "genes candidatos" a exercerem algum papel na susceptibilidade à esquizofrenia säo, basicamente, de dois tipos: de ligaçäo ("linkage") e de associaçäo. Quando, à luz da genética molecular, um gene é localizado próximo a um marcador de DNA específico no cromossomo, fala-se em estudo "de ligaçäo". Por outro lado, quando a doença é associada a um alelo específico de um determinado gene, fala-se em estudo "de associaçäo". Esta revisäo cobriu uma década de publicaçöes sobre o assunto, desde os primeiros trabalhos de Bassett et al. e de Sherrington et al., ambos divulgados em 1988 (gene localizado no braço longo do cromossomo 5, loco em "5q11-13") até as recentes propostas de Lin et al. (1997), apontando para o loco "13q14.1-q32" no cromossomo 13 e de Wright et al. (1998) para o loco genético "HLA DRB1" no nível de "6p21.3" no cromossomo 6. Os locos mais replicados foram: no braço longo do cromossomo 22 ("22q12-q13.1") e no braço curto do cromossomo 6 ("6p24-22"). Nesta revisäo crítica de estudos sobre genética molecular envolvidos na localizaçäo de genes que modulam a predisposiçäo à esquizofrenia, observou-se grande variabilidade nos resultados, sugerindo múltiplos locos envolvidos na predisposiçäo à doença.

Uma abordagem psicossomática da rinite alérgica perene / A psychosomatic approach to perennial allergic rhinitis

O presente estudo teve por objetivo investigar os dinamismos psicológicos possivelmente envolvidos na etiologia da renite alérgica perene. Assim sendo, 30 foram estudados através de entrevistas psicológicas e do teste das pirâmides coloridas de pfister. Os dados assim obtidos foram comparados com os da populaçäo de näo-riníticos, representada pela amostra utilizada por Robert Heiss para a padronizaçäo do teste da pirâmide de Pfister. O resultados de ambos os instrumentos de avaliaçäo revelaram que o grupo estudado apresenta dificuldades psíquicas intrínsecas, próprias de falhas no desenvolvimento afetivo-emocional, apontando mais para uma linha neurótica de estruturaçäo da personalidade

Heterose em suínos na fase de aleitamento / Heterosis in pre-weaning traits in swine

Visando avaliar o ganho de produtividade, advindo da heterose, no peso de suínos em fase de aleitamento, analisaram-se os pesos ao nascimento (PO), 21 dias de idade (P21) e desmama (PD) de 746 leitöes, sendo 201 da raça Landrace, 136 Wessex-Saddleback e 409 mestiços, pelo método dos quadrados mínimos, considerando-se, ainda, os efeitos fixos de época e ano de nascimento, ordem do parto, sexo do leitäo e tamanho da leitegada, além da raças paterna e materna e suas interaçöes. Os efeitos näo genéticos tiveram influência significativa em quase todas as características. Os mestiços mostraram, em geral, pesos superiores aos puros, com estimativas de heterose de 2,6 por cento para PO, 9,7 por cento para P21 e 13,9 por cento para PD, indicando a importância da herança näo aditiva à medida que os leitöes ficam menos dependentes de suas mäes. Os efeitos de interaçäo entre as raças paterna e materna foram cada vez maiores com o avançar da idade. Os resultados indicam haver ganho de produtividade com a utilizaçäo deste tipo de cruzamento

Experiencia com anastomoses mecanicas do tubo digestivo. Analise de 104 casos. / Anastomosis with staplers in gastrointestinal surgery. Review of 104 cases

Os autores descrevem a sua experiencia com 104 anastomoses realizados em diversos segmentos do tubo digestivo. Concluem que esse tipo de anastomose e pelo menos tao seguro quanto os metodos convencionais. As vantagens assinaladas sao a facilidade de execucao tecnica, principalmente nas anastomoses esofagojejunais e nas colo-retais, a reducao no tempo operatorio e na diminuicao das indicacoes de colostomias definitivas nos tumores do reto