Experience with molecular and cytogenetic diagnosis of fragile X syndrome in Brazilian families

Realizamos análises citogenéticas e moleculares em 55 famílias com a mutaçäo da síndrome do cromossomo X frágil, loco FMR-1 (318 indivíduos e 15 amostras de vilosidade coriônica). Foram estudados 129 indivíduos do sexo masculino, 75 com retardo mental e 54 normais. Entre os 54 normais, 11 eram portadores da pré-mutaçäo e nenhum apresentou o sítio frágil. Foram detectados 73 portadores da mutaçäo completa e 18 por cento eram mosaicos, ou seja, apresentavam também a pré-mutaçäo. Todos expressaram o sítio frágil em pelo menos um dos sistemas de induçäo utilizados. O tamanho da expansäo de trinucleotídeos CGG (delta) e a freqüência de manifestaçäo do sítio frágil apresentaram correlaçäo positiva. Entre as 153 mulheres normais, 85 eram portadoras da pré-mutaçäo e 15 da mutaçäo completa. A freqüência de expressäo do fra(X) foi zero ou extremamente baixa entre as pré-mutadas e essa freqüência näo diferiu da expressäo das näo portadoras da mutaçäo. Portanto a análise citogenética é ineficaz na determinaçäo de indivíduos pré-mutados, homens ou mulheres. Entre as 51 mulheres com a mutaçäo completa, 70 por cento manifestaram algum grau de comprometimento mental. Encontramos também correlaçäo entre o delta e a freqüência de expressäo do fra(X) nessas mulheres. Contudo, a detecçäo citogenética das mulheres com mutaçäo completa foi menos eficiente do que no caso dos homens, pois 14 por cento de falsos negativos foram observados. A análise de segregaçäo confirmou que o risco de prole afetada aumenta com o delta, e o risco médio de prole afetada para todas as heterozigotas foi de 30 por cento. Näo houve indicaçäo de desvio de segregaçäo nas famílias estudadas, pois o número de indivíduos que herdaram a mutaçäo näo diferiu do número daqueles que herdaram os alelos normais. Näo foi detectada nenhuma mutaçäo nova nas 55 genealogias investigadas.

Estudo imuno-histoquímico da distrofina em musculo de afetados por distrofias musculares progressivas

A deficiência da proteína Distrofina (locvalizada na membrana das fibras musculares) foi descrita recentemente como provável causa da distrofia muscular tipo Duchenne (DMD). No presente trabalho, foi feita uma reaçäo imuno-histoquímica para a detecçäo da distrofina em cortes histológicos de congelaçäo, obtidos a partir de biópsias musculares. Foram estudadas 56 indivíduos: Em quatro biópsias de musculo normal, ocorreu uma marcaçäo nítida e homogênea em todo o sarcolema das fibras musculares. No musculo de 20 pacientes com DMD, näo se observou marcaçäo na membrana da maioria das fibras, embora em muitos casos tenha ocorrido uma marcaçäo parcial de algumas delas (entre 4% e 30%). Em 10 afetados pela distrofia tipo Becker (DMB), 8 apresentaram marcaçäo normal em todo o sarcolema das fibras e 2 mostraram uma reaçäo aparentemente mais fraca. Nos quatro afetados por distrofia tipo Cinturas (DMC), apesar das alteraçöes histopatológicos típicas de afecçäo muscular primária, a membrana de todas as fibras mostrou-se com forte padräo imuno-reativo. Foram estudadas também 11 heterozigotas certas quanto ao gene da DMD (8 com atividade de enzimas séricas elevadas e 3 com enzimas normais), 4 filhas de heterozigotas certas com enzimas muito elevadas e 3 heterozigotas para o gene da DMB (todas com enzimas normais). Em todas elas observou-se marcaçäo total e homogênea em todas as fibras musculares. estes resultados säo muito importantes para a padronizaçäo de uma metodologia que possibilite um diagnóstico diferencial entre alguns tipos de distrofia, bem como tentar aprimorar a taxa de detecçäo de portadores, para fins de Aconselhamento Genético

Serum creatine-kinase and pyruvate-kinase levels in females of different racial background at risk for Duchenne muscular dystrophy

As atividades séricas das enzimas creatino-cinase (CK) e piruvato-cinase (PK) foram determinadas em 146 mulheres beterozigotas certas quanto ao gene da distrofia muscular de Duchenne (DMD) e 187 mäes de casos isolados, pertencentes a dois grupos raciais: caucasóide e negroide. A atividade da CK foi medida em 206 mulheres caucasoides e 127 mulheres negroides e a da PK em 148 caucasoides e 92 negroides. Os resultados desta pesquisa mostraram um aumento da média de atividade enzimática no grupo de mulheres heterozigotes e mäes de casos isolados negroides em comparaçäo ao grupo de mulheres caucasoides. Entretanto, as diferenças foram estatísticamente significantes apenas para a CK sérica. Sugere-se portanto, que os resultados da atividade sérica da CK de mulheres em risco de serem portadoras do gene da DMD sejam comparados com os de mulheres normais de mesmo grupo racial