Phytochemical characterization, antioxidant potential and antimicrobial activity of Averrhoa carambola L. (Oxalidaceae) against multiresistant pathogens / Caracterização fitoquímica, potencial antioxidante e atividade antimicrobiana de Averrhoa carambola L. (Oxalidaceae) frente a patógenos multirresistentes

Abstract The objective of this work was to perform the phytochemical characterization, to determine total phenols, antioxidant (AAO%) and antimicrobial potential of the ethanolic extracts of carambola. The phytochemical study was carried out through a qualitative analysis of the chemical constituents and quantitative determination of the phenol content By the Folin-Ciocalteu test. Qualitative and quantitative antioxidant tests were performed using the DPPH method (2,2 diphenyl-1-picryl-hydrazila) and iron reduction (FRAP). The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by microdilution in 96-well plates. The presence of pyrogallic tannins, steroids and saponins has been identified. The highest total phenol content, quantified in the samples, was found in the stem bark (0.0866 mgEAG/g) and in the fruit (0.0734 mgEAG/g). In the antioxidant evaluation, the extracts of the green fruit bagasse (AAO% 71.9%,) and stem bark at 50 μg/mL (AAO% 94%) with CE50 23.7 μg/mL. Leaf extracts, stem bark, ripe fruit bagasse and green fruit bagasse presented MICs of 100 μg/mL against multiresistant pathogenic bacteria and fungi.

Resumo O objetivo desse trabalho foi realizar a caracterização fitoquímica, determinar fenóis totais, potencial antioxidante (AAO%) e antimicrobiano dos extratos etanólicos de carambola O estudo fitoquímico foi realizado por meio de análise qualitativa dos constituintes químicos e determinação quantitativa do teor de fenóis totais pelo teste de Folin-Ciocalteu. Os testes antioxidantes qualitativos e quantitativos foram realizados pelo método do DPPH (2,2 difenil-1- picril-hidrazila) e redução do ferro (FRAP). A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada por microdiluição em placas de 96 poços. Foi identificada a presença de taninos pirogálicos, esteroides e saponinas. O maior teor de fenóis totais, quantificado nas amostras, foi encontrado na casca do caule (0,0866 mg EAG/g) e no fruto (0,0734 mg EAG/g). Na avaliação antioxidante destacaram-se a 500 µg/mL os extratos do bagaço do fruto verde (AAO% 71,9%,), e casca do caule a 50 µg/mL (AAO% 94%) com CE50 23,7 µg/mL. Os extratos das folhas, casca do caule, bagaço do fruto maduro e bagaço do fruto verde apresentaram CIM de 100 µg/mL contra bactérias e fungos patogênicos multirresistentes.

Composição de ácidos graxos do queijo e leite de vacas alimentadas com casca de banana / Fatty acid composition of cheese and milk of cows fed with banana peel

Objetivou-se avaliar os níveis de casca de banana seca ao sol na dieta de vacas F1 Holandês x Zebu sobre o perfil de ácidos graxos do leite e do queijo minas frescal. Os tratamentos foram constituídos de 0, 15, 30, 45 e 60% de substituição da silagem de sorgo pela casca de banana. O delineamento experimental foi em dois quadrados latinos 5 x 5 simultâneos. As amostras de leite e queijo foram analisadas quanto ao perfil de ácidos graxos por cromatografia gasosa. Observou-se efeito quadrático para o somatório de ácidos graxos poli-insaturados do leite, com valor máximo no nível de 23,54% de substituição. Houve efeito linear decrescente para os ácidos graxos C15:0 iso e C16:0 iso. Os ácidos graxos heneicosanoico, linoleico, linoleico conjugado e araquidônico apresentaram efeito quadrático. Não houve efeito das dietas sobre os ácidos graxos no queijo. A substituição de até 60% da silagem de sorgo por casca de banana na dieta de vacas em lactação pode ser alternativa para produção e processamento do leite, quando se considera a melhora no valor nutricional da fração lipídica do leite e o aumento dos teores de ácido linoleico conjugado.(AU)

This study aimed to evaluate the inclusion levels of dry banana peel in the sun in the diet of F1 Holstein x Zebu cows on the profile of fatty acids of milk and Minas fresh cheese. The diets were composed of 0, 15, 30, 45, and 60% replacement of sorghum silage by banana peel. The experimental design was Latin squares, simultaneous, 5 x 5. Samples of milk and cheese were analyzed for fatty acid composition by gas chromatography. Quadratic effect for the sum of milk polyunsaturated fatty acids, with the maximum level of 23,54% replacement. There was a decreasing linear effect for C15:0 iso fatty acids and C16: 0 iso. The heneicosanoic fatty acids, linoleic, conjugated linoleic and arachidonic presented quadratic effect. There was no effect of diets on fatty acids in cheese. Replacement of up to 60% of the sorghum silage of a banana peel in the diet of cows can be an alternative to milk production and processing when considering the improvement in the nutritional value of the milk lipid fraction and increase of the levels of conjugated linoleic acid.(AU)

Phytochemical characterization, antioxidant potential and antimicrobial activity of Averrhoa carambola L. (Oxalidaceae) against multiresistant pathogens

Abstract The objective of this work was to perform the phytochemical characterization, to determine total phenols, antioxidant (AAO%) and antimicrobial potential of the ethanolic extracts of carambola. The phytochemical study was carried out through a qualitative analysis of the chemical constituents and quantitative determination of the phenol content By the Folin-Ciocalteu test. Qualitative and quantitative antioxidant tests were performed using the DPPH method (2,2 diphenyl-1-picryl-hydrazila) and iron reduction (FRAP). The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by microdilution in 96-well plates. The presence of pyrogallic tannins, steroids and saponins has been identified. The highest total phenol content, quantified in the samples, was found in the stem bark (0.0866 mgEAG/g) and in the fruit (0.0734 mgEAG/g). In the antioxidant evaluation, the extracts of the green fruit bagasse (AAO% 71.9%,) and stem bark at 50 g/mL (AAO% 94%) with CE50 23.7 g/mL. Leaf extracts, stem bark, ripe fruit bagasse and green fruit bagasse presented MICs of 100 g/mL against multiresistant pathogenic bacteria and fungi.

Resumo O objetivo desse trabalho foi realizar a caracterização fitoquímica, determinar fenóis totais, potencial antioxidante (AAO%) e antimicrobiano dos extratos etanólicos de carambola O estudo fitoquímico foi realizado por meio de análise qualitativa dos constituintes químicos e determinação quantitativa do teor de fenóis totais pelo teste de Folin-Ciocalteu. Os testes antioxidantes qualitativos e quantitativos foram realizados pelo método do DPPH (2,2 difenil-1- picril-hidrazila) e redução do ferro (FRAP). A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada por microdiluição em placas de 96 poços. Foi identificada a presença de taninos pirogálicos, esteroides e saponinas. O maior teor de fenóis totais, quantificado nas amostras, foi encontrado na casca do caule (0,0866 mg EAG/g) e no fruto (0,0734 mg EAG/g). Na avaliação antioxidante destacaram-se a 500 µg/mL os extratos do bagaço do fruto verde (AAO% 71,9%,), e casca do caule a 50 µg/mL (AAO% 94%) com CE50 23,7 µg/mL. Os extratos das folhas, casca do caule, bagaço do fruto maduro e bagaço do fruto verde apresentaram CIM de 100 µg/mL contra bactérias e fungos patogênicos multirresistentes.

Sensorimotor speech disorders in Parkinson's disease: Programming and execution deficits / Distúrbios sensórios-motores da fala na doença de Parkinson

ABSTRACT Introduction: Dysfunction in the basal ganglia circuits is a determining factor in the physiopathology of the classic signs of Parkinson's disease (PD) and hypokinetic dysarthria is commonly related to PD. Regarding speech disorders associated with PD, the latest four-level framework of speech complicates the traditional view of dysarthria as a motor execution disorder. Based on findings that dysfunctions in basal ganglia can cause speech disorders, and on the premise that the speech deficits seen in PD are not related to an execution motor disorder alone but also to a disorder at the motor programming level, the main objective of this study was to investigate the presence of sensorimotor disorders of programming (besides the execution disorders previously described) in PD patients. Methods: A cross-sectional study was conducted in a sample of 60 adults matched for gender, age and education: 30 adult patients diagnosed with idiopathic PD (PDG) and 30 healthy adults (CG). All types of articulation errors were reanalyzed to investigate the nature of these errors. Interjections, hesitations and repetitions of words or sentences (during discourse) were considered typical disfluencies; blocking, episodes of palilalia (words or syllables) were analyzed as atypical disfluencies. We analysed features including successive self-initiated trial, phoneme distortions, self-correction, repetition of sounds and syllables, prolonged movement transitions, additions or omissions of sounds and syllables, in order to identify programming and/or execution failures. Orofacial agility was also investigated. Results: The PDG had worse performance on all sensorimotor speech tasks. All PD patients had hypokinetic dysarthria. Conclusion: The clinical characteristics found suggest both execution and programming sensorimotor speech disorders in PD patients.

RESUMO Introdução: Na doença de Parkinson (DP) a disfunção dos circuitos dos núcleos da base é um fator determinante na fisiopatologia dos sinais clássicos da DP e a disartria hipocinética é uma das manifestações da doença. No que se refere aos distúrbios da fala associados à DP, os modelos recentes de processamento de fala complicam a visão antiga da disartria como um déficit apenas de execução motora. Baseado nos achados de que as disfunções nos gânglios basais podem causar alterações de fala e que os distúrbios não estão apenas relacionados aos déficits de execução motora, mas também de programação motora, o objetivo deste estudo foi investigar a presença de distúrbios sensórios-motores da programação motora além dos de execução motora já descritos na fala de pacientes com DP. Métodos: O estudo é transversal e se baseou numa amostra composta por 60 adultos pareados por sexo, idade e escolaridade: 30 adultos diagnosticados com DP idiopática e 30 adultos sadios (grupo controle). Dados obtidos em um estudo prévio que analisou alterações de fluência em indivíduos com DP foram reanalisados acrescentando-se todos os tipos de manifestações/erros na fala, a fim de verificar falhas de programação e/ou execução motora. Os pacientes também realizaram avaliação da apraxia orofacial. Resultados: Todos os pacientes tinham disartria hipocinética. O grupo com DP obteve pior desempenho em todas as tarefas de fala. Conclusão: As características clínicas das manifestações/erros de fala encontrados em pacientes com DP são sugestivas de déficits de execução e de programação motora.

Influência da poluição aérea gerada pelo tráfego veicular na produção do óleo essencial e das atividades antifúngica e citotóxica in vitro de Cyrtocymura scorpioides (Lam. ) H. Rob. (Asteraceae) / Air pollution influence generated by vehicular traffic in essential oil production and antifungal and cytotoxic activities in vitro Cyrtocymura scorpioides (Lam. ) H. Rob. (Asteraceae)

RESUMO Cyrtocymura scorpioides (sin. Vernonia scorpioides (Lam.) Pers.), Piracá é utilizada popularmente para tratamento de úlceras, traumatismos, candidíase, processos inflamatórios e dores musculares. Objetivou-se verificar nas plantas cultivadas na Vila Nair, Jardim São Dimas e Urbanova em São José dos Campos - SP, a influência da poluição veicular nos rendimentos da matéria seca (folhas), no óleo essencial, e no extrato bruto, bem como a ação citotóxica em células HEP-2 e L929, e identificar os componentes do óleo essencial e ação fungicida em Candida albicans. As estacas (54) foram cultivadas durante 6 meses em solo + adubo (2:1) na Universidade do Vale do Paraíba - UNIVAP, e distribuídas nas estações Dutra (E1 - tráfego intenso), Teotônio (E2 - tráfego médio) e Urbanova (E3 - tráfego baixo), onde 18 mudas foram cultivadas durante 6 meses, sendo 3 repetições de 6 plantas. O óleo essencial foi extraído por hidrodestilação e seus componentes identificados por cromatografia gasosa acoplado a espectrômetro de massas (CG-MS), através de indice de similaridade com a base de espectros Wiley L. O extrato bruto foi concentrado por rotavapor. A ação fúngica foi avaliada pelo teste de difusão em disco e a citotoxicidade pelo teste MTT. Em Urbanova (E3) verificouse maior rendimento da matéria seca, do extrato bruto e do óleo essencial. Identificou-se no óleo essencial: ß-cariofileno, α-cariofileno, germacreno D, delta-cadineno e cariofileno. O Óleo Essencial possui possui baixa ação fungicida em C. albicans, enquanto o extrato hidroalcóolico se mostrou citotóxico para L929 e HEp-2.

ABSTRACT Cyrtocymura scorpioides (syn. Vernonia scorpioides (Lam.) Pers.), known as Piracá, is popularly used for the treatment of ulcers, trauma, candidiasis, inflammatory disorders, and muscle pain. This study aimed to assess the influence of vehicular pollution on the yield of dry matter (leaves), essential oil, and crude extract, and the cytotoxic action in HEP-2 and L929 cells. This study also aimed to identify the components of the essential oil, and verify its fungicidal action against Candida albicans in plants grown in Vila Nair, Jardim São Dimas, and Urbanova, São José dos Campos - SP, Brazil. The seedlings (54) were grown in soil + fertilizer (2:1) at the Universidade do Vale do Paraiba - UNIVAP, and distributed to different stations, Dutra (E1 - heavy traffic), Teotônio (E2 - medium traffic), and Urbanova (E3 - low traffic), where 18 seedlings were cultivated for 6 months, with 3 replicates of 6 plants. The essential oil was extracted by hydrodistillation and its components were identified by by Gas chromatography - mass spectrometry (GC-MS), with a similarity index computed using the Wiley L spectra. The crude extract was concentrated in a Buchi Rotary Evaporator R-114, the fungicidal action and cytoptoxicity were evaluated using the disk diffusion method and the MTT test, respectively. In Urbanova (E3), high yields of dry matter, crude extract, and essential oil were obtained. The following components were identified in the oil: ß-caryophyllene, α -caryophyllene, germacrene D, delta-cardinene, and caryophyllene oxide. The oil was found to have low fungicidal action against C. albicans, while the hydroalcoholic extract was cytotoxic to L929 and HEP-2.

Ureia e glicerina bruta como aditivos na ensilagem de cana-de-açúcar / Urea and crude glycerin as additive in sugar cane silage

Objetivou-se avaliar a inclusão de ureia e glicerina bruta como aditivos na ensilagem da cana-de-açúcar, na composição químico-bromatológica, pH, N-amoniacal (N-NH3) e digestibilidade in vitro (DIV). Os tratamentos foram quatro doses de ureia, 0, 10, 20 e 30 g de ureia por kg de cana-de-açúcar na ensilagem, e cinco doses de glicerina bruta, 0, 10, 20, 30 e 40g de glicerina bruta por kg de cana-de-açúcar na ensilagem. As silagens foram armazenadas por 180 dias. O tratamento com ureia afetou a maioria das variáveis relacionadas ao valor nutritivo, aumentando os teores de matéria seca (MS) e proteína (PB) (2,58; 7,76; 18,70 e 19,31%), reduzindo os teores de fibra em detergente neutro (FDN) e melhorando a DIV da MS (42,61; 48,53; 50,69 e 51,18%) e FDN (38,81; 39,23; 41,06 e 43,46%), e as características fermentativas da silagem, apresentando valores de pH de 3,49; 3,86; 4,18 e 3,93 e de N-NH3 de 1,72; 3,80; 7,88 e 9,00, para as dose de 0, 10, 20 e 30 g, respectivamente. A glicerina bruta aumentou os teores de MS e extrato etéreo (1,45; 3,03; 3,62; 3,41 e 4,38%), melhorou a DIV da MS com valores de 49,61; 52,24; 53,28; 55,60 e 56,09% e reduziu perdas por gases durante o processo de fermentação, apresentando médias de 6,69; 5,97; 5,89; 5,51 e 5,48% da MS para as doses 0, 10, 20, 30 e 40g, respectivamente. Assim, a ureia e a glicerina bruta podem ser utilizadas como aditivos na ensilagem da cana-de-açúcar...

The aim of this study was to evaluate the inclusion of urea and crude glycerin as an additive in ensiling of sugar cane, in chemical composition, pH, ammonia-N (N-NH3) and in vitro digestibility (IVD). The treatments were four doses of urea 0, 10, 20 and 30 g per kg of sugar cane ensiling and five doses of crude glycerin 0, 10, 20, 30 and 40g per kg of crude glycerin sugar cane ensiling. The silages were stored for 180 days. Treatment with urea affected most variables related to nutritional value, increasing the concentrations of dry matter (DM) and protein (CP) (2.58, 7.76, 18.70 and 19.31%) and reduced levels of neutral detergent fiber (NDF) and improved IVDDM (42.61, 48.53, 50.69 and 51.18%) and NDF (38.81, 39.23, 41.06 and 43.46%) and fermentation characteristics of silage, with pH values of 3.49, 3.86, 4.18 and 3.93 and NH3 1.72, 3.80, 7.88 and 9.00 for the dose of 0, 10, 20 and 30 g, respectively. The crude glycerin increased in DM and ether extract (1.45, 3.03, 3.62, 3.41 and 4.38%), improved IVDDM with values of 49.61, 52.24, 53 28; 55.60 and 56.09% and reduced gas losses during the fermentation process with mean of 6.69, 5.97, 5.89, 5.51 and 5.48% of DM for the doses 0, 10 , 20, 30 and 40g, respectively. Urea and crude glycerin can be used as an additive in ensiling of sugar cane...

Assessment of the quality of compounded fluconazole capsules marketed in the region of Araraquara (SP, Brazil) / Avaliação da qualidade de cápsulas de fluconazol manipuladas comercializadas na região de Araraquara (SP, Brasil)

O controle de qualidade de fármacos desempenha um papel importante na saúde pública ao garantir segurança e eficácia de medicamentos. No sistema de saúde pública,as farmácias magistrais também são importantes. Elas fornecem medicamentos personalizados como produtos dermatológicos e doses específicas para crianças.Infelizmente, muitos casos de produtos magistrais fabricados fora do padrão mínimo de qualidade têm sido relatados no Brasil. Neste trabalho, a qualidade das cápsulas magistrais de fluconazol 150 mg foi avaliada e os resultados foram comparados com os valores recomendados pela Farmacopeia Brasileira. Os resultados sugerem que é possível manipular produtos que satisfaçam as especificações farmacopeicas, mas estes ainda mostram que há farmácias magistrais onde o controle de qualidade é deficiente ou inexistente. O fluconazol é um fármaco importante no tratamento de infecções fúngicas. Seu uso como forma farmacêutica manipulada sem elevados padrões de qualidade é fortemente relacionado com a falha terapêutica e intoxicações, assim como o surgimento de microorganismos resistentes. Portanto, a necessidade de melhoria dos processos nas farmácias magistrais se torna mais enfático. Existem métodos validados que podem ser utilizados com sucesso para a análise de rotina de controle de qualidade e que podem ser implementados por qualquer farmácia de manipulação...

The quality control of drugs has an important role in public health, in ensuring the efficacy and safety of medicines. In the public health system, compounding pharmacies play a vital part. They provide medicines tailored to the individual patient, for example dermatological products and specific doses for children. Unfortunately, many cases of compounded products falling below the minimum quality standard have been reported in Brazil. In this study, the quality of compounded 150 mg fluconazole capsules was assessed and the results were compared with values stipulated in the Brazilian pharmacopoeia. The results suggest that, while it is certainly possible to prepare products meeting pharmacopoeial specifications, there are pharmacies where the quality control is deficient or nonexistent. Fluconazole is an important drug in combatting fungal infections. The use of fluconazole in dosage forms manufactured without high standards of quality control is strongly linked to treatment failure and cases of intoxication, as well as the emergence of resistant microorganisms. This highlights the urgent need for process improvement in compounding pharmacies. There are validated methods that can be successfully employed for routine quality control analysis that can be implemented by any compounding pharmacy...

Fluency in Parkinson?s disease: disease duration, cognitive status and age / Fluência na doença de Parkinson: tempo da doença, status cognitivo e idade

The objective of this study was to determine the frequency of occurrence and to characterize the typology of dysfluencies in individuals with Parkinson’s disease (PD), including the variables age, gender, schooling, disease duration, score on the Hoehn and Yahr scale and cognitive status (score on Mini-Mental State Examination). A cross-sectional study of a sample comprising 60 adults matched for gender, age and schooling was conducted. Group I comprised 30 adults with idiopathic PD, and Group II comprised 30 healthy adults. For assessment of fluency of speech, subjects were asked to utter a narrative based on a sequence of drawings and a transcription of 200 fluent syllables was performed to identify speech dysfluencies. PD patients exhibited a higher overall number of dysfluencies in speech with a large number of atypical dysfluencies. Additionally, results showed an influence of the variables cognitive status, disease duration and age on occurrence of dysfluencies.

O objetivo deste estudo foi avaliar a frequência de ocorrência e caracterizar a tipologia das disfluências em indivíduos com doença de Parkison (DP), controlando-se as variáveis, idade, sexo, escolaridade, tempo de doença, escore na escala de Hoehn e Yahr e status cognitivo (escore no Exame do Minimental). Realizamos um estudo transversal com amostra composta por 60 adultos pareados por sexo, idade e escolaridade. O grupo I foi formado por 30 adultos com DP idiopática, e o grupo II por 30 adultos sadios. Para a avaliação da fluência da fala foi solicitada a emissão de uma narrativa a partir de uma sequência de figuras e realizada a trascrição de 200 sílabas para verificação das disfluências de fala. Os pacientes com DP apresentaram um número maior de disfluências na fala com um grande número de disfluências atípicas e, adicionalmente, observamos que houve interferência das variáveis status cognitivo, tempo de doença e idade na ocorrência das disfluências.

Application of Scharer's quantitative method for the determination of residual alkaline phosphatase activity in standard Minas / Aplicação do método modificado de Scharer para a determinação quantitativa da atividade de fosfatase alcalina residual em queijo minas padrão

Milk pasteurization is a critical issue in the dairy industry, and failures in this process can affect final product safety. Scharer's enzymatic method is still traditionally used to verify pasteurization efficiency compliance, and it is based on screening for residual alkaline phosphatase in milk. Although several methods are used to quantify enzymatic activity to assess milk pasteurization efficiency, there is a small amount of published data regarding the use of these methods to quantify alkaline phosphatase in cheese. In this study, the Scharer's modified method was used to determine the levels of residual alkaline phosphatase in standard minas cheese, before and after 20 days of ripening. The cheeses were made using raw or pasteurized milk with the addition of different concentrations of raw milk (0; 0.05%; 0.10%; 0.20%; and 0.50%). In the fresh cheese samples, the method showed a sensitivity of only 0.50% with the addition of raw milk to the pasteurized milk used to make cheese. In addition, levels of up 0.20% of raw milk in pasteurized milk, the concentrations of phenol was inferior to 1μg phenol/g of dairy product which is the preconized indicator value for adequate pasteurization.

A pasteurização do leite é um ponto crítico na indústria de laticínios, e falhas nessa etapa comprometem a segurança do produto. O método enzimático de Scharer é tradicionalmente utilizado na verificação da eficiência da pasteurização e baseia-se na pesquisa da atividade de fosfatase alcalina residual em leite. Embora vários métodos estejam disponíveis para avaliar a eficiência da pasteurização, há um número reduzido de dados publicados baseados na quantificação da atividade da fosfatase alcalina em queijo. Neste estudo, o método modificado de Scharer foi utilizado para determinar os níveis de fosfatase alcalina residual em queijo minas padrão, antes e após 20 dias de maturação. Os queijos foram feitos com leite cru ou com leite pasteurizado com adição de diferentes concentrações de leite cru (0, 0,05%, 0,10%, 0,20% e 0,50%). Nas amostras de queijo fresco, o método apresentou sensibilidade apenas com 0,50% de adição de leite cru ao leite pasteurizado utilizado na fabricação de queijo. Em níveis de adição de até 0,20% de leite cru no leite pasteurizado, as concentrações de fenol se mostraram inferiores a 1μg de fenol/g de produto lácteo, que é o valor preconizado como indicador de pasteurização adequada.

Assessment of Leishmania major and Leishmania braziliensis promastigote viability after photodynamic treatment with aluminum phthalocyanine tetrasulfonate (AlPcS4)

Cutaneous leishmaniasis is an infectious disease caused by protozoans of the genus Leishmania, which is transmitted through the bite of hematophagous insects of the genus Lutzomyia. This study aimed at testing in vitro the phototoxic effect of aluminum phthalocyanine tetrasulfonate (AlPcS4) on the viability of Leishmania major and Leishmania braziliensis. Stationary phase promastigote forms were treated with AlPcS4 at 1.0 µM and 10.0 µM and incubated for one hour. Then 659 nm laser was applied at 5 and 10 J/cm². Parasite viability was determined by differential count using the trypan blue dye exclusion method and by monitoring growth curves for nine days. Trypan blue exclusion assay showed a significant reduction of viable parasites compared to controls, L. major seemed more sensitive to the toxic effects of AlPcS4 in the dark. The most effective photodynamic therapy (PDT) was obtained with AlPcS4 at 10.0 µM and 10 J/cm² whereas L. braziliensis showed the highest mortality rate after treatment.

Determinação in vitro do potencial antimicrobiano de preparações caseiras de plantas medicinais utilizadas para o tratamento de doenças infecciosas / In vitro determination of the antimicrobial potential of homemade preparations based on medicinal plants used to treat infectious diseases

The majority of the population in developing countries uses plants or plant preparations in their basic health care. Many plant species used nowadays in folk medicine have been proved to have antimicrobial properties. However, several factors, such as incorrect preparation of the plants, can interfere with the effectiveness of the treatment. The purpose of this study was to assess the use of homemade preparations of medicinal plants in the treatment of infectious diseases, by in vitro determination of their antimicrobial potential. Based on recipes elicited by questionnaires that were previously applied to a participant population, the samples were prepared in a similar manner and analyzed by the agar diffusion method. Members of 41 families, whose children attend a center of education that serves several needy communities in the city of Fortaleza (Ceará, Brazil), were interviewed; of these, 97.6% said they had used herbal therapy as a means to treat infectious diseases. In replies to a total of 39 questionnaires, 97 different homemade preparations of medicinal plants were cited. Out of 45 samples subjected to an in vitro assessment of antimicrobial activity, 25 (55.6%) had some inhibitory effect on the growth of at least one of the microorganisms used. Most of the plants with known antimicrobial properties and cited by respondents showed variations in their in vitro activity, according to the manner in which they were prepared.

Grande parte da população de países em desenvolvimento utiliza plantas ou preparações vegetais nos cuidados básicos à saúde. Muitas das espécies vegetais utilizadas na medicina popular apresentam propriedades antimicrobianas comprovadas; no entanto, diversos fatores, como a metodologia incorreta de preparo, podem interferir na eficácia do tratamento. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a utilização de preparações caseiras de plantas medicinais para o tratamento de doenças infecciosas através da determinação in vitro do potencial antimicrobiano. A partir de informações contidas em questionários que foram previamente aplicados à população participante, as amostras foram preparadas de forma semelhante e analisadas através do método de difusão em ágar. Foram entrevistadas 41 famílias, das quais 97,6% afirmaram utilizar as plantas medicinais como opção terapêutica no tratamento de doenças. Em um total de 39 questionários, foram citadas 97 diferentes preparações caseiras de plantas. Das 45 amostras (indicadas para tratar algum sinal ou sintoma que podem estar relacionado a um quadro infeccioso) submetidas à avaliação da atividade antimicrobiana in vitro, 55,6% (25 amostras) apresentaram atividade inibitória sobre o crescimento de pelo menos um dos microrganismos utilizados. A maioria das plantas com propriedade antimicrobiana conhecida e que foram citadas pelos entrevistados apresentaram variações na sua atividade in vitro de acordo com o modo como foram preparadas.

Imunidade passiva, ingestão de colostro e mortalidade em cabritos Moxotó criados em sistemas extensivo e intensivo / Passive immunity, colostrum ingestion, and mortality of Moxotó kids raised under extensive and intensive breeding systems

Dosou-se a proteína sérica total para avaliar a aquisição de imunidade passiva em cabritos Moxotó. Para tal, formaram-se quatro grupos experimentais, sendo dois sistemas de criação, extensivo e intensivo, e dois manejos de colostro, ingestão natural e artificial. Tanto no sistema intensivo quanto no extensivo, os teores de proteína no soro foram significativamente mais altos nos animais com ingestão natural de colostro, 7,11±0,2g/dL, do que nos com ingestão artificial, 6,35±0,17g/dL. Independentemente da forma de ingestão de colostro, os cabritos do sistema intensivo tiveram teores de proteína sérica total, 7,21±0,19g/dL, mais elevados que os do sistema extensivo, 6,25±0,18g/dL, no entanto a imunidade passiva foi satisfatória nos dois grupos de animais. Ocorreu alta mortalidade de crias no sistema extensivo, 37 por cento, devido ao complexo hipotermia/inanição em decorrência dos baixos níveis de colostro ingeridos. No sistema intensivo de criação não ocorreu mortalidade de cabritos. A produção de colostro das cabras criadas intensivamente, 163,5±14,71mL, foi mais alta que das cabras criadas extensivamente, 53,75±19,12mL. O peso total dos cabritos foi semelhante nos dois sistemas de criação, 2881±252,78g no sistema extensivo, e 2297±194,59g no sistema intensivo. Conclui-se que a ingestão de colostro nos dois sistemas de produção permitiu adequada aquisição de imunidade em cabritos, porém o sistema extensivo determinou severa deficiência nutricional nas mães, com baixa produção de colostro e graves perdas de neonatos.

The acquisition of passive immunity in Moxotó kids was determined by dosages of total serum proteins. Four experimental groups were formed in two breeding systems - extensive and intensive - and two managements of colostrum intake - suckling from the mother or supplying in bottles. In both breeding systems, the serum protein levels were significantly higher in kids with natural ingestion of colostrum, 7.11±0.2g/dL, than in kids with artificial ingestion, 6.35±0.17g/dL. The kids of the intensive system had levels of total serum protein of 7.21±0.19 g/dL which was higher than the one of the extensive breeding system, 6.25±0.18g/dL. However, the passive immunity was satisfactory in all groups. There was high mortality of kids, 37 percent, due to starvation/hypothermia, in the extensive breeding system. This mortality was apparently due to the low levels of colostrum ingestion, 55.83±8.7mL. The production of colostrum by does from intensive breeding sistem, 163.5±14.71mL, was significantly higher than those from extensive breeding system, 53.75±19.12mL. The total weight of the kids born in the extensive breeding system, 2,881±252.78g, was similar to those born in the intensive breeding system, 2,297±194.59g. The colostrum ingestion allowed appropriate immunity acquisition by kid raised under both systems. However, the extensive breeding system determined a severe nutritional deficiency in the does with low colostrum production and high neonatal losses.

Cryptomoscatona D2 de Cryptocarya mandioccana: atividade citotóxica contra linhagem celular de carcinoma cervical humano / Cryptomoschatone D2 from Cryptocarya mandioccana: cytotoxicity against human cervical carcinoma cell lines

Among the substances isolated from Cryptocarya sp, some styrylpyrones, such as goniothalamin, demonstrate antiproliferative activity in a broad range of human cell lines. In the present study, we assessed the cytotoxicity of a styrylpyrone (cryptomoschatone D2), isolated from Cryptocarya mandiocanna, in HPV-infected (HeLa and SiHa) and uninfected (C33A) human cervical carcinoma cell lines and a human lung fibroblast line (MRC-5). The cytotoxicity was tested by the MTT assay. In this assay, cells were treated with cryptomoschatone D2 at 15, 30, 60 or 90 ?M for 6, 24 or 48 hours, as well as for 6 hours followed by a post-treatment recovery period of 24, 48 or 72 hours. High cytotoxicity (dose- and timedependent) was observed in HeLa, SiHa, C33A and MRC-5 cell lines. Although in general the styrylpyrone cytotoxicity was not significantly different among the cell lines tested, it was apparently stronger in HeLa and C33A than in MRC-5 and SiHa in the 24 or 48-hour treatments. Moreover, HeLa and SiHa were able to recover their ability to proliferate, in direct proportion to the post-treatment recovery time. On the other hand, C33A did not demonstrate a similar post-treatment recovery. We can conclude that cryptomoschatone D2 possesses high dose-dependent or time-dependent cytotoxicity.

Dentre as substâncias isoladas de Cryptocarya sp, algumas estirilpironas, como a goniotalamina, apresentam atividade antiproliferativa em diferentes linhagens celulares. No presente estudo, foram avaliadas as atividades citotóxica de uma estirilpirona (criptomoscatona D2) isolada de Cryptocarya mandiocanna, em linhagens celulares de carcinoma cervical humano infectada por HPV (HeLa e SiHa), não infectada (C33A) e fibroblasto pulmonar humano (MRC-5). A atividade citotóxica foi avaliada pelo ensaio do MTT. No ensaio do MTT, as células foram tratadas com criptomoscatona D2 em 15, 30, 60 e 90 ?M por 6, 24 e 48 horas e por 6 horas com período de recuperação de 24, 48 e 72 horas pós-tratamento. O tratamento com a estirilpirona (criptomoscatona D2) ocasionou elevada citotoxicidade dose-resposta e tempo-resposta em HeLa, SiHa, C33A e MRC-5. Embora não haja diferença estatisticamente significativa de citotoxicidade entre as linhagens, aparentemente a citotoxicidade foi maior em HeLa e C33A (tratamento de 24 e 48 horas) que em MRC-5 e SiHa. Ainda, no período de recuperação, HeLa e SiHa aparentemente restabelecem sua capacidade proliferativa, que é diretamente proporcional ao tempo de recuperação, enquanto o mesmo comportamento não é observado em C33A. Estes resultados sugerem que criptomoscatona D2 possui elevada atividade antiproliferativa dose-resposta ou o tempo resposta.

Cytoskeleton, endoplasmic reticulum and nucleus alterations in CHO-K1 cell line after Crotalus durissus terrificus (South American rattlesnake) venom treatment

Snake venoms are toxic to a variety of cell types. However, the intracellular damages and the cell death fate induced by venom are unclear. In the present work, the action of the South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus venom on CHO-K1 cell line was analyzed. The cells CHO-K1 were incubated with C. d. terrificus venom (10, 50 and 100g/ml) for 1 and 24 hours, and structural alterations of actin filaments, endoplasmic reticulum and nucleus were assessed using specific fluorescent probes and agarose gel electrophoresis for DNA fragmentation. Significant structural changes were observed in all analyzed structures. DNA fragmentation was detected suggesting that, at the concentrations used, the venom induced apoptosis.

Comparative analyses of the structure of the 1, 3-beta-glucan synthase gene in Paracoccidioides brasiliensis isolates

The evolutionary origin and significance of spliceosomal introns have been the subject of many investigations. Two theories, [quot ]introns-early[quot ] theory and [quot ]introns-late[quot ] theory, have been proposed to explain the evolution of introns in eukaryotic genes. Intron position is generally conserved in paralogue and orthologue genes. Some introns occur at similar but not necessarily identical positions in homologous genes, which were separated by great evolutionary distances. This event can be explained by insertion, loss or movement of the intron over short distances. Intron loss and gain events are unique in evolution and can be useful as markers for phylogenetic analyses. The insertion of introns at an identical position suggests a common ancestor gene. Here we analyzed, using PCR and RT-PCR, the structure of the 1,3-beta-glucan synthase gene (FKS) in several clinical isolates of Paracoccidioides brasiliensis (Pb): isolates Pb 01, Pb 4940, Pb 8515, Pb 8311, Pb 8334, Pb 4268, Pb 1668, and Pb E. Our results showed that seven of the isolates examined showed identical structures concerning the position of introns in PbFKS1. PbFKS4940 showed the intron described at the 3' end and had lost that one at the 5' end. The presence of the PbFKS4940 transcript suggests that it could be a functional gene. These data suggest a divergent evolution for introns with regard to the 1,3-beta-glucan synthase gene in P. brasiliensis isolates.

Avaliação produtiva e econômica de sistemas de produção bovina em pastagens de capim-elefante / Productive and economic evaluation of cattle production systems on elephant-grass pastures

Avaliou-se o desempenho produtivo de novilhas manejadas em capim-elefante com suplementação alimentar e estudou-se a viabilidade econômica dos sistemas de produção. Utilizaram-se novilhas Holandês-Zebu com idade média de 17 meses e peso médio de 215±8kg, distribuídas nos seguintes sistemas de produção: SP1 - sem suplementação; SP2 - suplementadas com ração concentrada; e SP3 - suplementadas com leguminosa Stylosanthes guianensis, cv. Mineirão. Foram utilizadas 22 novilhas sendo 12 distribuídas nos três sistemas e as demais utilizadas como animais de equilíbrio em função da quantidade de forragem disponível. Os ganhos de peso médio diário foram 429±18g, 624±23g e 535±8g para SP1, SP2 e SP3, e os ganhos de peso diário por área de 2,38; 3,46 e 1,43kg/ha/dia, para SP1, SP2 e SP3, respectivamente. A taxa interna de retorno obtida foi 29,6 por cento, 30,1 por cento e 10,5 por cento para SP1, SP2 e SP3, respectivamente. O preço de venda das novilhas foi o fator de maior impacto no desempenho econômico dos sistemas de produção.

Therapeutic targets in Paracoccidioides brasiliensis: post-transcriptome perspectives

The rise in antifungal resistance, observed as a result of the increasing numbers of immunocompromised patients, has made the discovery of new targets for drug therapy imperative. The description of the Paracoccidioides brasiliensis transcriptome has allowed us to find alternatives to refine current therapy against paracoccidioidomycosis. We used comparative analysis of expressed sequence tags to find promising drug targets that have been addressed in other pathogens. We divided the analysis into six different categories, based on the involvement of the targeted mechanisms in the cell: i) cell wall construction, ii) plasma membrane composition, iii) cellular machinery, iv) cellular metabolism, v) signaling pathways, and vi) other essential processes. Through this approach, it has been possible to infer strategies to develop alternative drugs against this pathogen.

Transcriptome overview of Paracoccidioides brasiliensis proteases

Proteases perform a wide variety of functions inside and outside cells, regulating many biological processes. Infectious microorganisms use proteases, either secreted or attached to their cell surface to weaken and invade their hosts. Therefore, proteases are targets for drugs against a diverse set of diseases. Paracoccidioides brasiliensis is the most prevalent fungal pathogen causing systemic mycosis in Latin America. The development of paracoccidioidomycosis depends on interactions between fungal and host components and proteases have been described as important factors implicated in the mechanism of host colonization by fungi. The primary goal for this study is to present an overview of the transcriptome sequences--identified cDNAs that encode proteases. We obtained a total of 53 cDNAs encoding proteases; 15 were classified as ATP-independent, 12 as ATP-dependent, 22 as proteasome subunits, and 4 as deubiquitinating proteases. The mechanisms and biological activity of these proteases differ in substrate specificity and in catalytic mechanisms.

Screening for glycosylphosphatidylinositol-anchored proteins in the Paracoccidioides brasiliensis transcriptome

Open reading frames in the transcriptome of Paracoccidioides brasiliensis were screened for potential glycosylphosphatidylinositol (GPI)-anchored proteins, which are a functionally and structurally diverse family of post-translationally modified molecules found in a variety of eukaryotic cells. Numerous studies have demonstrated that various GPI anchor sequences can affect the localization of these proteins in the plasma membrane or the cell wall. The GPI anchor core is produced in the endoplasmic reticulum by sequential addition of monosaccharides and phospho-ethanolamine to phosphatidylinositol. The complete GPI anchor is post-translationally attached to the protein carboxyl-terminus by GPI transamidases. Removal of this GPI lipid moiety by phospholipases generates a soluble form of the protein. The identification of putative GPI-attached proteins in the P. brasiliensis transcriptome was based on the following criteria: the presence of an N-terminal signal peptide for secretion and a hydrophobic region in the C-terminus presenting the GPI-attachment site. The proteins that were identified were in several functional categories: i) eight proteins were predicted to be enzymes (Gel1, Gel2, Gel3, alpha-amylase, aspartic proteinase, Cu-Zn SOD, DFG5, PLB); ii) Ag2/PRA, ELI-Ag1 and Gel1 are probably surface antigens; iii) Crh-like and the GPI-anchored cell wall protein have a putative structural role; iv) ECM33 and Gels (1, 2 and 3) are possibly involved in cell wall biosynthesis, and v) extracellular matrix protein is considered to be an adhesion protein. In addition, eight deduced proteins were predicted to localize in the plasma membrane and six in the cell wall. We also identified proteins involved in the synthesis, attachment and cleaving of the GPI anchor in the P. brasiliensis transcriptome.

The cell wall of Paracoccidioides brasiliensis: insights from its transcriptome

The cell wall of a human pathogenic fungus is in contact with the host, serves as a barrier against host defense mechanisms and harbors most fungal antigens. In addition, cell wall biosynthesis pathways have been recognized as essential to viability and as specific drug targets. Paracoccidioides brasiliensis is a dimorphic fungus that presents mycelium morphology in the free environment and causes infection in a yeast form. The morphogenetic conversion is correlated with changes in the cell wall composition, organization and structure. Based on transcriptome analysis, the enzymes involved in the biosynthesis and remodeling of cell wall polysaccharides, as well as several cell wall-associated molecules of P. brasiliensis, were identified and addressed in further detail.